肿瘤坏死因子α抑制豚鼠急性缺血心室肌细胞L型钙通道电流

为探讨肿瘤坏死因子α对正常及模拟缺血状态下豚鼠心室肌细胞L型钙通道电流的影响。全细胞膜片技术记录豚鼠心室肌细胞单个L型钙通道电流。肿瘤坏死因子α(100、300和500 ku/L)对豚鼠心室肌细胞L型钙通道电流峰值的影响与对照组均无明显差异(P>0.05),但模拟急性缺血时,同浓度的肿瘤坏死因子α却明显抑制豚鼠心室肌细胞L型钙通道电流峰值并呈浓度依赖性,抑制率分别为46.5％±3.5％、62.7％±3.0％和80,7％±3.7％,与对照组和单纯缺血组相比差异明显(均P<0.05)。正常灌流液中不同浓度的肿瘤坏死因子α对豚鼠心室肌细胞峰值L型钙通道电流无明显影响;但模拟急性缺血时其却呈浓度依赖性地增强缺血对豚鼠心室肌细胞的L型钙通道电流峰值抑制作用。     

福辛普利预处理对缺氧复氧心室肌L型钙通道电流的影响

目的:观察福辛普利晚期预处理对缺氧复氧心室肌细胞L型钙通道电流的影响。方法:应用全细胞膜片钳方法,记录酶解的成年豚鼠心室肌细胞及福辛普利预处理后L型钙通道电流在缺氧复氧期的变化。结果:缺氧复氧期心室肌细胞L钙电流峰值明显下降,与对照组相比有明显差异(-237.71±17.70pAvs-286.00±21.15pA,P=0.0006,n=7),L型钙电流电流-电压曲线上移;福辛普利预处理后心室肌细胞L钙电流峰值亦下降,但下降不明显(-265.57±20.20PAvs-286.00±21.15pA,P=0.089,n=7)与缺氧复氧组比较有明显差异(P=0.018),L型钙电流电流-电压曲线上移幅度减小。结论:福辛普利可稳定缺氧复氧心肌L型钙通道电流,对心肌有保护作用。     

外源性磷酸肌酸对缺血豚鼠心室肌细胞L型钙通道电流的影响

目的:观察不同浓度外源性磷酸肌酸(exogenous phosphocreatine,PCr)对豚鼠缺血心室肌细胞L型钙通道(ICa.L)电流的影响,探讨其治疗缺血性心力衰竭的电生理学机制。方法:单个心室肌细胞经酶解从豚鼠左心室获得,采用膜片钳全细胞模式记录ICa.L电流,通过灌注模拟缺血液并充以95%N2+5%CO2的混合气体建立缺血模型,将PCr加入模拟缺血液中分别配成5,10,20,30 mmol/L浓度。将细胞分成6组,分别予模拟缺血液,含有5,10,20,30mmol/L浓度PCr的模拟缺血液,台氏液灌流,后者充以95%O2+5%CO2的混合气体。10 min后记录各组的峰电流及电流密度。结果:与台氏液组相比,模拟缺血液组ICa.L峰电流密度降低(80.6±5.2)%(P0.05),含有5,10,20,30 mmol/L浓度PCr的模拟缺血液组ICa.L峰电流密度分别降低(53.8±6.7)%(P0.05);(41.8±8.2)%(P0.05);(38.1±7.4)%(P0.05);(36.6±9.7)%(P0.05)。10,20,30 mmol/L 3种浓度对ICa.L峰电流密度的影响无统计学差别。结论:PCr能明显增加缺血时受抑制的ICa.L峰电流及电流密度,这可能是其治疗缺血性心力衰竭的电生理学机制。PCr在低浓度(0～10 mmol/L)对ICa.L电流及电流密度的影响呈现明显的量效关系,浓度大于10mmol/L量效关系不明显。     

心钠素对豚鼠乳头肌动作电位和心室肌细胞钙通道电流的影响

应用标准玻璃微电极和全细胞膜片钳技术研究了心钠素（ＡＮＰ）对豚鼠乳头肌动作电位和心室肌细胞钙通道电流的影响及其对β受体兴奋的拮抗作用。结果表明：ＡＮＰ可明显缩短动作电位时程，尤其动作电位平台期缩短较为明显，２０ｎｍｏｌ／ＬＡＮＰ灌流心室乳头肌可明显抑制β受体兴奋所致动作电位平台期的延长。ＡＮＰ这种作用的机制与其抑制心室肌细胞钙通道电流有关。     

心肌梗死后残存心室肌细胞L型钙通道的改变

目的　探讨L型钙通道在急性心肌梗死 (AMI)后室性心律失常发生中的作用及其机制。方法　开胸冠脉结扎制备兔AMI模型 ,于 1周和 2个月处死动物分离心室肌细胞 ,以膜片钳技术记录梗死及周边区心外膜细胞L -型钙通道电流 (ICa -L)的变化。结果　AMI兔梗死周边区心外膜细胞L型钙电流受到抑制 ,电流密度 -电压关系 (I -V)曲线上移 ,其峰值电流密度在正常对照组、AMI后 1周和 2个月分别为 - ( 5 5 8± 1 5 3) pA /pF(n =10 )、- ( 3 5 2± 0 93) pA/ pF (n =6 ,与对照组比较P <0 0 5 )和 - ( 4 84± 1 4 8)pA/ pF(n =11,与对照组比较P <0 0 5 ) ,但I -V曲线的形态轨迹不变。其失活曲线左移 ,失活速度加快 ,半数最大失活电位 3组分别为 -( 13 1± 4 2 )mV、- ( 2 5 9± 7 0 )mV和 - ( 2 1 3± 5 6 )mV ,P <0 0 5。结论　AMI后梗死周边带心外膜细胞L型钙通道受抑制 ,可能为AMI后室性心律失常发生的机制之一 ;AMI后 2个月钙通道的异常程度减轻 ,有恢复正常的趋势     

硝苯地平对心室肌细胞L型钙通道状态依赖性阻滞的研究

目的探讨选择性L型钙通道阻滞剂硝苯地平对L型钙流[ICa(L)]浓度、状态依赖性阻滞作用的影响。方法采用膜片钳全细胞记录技术对豚鼠单个心室肌细胞,给予35℃的各种含药物细胞外液快速灌流,记录ICa(L)。结果①保持电位-80mV,硝苯地平抑制ICa(L)的IC50为0.3μmol·L-1;保持电位为-40mV时,IC50为0.05μmol·L-1,呈浓度依赖性阻滞。硝苯地平0.3μmol·L-1作用于电压依赖的ICa(L)失活曲线,使其左移17mV,至更负的膜电位,显示硝苯地平相对选择与失活态钙通道结合。②在10s的静息间隔药物作用时间后的第1个实验刺激,硝苯地平3μmol·L-1或30μmol·L-1加速ICa(L)的失活,提示硝苯地平对ICa(L)可能存在激活态阻滞。结论在生理条件下,硝苯地平对ICa(L)的阻滞呈浓度、状态依赖性。相对选择与失活态钙通道结合,且可能存在激活态阻滞。     

大豆肽对大鼠心室肌细胞L-型钙通道电流的影响

目的探讨大豆肽对大鼠心室肌细胞L-钙通道电流(ICa-L)的影响。方法采用全细胞膜片钳技术观察不同剂量(0.03、0.1、0.3mmol.L-1)大豆肽酶法对急性分离的成年大鼠心室肌细胞L-型钙通道电流(ICa-L)的影响。结果大豆肽0.03、0.1、0.3 mmol.L-1均明显抑制ICa-L,分别使ICa-L峰值降低21.7%(P<0.05),23.6%和30.7%(P<0.01),该作用具有剂量依赖性。大豆肽使ICa-L的I-V关系曲线上移,但原有的I-V依赖性特征不变。结论大豆肽对大鼠心室肌细胞ICa-L具有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性。     

稳心颗粒对大鼠心室肌细胞L型钙电流的影响

目的研究步长稳心颗粒对大鼠心室肌细胞L型钙电流（（L-typecalcium current,ICa-L）动力学特性的影响。方法以酶解法分离获得单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术,研究1g／L、5g／L、10g／L稳心颗粒对ICa-L的影响。结果1g／L、5g／L、10g／L的稳心颗呈浓度依赖性地抑制ICa-L,对其峰电流的的抑制率分别为29．3％±4．8％、45．8％±5．3％、72．6％±4．1％。10g／L的稳心颗粒使ICa-L电流电压曲线上移,激活曲线右移,并延长失活后恢复时间。结论稳心颗粒对大鼠心室肌细胞ICa-L具有浓度依赖性的抑制效应,与其抗心律失常效应有关。     

伊贝沙坦对兔心室肌细胞L-型钙通道电流的影响

目的 研究伊贝沙坦(irbesartan)对正常家兔心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)、内向整流性钾电流(IK1)、快钠流(INa)以及跨膜动作电位的影响。方法 应用膜片钳全细胞记录方法记录各项离子流和跨膜动作电位。结果 (1)伊贝沙坦呈浓度依赖性阻断ICa-L；(2)伊贝沙坦可使ICa-L I—V曲线上移，但不改变其激活电位、峰值电位和反转电位；(3)伊贝沙坦呈使用依赖性阻滞ICa-L；(4)伊贝沙坦对ICa-L激活曲线无明显影响，但ICa-L失活后再激活的恢复时间常数(τ)明显延长；(6)伊贝沙坦对IKl和INa无明显影响；(7)伊贝沙坦(100nM)可使单个心室肌细胞动作电位时限缩短，对静息电位(RP)、动作电位幅度(APA)无影响。结论 伊贝沙坦作用于L-型钙通道的失活态从而阻断ICa-L。     

米诺环素对大鼠心室肌细胞L型钙电流的影响

目的 研究米诺环素对大鼠心室肌细胞L型钙电流（Ica-L）动力学特性的影响.方法 以酶解法分离获得单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术,研究米诺环素对Ica-L的影响.结果 10、50、250 μmol/L米诺环素对峰电位的抑制率分别为11%±5.86%,54.79%±6.32%,71.73%±5.29%,使Ica-LI-U曲线上移,激活曲线右移,并延长失活后恢复时间.结论 米诺环素通过延长钙通道的激活及失活后恢复时间,抑制心肌细胞Ica-L,预防钙超载.     

持续性心房颤动患者心房肌细胞L型钙通道电流变化的研究

目的比较窦性心律(窦律)患者和持续性心房颤动(房颤)患者心房肌细胞L-型钙通道电流密度及通道电压依赖的激活和失活特性变化。方法应用两步酶解法获得单个人体心房肌细胞,采用常规全细胞膜片钳技术记录L-型钙通道电流,观察18例窦律患者和12例持续房颤患者右心房肌L-型钙通道电流密度及动力学特性变化。结果(1)持续房颤组与窦律组相比,L-型钙通道电流密度降低,测试脉冲从-40~0mV时的L-型钙通道电流密度分别为(-4.58±0.39)pA/pF(n=21)和(-1.32±0.19)pA/pF(n=12),两组比较P<0.01。(2)动力学特性:窦律组与持续房颤组比较,通道激活曲线参数半数最大激活电压(V1/2)、斜率因子(K)以及失活曲线参数半数最大失活电压(V1/2)、斜率因子(K)差异均无统计学意义。结论持续房颤患者心房肌细胞L-型钙通道电流密度明显降低,其通道动力学特性变化差异无统计学意义。L-型钙通道电流密度的变化是房颤时“心房电生理重构”离子机制之一。     

心力衰竭与肿瘤坏死因子α

心力衰竭(心衰)时心室重构的病理刺激主要来自二方面:一方面神经内分泌的过度激活,另一方面为血流动力学异常.异常升高的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、去甲肾上腺素(NE)、醛固酮和内皮素等直接作用于心肌,促进心肌肥厚、心肌细胞凋亡和间质纤维化.压力/容量负荷促进心肌组织分泌心房钠尿肽和B型钠尿肽同时,也促进细胞因子如肿瘤坏死因子α(TNF-α)等的分泌.     

氧化苦参碱对豚鼠心室肌细胞膜L-型钙通道的影响

研究氧化苦参碱 (Oxy)对豚鼠心室肌细胞膜L 型钙通道的影响 ,探讨Oxy在离子通道水平的药理作用机制。用急性酶解法分离豚鼠心室肌细胞 ,应用膜片钳全细胞记录技术 ,观察不同浓度的Oxy对L 型钙通道的影响。结果 :用 0 .0 1 ,0 .1 ,1 ,1 0 μmol/L可浓度依赖性地增加L 型钙电流 (ICa L)。在 0 .1 μmol/L时 ,给药后电流密度增加约 31 %(P <0 .0 1 ) ,可使心肌细胞钙电流 电压曲线下移 ,但激活电位、峰电位及反转电位无改变 ;Oxy使激活曲线向负电位方向变化 ,半数激活电压增加 ;对失活曲线无明显影响 ,未改变ICa L失活特性。结论 :Oxy可浓度依赖性和电压依赖性地增加心肌细胞膜L 型钙通道电流     

阿魏酸钠与胺碘酮对家兔心室肌细胞L型钙通道电流的影响

目的探讨阿魏酸钠对家兔心室肌细胞膜L型钙通道电流(ICa-L)的影响。方法酶解法急性分离兔单个心室肌细胞,以经典的Ⅲ类抗心律失常药物胺碘酮为对照,应用膜片钳全细胞记录技术观察3,10,30,100μmol/L的阿魏酸钠对心室肌细胞膜ICa-L的作用。结果阿魏酸钠及胺碘酮均呈浓度依赖性抑制L型钙电流。3,10,30,100μmol/L的阿魏酸钠对ICa-L的抑制率分别为11.1%±2.4%,26.9%±6.2%,40.5%±5.0%,61.9%±5.5%(P<0.05);1,3,10,30μmol/L的胺碘酮对ICa-L的抑制率分别为21.1%±3.8%,32.6%±2.6%,52.6%±4.6%,71.4%±7%(P<0.05);半数抑制浓度分别为32.6及9.5μmol/L,阿魏酸钠的抑制作用弱于胺碘酮(P<0.05)。阿魏酸钠及胺碘酮均能使ICa-L电流-电压曲线上移,稳态激活曲线右移,失活曲线左移,并可减慢钙通道灭活后的恢复过程。结论阿魏酸钠对ICa-L具有浓度依赖性阻滞作用,使ICa-L的激活减慢,失活加快,并且失活后的恢复时间延长,可能是其抗心律失常作用的电生理机制之一。     

丹参素对豚鼠心室肌细胞L-型钙通道的影响

目的　研究丹参素对豚鼠心室肌细胞膜L 型钙通道的影响 ,探讨丹参素在离子通道水平的药理机制。方法　急性酶解法获得豚鼠的单个心肌细胞 ,用标准的全细胞膜片钳技术记录钙电流。结果　在保持电位 (Holdingpoten tial,HP)为 - 80mV ,预先去极化至 - 4 0mV ,再去极化至0mV ,波宽为 30 0mS的刺激参数下 ,可记录到一具有电压和时间依赖性内向的电流 ,当用含 1μmol/L硝苯地平的台氏液灌流时该电流被迅速消除 ,在灌流液中加入丹参素 1mg/mL和 10mg/mL ,1mg/mL组对钙电流无明显改变 (P >0 0 5 ,n =5 ) ,10mg/mL组使钙电流减少 [- (7 76± 0 85 )pA/pFvs - (2 6 2 6± 0 5 9)pA/pFP <0 0 5 ,n =8],并使心肌细胞钙电流 -电压曲线上移 ,原有的电流 -电压依赖特征不变。结论　丹参素浓度依赖性地抑制心肌L 型钙通道     

肿瘤坏死因子α对急性肝坏死小鼠肠道分泌型IgA变化的影响

据报道,重型肝炎患者血清中肿瘤坏死因子(TNF)α明显升高~([1-2]),因此,有学者认为TNF α在急性肝坏死时对肝损伤起重要作用,是导致肝坏死的重要介质之一~([3]).我们用脂多糖(LPS)/D-氨基半乳糖(GalN)建立急性肝坏死模型,并用抗小鼠TNF α-IgG抗体和抗小鼠肿瘤坏死因子受体1(TNF α-R1)抗体进行阻断,同时用TNF α代替LPS建立急性肝坏死动物模型,以观察TNF α是否是影响分泌型IgA(SIgA)变化的一个因子,从而探讨TNF α是否在急性肝坏死时对肠道SIgA的变化起作用,并验证SIgA变化是否可导致腹膜炎.     

肿瘤坏死因子α和肿瘤坏死因子α转化酶基因在糖尿病心肌病变大鼠心肌中的表达

对小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射加高脂饲料喂养建立糖尿病心肌病变大鼠模型的研究显示,模型组大鼠心肌组织中肿瘤坏死因子α(TNFα)和肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)mRNA表达量均比正常组显著增高。福建省立医院内分泌研究室     

肿瘤坏死因子α对急性肝坏死小鼠血脑屏障通透性的影响

研究拟通过建立急性肝坏死（ALF）动物模型，探讨肿瘤坏死因子α（TNFα）在肝坏死时血脑屏障（BBB）通透性改变中的作用。     

肿瘤坏死因子α抑制剂的免疫原性

近年来肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）抑制剂广泛应用于风湿免疫性疾病的治疗,但临床医生对其免疫原性尚认识不足。越来越多的证据表明,TNF-α抑制剂的免疫原性对TNF-α抑制剂的药代动力学和临床疗效等均有影响。本文对TNF-α抑制剂免疫原性的产生机制、形成特点和监测方法等进行综述,相信加强监测和减少TNFα抑制剂的免疫原性具有重要的临床意义。     

肿瘤坏死因子-α与2型糖尿病的相关性

肿瘤坏死因子(TNF)-α是一种前炎性反应因子.近年发现TNF-α与2型糖尿病、胰岛素抵抗密切相关.研究发现,TNF-α基因多态性也与胰岛素抵抗的发生密切相关,是目前的研究热点.