阿托伐他汀对实验性变态反应性脑脊髓炎豚鼠模型发病的影响

目的 探讨阿托伐他汀对实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）的防治作用。方法 皮下注射粗制碱性髓鞘蛋白（MBP）建立EAE模型，EAE模型分为高、低剂量治疗组和对照组。治疗组造模前7天开始灌胃阿托伐他汀直至整个实验结束，对照组不用阿托伐他汀。结果 治疗组的潜伏期比对照组缩短（P〈0．01或P〈0．05），低剂量组的潜伏期比高剂量组潜伏期长，两者具有统计学的差异（P〈0．05）；治疗组的进展期明显缩短（P〈0．01）；病情高峰期神经功能缺失评分，高剂量治疗组与对照组相比，明显降低（P〈0．01）；EAE对照组的死亡率高达50％，EAE低剂量组的死亡率为20％，EAE高剂量组无死亡，各组间差异具有显著性（P〈0．05）。结论 阿托伐他汀具有延长EAE动物发病潜伏期，缩短病情进展期，减轻中枢神经系统损害作用，降低高峰期死亡率。     

哮喘豚鼠外周血淋巴细胞和肺组织H1R,H2R的测定及其相关性

目的；探讨组胺受体１、组胺受体２在哮喘致病听作用。方法；用放射配基结合分析测定了１２只哮喘豚鼠及１２只正常豚鼠餐周血淋巴细胞（ＰＢＬ）和肺的Ｈ１Ｒ６ Ｈ２Ｒ，并对哮喘豚鼠ＰＢＬ和Ｈ１Ｒ的Ｈ２Ｒ与肺的Ｈ１Ｒ和Ｈ２Ｒ密度人了相关分析，实验所用配基分别为Ｈ１Ｒ和Ｈ２Ｒ选择悸阻断剂＾３Ｈｍｅｐｙｒａｍｉｎｅ和＾３Ｈ－ｔｉｏｉｄｉｎｅ。结果：哮喘豚鼠ＰＢＬ和肺组织Ｈ１Ｒ密度元旦升高，而Ｈ２Ｒ密度均下降（Ｐ〉     

快速灌流固定豚鼠肺组织石蜡制片探讨

在糖皮质激素快速有效地缓解哮喘症状的非基因组机制研究中,建立豚鼠哮喘模型十分重要。本实验采用肺动脉灌流方法对豚鼠的肺进行快速灌流固定,采用此法获得的标本比较接近肺的真实状况。     

电针对实验性过敏性哮喘豚鼠末梢肺组织冰冻切片β受体数量及腺苷环磷酸含量变化的影响

［目的］探讨哮喘与肺组织β受体数量与腺苷环磷酸含量的关系及电针对其的影响［方法］采 用放射配基结合与蛋白结合分析法分别测定接受与未接受电针刺激的哮喘豚鼠末梢肺组织的冰冻切片 β受体与３Ｈ－ＤＨＡ结合量及腺苷环磷酸含量［结果］哮喘豚鼠肺组织冰冻切片的β受体与３Ｈ－ＤＨＡ最大 结合量及腺苷环磷酸含量明显低于对照组，电针刺激可使哮喘豚鼠肺组织冰冻切片β受体最大结合量 及腺苷环磷酸含量维持在正常水平，但对正常豚鼠未见有影响［结论］哮喘发作与肺组织β受体功能 降低有关，电针可使其功能恢复至正常水平     

新生豚鼠海马神经干细胞的分离培养及鉴定

目的：探讨新生豚鼠海马来源的神经干细胞体外培养的最佳条件。方法：分离新生24h内的豚鼠海马组织，制成单细胞悬液，分别于DMEM／F12培养基、含体积分数2％B27的培养基及含4ng／L bFGF的B27培养基进行原代和传代培养，收集原代和传代培养的细胞，进行巢蛋白(Nestin)、GFAP及NSE免疫细胞化学染色。结果：在含bFGF的B27培养基中，传代的细胞不断分裂增殖，形成悬浮生长的呈Nestin阳性的神经干细胞团。传代培养分化的细胞可见NSE或GFAP免疫阳性细胞。结论：含体积分数2％B27的DMEM／F12培养基中添加bFGF可获得大量新生豚鼠海马神经干细胞。     

RT-PCR检测NK1mRNA在哮喘豚鼠气道表达的研究

目的 应用RT-PCR半定量法检测哮喘豚鼠气道神经激肽1受体(NK1)mRNA表达的相对含量.方法 用卵蛋白超声雾化法制作哮喘豚鼠模型,随机分成正常对照组及诱喘组.RT-PCR技术检测(NK1)mRNA,图像分析测定(NK1)mRNA的相对含量.结果 诱喘组(NKl)mRNA的相对含量较正常组明显增多.结论 NK1参与了卵蛋白诱发哮喘的发病机制.     

芦荟凝胶对豚鼠哮喘的作用研究

目的:探讨芦荟凝胶对豚鼠过敏性哮喘的影响。方法:将豚鼠随机分为哮喘组、芦荟组和正常组3组,用10%卵清蛋白(OVA)生理盐水200mg/kg合并等体积1mg/ml氢氧化铝致敏豚鼠,两周后抗原OVA第2次攻击,复制豚鼠哮喘模型;芦荟组隔天芦荟灌胃两周,其余两组生理盐水灌胃。对比观察其行为学差异和血中嗜酸性粒细胞(EOS)数目的差异。结果:芦荟组嗜酸性粒细胞数目较哮喘组明显降低(P<0.05),且其哮喘症状有明显差异(P<0.05)。结论:芦荟凝胶可有效减轻豚鼠的哮喘症状。     

咳嗽变异性哮喘豚鼠模型的构建

目的尝试制备一种咳嗽变异性哮喘（CVA）的豚鼠模型。方法30只雄性豚鼠饲养1周后，随机分为健康正常组和模型组，每组15只。模型组第1天肌注4％OVA溶液0、5ml，同时腹腔注射2％Al（OH）30．2ml，14d后，模型组用1％OVA溶液雾化后攻击，隔天1次，每次15s，共7次。第29天，两组豚鼠用10^-4mol／L辣椒素溶液引咳。结果通过对咳嗽次数、肺病理切片、肺泡灌洗液、外周血等指标的观测，发现模型组的咳嗽次数多于健康正常组；与健康正常组比较，模型组的病理损伤明显；从肺泡灌洗液和血内嗜酸性粒细胞计数及白细胞计数上看，模型组与健康正常组两组存在统计学差异，前者较后者计数均有升高。结论这种改进后方法能成功地建立咳嗽变异性哮喘模型。     

1型和2型糖尿病大鼠肺组织脂联素受体的表达

目的观察1型糖尿病（1-DM）和2型糖尿病（2-DM）大鼠肺组织脂联素受体（AdipoRl和AdipoR2）的表达情况。方法sD大鼠随机分为1一DM组（一次性腹腔内注射高剂量链脲佐菌素建模,普通饮食,8周后处死）、72h组（一次性腹腔内注射高剂量链脲佐菌素建模,普通饮食,72h后处死）、2-DM组（高脂饮食配合一次性腹腔内注射低剂量链脲佐菌素建模,8周后处死）和对照组（一次性腹腔内注射等容量枸橼酸缓冲液,普通饮食）。分别检测血清胰岛素和脂联素水平以及肺组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性以及AdipoRl和AdipoR2的表达,HE染色观察肺组织病理学改变。结果与对照组比较,1-DM组和2-DM组血清脂联素水平均显著降低（P〈0．05）;2-DM组血清脂联素水平显著低于1-DM组（P〈0．05）;1-DM组和2-DM组肺组织AdipoRl表达及SOD活性均显著低于对照组,而72h组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;1一DM组和2-DM组肺组织有基膜增厚、血管堵塞等病理学改变。结论肺组织脂联素受体表达以AdipoRl为主,高血糖可引起肺损伤、肺AdipoRl表达及SOD活性降低。     

自拟通肺平哮汤对哮喘豚鼠Th1/Th2细胞功能调节作用的影响

目的探讨中药复方通肺平哮汤对哮喘豚鼠气道炎性反应的抑制及对Th1/Th2细胞功能调节作用的影响。方法 40只健康雄性Hartley系豚鼠随机分为空白对照组、病理模型组、地塞米松组、通肺平哮汤组各10只,后3组用卵白蛋白(OVA)致敏,建立哮喘豚鼠模型,然后分别给予蒸馏水(2 ml/只)、地塞米松(0.01 g/kg)、通肺平哮汤(20 g/kg),用药7 d后处死动物,采用流式细胞术分析CD_4~+细胞干扰素-γ(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)水平变化。结果与空白对照组比较,病理模型组IFN-γ水平明显降低,IL-4水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与病理模型组比较,地塞米松组、通肺平哮汤组IFN-γ水平明显升高(P<0.05),而IL-4水平无明显差异(P>0.05);地塞米松组与通肺平哮汤组比较差异亦无统计学意义(P>0.05)。病理组织学检查示病理模型组气道壁及肺间质大量嗜酸性粒细胞浸润,平滑肌层增厚,管腔狭窄,地塞米松组及通肺平哮汤组病理改变显著减轻。结论通肺平哮汤可以抑制Th2的活化,使Th1/Th2平衡向Th1偏移从而发挥平喘作用。     

α-黑素细胞刺激素对EAE豚鼠外周血IL-17、IL-23水平的影响

目的通过研究α-黑素细胞刺激素（α-MSH）对急性实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）豚鼠外周血IL-17、IL-23水平的影响,探讨α-MSH对EAE发病保护作用及免疫学机制。方法将40只雌性豚鼠随机分为正常对照组、EAE对照组和EAE高剂量治疗组、EAE低剂量治疗组,每组各10只。EAE对照组及EAE高剂量治疗组、EAE低剂量治疗组采用粗制髓鞘碱性蛋白（cMBP）诱发急性EAE,EAE高、低剂量治疗组自造模前7d始分别按1mg/（kg.d）及0.25mg/（kg.d）予腹腔注射注射α-MSH直至试验结束。观察4组豚鼠神经功能障碍评分变化,并用ELISA法测定IL-17、IL-23水平。结果 EAE高剂量治疗组、EAE低剂量治疗组神经功能障碍评分较EAE对照组显著降低（P〈0.01,P〈0.05）,且EAE高剂量治疗组降低更明显（P〈0.05）。EAE对照组及EAE低剂量治疗组豚鼠发病高峰期外周血IL-17、IL-23水平均较正常对照组升高（均P〈0.01）,EAE高剂量治疗组与正常对照组比较IL-17、IL-23水平差异均无统计学意义（P〉0.05）,EAE高剂量治疗组与EAE低剂量治疗组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。EAE各组豚鼠发病高峰期外周血IL-17、IL-23水平与神经功能障碍评分均呈正相关（r=0.79、P〈0.05,r=0.84、P〈0.01）。结论α-MSH对EAE豚鼠发病具有保护作用,其作用机制可能是通过抑制IL-17、IL-23生成发挥调节作用的。     

越婢加半夏汤对过敏性哮喘小鼠血清IgE及肺组织中SOD影响的研究

目的 通过研究不同阶段各实验组小鼠血清中免疫球蛋白（IgE）及肺组织中超氧化物歧化酶（SOD）活力与抑制率的改变,探索越婢加半夏汤对过敏性哮喘小鼠的作用机制。方法 采用卵白蛋白( OVA)、氢氧化铝凝胶混悬液腹腔注射致敏和雾化激发的方法建立小鼠哮喘模型,各组小鼠治疗完成后处死,采用ELISA法检测各组小鼠血清IgE水平,采用WST-1法测定各组小鼠肺组织匀浆中SOD活力水平,肺组织HE染色,观察其病理变化。结果 中药制剂组小鼠与哮喘模型组小鼠相比,前者外周血清中IgE含量下降(P<0.05),IgE在2组间差异有统计学意义(P<0.05);前者肺组织匀浆中SOD活力与抑制率升高,SOD活力与抑制率在2组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 降低过敏性哮喘小鼠血清中IgE含量及升高小鼠肺组织SOD活力与抑制率水平,提高肺组织抗氧化能力,可能为越婢加半夏汤治疗过敏性哮喘的作用机制之一。     

豚鼠过敏性脑脊髓炎CNS中IL-1R的表达

目的 探索中枢神经系统脱髓鞘疾病进程中IL－1R的表达与神经胶质细胞活化的关系。方法 用牛脊髓髓鞘碱性蛋白加完全福氏佐剂对豚鼠进行免疫,诱发实验性过敏性脑脊髓炎（EAE）模型,采用免疫组化方法对EAE不同时期中枢神经系统中IL－1R的表达进行研究,同时采用抗蓖 凝集素RCA－1标记小胶质细胞、抗胶质纤维酸性蛋白标记星型胶质细胞。结果 在EAE症状出现之前3d至临床高峰期,小胶质细胞样细胞呈现IL－1R免疫反应阳性,表达IL－1R的星型胶质细胞样细胞呈活化状态,而恢复期则主要为星型胶质细胞样细胞呈现免疫反应阳性。结论 在EAE不同时期表达IL－1受体的细胞型不同与不同时期神经胶质细胞的活化类型有关,即与EAE早期小胶质细胞的活化和恢复期星型胶质细胞增生有关。     

哮喘豚鼠气道上皮细胞信号转导子和转录活化子1的表达与气道炎症关系的研究

目的研究哮喘豚鼠气道上皮细胞信号转导子和转录活化子1(STAT1)的表达及动态变化,探讨STAT1蛋白与哮喘气道炎症的相关性及地塞米松的影响.方法 48只豚鼠随机分为6组,卵白蛋白腹腔注射与雾化吸入诱发豚鼠哮喘发作,在激发后0 h、24 h、72 h、5 d,以及地塞米松治疗后第5 d,测定哮喘豚鼠支气管粘膜周围肺组织嗜酸粒细胞(EOS)浸润与支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸粒细胞数量, 酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF中γ-干扰素浓度,免疫组化测定哮喘豚鼠气道上皮细胞中STAT1表达.结果豚鼠在诱喘后各个时相(0 h、24 h 、72 h及5 d) BALF中嗜酸粒细胞的变化与支气管粘膜肺组织EOS浸润密度正相关(r=0.815,P＜0.001).气道上皮细胞中STAT1表达与支气管粘膜周围肺组织EOS浸润及BALF中EOS数量均呈正相关(r=0.752,P＜0.001; r=0.692,P＜0.01) .地塞米松能抑制上皮细胞STAT1表达(5 d与治疗组相比,P＜0.01).BALF中γ-干扰素浓度与气道上皮细胞STAT1表达呈负相关(r=-0.499,P＜0.05).结论支气管哮喘存在支气管上皮细胞STAT1的持续活化及过度表达,并与嗜酸粒细胞聚集增多有密切关系.     

越婢加半夏汤降低过敏性哮喘小鼠的血清IgE和升高肺组织中SOD的活力

目的 通过观察不同阶段各实验组小鼠血清中免疫球蛋白(IgE)及肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力与抑制率的变化,探讨越婢加半夏汤对过敏性哮喘小鼠的作用机制。方法 随机将健康昆明种小白鼠分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松干预组和中药制剂组。采用卵白蛋白(OVA)、氢氧化铝凝胶混悬液腹腔注射致敏和雾化激发的方法建立小鼠哮喘模型,造模成功后,中药制剂组给予越婢加半夏溶液1 mL/100 g。地塞米松组给予腹腔注射地塞米松 1 mg /kg。正常对照组和哮喘模型组小鼠分次给予生理盐水灌胃治疗。给药30 d后处死,检测各组小鼠血清IgE水平和肺组织SOD活力,并进行HE染色观察肺组织的病理学变化。结果 中药制剂组小鼠与哮喘模型组小鼠相比,前者外周血清中IgE含量下降(P<0.05),IgE在2组间差异有统计学意义(P<0.05);前者肺组织匀浆中SOD活力与抑制率升高,SOD活力与抑制率在2组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 降低过敏性哮喘小鼠血清中IgE含量及升高小鼠肺组织SOD活力与抑制率水平,提高肺组织抗氧化能力,可能为越婢加半夏汤治疗过敏性哮喘的作用机制之一。     

用抗肽抗体对豚鼠心肌行M2胆碱受体分布的研究

目的:对比观察豚鼠左右心房和心室M2胆碱受体的分布位置及其特性.方法:采用M2胆碱受体自身抗体与用人M2胆碱受体肽段经免疫制备的抗受体抗体在豚鼠心肌进行免疫组织化学研究.结果:M2胆碱受体的免疫反应阳性颗粒主要位于胞膜及周缘胞浆内;心房和心室肌细胞均存在明显的免疫阳性反应物,但其分布密度存在有明显差异,心房免疫阳性颗粒明显多于心室;用阿托品后,心房心室细胞的免疫阳性反应产物明显降低,M2胆碱受体抗体和受体结合的位点可部分被M2胆碱受体拮抗剂阻断.结论:豚鼠心脏M2胆碱受体主要分布于心房和心室肌细胞的表面,心房M2胆碱受体密度明显大于心室.M胆碱受体拮抗剂具有阻滞M2胆碱受体抗体和其受体结合的效应.     

实验性急性肺损伤时脑组织一氧化氮和内皮素动态变化

目的:探讨油酸 (OA )所致急性肺损伤过程脑组织一氧化氮 (NO)和内皮素 (ET)的动态变化 ,了解二者在急性肺损伤时对脑的影响及其作用。方法:2 6只家兔随机分为假手术对照组和实验组 ,实验组注射 OA造成急性肺损伤模型 ,实验组以 30、6 0、90和 12 0 min为时点又分为 4个组。检测 5个组脑组织 NO和 ET含量的动态变化。 结果 :脑组织一氧化氮含量注入油酸后 30 m in组代偿性增加 ,与对照组相比差异有统计学意义 (P <0 .0 1) ,以后各时间组 NO逐渐缓慢降低 ,分别与 OA30 min组含量相比差异有统计学意义 (P<0 .0 1)。脑组织 ET含量在 OA30 m in组显著下降 ,与对照组相比差异有统计学意义 (P <0 .0 1) ,而在 6 0、90和 12 0 m in组含量又增加 ,分别与 30 min相比差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论:油酸所致急性肺损伤过程可伴发脑组织 NO和 ET水平的失衡性变化 ,NO和 ET的失衡是引起油酸所致急性肺损伤时脑功能、代谢和结构改变的主要因素之一。     

Musashi1和Sox2蛋白在肺癌组织中的表达及其临床意义 

目的：探讨干细胞标志物Musashi1和性别决定区Y框架蛋白2(Sox2)在肺癌组
织中的表达情况，阐明二者在肺癌发生发展过程中的作用及其临床意义。方法：