L—型Ca~(2+)通道、NMDA受体在马桑内酯致痫中的作用:电生理和原位杂交研究

近年的研究提示,神经细胞内Ca~(2+)超载是某些神经元痫样放电产生的起始因素。但Ca~(2+)在马桑内酯(Coriaria Lactone,CL)致痫机制中的作用尚不清楚。本文选用L—型电压依赖性Ca~(2+)通道阻断剂硝苯吡啶和NMDA受体拮抗剂氯胺酮,分别阻断两类不同性质的Ca~(2+)通道,从整体、细胞、基因三个水平来系统地分析Ca~(2+)在CL致痫中的作用。     

神经细胞损伤与细胞钙稳态失调

神经细胞损伤与细胞内Ca~(2+)稳态失调的关系,是目前神经科学和毒理学共同关注的研究课题之一。本文从方法学角度比较了测定细胞内Ca~(2+)浓度([Ca~(2+)]_i)的主要技术,综述了近3～4年该工作的最新进展。     

钙调蛋白在免疫应答反应中的生物学效应及其表现

Ca~(2+)参与免疫应答反应的诱导和调节。从淋巴细胞活化到抗体合成以及非特异性炎症反应,各个阶段都少不了Ca~(2+)的作用。人们认为Ca~(2+)是环核苷酸诱导控制免疫应答反应的重要一环,但是对于二者之间的关系仍无定见。钙调蛋白(Calmodulin,CaM)的发现使我们对Ca~(2+)和环核苷酸调节免疫应答反应有了较为完整的概念。CaM是细胞内Ca~(2+)的重要受体,它与Ca~(2+)结合后发生构象改变而激活。同时又     

钙调素的测定方法——依赖于钙离子的磷酸二酯酶测定

钙调素(Calmodulin,CaM)是一种极重要的钙调节蛋白,它广泛存在于生物体各种组织,与钙离子(Ca~(2+))具有高亲和力和结合力,作为Ca~(2+)的受体影响细胞的多种功能。体内凡受Ca~(2+)影响的生理过程可能都与Ca~(2+)有关。因而自60年代末被发现以来受到高度重视和广泛研究,其测定方法也相应发展起来。目前大致有2类测定CaM的方法:一是放射免疫分析法(RIA);二是依赖于Ca~(2+)的环核苷酸磷酸二酯酶测定法(PDE)。本文介绍和讨论CaM的PDE生物活性测定法。     

肌浆网ryanodine受体结构和功能研究的进展

肌浆网ryanodine受体是由4个亚基组成的Ca~(2+)释放通道。肌浆网Ca~(2+)释放机制仍不完全清楚,Ca~(2+)、IP_3和机械耦联引起的Ca~(2+)释放可能分别在心肌、血管平滑肌和骨骼肌SR Ca~(2+)释放中起主要作用。此外,巯基氧化引起的SR Ca~(2+)释放近年来也颇受重视。     

钙离子通道研究进展

<正> 70年代初期,细胞内透析技术的进展及其在神经细胞体的应用使人们首次得以在全细胞水平将Ca~(2+)电流与其它跨膜电流区别开进行研究。这些研究表明:(1),Ca~(2+)离子通道的活动是按m~2 Hodgkin-Huxley模式进行的;(2),首次指出细胞内Ca~(2+)对Ca~(2+)离子通道的功能是至关重要的;(3),Ca_2~+离子通道的一个基本特性是在细胞外有Ca~(2+)螯合剂存在的情况下,它转变为单价离子可透过的形式[Kostyuk and Krishtal, J.Physiol. (London)270:545(1977);ibid,P.569]。对后一现象的进一步研究发现Ca~(2+)本身可调节Ca_2~+离子通道的选择性,这一调节可能是通过将Ca~(2+)与Ca~(2+)离子通道的外口附近的高亲合     

阿霉素对兔心肾损伤与一氧化氮合酶表达

目的:探讨阿霉素(Adr)对心和肾损伤与一氧化氮合酶(NOS)表达。方法:用治疗剂量阿霉素静脉注射法建立兔心、肾损伤模型组,测定兔心输出量(CO)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP):取心和肾组织进行HE染色及超薄切片染色;NADPH组化染色并进行图像分析,观察动物心和肾组织中ALP、Ca~(2+)-ATP酶和 NOS的变化。结果:实验组CO、LVSP均明显低于对照组,LVEDP明显高于对照组;实验组心和肾组织的超微结构受损伤,Ca~(2+)-ATP酶活性明显下降,而NOS表达明显上调。结论:治疗剂量阿霉素能够降低心和肾组织中Ca~(2+)-ATP酶的活性和上调NOS的表达,是导致心和肾组织损伤的重要原因。     

复合磷酸钙颗粒溶解性能测试研究

目的研究复合磷酸钙颗粒(HA∶TCP=3∶7)在TRIS缓冲溶液中的体外溶解特性。方法配制一系列浓度逐级递增的Ca~(2+)标准溶液,绘制Ca~(2+)离子溶液的工作曲线。将复合磷酸钙颗粒(HA∶TCP=3∶7)置于pH值为7.4的TRIS缓冲溶液中浸泡,每小时取样一次(初始阶段每3分钟取样一次),用高速离心技术提取上层清液,采用电感耦合等离子体质谱法测定各时间点提取液的Ca~(2+)浓度,绘制Ca~(2+)浓度对浸泡时间的溶解曲线。结果 Ca~(2+)离子溶液的工作曲线的线性方程为y=4043.9x+23783,相关系数R为0.9999,方法检出限为0.0063 g/m L,定量限为0.021 g/mL。浸泡后最初的0.5 h以内,Ca~(2+)浓度随时间延长急剧升高,0.5 h处有明显转折,0.5 h至20 h,Ca~(2+)浓度仍随时间增加而升高,但是增加的速率较前0.5 h明显下降,20 h以后溶解达到基本平衡。复合磷酸钙颗粒的溶解过程分为3个阶段,首先是Ca~(2+)离子浓度快速升高的溶解过程,第二阶段是Ca~(2+)离子溶解与HA或Ca HPO_4·2H_2O沉积的竞争过程,第三阶段是Ca~(2+)离子浓度不再继续增加的稳定过程。结论复合磷酸钙颗粒(HA∶TCP=3∶7)在TRIS缓冲溶液中的溶解具有一定的规律性,24 h后溶出的Ca~(2+)离子浓度在1200 g/L左右。     

细胞膜上钙转运分子机制的研究进展

Ca~(2+)浓度与细胞的代谢和细胞的功能具有密切的关系。在通常情况下,细胞外游离的Ca~(2+)浓度为10~(-3)M,细胞内游离的Ca~(2+)则为10~(-8)～10~(-7)M。为了维持细胞内如此之低的Ca~(2+)浓度,质膜上Ca~(2+)转运以及细胞内Ca~(2+)转运系统具有重要的作用。在10~3～10~4化学梯度(Ca_0~(2+)/Ca_i~(2+))范围和     

钙对心肌ATP酶的损害及镁的保护作用

本工作在大鼠心肌肌膜观察到,Mg~(2+)为心肌Na~+-K~+-ATP酶激活所不可缺少的因素,当Mg~(2+)浓度在0～6mM时,Na~+-K~+-ATP酶及Mg~(2+)-ATP酶活性与其密切相关;当超过8 mM时,ATP酶总活性不变,但Na~+-K~+-ATP酶/Mg~(2+)-ATP酶之比值增高。高浓度Ca~(2+)对于Na~+-K~+-ATP酶及Mg~(2+)-ATP酶均具有抑制作用,而提高Mg~(2+)浓度可部分地拮抗高Ca~(2+)的损伤作用。     

舒张功能障碍性心力衰竭发病机制的研究——血小板Ca~(2+),红细胞Ca~(2+)及其膜Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶的变化

作者测定了42例收缩功能正常或大致正常,舒张功能障碍性轻、中度(Ⅰ°与Ⅱ°)心衰患者血小板Ca~(2+)、红细胞Ca~(2+)及其膜Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性。结果表明:心衰组血小板Ca~(2+)与红细胞Ca~(2+)含量升高,Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性下降,与对照组比较,P<0.001,其巾Ⅰ°与Ⅱ°间P<0.05或<0.001;不同心脏病间,上述改变以高血压性心脏病最明显,其次为肥厚型心肌病与冠心病。提示:细胞内Ca~(2+)超负荷可能是舒张功能障碍的原因之一。     

兔肺,肾皮质钙离子的超微结构定位和能谱分析

本文用改良的焦锑酸盐法对兔肺和肾皮质钙离子(Ca~(2+))进行超微结构定位观察,在肺泡Ⅰ、Ⅱ型细胞、毛细血管内皮细胞和肾小管细胞胞质中均显示数量不等的Ca~(2+)沉淀产物,对这些Ca~(2+)沉淀产物用能谱仪进行X射线微区元素分析,表明含有钙的Kα峰和锑的Lα峰。用EGTA处理后,绝大多数Ca~(2+)的沉淀产物溶解。以上结果证实,用改良的焦锑酸盐法可在超微结构上原位显示Ca~(2+)。     

海人藻酸致SD大鼠小脑损害机理及脑微灌流研究

目的:研究海人藻酸(KA)对损伤小脑组织局部细胞外液Ca~(2 )的影响。方法:采用鼠脑立体定位仪,微量注射KA损毁SD大鼠双侧小脑顶核,制备SD大鼠小脑共济失调模型;用脑微灌流技术检测损伤前后小脑组织细胞外液Ca~(2 )浓度。结果:病理学证实,KA注射部位的神经元大部分坏死、脱失,出现明显的神经变性损害;KA致小脑损伤后其局部组织细胞外液Ca~(2 )浓度立即下降。结论:SD大鼠小脑微量注射KA 1ul即可导致以神经元退变为主的病理学损害,证实了作为谷氨酸受体激动剂的KA是通过电压依赖性Ca~(2 )通道,使Ca~(2 )流入细胞内引起细胞内Ca~(2 )超载,导致大鼠小脑神经元的损害。     

膜钙泵分子结构、功能及其调控

Ca~(2+)在胞内的生物功能,主要是作为第二信使,通过各种钙结合蛋白,特别是钙调蛋白(CaM)调节胞内许多酶及有关的功能。Ca~(2+)的生物功能依赖于其跨膜的不均衡分布。一般讲,细胞浆内Ca~(2+)浓度大约为10~(-7)M,而胞外及胞内某些细胞器内(如线粒体、ER、SR体系)Ca~(2+)浓度高达10~(-3)M,正常情况下,细胞必需保持这样高的浓度梯度(图1)。不同的刺激如神经递质、激素、抗原、光、电等可引起Ca~(2+)一阵性流入胞内或触发胞内Ca~(2+)储库释放Ca~(2+)到胞     

哌唑嗪对原发性高血压病人红细胞Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶和钙调素的影响

本实验观察了原发性高血压(EH)病人红细胞Ca~(2+)Mg~(2+)-ATP酶活性,红细胞和血浆钙调素(CaM)的变化及哌唑嗪对其影响。结果表明:EH病人红细胞基础和最大Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性显著下降,并与血压呈显著负相关;红细胞CaM活性也显著降低并与最大Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性呈显著正相关;经哌唑嗪治疗后,EH病人红细胞Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性和CaM变化不显著,但血浆CaM有所降低。提示EH病人红细胞钙代谢异常与外周阻力增高有密切关系,哌唑嗪对细胞和体液CaM有不同影响。     

抗高血压因子对大鼠血管平滑肌钙内流的影响

实验观察了从原发性高血压病患者红细胞中提取的抗高血压因子(AHF)对自发性高血压大鼠(SHR)、肾性高血压大鼠(RHR)和正常血压的WKY大鼠和Wistar大鼠主动脉和肠系膜动咏平滑肌Ca~(2+)内流的影响。结果表明,SHR和RHR的肠系膜动脉Ca~(2+)内流显著高于主动脉;AHF可显著抑制SHR和RHR主动脉和肠系膜动脉Ca~(2+)内流,抑制作用呈剂量依赖性,且对肠系腆动脉Ca~(2+)内流抑制作用更明显;AHF也可抑制正常动物血管平滑肌Ca~(2+)内流。本工作提示,AHF的降压机制可能与其抑制血管平滑肌特别是小动脉血管平滑肌Ca~(2+)内流有关。     

细胞钠／钙交换可能参与高血压的发病机制

当前不论从组织水平,细胞水平还是亚细胞水平均证实血管平滑肌(VSM)细胞膜上存在着Na/Ca交换这一胞内Ca~(2+)调节机制。它可以利用Na~+的跨膜电化学梯度(g_(Na~+)来逆向转运Ca~(2+)。视Na~(2+)与Ca~(2+)电化学梯度的不同,它既可以介导Ca~(2+)进入细胞也可以将Ca~(2+)转运出细胞。 VSM细胞Ca~(2+)代谢的异常是高血压发病的一个重要原因。那么这一异常是否与Na/Ca交换有关呢?答案似乎是肯定的。在高血压病人的红细胞,自发性高血压大鼠(SHR)的红细胞或VSM细胞中Na~+与Ca~(2+)的含量均比正常对照明显增高。后者看来与Na~+,K~+-ATPase的抑制有关,因为不少证据显示高血压病人或动物血液中一种可以抑制Na~+,K~+-ATPase的内源性洋地黄类物质(endogenous digitalis)的水平升高。用高血压患者去蛋白     

钙信号在醛固酮合成中的作用及其调控机制

血管紧张素Ⅱ、促肾上腺皮质激素和钾是刺激醛固酮分泌的重要生理因素,这3种物质均可激活肾上腺皮质细胞膜上电压门控Ca~(2+)通道,引起Ca~(2+)内流,是生理性刺激醛固酮分泌的共同途径。在醛固酮瘤中,ATP1A1、ATP2B3、CACNA1D和KCNJ5突变均会导致细胞内Ca~(2+)增加。细胞内钙信号将通过Ca~(2+)-CaM-CaMK途径促进醛固酮合成。     

缺血等因素对大鼠心肌线粒体Ca^2＋转运的影响

本研究检测了体外缺血等因素对心肌线粒体Ca~(2+)转运的影响。结果表明,缺血明显抑制线粒体Ca~(2+)-ATP酶活性及~(45)Ca摄取率。缺血10分钟时,线粒体Ca~(2+)-ATP酶活性开始下降,40分钟时显著降低,~(45)Ca摄取率的变化也呈类似趋势。去甲肾上腺素及cAMP对线粒体Ca~(2+)-ATP酶活性,~(45)Ca摄取率无任何影响。无机磷对线粒体Ca~(2+)-ATP酶有轻微的抑制作用,二磷酸腺苷对谚酶活性有明显抑制作用,其IC_(50)值为2.5mmol/L。     

K~+通道阻滞剂对结肠上皮细胞(HT-29/B6)胞内钙的调节

本文运用fura-2技术研究了K~+通道阻滞剂对Carbacol(氨甲酰胆碱)介导的Ca~(2+)进入人类排Cl~-的HT-29/B6并影响胞内钙浓度的作用。结果表明,用100μmol/L氨甲酰胆碱刺激HT-29/B6可产生清晰的双相Ca~(2+)反应:Ca从静息水平(85±3nmol/L)迅速激发至短暂的峰值(821±44nmol/L),随后降至一段平台(317±12nmol/L)。平台高度与胞外Ca~(2+)浓度相关并在Ca~(2+)出入胞浆膜之间代表着新的平衡状态。平台在缺Ca~(2+)的条件下不出现而钙峰无论在有钙或无钙条件下均能出现,这表明Ca~(2+)峰的出现是由胞内Ca~(2+)库释放所致,而平台的维持则是外钙流入胞内所致。加阿托品