改良的小鼠原位肝移植实验模型

目的 介绍一种稳定、可靠、存活率高的小鼠原位肝移植实验模型。方法 选择同系雄性C57BIV6小鼠，供、受体各22只（其中16只作长期存活观察）。供肝经肝门静脉灌注4℃威斯康星大学保存液。血管重建时，肝上腔静脉端端吻合，肝门静脉和肝下腔静脉采用袖套法吻合。不作动脉重建。术后观察肝移植物组织学改变和肝脏再生反应。结果 小鼠肝脏移植手术成功率为100％。受体存活率为100％（超过30d）。无肝期保持在23min内。术后组织学检查移植肝组织结构良好，肝脏再生反应不明显。结论 改良方法建立的小鼠肝移植实验模型稳定性强，存活率高，精细的显微外科技术是成功的关键。     

重建肝动脉血供的小鼠原位肝移植模型的建立

目的 构建稳定的重建肝动脉血供的小鼠原位肝移植模型,初步探讨重建肝动脉血供在小鼠肝移植中的意义.方法 66只小鼠分为实验组(n=33)和对照组(n=33).实验组行重建肝动脉血供的原位肝移植术,在经典"双袖套法"的基础上,采用支架法重建肝动脉血供;对照组行非动脉化的原位肝移植.结果 共施行小鼠原位肝移植共66只.术后2周实验组生存率为84.85%(28/33),对照组生存率为81.82%(27/33);实验组的血清γ-GT和ALP水平显著低于对照组;病理学证据亦提示实验组胆管上皮细胞受损较对照组为轻. 结论肝动脉血供重建有助于减轻移植肝胆道冷保存-再灌注损伤.该模型可能成为肝移植分子生物学研究的理想动物模型.     

改良法重建肝动脉血供的大鼠原位肝移植模型

目的 建立一种稳定的重建肝动脉血供的大鼠原位肝移植模型，为研究肝移植术后移植免疫、胆道并发症等提供一个更加符合生理的动物模型。方法 以经典的“双袖套”大鼠原位肝移植模型为基础．将带有主动脉的供肝动脉与受体腹主动脉行端侧吻合重建肝动脉血供。结果 共施行重建肝动脉血供的大鼠原位肝移植35例。术后24h动物存活率85．7％。术后1周动物存活率82．9％。结论 用带有主动脉的供肝动脉与受体腹主动脉行端侧吻合重建肝动脉血供的方法稳定可靠，易于标准化。该模型是研究肝移植术后免疫排斥、胆道并发症的理想模型。     

肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型建立

目的 建立稳定的肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型.方法 以"双袖套法"小鼠肝移植为基础,将带腹主动脉的供肝肝动脉与受体腹主动脉行端侧吻合.共完成小鼠原位肝移植70例,并观察术后24 h、1周、1个月受体存活率,术后1个月肝功能及肝组织病理变化.同时设立假手术组对照.结果 受体术后24 h、1周、1个月存活率分别为94.3%、91.4%、85.7%.术后1个月肝功能ALT:(39.20±2.09)U/L AST:(75.60±3.24)U/L.与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).病理显示肝组织结构良好.结论 该方法可稳定地建立肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型.     

肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型建立

目的 建立稳定的肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型.方法 以"双袖套法"小鼠肝移植为基础,将带腹主动脉的供肝肝动脉与受体腹主动脉行端侧吻合.共完成小鼠原位肝移植70例,并观察术后24 h、1周、1个月受体存活率,术后1个月肝功能及肝组织病理变化.同时设立假手术组对照.结果 受体术后24 h、1周、1个月存活率分别为94.3%、91.4%、85.7%.术后1个月肝功能ALT:(39.20±2.09)U/L AST:(75.60±3.24)U/L.与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).病理显示肝组织结构良好.结论 该方法可稳定地建立肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型.     

肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型建立

目的 建立稳定的肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型.方法 以"双袖套法"小鼠肝移植为基础,将带腹主动脉的供肝肝动脉与受体腹主动脉行端侧吻合.共完成小鼠原位肝移植70例,并观察术后24 h、1周、1个月受体存活率,术后1个月肝功能及肝组织病理变化.同时设立假手术组对照.结果 受体术后24 h、1周、1个月存活率分别为94.3%、91.4%、85.7%.术后1个月肝功能ALT:(39.20±2.09)U/L AST:(75.60±3.24)U/L.与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).病理显示肝组织结构良好.结论 该方法可稳定地建立肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型.     

小鼠50%体积肝脏原位移植实验模型的建立

目的 介绍一种小鼠50%体积的原位肝脏移植实验模型.方法 选择同系雄性C57BL/6小鼠,供、受体各28只.实验分为50%体积移植组和全肝移植对照组.50%肝脏移植物通过切除左侧肝叶获得.供肝经门静脉灌注4℃威斯康星大学保存液.血管重建时,肝上腔静脉端端吻合,门静脉和肝下腔静脉采用袖套法吻合.不作动脉重建.术后观察移植物的存活时间.组织病理学检查肝脏移植物的组织结构和细胞形态,免疫组化检测肝细胞复制情况.结果 小鼠肝脏移植手术成功率为100%.50%体积的小鼠肝脏移植受体存活率为90%(＞15 d).全肝移植受体存活率为100%(＞15 d).所有受体手术无肝期保持在23 min内.术后组织学检查移植肝组织结构良好,全肝移植后肝脏再生反应不明显.50%体积的肝脏移植后激发明显的再生反应.结论 小鼠50%体积的肝脏移植实验模型存活率高,术后激发明显的再生反应.该模型可应用于缺血再灌注损伤和肝脏再生等基础研究.     

肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型建立

目的 建立稳定的肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型.方法 以"双袖套法"小鼠肝移植为基础,将带腹主动脉的供肝肝动脉与受体腹主动脉行端侧吻合.共完成小鼠原位肝移植70例,并观察术后24 h、1周、1个月受体存活率,术后1个月肝功能及肝组织病理变化.同时设立假手术组对照.结果 受体术后24 h、1周、1个月存活率分别为94.3%、91.4%、85.7%.术后1个月肝功能ALT:(39.20±2.09)U/L AST:(75.60±3.24)U/L.与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).病理显示肝组织结构良好.结论 该方法可稳定地建立肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型.     

肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型建立

目的 建立稳定的肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型.方法 以"双袖套法"小鼠肝移植为基础,将带腹主动脉的供肝肝动脉与受体腹主动脉行端侧吻合.共完成小鼠原位肝移植70例,并观察术后24 h、1周、1个月受体存活率,术后1个月肝功能及肝组织病理变化.同时设立假手术组对照.结果 受体术后24 h、1周、1个月存活率分别为94.3%、91.4%、85.7%.术后1个月肝功能ALT:(39.20±2.09)U/L AST:(75.60±3.24)U/L.与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).病理显示肝组织结构良好.结论 该方法可稳定地建立肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型.     

肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型建立

目的 建立稳定的肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型.方法 以"双袖套法"小鼠肝移植为基础,将带腹主动脉的供肝肝动脉与受体腹主动脉行端侧吻合.共完成小鼠原位肝移植70例,并观察术后24 h、1周、1个月受体存活率,术后1个月肝功能及肝组织病理变化.同时设立假手术组对照.结果 受体术后24 h、1周、1个月存活率分别为94.3%、91.4%、85.7%.术后1个月肝功能ALT:(39.20±2.09)U/L AST:(75.60±3.24)U/L.与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).病理显示肝组织结构良好.结论 该方法可稳定地建立肝动脉重建的小鼠原位肝移植模型.     

改良"二袖套法"制备大鼠原位肝移植动物模型

目的：介绍改进的“二袖套法”法大鼠原位肝移植动物模型。方法：采用改进的“二袖套”法进行110只大鼠原位肝移植。结果：切取供肝时间平均37min，修肝时间平均13min，无肝期平均14min，术中和术后4h内死亡8只，手术成功率达93%。术后1周死亡11只，1周存活率为89%，主要死亡原因为感染和胆道梗阻。结论：改进的“二袖套”法大鼠原位肝移植具有无肝期短、手术成功率高，大鼠术后存活时间长的优点，是大鼠原位肝移植的理想术式。     

大鼠原位肝移植模型的手术操作技巧探讨

目的 建立一个稳定的大鼠原位肝移植模型,探讨其手术技巧。方法在Kamada“二袖套法”的基础上进行改良。供体改经腹主动脉进行肝脏冷灌注;肝上下腔静脉用连续缝合法吻合,门静脉和肝下下腔静脉用袖套法吻合．胆总管采用单管内支架胆管端端吻合法。结果共施行大鼠原位肝移植140例,无肝期平均11min．手术成功率为97％,大鼠1周存活率为95％。结论改良的两袖套法具有操作简便、无肝期短、手术成功率高、大鼠术后存活时间长的优点,是大鼠原位肝移植的理想术式。娴熟细致的外科操作、受体无肝期的长短是决定动物存活的关键。     

大鼠原位肝移植模型的手术技巧及并发症的预防

目的 探讨建立一个稳定的大鼠原位肝移植模型的手术技巧以及术中和术后并发症的预防。方法 在Kamaka用“二袖套法”吻合血管的基础上进行改良。供体改经腹主动脉进行肝脏冷灌注；肝上下腔静脉用缝合法吻合，门静脉和肝下下腔静脉用袖套法吻合，胆总管采用单管内支架胆管端端吻合法。结果 共施行大鼠原位肝移植360次，手术成功率为91．3％。非干预组中，同系移植大鼠1周存活率为86．5％，3个月存活率达80．7％。结论 熟练的显微外科技术、细致的手术操作是预防术中和术后并发症的先决条件。受体无肝期的长短是决定动物存活的关键。     

Sewed revascularization for arterialized liver transplantation in mice

Background

Mouse models of liver transplantation are powerful tools for biomedical research. The cuff method is currently the most popular approach for revascularization of mouse liver grafts, as it is relatively easy to perform hence reducing the anhepatic time. However, the use of cuffs may induce a tissue reaction, causing chronic obstruction of anastomosed vessels, leading to portal hypertension. Here, we applied the suture technique for arterialized liver transplantation in mice.

Materials and methods

Liver transplantation was performed on 14 pairs of C57BL/6 mice. All hepatic vessels were anastomosed by sewing. The bile duct was connected with a stent. The liver grafts were harvested for histology on day 30 after surgery. Serum aspartate transaminase, alkaline phosphatase and bilirubin were measured at d 3, 7, and 30 after implantation.

Results

With a mean anhepatic time of 25.78 ± 3 min, the survival rate was 86% (n = 14) at 30 d following surgery. During this period, no significant liver injury was observed as assessed by serum markers and histology. Survival remained stable when grafts were exposed to 6 h cold ischemia prior to implantation. Vessel examination at the end of the studied period revealed an intact patency and a lack of collateral vessel growth.

Conclusion

Arterialized liver transplantation with sewed revascularization in mice is technically feasible. Both sewing and arterialization seem to be important factors promoting the survival of mouse recipients. The mouse model of suture arterialized orthotopic liver transplantation provides a novel tool for modern transplantation research and might be particularly suited for studies requiring longer-term survival of recipients.     

小型猪小体积肝移植模型的建立

目的研究构建成熟稳定小型猪小体积肝移植模型的方法。方法选用体重一致的广西巴马小型猪20只,按照随机原则分为供体组和受体组各10只。在获取供肝的过程中即进行减体积操作,切除左半肝并保留肝中静脉主干。受体采用经典原位非静脉-静脉转流法行小体积肝移植。记录受体肝移植的手术时间,供肝热缺血时间、冷缺血时间,受体无肝期时间。观察移植术后2周存活情况及手术相关并发症。结果手术时间5～7h,平均6h;供肝热缺血时间2～3min;冷缺血时间(116±16)min;无肝期时间(35±4)min。术中小型猪均无死亡。10只受体猪中,2只死于手术相关并发症,其中1只于术后10h死于肝断面出血,另1只于术后2d死于切口疝。其余8只受体猪皆存活超过2周,2周存活率达80%,均未发生手术相关并发症。结论在供体手术中切除左半肝并保留肝中静脉主干,受体采用经典原位非静脉-静脉转流法行小型猪小体积肝移植模型构建是可行且稳定的。     

冷保存大鼠部分肝移植模型的建立

目的　建立稳定的大鼠部分肝移植模型 ,研究冷保存对部分肝移植后肝再生的影响。方法　采用雄性SD大鼠 ,双袖套法行部分肝移植 ,观察不同冷保存时间受体生存状况以及各组手术情况。结果　各组移植肝平均体积为 62 % -64 % ,无肝期为 14 -15min。长时间冷保存后大鼠 7d存活率明显下降 ,生存分析显示各组间差异有显著性。 8h冷保存后大鼠 7d存活率为 40 % ,与临床辟裂式肝移植 1年生存率相似。结论　 8h保存大鼠部分肝移植模型是研究冷保存对部分肝移植肝再生影响的较好模型     

120例大鼠原位肝移植报道

目的建立一个稳定的大鼠原位肝移植模型,探讨其术中和术后并发症的预防。方法在Ka-mada“二袖套法”吻合血管的基础上进行改良。供体改经腹主动脉进行肝脏冷灌注;肝上下腔静脉用缝合法吻合,门静脉和肝下下腔静脉用袖套法吻合,胆总管采用单管内支架胆管端端吻合法。结果共施行大鼠原位肝移植120例,手术成功率为96.7%。大鼠1周存活率为95%,3月存活率达90%。结论娴熟细致的外科操作提高了手术成功率,受体无肝期的长短是决定动物存活的关键。     

Pattern of ischemia reperfusion injury in a mouse orthotopic liver transplant model

BACKGROUND: The molecular pathways of ischemic injury after liver transplantation are complex and difficult to dissect because of the presence of many variables. Transgenic and genetically deficient strains of mice provide ideal models for the study of the contribution of a single gene product in biological processes in vivo. Although well described in rats, prolonged preservation has not been studied in a mouse model of orthotopic liver transplantation (mOLT). The aim of this study was to establish a model of cold ischemia and reperfusion injury in mOLT and describe the pattern of the regenerative response to various lengths of cold storage. MATERIALS AND METHODS: mOLT was performed using a syngeneic combination. Grafts were preserved at 4 degrees C in University of Wisconsin (Viaspan) solution for increasing periods of cold preservation. After cold storage, the liver grafts were transplanted and recipient survival was monitored. Hepatocellular injury was determined by histology, and the regenerative response was quantitated by interleukin 6 upregulation and DNA replication. RESULTS: Long-term survival was 100%, 100%, 88%, and 0% for cold preservation of 1, 4, 8, and 16 h, respectively. Grafts with short preservation times (1 and 4 h) demonstrated limited injury and a weak regenerative response, with slight IL-6 early upregulation and minimal cell division. Eight hours of cold ischemia resulted in prominent injury and an intense regenerative response accompanied by significant IL-6 upregulation and DNA synthesis. Sixteen hours of storage resulted in all recipients succumbing to liver failure, with histology showing extensive hepatic necrosis. CONCLUSIONS: This study demonstrated the feasibility of using the mOLT model for the study of molecular mechanisms associated with recovery from cold ischemia and reperfusion injury. Increasing lengths of cold ischemia correlate with progressive tissue damage whereas recovery is associated with a regenerative response that correlates with the severity of injury.     

两种不同方法的大鼠小体积肝移植模型建立的比较

目的　探索一种大鼠小体积肝移植模型简单有效的建立方法。方法　选取体重相近的SD大鼠作为供受体 ,采用体外和体外两种方法切除部分肝叶以获取小体积供肝 ,按Kamada两套管法做供肝植入。比较两种方法的技术并发症。结果　体外法在术后肝断面出血、渗血 ,肝后下腔静脉狭窄和继发血栓 ,术中因出血引起的低血压休克 ,相近肝叶静脉误扎引起的回流障碍等并发症发生方面较体内法多。两者总的并发症发生率分别为 35 % (6 / 16 )和 5 % (4 / 78) (P <0 0 5 ) ,而两种方法在无肝期 ,冷缺血时间及总的手术时间上无统计学差异。结论　选取体重相近的供受体进行体内切除减体积是大鼠小体积肝移植模型建立的可行有效方法