沙利霉素逆转P-gp介导的肾癌ACHN细胞多药耐药的实验研究

目的探讨沙利霉素对肾癌ACHN细胞多药耐药的逆转及其机制。方法实验分为对照组、阿霉素组、沙利霉素组及阿霉素和沙利霉素联合用药组,药物作用24h后,CCK-8方法检测肾癌细胞的生长活性,免疫细胞化学法检测肾癌细胞P-糖蛋白（P-gp）的表达情况。结果 10μg/ml阿霉素对肾癌ACHN细胞的生长抑制率仅为4.758%。沙利霉素组对肾癌ACHN细胞生长抑制率呈剂量依赖性,并高于阿霉素组（P〈0.05）,其中以10μmol/L组抑制率最高（达17.555%）。联合用药组的生长抑制率高于沙利霉素组及阿霉素组（P〈0.05）,以10μmol/L沙利霉素＋10μg/ml阿霉素组的抑制率最高（达45.447%）。与阿霉素组比较,经沙利霉素处理过的肾癌ACHN细胞中的P-gp蛋白表达下降（P〈0.05）。结论沙利霉素增强了肾癌ACHN细胞对阿霉素的敏感性,耐药性逆转的机制之一可能与沙利霉素下调癌细胞中P-gp的表达有关。     

自噬在硼替佐米诱导的肾癌细胞凋亡中作用的研究

目的探讨自噬在硼替佐米诱导的肾癌细胞凋亡中的作用。方法采用MTT检测硼替佐米对人肾癌ACHN细胞增值率的影响;通过Western Blotting检测硼替佐米对人肾癌ACHN细胞凋亡相关蛋白cleaved caspase-3及自噬相关蛋白LC3表达水平的影响;联用自噬抑制剂3-MA后,MTT检测细胞增殖率,Western Blotting检测凋亡相关蛋白cleaved caspase-3表达水平。结果硼替佐米对肾癌ACHN细胞的增殖有抑制作用,并且增加人肾癌ACHN细胞凋亡相关蛋白cleaved caspase-3表达水平及自噬相关蛋白LC3表达水平,呈一定的浓度依赖性;联用3-MA可增加硼替佐米诱导的肾癌ACHN细胞的增殖抑制作用,并可增加硼替佐米诱导的肾癌ACHN细胞cleaved caspase-3表达水平。结论硼替佐米可诱导肾癌细胞凋亡并诱导肾癌细胞发生自噬,抑制自噬可以明显增强硼替佐米的肾癌细胞毒作用。     

细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5过度表达对神经细丝磷酸化的影响(英文)

背景:阿尔茨海默病的主要神经病理学特征之一是由过度磷酸化的细胞骨架蛋白(如,神经细丝)组成的神经原纤维缠结,细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶5可催化蛋白的磷酸化,但神经细丝是否可被细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶5磷酸化及其在阿尔茨海默病发病中的作用却知之甚少。目的:在细胞水平观察细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶5过度表达对神经细丝磷酸化的影响。设计:随机对照实验。单位:华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系。材料:实验于2001-02/10在华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系实验室完成。观察对象为培养的鼠成神经瘤细胞株(N2a)细胞。方法:培养N2a细胞,分为2组,一组为转染组,一组为未转染组。转染组用脂质体转染技术将细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5基因转入N2a细胞株中,并建立稳定表达细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5的N2a/cdk-5细胞株,免疫沉淀法及酶活性测定检测细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5活性,免疫荧光和免疫印迹技术检测它的表达和神经细丝的磷酸化状态。主要观察指标:两组细胞内神经细丝磷酸化的程度。结果:在N2a细胞株转染组中,细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5表达增加,并使抗体SMI31显色增强,SMI32显色减弱,提示神经细丝被过度磷酸化。与此同时,细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5酶活性较未转染组提高3.5倍。结论:提示细胞水平的细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5过度表达会导致细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5过度激活和神经细丝过度磷酸化,而过度磷酸化的神经细丝可能参与了阿尔茨海默病的病理过程。     

雷帕霉素抑制人肾癌ACHN细胞生长及转移的实验研究

[目的]观察雷帕霉素（RPM）对人肾癌细胞株ACHN生长、周期、凋亡及转移的影响,探讨RPM抑制肾癌细胞生长、转移的可能机制及临床应用前景.[方法]体外培养肾癌ACHN细胞,用不同浓度（10 ng/mL、25 ng/mL）的RPM干预ACHN细胞.采用MTT法检测RPM对于ACHN细胞增殖的影响;流式细胞仪检测ACHN细胞周期及凋亡的变化;Transwell 小室法检测细胞体外侵袭能力的变化;动物体内荷瘤实验检测对ACHN侵袭转移的影响.[结果]RPM能显著抑制ACHN细胞生长增殖,且呈时间和浓度依赖性,差别有显著性意义（P〈0.05）,并促进肿瘤细胞的早期凋亡（P〈0.05）.[结论]RPM明显抑制人肾癌ACHN细胞的生长及迁移,以RPM为基础的肾癌治疗方案可能在临床中具有良好的应用前景.     

RNAi干扰Stat3基因诱导喉癌顺铂耐药细胞凋亡及对Stat3信号转导的影响

目的利用RNA干扰Stat3基因,探讨其对喉癌细胞系Hep-2细胞中对顺铂耐药的细胞凋亡的影响。方法常规体外培养人喉鳞状细胞癌hep-2细胞株,重建质粒(pGPU6/GFP/Neo-sh Stat3、简称pG/G/N-sh Stat3)通过脂质体包裹转染Hep-2细胞,实验分为:Ⅰ重建质粒(pG/G/N-sh Stat3)+顺铂(DDP)组;Ⅱ单纯重建质粒(pG/G/N-sh Stat3)组;Ⅲ单纯顺铂(DDP)组;Ⅳ脂质体组;Ⅴ阴性对照组。利用流式细胞技术检测各试验组转染24h、48h及72h后的细胞凋亡情况,及各试验组转染72h后Stat3、p-Stat3及其靶目标基因产物Bcl-2蛋白表达水平。结果重建质粒(pG/G/N-sh Stat3)增强了顺铂对Hep-2细胞凋亡的促进作用;转染72h后,流式细胞仪检测结果显示重建质粒(pG/G/N-sh Stat3)+顺铂组的Stat3信号转导通路蛋白Stat3、p-Stat3蛋白及其靶目标基因产物Bcl-2蛋白的表达受到明显的抑制。结论 RNAi沉默STAT3基因通过抑制Stat3相关调控蛋白的表达,诱导喉癌顺铂耐药细胞凋亡,增强人喉鳞状细胞癌hep-2细胞株对化疗的敏感性。     

细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5过度表达对神经细丝磷酸化的影响

背景:阿尔茨海默病的主要神经病理学特征之一是由过度磷酸化的细胞骨架蛋白(如(o),神经细丝)组成的神经原纤维缠结,细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶5可催化(o)蛋白的磷酸化,但神经细丝是否可被细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶5磷酸化及其在阿尔茨海默病发病中的作用却知之甚少.目的:在细胞水平观察细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶5过度表达对神经细丝磷酸化的影响.设计:随机对照实验.单位:华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系.材料:实验于2001-02/10在华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系实验室完成.观察对象为培养的鼠成神经瘤细胞株(N2a)细胞.方法:培养N2a细胞,分为2组,一组为转染组,一组为未转染组.转染组用脂质体转染技术将细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5基因转入N2a细胞株中,并建立稳定表达细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5的N2a/cdk-5细胞株,免疫沉淀法及酶活性测定检测细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5活性,免疫荧光和免疫印迹技术检测它的表达和神经细丝的磷酸化状态.主要观察指标:两组细胞内神经细丝磷酸化的程度.结果:在N2a细胞株转染组中,细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5表达增加,并使抗体SMI31显色增强,SMI32显色减弱,提示神经细丝被过度磷酸化.与此同时,细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5酶活性较未转染组提高3.5倍.结论:提示细胞水平的细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5过度表达会导致细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5过度激活和神经细丝过度磷酸化,而过度磷酸化的神经细丝可能参与了阿尔茨海默病的病理过程.     

UCA1在肾癌中的表达分析及临床意义研究

目的检测长链非编码RNA UCA1在肾癌组织、肾癌细胞系中的表达水平,比较配对组织间、细胞系之间的表达差异,分析UCA1表达水平与患者临床特征之间的关系,探究其在肾癌中的临床意义。方法提取肾癌细胞系及46对配对组织中的总RNA,反转录获得c DNA后通过实时荧光定量PCR方法检测UCA1的表达量,使用统计学软件分析UCA1表达的差异性及其表达水平与患者临床特征之间的相关性。结果 UCA1在肾癌组织中表达水平明显高于配对癌旁正常组织(P<0.001),在肾癌细胞(786-O、ACHN、769P、Caki-2)中表达水平高于人胚肾细胞(293T)(P<0.001)。标本中共有38例(82.609%)肾癌标本UCA1表达上调,癌组织中UCA1表达量与患者临床特征无明显相关性(P>0.05)。结论 UCA1在肾癌组织及细胞系中表达明显上调,提示其和肾癌的发生发展有一定关系。     

细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5过度表达对神经细丝磷酸化的影响

背景：阿尔茨海默病的主要神经病理学特征之一是由过度磷酸化的细胞骨架蛋白（如6，神经细丝）组成的神经原纤维缠结，细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶5可催化6蛋白的磷酸化，但神经细丝是否可被细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶5磷酸化及其在阿尔茨海默病发病中的作用却知之甚少。目的：在细胞水平观察细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶5过度表达对神经细丝磷酸化的影响。设计：随机对照实验。单位：华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系。材料：实验于2001—02／10在华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系实验室完成。观察对象为培养的鼠成神经瘤细胞株（N2a）细胞。方法：培养N2a细胞，分为2组，一组为转染组，一组为未转染组。转染组用脂质体转染技术将细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶．5基因转入N2a细胞株中，并建立稳定表达细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5的N2a／cdk-5细胞株，免疫沉淀法及酶活性测定检测细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5活性，免疫荧光和免疫印迹技术检测它的表达和神经细丝的磷酸化状态。主要观察指标：两组细胞内神经细丝磷酸化的程度。结果：在N2a细胞株转染组中，细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5表达增加，并使抗体SMI31显色增强，SMI32显色减弱，提示神经细丝被过度磷酸化。与此同时，细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5酶活性较未转染组提高3．5倍。结论：提示细胞水平的细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5过度表达会导致细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶-5过度激活和神经细丝过度磷酸化，而过度磷酸化的神经细丝可能参与了阿尔茨海默病的病理过程。     

吲哚胺2,3-双加氧酶在急性髓系白血病细胞株的表达及其活性调节的实验研究

目的:研究吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)在急性髓系白血病细胞株(AML)的表达及其活性调节。方法:采用RT-PCR检测经γ-干扰素(IFN-γ)、胸腺肽α1(Tα1)、IFN-γ+Tα1及氯喹等药物作用前后HL-60细胞株及K562细胞株IDO mRNA及Toll样受体9(TLR9)mRNA表达变化;采用考马斯亮蓝染色法及改良比色法检测经IFN-γ、Tα1、IFN-γ+Tα1作用前后两细胞株IDO酶活性变化。结果:两细胞株均表达IDO mRNA及TLR9 mRNA;细胞经IFN-γ作用后,IDO mRNA表达及酶活性增加并呈浓度依赖性;经Tα1作用后,IDO mRNA表达及酶活性降低并呈浓度依赖性;经IFN-γ+Tα1共同作用后,Tα1明显削弱IFN-γ对IDO mRNA表达及酶活性的上调作用(P0.01);经氯喹作用后,两细胞株IDO mRNA表达无明显变化;经IFN-γ、Tα1、IFN-γ+Tα1及氯喹等药物作用后,两细胞株TLR9 mRNA表达无明显变化。结论:AML细胞表达IDO mRNA且具有酶活性,IDO可能在AML细胞诱导机体产生免疫耐受过程中起关键作用,可作为判断白血病预后的新指标;Tα1下调IDO表达及酶活性,并可削弱IFN-γ对IDO的诱导作用,提示Tα1作为免疫调节剂可能成为AML免疫治疗的新手段。     

B7基因转染对肾癌细胞的影响

目的 :观察B7基因表达对人肾癌细胞免疫原性的影响。方法 :将B7基因采用脂质体转染技术 ,将PLXSN/B7 1转染肾癌细胞。运用RT PCR方法观察B7 1表达情况 ,同时应用单克隆抗体标记技术检测转染前后免疫学改变。结果 :肾癌细胞不表达 ,转染后大多数肾癌细胞表面表达B7 1。转染前后肾癌患者T3、T4升高 ,T8降低 ,T4 /T8升高。结论 :B7 1基因能增强免疫细胞对肾癌细胞的识别和杀伤 ,从而有效增强肾癌细胞的免疫原性     

lncRNA HCG11-201对肾癌细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)HCG11-201在肾癌组织中的表达及影响癌细胞增殖和侵袭的分子机制。方法生物信息学方法预测HCG11-201表达与肾癌患者预后的相关性。实时荧光定量PCR(qPCR)检测肾癌组织和癌旁正常组织、肾癌细胞系和正常肾小管上皮细胞中HCG11-201的表达,选择表达最少的肾癌细胞系转染,分别将HCG11-201质粒(实验组)或阴性对照质粒(对照组)转至肾癌细胞。qPCR检测HCG11-201质粒转染效率。MTT法检测转染后细胞增殖活性,Transwell小室实验检测转染后细胞侵袭能力。生物信息学方法预测HCG11-201可吸附结合的微小RNA(miRNA)及miRNA下游基因。qPCR和Western blot检测miRNA和下游基因表达。结果GEPIA数据库显示,HCG11-201相对表达水平越高,患者总生存期越长(P<0.01)。肾癌组织HCG11-201相对表达水平显著低于癌旁正常组织(P<0.01)。肾癌细胞HCG11-201相对表达水平显著低于正常肾小管上皮细胞(P<0.01),其中Caki-1细胞相对表达水平最低(P<0.01)。与对照组比较,实验组Caki-1细胞HCG11-201相对表达水平显著升高(P<0.01),细胞增殖活性显著降低(P<0.05),细胞的侵袭能力显著降低(P<0.05)。HCG11-201可互补结合miR-522,miR-522可互补结合线粒体融合蛋白2(mitofusion-2)。与对照组比较,实验组Caki-1细胞miR-522的相对表达水平显著降低(P<0.01),mitofusion-2的mRNA相对表达水平和蛋白水平显著升高(P<0.01)。结论lncRNA HCG11-201在肾癌组织和细胞系低表达,与肾癌患者预后相关。过表达HCG11-201可明显抑制肾癌细胞增殖和侵袭,其分子机制可能为HCG11-201吸附miR-522进而上调mitofusion-2基因的表达。     

miR-543调控肾透明细胞癌细胞增殖和侵袭的机制分析

目的探讨与分析miR-543调控肾透明细胞癌(CCRCC)细胞增殖和侵袭的机制。方法 CCRCC细胞系ACHN随机分为三组:空白组、阴性对照(NC)组与miR-543组,NC组与miR-543组分别转染照NC与miR-543模拟剂,空白组不进行转染。MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Transwell检测细胞转移与侵袭比率,Western blot检测蛋白表达水平。结果转染后24 h与48 h,与NC组与空白组相比,miR-543组的细胞增殖抑制率显著增加(P0. 05),细胞凋亡率显著增加(P 0. 05),细胞转移与侵袭相对数显著降低(P 0. 05),SDF-1、CXCR7蛋白相对表达量显著降低(P 0. 05),NC组与空白组比较差异无统计学意义(P 0. 05)。且miR-543对细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、细胞转移与侵袭、SDF-1和CXCR7蛋白相对表达量的影响均不具有时间依赖性。结论 miR-543能抑制调控肾透明细胞癌细胞增殖和侵袭,促进细胞凋亡,且不具有时间依赖性,其作用机制可能与抑制SDF-1/CXCR7表达有关。     

miR-34a通过调控YY1抑制肾癌细胞的增殖及侵袭

目的探讨miR-34a在肾癌组织中表达、miR-34a对人肾癌ACHN细胞增殖和侵袭的影响及调控机制。方法实时聚合酶链反应(PCR)检测miR-34a在20例肾癌及癌旁组织中的表达;采用脂质体转染法将miR-34a mimics转染入肾癌ACHN细胞中,试验分空白对照组、阴性对照组、miR-34a mimics转染组。实时PCR检测转染24 h后miR-34a表达量;噻唑蓝(MTT)试验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;Transwell及Matrigel检测细胞侵袭能力;实时PCR和蛋白质印迹(Western blot)技术检测转染后转录因子YY1表达水平。结果与癌旁组织相比,20例癌组织中miR-34a平均表达量为1.06±0.67,显著低于癌旁组织(1.62±0.83,P<0.01);转染后24 h,miR-34a mimics转染组的miR-34a表达量为157.04±13.01,较阴性对照组显著上调(P<0.01);miR-34a mimics转染组细胞增殖能力显著降低(P<0.01),细胞生长被阻滞在G0/G1期;细胞侵袭能力明显减弱(P<0.01);转染miR-34a mimics后YY1基因在mRNA表达无明显变化(P>0.05),蛋白水平下调。结论 miR-34a在肾癌中低表达,可能与肾癌的发生有关;miR-34a调控YY1的表达可能是抑制肾癌细胞生物活性的重要机制之一。     

长链非编码RNA CCAT2在肾癌中的表达和肾癌临床分期的关系

目的检测并分析长链非编码RNA CCAT2在肾癌中的表达水平及其表达与患者临床特征之间的关系。方法通过实时荧光定量PCR检测肾癌及癌旁正常组织、肾癌细胞系(ACHN、786-O)及人胚肾细胞系(293T)中长链非编码RNA CCAT2的表达水平,通过配对t检验比较配对组织间表达差异;列出四格表,通过Fisher确切概率法探究CCAT2表达水平与患者临床特征之间的关系。结果 32例肾癌组织中26例(81.25%)表达升高,CCAT2在肾癌组织中表达水平明显升高(P<0.01),正常组织中CCAT2相对表达量为1±0.205 85,肾癌组织中CCAT2相对表达量为12.817 12±0.551 67;CCAT2在293T细胞中表达水平明显低于786-O、ACHN细胞(P<0.01),293T细胞中CCAT2相对表达量为1±0.004 88,786-O细胞中CCAT2相对表达量为15.670 72±1.075 72,ACHN细胞中CCAT2相对表达量为36.504 44±8.990 78;CCAT2在临床分期、分级较高的肾癌组织中升高更明显(P<0.05)。未发现CCAT2表达水平和患者年龄、性别、肾癌组织类型之间的相关性(P>0.05)。结论肾癌组织中CCAT2表达升高,提示CCAT2与肾癌发生相关。     

Tyk2／Stat3在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的:探讨宫颈鳞状细胞癌和癌旁正常宫颈组织中Tyk2、Stat3和VEGF-C的表达及意义.方法:利用组织芯片技术和免疫组化Envision法检测Tvk2、Stat3和VEGF-C在宫颈鳞状细胞癌组织和癌旁正常宫颈组织的表达.结果:宫颈鳞状细胞癌组织Tvk2、stat3和vEGF-C的表达率明显高于癌旁正常宫颈组织;Tvk2和VEGF-C与宫颈鳞状细胞癌的血管侵犯相关:Tvk2、stat3和VEGF-C与宫颈鳞状细胞癌的临床分期、分化程度、有无淋巴转移等无关;三者在宫颈鳞状细胞癌中的表达阳性率呈两两正相关.结论:Tyk2和Stat3表达与宫颈鳞状细胞癌发生、发展有关.二者具有相互诱导和信息传递的协同作用.Tyk2和VEGF-C的阳性过表达间接反应了宫颈癌浸润能力,在肿瘤细胞的扩散中起着重要的作用,可能是宫颈癌预后指标.     

HBV核心蛋白拮抗α干扰素抗病毒活性的初步研究

目的 探讨HBV核心蛋白（HBc）对α干扰素（IFN-α）抗病毒活性可能存在的拮抗机制。 方法 以表达抗黏液病毒A蛋白(MxA)的重组质粒pcDNA3.1-Flag-MxA （野生型）转染肝胚瘤细胞株HepG2.2.15细胞,用ELISA和real-time PCR法分别检测转染后HepG2.2.15细胞上清HBsAg、HBeAg和细胞外HBV DNA。HBc核心蛋白表达质粒（pHBc-EGFP）转染HepG2细胞后,RT-PCR法分析IFN-α抗病毒蛋白MxA、双链RNA激活的蛋白激酶（PKR）和2′,5′-寡腺苷酸合成酶（2′,5′-OAS）等mRNA水平。结果 转染MxA重组质粒的HepG2.2.15细胞能够表达MxA,转染48 h时HBsAg、HBeAg比空白对照组显著减少（P＜0.05）,HBV DNA无显著性差异。转染pHBc-EGFP的HepG2细胞,经1 000 IU/ml IFN-α处理后,抗病毒蛋白PKR和2′,5′-OAS mRNA水平未见明显改变,而MxA-mRNA水平显著降低（P＜0.05）。 结论 HBV核心蛋白可能通过抑制抗病毒蛋白MxA的表达,而发挥对IFN-α的拮抗作用。     

IFN-γ对AKT基因激活的32D细胞的影响及作用机制探讨

目的 观察IFN-γ对AKT基因激活的小鼠髓系祖细胞系(32D细胞)的影响,探讨IFN-γ对造血细胞增殖和凋亡双向调节的可能机制.方法 用质粒转导技术使32D细胞高表达AKT基因,以IFN-γ作用32D细胞,用水溶性四氮唑(WST-1)细胞增殖检测法检测细胞增殖水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测磷酸化胞外信号调节激酶(p-Erk)1/2、信号转导和转录活化蛋白(Stat)3、p-Stat3的表达.结果 ①低浓度(100 U/ml)IFN-γ能促进32D细胞增殖、抑制凋亡,高浓度(1000 U/ml)IFN-γ则相反(100 U/ml处理24 h细胞密度为0.238±0.010;而1000 U/ml处理后为0.106±0.010,未处理组为0.170±0.010).②低浓度IFN-γ可使32D细胞内Stat3磷酸化水平升高(1124±13),高浓度时减低(601±13).③转染激活型AKT质粒的32D细胞(激活型细胞)较其他组细胞的增殖率显著增高、凋亡率明显降低[分别为0.287±0.010、(9.57±0.17)%](P＜0.05).④激活型32D细胞较其他组细胞p-Erk1/2蛋白表达明显减低(P＜0.05).结论 ①IFN-γ对32D细胞有双重作用,即低浓度促进细胞增殖、抑制凋亡,高浓度抑制细胞增殖、促进凋亡.②IFN-γ对32D细胞的双重效应可能是通过Stat3的磷酸化水平的增减实现的.③激活型AKT能明显促进32D细胞增殖、抑制凋亡,IFN-γ可通过调控AKT来调节细胞增殖及凋亡.④AKT激活后可以抑制Erk信号通路,可能是通过抑制Rafl的修饰实现的.     

肾癌患者外周血Th1/Th2和Tc1/Tc2细胞因子的表达

目的检测不同临床分期肾癌患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞中细胞因子的表达水平,分析Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移对肾癌发生和转移的临床意义。方法用流式细胞仪检测60例不同分期肾癌患者和40例正常对照者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞分泌的IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4、IL-6和IL-10的表达水平。结果与正常对照组相比,无症状型肾癌患者各细胞因子的表达无明显差异,而局限型患者Th1、Tc1类细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平降低(P<0.01),局部进展型和转移型肾癌患者Th1、Tc1类细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平明显下降(P<0.01);而Th2、Tc2类细胞因子IL-4、IL-6(P<0.05,P<0.01)分泌水平升高。结论 Th1/Th2偏移和Tc1/Tc2偏移促进了晚期肾肿瘤的进展和转移。T淋巴细胞亚群改变导致免疫功能失调,使肿瘤细胞发生免疫逃逸。     

载脂蛋白M对肾癌细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用

目的:研究人载脂蛋白M(apolipoprotein M,Apo M)对肾透明细胞癌细胞株(ACHN、769-P和786-O)增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:采用装载人Apo M基因的慢病毒和阴性对照组慢病毒分别感染肾癌细胞株,建立Apo M过表达组(Apo M-OE组)和阴性对照组(NC组)细胞模型。应用CCK-8增殖实验和克隆形成实验观察细胞增殖能力,采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力,采用Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果:Apo M过表达后,ACHN和769-P过表达组细胞在72h增殖能力显著降低(分别P0.01,P0.05);786-O细胞在48 h表现出明显差异(P0.001)。克隆形成实验表明Apo M过表达后,3株细胞克隆形成能力明显减弱(分别P0.001,P0.01,P0.01)。细胞划痕实验证实ACHN和769-P过表达组细胞在12 h时出现明显差异(分别P0.05,P0.001);786-O细胞在24h时迁移能力明显受抑(P0.01)。细胞侵袭实验发现3株细胞过表达A po M后侵袭能力下降(分别P0.001,P0.001,P0.01)。结论:Apo M过表达后,肾癌细胞增殖、迁移和侵袭能力显著减弱。     

miRNA-592在肾细胞癌进展中作用及其与预后关系研究

目的 探讨miRNA-592在肾细胞癌(RCC)中的作用及其与预后的关系.方法 逆转录-聚合酶链反应检测110例RCC组织及其配对的癌旁组织、正常人肾上皮细胞系(HK-2)和人RCC细胞系(786-O、ACHN、Caki-1和769-P)中miRNA-592的表达.分析miRNA-592与RCC临床病理特征及生存预后的...