雷公藤内酯醇对类风湿关节炎大鼠TLR4/NF-κB信号通路的调控作用研究

目的观察雷公藤内酯醇治疗类风湿关节炎(RA)大鼠的疗效,并通过Toll-样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路探讨其作用机制。方法将24只健康SD大鼠,随机分为空白对照组、RA模型组、阳性药双氯芬酸组、雷公藤内酯醇组,每组6只。采用热杀死结核分枝杆菌诱导RA模型组、阳性药双氯芬酸组、雷公藤内酯醇组大鼠制作RA模型;造模成功后,阳性药双氯芬酸组给予10mg/kg双氯芬酸灌胃,雷公藤内酯醇组大鼠给予6mg/kg雷公藤内酯醇灌胃,空白对照组和RA模型组大鼠给予等量0.9%氯化钠溶液灌胃。采用ELISA法测定大鼠血清中炎性细胞因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-4、IL-6]表达水平;评价关节炎指数及足体积。免疫组织化学法检测关节滑膜组织TLR4、NF-κB、p-NF-κB蛋白表达,q-PCR法检测滑膜组织TLR4mRNA的表达。结果与空白对照组比较,RA模型组血清中TNF-α、IL-4、IL-6表达水平显著升高(P0.05);与RA模型组比较,阳性药双氯芬酸组血清中TNF-α、IL-4、IL-6表达水平显著下降(P0.05),且雷公藤内酯醇组TNF-α、IL-4、IL-6表达水平呈极显著下降(P0.01)。与RA模型组比较,雷公藤内酯醇组在第8、12、16、20天时关节炎指数和足体积显著降低(P0.05),阳性药双氯芬酸组在第12、16、20天时关节炎指数和足体积显著降低(P0.05)。与空白对照组比较,RA模型组滑膜组织中TLR4、NF-κB、p-NF-κB蛋白表达量和TLR4mRNA表达量显著上调(P0.05);与RA模型组比较,阳性药双氯芬酸组滑膜组织中TLR4、NF-κB蛋白表达量和TLR4mRNA表达量显著下降(P0.05),雷公藤内酯醇组滑膜组织中TLR4、NF-κB、p-NF-κB蛋白表达量和TLR4mRNA表达量显著下调(P0.05)。结论雷公藤内酯醇可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路的信号因子表达,从而降低炎性因子的产生,减少炎性反应,起到治疗RA的作用。     

利拉鲁肽对链脲霉素致糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用机制分析

目的探究利拉鲁肽对链脲霉素致糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用机制。方法 60只SD大鼠中随机取12只作为空白对照组,其余48只大鼠随机分为模型组和低、中、高剂量利拉鲁肽组。采用一次性腹腔注射链脲霉素(55 mg/kg)诱导糖尿病大鼠模型,造模前7 d皮下注射低、中、高剂量的利拉鲁肽(35μg/kg、70μg/kg、140μg/kg),1次/d,连续注射7 d。空白对照组和模型组以等量生理盐水替代。处理结束后,检测大鼠心功能指标[左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、射血分数(EF),短轴缩短率(FS)]和空腹血糖水平。HE染色和Masson染色观察大鼠心肌损伤和纤维化程度;酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)的含量; Western blot检测Toll样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白(MyD88)及核因子κB P65(NF-κB P65)表达。结果与空白对照组相比,模型组大鼠LVESD、LVEDD、空腹血糖、CVF、TNF-α、IL-1β、IL-6、TLR4、MyD88及NF-κB P65磷酸化水平明显升高,EF、FS明显降低(P 0. 05),心肌病理损伤显著增加。与模型组相比,利拉鲁肽处理组LVESD、LVEDD、空腹血糖、CVF、TNF-α、IL-1β、IL-6、TLR4、MyD88及NF-κB P65磷酸化水平明显降低,EF、FS明显升高(P 0. 05),心肌病理损伤明显减轻。结论利拉鲁肽可呈剂量依赖性地降低大鼠血糖水平,保护糖尿病大鼠心肌损伤,抑制TLR4/MyD88/NF-κB活化后介导的炎症反应可能是其作用机制。     

中风Ⅱ号对PC12细胞化学损伤模型TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响

目的:观察中风Ⅱ号口服液对PC12细胞化学损伤模型TLR4/My D88/NF-κB通路的影响。方法:制作PC12细胞化学性损伤模型,用中风Ⅱ号含药血清干预,并设空白对照组、模型组进行比较,MTT法测定细胞增殖,RT-PCR检测TLR4、My D88、TRIF、NF-κB m RNA表达,Western Blot检测TLR4、My D88、TRIF、NF-κB蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组PC12细胞增殖显著降低(P<0.01),TLR4、My D88、NF-κB的m RNA和蛋白表达显著升高(P<0.01或P<0.05);与模型组比较,中风Ⅱ号含药血清低剂量组、高剂量组PC12细胞增殖显著升高(P<0.01或P<0.05),TLR4、My D88、NF-κB的m RNA和蛋白表达显著降低(P<0.01或P<0.05);与低剂量组比较,高剂量组PC12细胞增殖显著升高(P<0.01或P<0.05),TLR4、My D88、NF-κB的m RNA和蛋白表达显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论:中风Ⅱ号可通过抑制TLR4/My D88/NF-κB通路,进而调控炎症级联反应,保护PC12细胞化学性损伤。     

TSNⅡA对大鼠IRI肾脏TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的探讨丹参酮ⅡA(TSNⅡA)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)肾脏Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响及对炎症因子水平的下调作用,并分析其对肾脏IRI保护作用机制。方法选取雄性Wistar大鼠建立大鼠肾IRI模型,采用随机数字表表法随机分为五组,每组12只,其中A组大鼠为假手术组;B组为IRI模型组;C组为ST2825干预组,注射ST2825(100 mg/kg);D组为Bay-7082干预组,注射Bay-7082(50μg/kg);E组为TSNⅡA干预组:实验前3 d开始TSNⅡA干预组股静脉注射丹参酮ⅡA注射液(5 mg/kg),每天1次。18 h后,取大鼠下腔静脉血液2 ml,检测血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)浓度,并处死大鼠,应用免疫组化法检测肾脏TLR4和NF-κB阳性表达率。结果 B、C、D和E组TLR4和NF-κB阳性率均高于A组,C、D和E组TLR4和NF-κB阳性率均低于B组,E组TLR4和NF-κB阳性率分别为(38.27±2.87)%和(40.76±4.20)%,均高于C和D组,差异均具有统计学意义(P0.05)。B、C、D和E组血清TNF-α、IL-1和IL-6水平均高于A组,C、D和E组血清TNF-α、IL-1和IL-6水平均低于B组,E组血清TNF-α、IL-1和IL-6水平分别为(76.02±4.28)pg/L、(86.41±6.32)ng/L和(80.28±5.60)ng/L,均高于C和D组,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论TSNⅡA能够下调大鼠肾脏TLR4和NF-κB水平,抑制TLR4/NF-κB信号通路,降低炎症因子水平,实现对肾脏IRI的改善与保护作用。     

柚皮素对过敏性鼻炎模型大鼠鼻黏膜组织TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路的影响

目的 探究柚皮素对过敏性鼻炎(AR)模型大鼠鼻黏膜组织Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)/肿瘤坏死因子α(TNF-α)信号通路的影响。方法 建立AR大鼠模型，48只大鼠以随机数字表法平均分为4组：模型组、柚皮素低(100 mg/kg)剂量组、柚皮素高(200 mg/kg)剂量组、柚皮素高(200 mg/kg)剂量+脂多糖(LPS)(TLR4通路激活剂，0.4 mg/kg)组，另取12只SD大鼠设为对照组。以药物分组干预治疗后，观察大鼠鼻炎症状并进行评分；苏木精-伊红(HE)染色检测大鼠鼻黏膜组织病理形态改变；试剂盒测定大鼠血清IgE及炎性因子白细胞介素(IL)-17、IL-18水平；免疫组织化学染色检测大鼠鼻黏膜组织CD19、CD23表达；免疫印迹法检测大鼠鼻黏膜组织TLR4/NF-κB/TNF-α通路蛋白表达。结果 与对照组相比，模型组大鼠鼻黏膜组织发生严重病理损伤，鼻炎症状评分、血清IgE、IL-17及IL-18水平、鼻黏膜组织CD19、CD23阳性细胞比例、鼻黏膜组织TLR4、核内NF-κB p65、TNF-α蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型...     

槲皮素和姜黄素对脓毒症大鼠炎症因子的影响

目的 探讨槲皮素和姜黄素预处理对脓毒症大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)白细胞介素-6 (IL-6 )及核转录因子-κB(NF-κB)的影响.方法 将120 只Wistar 大鼠按随机数字表法分为假手、术组(A 组)模型组(B 组)槲皮素预处理组(C1 组100 mg/kg 、C2 组50 mg/kg)姜黄素预处理组(D1 组100 mg/kg 、D2 组、50 mg/kg)、槲皮素、+姜黄素预处理组(E1 组槲皮素50 mg/kg +姜黄素、100 mg/kg,E2 组槲皮素50 mg/kg +姜黄素50 mg/kg,E3 组槲皮素100 mg/kg +姜黄素50 mg/kg,E4 组槲皮素100 mg/kg +姜黄素100 mg/kg).采用盲肠结扎穿孔术(CLP )复制脓毒症模型;A 组仅开腹分离盲肠而不结扎.各组于制模前灌胃相应药物,A 组和B 组仅灌胃0.1% 二甲基亚砜(DMSO)均每日1 次,连用3d.各组取6 只大鼠记录制模后脓毒症严重程度评分及生存时间;余大鼠于制模后24 h 处死,用,酶联免疫吸附试验(ELISA )测定血清TNF-α、IL-6 水平,荧光定量聚合酶链反应(PCR )测定肝组织核转录因子-κB(NF-κB)mRNA 表达,并分析脓毒症严重程度评分、NF-κB 与TNF-α、IL-6 的相关性.结果 ①B 组术后24 h 脓毒症严重程度评分(分)明显高于A 组(P＜0.05)半数生存时间较C、D、E 组明显缩短(P＜0.05);各药物预处理组术后脓毒症严重程度评分均较B 组明显下降(均,P＜ 0.05),其中E4 组(13.83±1.33 )下降更显著.②B 组TNF-α、IL-6 、NF-κB mRNA 表达均较A 组明显升高(均P＜0.05);与B 组比较,药物预处理组能明显降低TNF-α、IL-6 的浓度和NF-κB mRNA 的表达水平,且各组组内比较差异有统计学意义(均P＜0.05)其中以E4 组下降更显著.③脓毒症严重程度评分与血清TNF-α、IL-6 水平均呈正相关(r 值分别为0.852 、8,均P＜0.01);NF-κB mRNA 与血清TNF-α、IL-6 水平呈正相关(r 值分别为0.852 、0.848,均P＜0.01).结论 槲皮素和姜黄素预处理能明显抑制脓毒症时NF-κB 的表达和炎症反应,随槲皮素及姜黄素剂量增加作用更为显著;且二药合用较单药效果更佳.     

基于miR-146a调控NF-κB信号通路探讨芍药甘草汤治疗颈型颈椎病兔颈后肌炎症损伤的作用机制

目的:从组织学及分子学层面探讨芍药甘草汤对兔颈后肌炎症损伤的作用及其可能的机制,为临床运用芍药甘草汤治疗颈型颈椎病提供实验依据。方法:将30只6月龄的新西兰白兔随机分为高剂量组、中剂量组、低剂量组、模型组、正常组,每组6只,参照课题组前期成功制备的寒湿型兔颈型颈椎病模型进行造模。造模8周后,高剂量组、中剂量组、低剂量组分别予以16、8、4 g/kg的芍药甘草汤进行灌胃治疗,正常组和模型组给予正常饲养。于治疗4周后用ELISA法检测5组血清中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平。HE染色法观察5组兔颈后肌组织形态的变化。Western blot法检测5组兔颈后肌组织中核转录因子(NF)-κB信号通路关键节点髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB P65蛋白表达水平。RT-qPCR法检测5组兔颈后肌TLR4、miR-146a及其下游靶基因TRAF-6的mRNA表达水平。结果:芍药甘草汤可降低兔血清炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量(P0.01);明显改善受炎症损伤的兔颈后肌细胞形态结构;降低MyD88、NF-κBP65蛋白的表达(P0.05);同时提高颈后肌组织中miR-146a的表达水平(P0.05),降低TLR4、TRAF-6的表达水平(P0.05)。结论:服用芍药甘草汤可以减轻颈型颈椎病模型兔颈后肌的炎症损伤,其作用机制可能是通过改变模型兔颈后肌组织中miR-146a的表达而抑制NF-κB信号通路释放TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症因子,从而改善颈型颈椎病模型兔颈部炎症损伤,起到治疗颈型颈椎病的作用。     

甲胺鸢尾素对异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤后相关炎性因子的影响

目的探究中药葛花提取物甲胺鸢尾素对大鼠心肌缺血损伤后相关炎性因子的影响机制。方法将大鼠分为4组,实验1、2组采用不同剂量甲胺鸢尾素灌胃,模型组及空白组等量生理盐水灌胃,10d各组(空白组除外)均皮下多点注射盐酸异丙肾上腺素0.4mg/100g,制备异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤模型。造模后,取各组大鼠相应部位材质,检测并对比分析各组大鼠的TNF-α、IL-1β、Bcl-2及NF-κB蛋白的变化情况。结果与空白组对比,模型组大鼠及实验组血清TNF-α、IL-1β、Bcl-2、NF-κB明显升高(P0.05);与模型组对比,实验1、2组血清TNF-α、IL-1β、NF-κB明显降低(P0.05),Bcl-2明显升高(P0.05),其中实验1组比实验2组降低/升高更加明显(P0.01)。结论甲胺鸢尾素对异丙肾上腺素致大鼠缺血再灌注损伤能起到保护作用,能够有效抑制TNF-α、IL-1β炎症因子的释放,上调Bcl-2,抑制NF-κB蛋白表达。     

超短波调控NF-κB/TLR4信号通路抑制大鼠急性肺损伤炎症反应的研究

目的:观察超短波对大鼠急性肺损伤炎症反应的作用及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、Toll样受体4(Tolllike receptors 4,TLR4)表达的影响。方法:将24只雄性SD大鼠随机分成3组:对照组,急性肺损伤组,超短波组,每组8只。气管内滴注脂多糖建立急性肺损伤模型。造模后的即刻、4h、8h分别给予干预组大鼠超短波治疗,电极板胸背对置,间距11cm,每次干预15min。采用HE染色观察肺组织病理学表现,肺损伤评分评估损伤程度,湿/干重比值(W/D)评估肺水肿,ELISA检测血清炎症因子白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)的水平,RTPCR及Western-blot分别检测NF-κB、TLR4 m RNA及蛋白表达水平。结果:与对照组比较,HE染色见急性肺损伤组大鼠肺组织结构受损,肺损伤评分及肺组织湿/干重比值(W/D)增高(P0.01);血清炎症因子IL-6、TNF-α的水平上升(P0.01);NF-κB、TLR4 m RNA表达及蛋白相对表达量明显升高(P0.01)。与急性肺损伤组比较,超短波组大鼠肺组织结构受损程度明显减轻,肺损伤评分降低(P0.01);肺组织湿/干重比值(W/D)下降,但尚不具备显著性意义(P0.05);血清炎症因子IL-6、TNF-α水平下降(P0.05,P0.01);NF-κB、TLR4 m RNA表达及蛋白相对表达量降低(P0.01,P0.01)。结论:超短波通过抑制NF-κB/TLR4信号通路,降低炎症因子IL-6、TNF-α的水平,抑制急性肺损伤炎症反应。     

核因子κB抑制剂PDTC对颈椎病大鼠椎间盘炎症反应的抑制作用

目的探讨核因子κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫基甲酸盐(PDTC)对颈椎病大鼠椎间盘炎症反应的抑制作用。方法构建动静力失衡性颈椎病大鼠模型,将造模成功大鼠分为模型组,PDTC低、中、高剂量组,另外设立假手术组(仅切开颈部皮肤),每组大鼠10只,PDTC低、中、高剂量组大鼠每天分别腹腔注射50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg PDTC,假手术组及模型组腹腔注射等量生理盐水,连续28 d。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠椎间盘组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-1β(IL-1β)及IL-6含量,Realtime PCR检测TNF-α,IL-1β及IL-6 mRNA表达,Western blot检测各组大鼠椎间盘组织中NF-κB p65、NF-κB抑制蛋白(IκBα)表达。结果与假手术组比较,模型组中大鼠椎间盘组织中TNF-α,IL-1β及IL-6 mRNA及蛋白含量提高(P <0. 05),p-NF-κB p65、p-IκBα表达量上调(P <0. 05)。与模型组比较,PDTC低、中、高剂量组大鼠椎间盘组织中TNF-α,IL-1β及IL-6 mRNA及蛋白含量降低(P <0. 05),p-NF-κB p65、p-IκBα表达量下调(P <0. 05),并呈剂量依赖性。结论 PDTC能显著地抑制颈椎病大鼠椎间盘炎症反应,并其作用呈剂量依赖性。     

HIF-1α通过TLR4/NF-κB信号通路对 心肌缺血-再灌注大鼠心肌损伤的保护机制分析

目的分析缺氧诱导因子1α(HIF-1α)通过TLR4/NF-κB信号通路保护心肌缺血-再灌注(MIRI)大鼠心肌损伤的作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、MIRI组和HIF-MIRI组各10只,HIF-MIRI组于造模前24 h腹腔注射二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG,20μg/g),MIRI组和HIF-MIRI组大鼠采用手术结扎法制备MIRI模型,对照组只打开心包,不结扎。造模成功后,HE染色检测各组大鼠心肌组织损伤;试剂盒检测血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)水平; ELISA法测定心肌组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β和IL-6水平;实时荧光定量(RT)-PCR测定HIF-1αmRNA的表达; Western Blot检测HIF-1α、Toll-样受体4(TLR4)、核转录因子(NF-κB)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3的表达。结果与对照组相比,MIRI组和HIF-MIRI组大鼠血清CK-MB和LDH、炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著升高(P 0. 01),心肌组织HIF-1αmRNA的表达显著上调(P 0. 01),HIF-1α、TLR4、NF-κB和Caspase-3蛋白的表达显著上调(P 0. 01);与MIRI组相比,HIF-MIRI组大鼠血清CK-MB和LDH水平、炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6显著下降(P 0. 01),心肌组织HIF-1αmRNA和蛋白的表达显著上调(P 0. 01),TLR4、NF-κB和Caspase-3蛋白的表达显著下调(P 0. 01),HE染色显示心肌组织的病理变化明显减轻。结论 HIF-1α可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路抑制炎症因子的释放,降低机体炎症因子水平,改善MIRI心肌损伤。     

MAPK通过调控TLR4/Myd88/NF-κB通路对妊娠期肠梗阻胃肠功能的影响

目的 分析MAPK通过调控TLR4/MyD88/NF-κB通路对妊娠期肠梗阻胃肠功能的影响。方法 选取105只SPF级Wistar大鼠,雌性、雄性分别为70、35只,将所有大鼠同笼放置后,共有33只雌性大鼠妊娠成功,将妊娠成功的8只作为空白组,剩余25只雌性大鼠建立肠梗阻模型,最终建模成功24只,将其分为模型组、上调组、下调组各8只。结果 与模型组相比,上调组MAPK表达量、VIP、GAS、TNF-α、IL-6水平、TLR4、Myd88、NF-κB mRNA表达量及相对表达量上升,MOT、IL-4、IL-10水平下降,下调组MAPK表达量、VIP、GAS、TNF-α、IL-6水平、TLR4、Myd88、NF-κB mRNA表达量及相对表达量下降,MOT、IL-4、IL-10水平上升（P <0.05）。结论 妊娠期肠梗阻大鼠经下调MAPK干预后胃肠功能改善,炎性反应减轻,其机制可能与TLR4/Myd88/NF-κB通路得到抑制有关。     

HSP70与TLR-NF-κB信号途径在急性肺损伤发病机制中作用的实验研究

目的:探讨HSP70与Toll-NF-κB信号途径在急性肺损伤发病机制中的相互作用。方法:大鼠尾静脉注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)制备急性肺损伤模型。将32只大鼠随机分为两组:生理盐水对照组(NS组,8只)、急性肺损伤模型组(LPS组,32只),LPS组再细分为2、6、24 h三个亚组(各8只)。LPS组尾静脉注射LPS(浓度6 mg/k g)制备急性肺损伤模型。测定各组大鼠不同时间点的动脉血气分析、肺组织湿/干重(W/D)比,ELISA法测定血清TNF-α、IL-6、IL-10,Real Time-PCR法测定肺组织HSP70、TLR及NF-κB水平并观测肺组织结构变化情况。结果:NS组大鼠各项指标无明显波动,LPS组大鼠血气分析提示存在进行性低氧、二氧化碳潴留,肺组织湿/干重(W/D)比、TNF-α、IL-6、IL-10提示逐渐升高,肺组织HSP70与TLR、NF-κB间提示随时间点推进存在正相关性(P0.05)。结论:大鼠急性肺损伤病理过程中,HSP70与TLR、NF-κB通路间存在互相促进关系。     

清脑止痛胶囊对利血平致偏头痛模型大鼠的影响

目的研究清脑止痛胶囊(QNZTJN)对利血平致偏头痛模型大鼠血浆和中脑组织相关神经递质及炎性因子的影响。方法 90只健康雄性Wistar大鼠,随机均分为6组:空白组,模型组,阳性药正天丸组(ZTW,0.006g/kg),清脑止痛胶囊剂量低(QNZTJN-L,0.35g/kg)、中(QNZTJN-M,0.7g/kg)、高(QNZTJN-H,1.4g/kg)组。皮下注射利血平(0.7mg/kg)14d建立偏头痛模型,造模第4d开始灌胃给药11d,观察末次给药后3h内大鼠行为学反应;免疫组织化学法及Western blot法,检测大鼠中脑组织核因子kappa B(NF-κB)和环氧合酶2(COX-2)表达水平;酶联免疫法,检测大鼠血浆和中脑组织5-羟色胺(5-HT)、前列环素E_2(PGE_2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)含量水平。结果模型组与空白组相比,大鼠挠头次数显著增加(P0.01),NF-κB、COX-2在中脑组织表达显著增加(P0.01),5-HT在血浆和中脑组织含量显著降低(P0.01),PGE_2、TNF-α、IL-1β在血浆和中脑组织含量显著升高(P0.05,P0.01)。QNZTJN-M、QNZTJN-H组和ZTW组与模型组相比,大鼠挠头次数显著减少(P0.05,P0.01),NF-κB、COX-2在中脑组织表达显著降低(P0.05,P0.01),5-HT在血浆和中脑组织含量显著升高(P0.05,P0.01),PGE_2、TNF-α、IL-1β在血浆和中脑组织含量显著降低(P0.05,P0.01)。结论清脑止痛胶囊可缓解利血平致大鼠偏头痛症状,其作用机制可能与调节神经源性炎症和单胺类神经递质释放有关。     

芍药苷对大鼠急性胰腺炎的保护作用及相关机制研究

目的探讨芍药苷(Paeoniflorin,PAE)对大鼠急性胰腺炎的作用及相关分子机制研究。方法建立大鼠急性胰腺炎模型,60只SD大鼠随机分为5组,A组(空白对照组)、B组(急性胰腺炎模型组)、C组(PAE 20 mg/kg)、D组(PAE 40 mg/kg)、E组(PAE 80 mg/kg),每组12只,灌胃处理。48 h后干湿法检测胰腺水肿指数;血生化仪测定血清淀粉酶水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测肿瘤坏死因子α(TNF-α),白细胞介素1β(IL-1β)以及白细胞介素6(IL-6)表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测核转录因子κB(NF-κB)、凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达。结果造模后,B组水肿指数和血清淀粉酶明显高于A组,而PAE治疗48 h后C、D、E组水肿指数和血清淀粉酶明显低于B组(P0.05);ELISA显示,造模后,B组TNF-α,IL-1β以及IL-6表达显著高于A组,而C、D、E组TNF-α,IL-1β以及IL-6表达明显低于B组,差异有统计学意义(P0.05);Western blot法显示,造模后,B组NF-κB和Bax蛋白表达显著高于A组,而Bcl-2表达明显低于A组,PAE治疗后,C、D、E组NF-κB和Bax蛋白表达显著低于B组,Bcl-2表达明显高于B组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 PAE可通过抑制炎症反应和胰腺腺泡细胞凋亡减轻大鼠的急性胰腺炎。     

右美托咪定通过抑制NF-κB及炎症因子减轻失血性休克大鼠急性肺损伤

目的 探讨右美托咪定对失血性休克大鼠肺组织核因子κB(NF-κB)和炎症因子水平的影响及减轻急性肺损伤(ALI)的作用。方法 将72只SD大鼠采用随机数字表法分为对照组(Con组,假手术)、ALI模型组(ALI组)、小剂量右美托咪定组(Dex-0.5组,0.5μg/kg)、中剂量右美托咪定组(Dex-1.5组,1.5μg/kg)、大剂量右美托咪定组(Dex-4.5组,4.5μg/kg)和NF-κB特异性抑制剂组(PDTC组),每组12只。经股动脉放血和股静脉回输血液,维持平均动脉压在35～45 mm Hg水平1 h,建立失血性休克ALI大鼠模型。建模后6 h采集股动脉血进行血气分析,计算氧合指数;处死大鼠取右肺组织测量湿/干重比(W/D),光镜观察并进行肺组织损伤评分,采用免疫组织化学法观察肺组织NF-κB表达水平;取左肺支气管肺泡灌洗液采用酶联免疫吸附试验检测白细胞介素(IL)-6、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF)-α水平。结果 与Con组比较,ALI组、Dex-0.5组大鼠W/D、肺组织损伤评分均升高,ALI组大鼠NF-κB、IL-6、IL-10、TNF-α水平均升高,差异均...     

慢性盆腔炎模型大鼠中miR-29 及炎症信号通路分子的表达水平及其作用机制研究

目的 探究微小核糖核酸(micro RNA,miR)-29 对大鼠慢性盆腔炎模型的作用并探究其作用机制。方法 将80 只SPF 级SD 大鼠随机分为四组,分别为对照组(n=20)、模型组(n=20)、阴性对照组(n=20)和试验组(n=20)。模型组、阴性对照组和试验组通过机械损伤及接种混合菌构建大鼠慢性盆腔炎模型,阴性对照组和试验组造模后通过尾静脉注射5nmol 阴性对照(negative control, NC)antagomiR 和miR-29 antagomiR。HE 染色检测大鼠子宫组织病理特性;酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测各组大鼠外周血炎症相关指标:白细胞介素(interleukin,IL)-1β,白细胞介素(IL)-6,白细胞介素(IL)-8 和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α 水平;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测子宫组织miR-29,Toll 样受体4(Toll-like receptors,TLR)4,核因子κB(nuclear factor,NF-κB)及NK-κB 抑制蛋白α(IκB α)表达水平;WesternBlot 检测子宫组织TLR4,NF-κB 和IκB α 蛋白表达水平。结果 HE 染色结果表明,与对照组相比,模型组、阴性对照组和试验组大鼠出现明显慢性盆腔炎症状,试验组子宫组织损伤显著缓解;ELISA 结果表明:模型组大鼠外周血IL-1β,IL-6,IL-8 和TNF-α 水平显著高于对照组,与模型组和阴性对照组相比,试验组炎症因子IL-1β,IL-6,IL-8 和TNF-α 释放显著降低,差异有统计学意义(t=3.021 ～ 6.878,均P ＜ 0.05);qPCR 结果表明,与对照组相比,模型组miR-29,TLR4,NF-κB 和IκB α 的mRNA 表达显著上升,与模型组和阴性对照组相比,试验组miR-29 ,TLR4,NF-κB 和IκB α的 mRNA 表达显著降低,差异有统计学意义(t=3.917 ～ 8.095,均P ＜ 0.05)。Western Blot 结果表明:与对照组相比,模型组TLR4,NF-κB 和IκB α 蛋白表达显著上升,与模型组和阴性对照组相比,试验组TLR4,NF-κB 和IκBα 蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(t=2.987 ～ 8.045,均P ＜ 0.05)。结论 慢性盆腔炎模型大鼠子宫组织中miR-29 显著高表达,下调miR-29 具有对大鼠子宫的保护作用,其机制可能与抑制炎症因子释放及TLR4/NF-κB 信号通路的调控相关。     

急性百草枯中毒大鼠肺组织Toll样受体4和核因子-κB表达的变化

目的 观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺组织中Toll样受体4(TLR4)和核因子-κB (NF-κB) mRNA表达的变化,探讨TLR4-NF-κB通路在急性PQ中毒肺损伤中的作用.方法 30只雄性SD大鼠随机分为2组:生理盐水(NS)对照组(6只,NS腹腔注射),PQ染毒组(24只,腹腔注射PQ溶液,20 mg/kg).PQ染毒组分别在染毒后6、24、48 h及72 h麻醉处死,NS对照组于处理后6h处死,进行肺组织HE染色,病理学观察,用实时定量PCR方法检测TLR4和NF-κB的mRNA表达情况,用ELISA方法测定肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血清中IL-6含量.结果 PQ染毒组大鼠肺组织病理表现为早期充血水肿明显,大量炎性细胞浸润.与NS对照组相比PQ染毒组肺组织中TLR4和NF-κB mRNA的表达量、TNF-α、IL-6含量在各时间点均有不同程度升高,差异均具有统计学意义(P＜0.01).结论 大鼠急性PQ中毒后肺组织中TLR4和NF-κBmRNA表达量、TNF-α、IL-6含量明显上调,TLR4-NF-κB通路参与了PQ中毒大鼠肺损伤的早期病理生理过程.     

银杏叶提取物对糖尿病肾病的防治作用与机制研究

目的:观察银杏叶提取物(GBE)对糖尿病肾病大鼠核转录因子-κB(NF-κB)活性、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平的影响,探讨其对糖尿病肾病的防治作用及其机制.方法:22只Wistar大鼠分为正常对照组(A组),糖尿病无干预组(B组),GBE干预组(C组).以一次性腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg制备糖尿病大鼠模型.12周后取肾组织进行病理学观察,以电泳迁移率变动分析法检测肾组织NF-κB活性,放射免疫法测定血清TNF-α和IL-6水平.结果:B、C组大鼠饲养过程中各死亡2只,存活大鼠空腹血糖>13.9 mmol/L,模型制作成功.B组肾小球基底膜厚度、肾小球内细胞数和单个核细胞数显著多于A组,C组显著少于B组而多于A组(P均<0.05).与A组比较,B组肾组织NF-κB活性、TNF-α和IL-6水平均显著升高,C组也有升高但明显低于B组(P均<0.05).TNF-α、IL-6水平与NF-κB活性呈正相关(r1=0.83,r2=0.78;P均<0.05).结论:银杏叶提取物可以通过抑制肾组织中NF-κB的活化、减轻过度的炎症反应而延缓糖尿病肾病的发生、发展.     

丹参酮ⅡA对TLR4/NF-κB信号通路下游炎症因子的影响及其临床意义

目的探讨丹参酮ⅡA对大鼠IRI肾脏TLR4/NF-κB信号通路以及下游炎症因子的影响,分析其对肾脏保护的可能机制。方法建立大鼠肾脏缺血再灌注(IRI)模型,将60只SD大鼠随机均分为空白组、对照组、丹参酮ⅡA组、ST2825组及Bay11-7082组,行对应处理,24 h后取肾脏标本,行HE法观察组织病理学形态,以PT-PCR法、Western Blotting法检测TLR4、NF-κB mRNA及蛋白水平,行酶联免疫吸附试验检测组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果与空白组相比,对照组肾组织病理学明显改变,且TLR4、NF-κB mRNA及蛋白水平,组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平均明显上升;丹参酮ⅡA、ST2825及Bay11-7082均可有效保护肾组织,表现为细胞肿胀、坏死和脱落程度较轻,同时炎症反应更轻,表现为TLR4、NF-κB mRNA及蛋白水平,组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低,与对照组相比,上述指标差异均有统计学意义(P0.05)。结论丹参酮ⅡA对缺血再灌注肾脏组织有保护作用,其机制与抑制TLR4/NF-κB信号通路、减少下游炎症因子有关。