咯利普兰对佐剂关节炎大鼠腹腔巨噬细胞体外释放炎性细胞因子的影响

目的探讨选择性磷酸二酯酶(PDE)4抑制剂咯利普兰对脂多糖(LPS)诱导的佐剂关节炎(AA)大鼠腹腔巨噬细胞(PM)体外释放促炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的影响,为选择性PDE4抑制剂治疗类风湿关节炎(RA)提供理论依据。方法制备AA大鼠模型,收集PM,体外给予LPS及不同浓度咯利普兰共同孵育,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1β水平,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定细胞内TNF-αmRNA、IL-1βmRNA的表达,并与正常对照相比较。结果 AA大鼠PM培养上清中TNF-α、IL-1β、细胞内TNF-αmRNA、IL-1βmRNA表达均高于对照组大鼠,分别为(386.80±63.24)ng/L vs(48.53±6.47)ng/L(P<0.01)、(317.77±29.33)ng/L vs(77.75±11.60)ng/L(P<0.01)、77.92±12.55vs 15.97±4.37(P<0.01)、49.30±10.06vs 10.15±1.34(P<0.01)。咯利普兰能够剂量依赖性地抑制LPS刺激的AA大鼠PM体外表达TNF-αmRNA、IL-1βmRNA,并抑制TNF-α、IL-1β产生。结论咯利普兰能抑制LPS诱导的AA大鼠PM体外释放促炎性细胞因子,提示其可能通过抑制炎症反应用于RA的治疗。     

血清miR-181b及miR-210在妊娠期高血压疾病中表达及与炎性细胞因子的相关性

目的探讨妊娠期高血压疾病(hypertensive disorders in pregnancy, HDP)患者血清miR-181b、miR-210表达变化,分析其与白细胞介素(interleukin, IL)-1β、IL-6及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)的关系。方法 HDP患者226例,其中妊娠期高血压(gestational hypertension, GH)60例(GH组)、轻度子痫前期(mild preeclampsia, MP)90例(MP组)、重度子痫前期(servere preeclampsia, SP)76例(SP组),同期健康孕妇60例为对照组。检测4组血清miR-181b mRNA、miR-210 mRNA相对表达量及IL-1β、IL-6及TNF-α水平;Pearson相关分析HDP患者血清miR-181b mRNA、miR-210 mRNA相对表达量与IL-1β、IL-6及TNF-α的相关性。结果对照组、GH、MP、SP组血清miR-181b mRNA相对表达量(1.42±0.65、5.73±1.60、10.94±4.28、17.13±8.16)、miR-210 mRNA相对表达量(0.84±0.13、3.62±1.05、4.74±1.36、7.92±2.17),IL-1β[(2.60±0.84)、(11.26±2.53)、(17.65±6.24)、(23.92±9.16)ng/L]、IL-6[(90.26±27.45)、(106.35±33.74)、(128.42±36.18)、(151.46±40.27)ng/L]及TNF-α[(12.40±2.28)、(19.25±4.42)、(35.84±6.53)、(64.73±9.50)ng/L]水平依次增高(P0.05);HDP患者血清miR-181b mRNA相对表达量与IL-1β、IL-6、TNF-α呈正相关(r=0.694,P0.001;r=0.735,P0.001;r=0.846,P0.001)、miR-210 mRNA相对表达量与IL-1β、IL-6、TNF-α呈正相关(r=0.548,P=0.003;r=0.718,P0.001;r=0.815,P0.001)。结论 HDP患者miR-181b及miR-210表达上调,且上调程度与HDP病情严重程度及IL-1β、IL-6、TNF-α水平变化相关,可能参与HDP的发生、发展。     

益生菌制剂对脓毒症小鼠生存情况的影响及机制研究

目的探讨益生菌制剂对脓毒症小鼠生存情况的影响及作用机制。方法 60只雄性C57BL6小鼠随机分为三组,分别为假手术组(20只)、对照组(20只)和实验组(20只)。在饲养2 d后,实验组小鼠每天给予200μL的益生菌制剂,对照组和假手术组小鼠每天给予200μL等渗Na Cl溶液,连续灌胃4周。分别对实验组小鼠与对照组小鼠进行盲肠结扎穿孔术(CLP),而假手术组小鼠不予盲肠穿刺,其余步骤同CLP。每组10只用于观察小鼠活动状态及7 d存活情况;每组剩余10只,术后24 h取血液、结肠组织。采用酶联免疫吸附实验法检测各组小鼠血清中炎症因子白细胞介素22(IL-22)、IL-2及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察各组小鼠结肠组织形态,免疫组织化学法观察各组小鼠肠黏膜抗紧密连接相关蛋白(Occludin)表达。结果假手术组小鼠生长状态良好;对照组小鼠则蜷缩在笼角,浑身战栗;实验组小鼠较对照组活跃,活动较多,未见明显战栗。术后第7天,对照组无小鼠存活,实验组小鼠仍有3只存活,予安乐死,其7 d存活情况显著高于对照组小鼠(P=0.020);而假手术组小鼠10只均存活,予安乐死。对照组与假手术组比较,小鼠血清IL-22[(103±23)ng/L vs.(27±9)ng/L,t=7.590,P0.001]、IL-2[(328±27)ng/L vs.(77±21)ng/L,t=21.368,P0.001]及TNF-α[(94±22)ng/L vs.(56±9)ng/L,t=4.734,P0.001]表达水平比较,差异均有统计学意义;实验组与假手术组小鼠血清IL-22[(75±33)ng/L vs.(27±9)ng/L,t=3.755,P=0.001]、IL-2[(217±30)ng/L vs.(77±21)ng/L,t=10.850,P0.001]及TNF-α[(107±20)ng/L vs.(56±9)ng/L,t=5.956,P0.001]表达水平比较,差异亦均有统计学意义;与对照组相比,实验组小鼠血清IL-22[(103±23)ng/L vs.(75±33)ng/L,t=2.185,P=0.042]及IL-2[(328±27)ng/L vs.(217±30)ng/L,t=8.371,P0.001]表达水平差异均有统计学意义,而TNF-α[(94±22)ng/L vs.(107±20)ng/L,t=1.363,P=0.188]表达水平比较,差异无统计学意义。假手术组小鼠的结肠黏膜上皮完整,腺体排列规则,少许或无炎症细胞浸润;对照组小鼠则出现结肠黏膜上皮腺体排列紊乱、变形、缺失,肠上皮细胞间紧密连接结构模糊,以及炎症细胞广泛浸润现象,有些伴有隐窝脓肿形成;而实验组小鼠结肠上皮基本完整,未有糜烂缺失,腺体排列基本正常,炎症细胞浸润程度也较对照组小鼠有所减轻。免疫组织化学法检测结果显示,假手术组小鼠结肠上皮细胞腺泡结构完整,Occludin蛋白表达较多;对照组小鼠结肠上皮细胞腺泡结构破坏、消失,炎症细胞浸润,Occludin蛋白表达较少;实验组小鼠结肠上皮细胞腺泡结构尚完整,腺泡间间隙增宽,Occludin蛋白表达较对照组有所增加。结论益生菌可通过抑制肠上皮细胞间紧密连接相关蛋白的减少,稳定肠道黏膜屏障结构,有效提高脓毒症小鼠的存活情况。     

全身振动对绝经后骨质疏松症患者细胞因子的影响

目的探讨全身振动对绝经后骨质疏松症患者细胞因子水平的影响。方法采用随机对照研究,70例入选的绝经后骨质疏松症志愿者随机分为振动组(n=35)和对照组(n=35)。两组受试者每日均服用钙尔奇D600mg。振动组:应用频率为30Hz的振动治疗仪,3次/周,10min/次,共12周振动干预;对照组仅服用相同剂量的钙尔奇D。观察两组患者干预前后腰椎骨密度(BMD)、疼痛程度和血清内IL-1β、TNF-α和IGF-1的变化。结果与干预前相比,振动组和对照组患者的腰椎BMD均有显著上升[(0.797±0.074)g/cm2vs.(0.734±0.071)g/cm2,(0.802±0.073)g/cm2vs.(0.740±0.064)g/cm2,均P<0.05],骨痛症状均有明显改善,但是振动组BMD的提高及骨痛的改善更为明显(与对照组相比,P<0.05);振动干预后患者血清内IL-1β和TNF-α显著降低[(15.9±4.4)ng/Lvs.(10.1±3.8)ng/L,(165.4±20.6)ng/Lvs.(82.5±18.6)ng/L,均P<0.05],IGF-1显著增高[(96.5±17.2)μg/Lvs.(178.3±22.5)μg/L,P<0.05];对照组实验前后三者均无显著变化。结论 30Hz全身振动具有防治绝经后骨质疏松症的作用,其机制可能与其下调IL-1β、TNF-α水平,上调IGF-1水平有关。     

乌司他丁对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制研究

目的研究乌司他丁对脂多糖诱导的脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法将52只大鼠分为乌司他丁组和对照组,每组26只。两组大鼠腹腔注射脂多糖溶液(10 mg/kg)以制备脓毒症模型,分别于建模前18 h和3 h,乌司他丁组大鼠给予乌司他丁(100 000 U/kg),对照组注射等量生理盐水。于造模成功后0.5、2、4、12、24、72 h各时间点采血检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-10及肺泡灌洗液蛋白浓度,并通过光学显微镜观察肺组织病理学改变。结果两组大鼠血浆TNF-α、IL-6、IL-10及肺泡灌洗液总蛋白浓度各时间点比较,差异均有统计学意义(F=5.899,P=0.040;F=7.932,P=0.029;F=18.450,P=0.005;F=6.467,P=0.038),且与对照组相比较,乌司他丁组在0.5、2、4、12、24、72 h各时间点的血浆TNF-α[(21.6±3.8)ng/L vs.(14.8±2.5)ng/L,(69.2±3.2)ng/L vs.(48.8±3.9)ng/L,(74.8±6.9)ng/L vs.(56.3±4.2)ng/L,(120.2±43.8)ng/L vs.(106.4±65.8)ng/L,(190.2±30.4)ng/L vs.(119.8±28.9)ng/L,(159.7±10.5)ng/L vs.(112.3±10.2)ng/L]、IL-6[(145±6)ng/L vs.(119±5)ng/L,(344±19)ng/L vs.(225±22)ng/L,(458±36)ng/L vs.(273±28)ng/L,(949±64)ng/L vs.(328±27)ng/L,(841±61)ng/L vs.(306±6)ng/L,(899±35)ng/L vs.(278±16)ng/L]及肺泡灌洗液总蛋白浓度[(320±8)mg/L vs.(290±17)mg/L,(400±7)mg/L vs.(336±9)mg/L,(536±10)mg/L vs.(492±14)mg/L,(806±10)mg/L vs.(608±17)mg/L,(781±17)mg/L vs.(579±16)mg/L,(662±24)mg/L vs.(505±9)mg/L]均明显降低(P均0.05),而血浆IL-10浓度[(5.7±0.8)ng/L vs.(11.7±0.9)ng/L,(17.2±1.6)ng/L vs.(31.9±2.6)ng/L,(22.3±2.1)ng/L vs.(54.7±4.8)ng/L,(42.3±4.9)ng/L vs.(80.7±1.9)ng/L,(29.7±1.4)ng/L vs.(69.4±3.4)ng/L,(21.4±2.9)ng/L vs.(74.3±5.5)ng/L]均明显升高(P均0.05)。对照组大鼠肺泡间隔增厚,间质充血水肿,炎性细胞浸润,肺泡塌陷,而乌司他丁组大鼠上述病理学改变明显减轻。结论乌司他丁是通过下调TNF-α、IL-6,上调IL-10水平,从而抑制炎症细胞在肺部的浸润以及肺组织中蛋白酶的表达来保护脂多糖诱导的脓毒症大鼠急性肺损伤。     

羟氯喹对类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞基质金属蛋白酶-1表达的影响

目的探讨羟氯喹(hydroxychloroquine, HCQ)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)诱导的类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-1表达的调控作用及分子机制。方法对数生长期MH7A细胞分为空白组(细胞正常培养)、TNF-α组(细胞培养基中加入10μg/L TNF-α)、HCQ联合A组(细胞培养基中加入2.5μmol/L HCQ+10μg/L TNF-α)、HCQ联合B组(细胞培养基中加入5μmol/L HCQ+10μg/L TNF-α)、HCQ联合C组(细胞培养基中加入10μmol/L HCQ+10μg/L TNF-α)。5组细胞培养24 h,采用ELISA法检测细胞培养上清液MMP-1水平,采用实时荧光定量PCR法检测细胞MMP-1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测细胞c-Jun氨基末端激酶(Jun N-terminal kinase, JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)蛋白相对表达量。将MH7A细胞分为对照组和茴香霉素组,对照组细胞按HCQ联合C组培养方法培养24 h;茴香霉素组细胞培养基中先加入10μg/L茴香霉素培养2 h后,再按HCQ联合C组的培养方法继续培养至24 h;采用实时荧光定量PCR法检测2组MMP-1 mRNA相对表达量。结果 TNF-α组[(791.32±175.40)ng/L、6.89±1.20]、HCQ联合A组[(366.71±224.44)ng/L、4.12±0.71]、HCQ联合B组[(283.22±154.86)ng/L、2.99±0.18]、HCQ联合C组[(173.44±36.25)ng/L、2.01±0.80]、空白组[(133.13±62.19)ng/L、1.00±0.00]细胞MMP-1水平和MMP-1 mRNA相对表达量均依次降低(P0.05);TNF-α组(2.02±0.07)、HCQ联合A组(1.31±0.09)、HCQ联合B组(0.86±0.09)、HCQ联合C组(0.56±0.05)、空白组(0.43±0.03)细胞p-JNK蛋白相对表达量依次降低(P0.05),而TNF-α组(2.30±0.16)、HCQ联合A组(2.16±0.13)、HCQ联合B组(2.03±0.05)、HCQ联合C组(2.16±0.16)、空白组(2.23±0.11)JNK蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P0.05);茴香霉素组细胞MMP-1 mRNA相对表达量(5.13±1.43)高于对照组(2.01±0.80)(P0.05)。结论 HCQ能通过JNK信号通路调控MH7A细胞MMP-1的表达。     

清肝化瘀方药对原发性肝癌患者的疗效及对细胞免疫功能的影响

目的探讨清肝化瘀方药对原发性肝癌患者的疗效及对细胞免疫功能的影响。方法原发性肝癌患者80例,随机分为两组;治疗组50例,服用清肝化瘀方药,对照组30例给予复方氟脲嘧啶多相脂质体口服液,观察临床疗效和外周血细胞因子白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素12(IL-12)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子1β(TGF-β1)和γ-干扰素(IFN-γ)的变化。结果清肝化瘀方药能改善患者细胞免疫功能,有效率达36.0%,对照组为10.0%,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);服用清肝化瘀方药前与用药后相比TGF-β1(0.69±0.06 vs 0.58±0.09)ng/LI、L-12(48.87±10.21 vs 28.58±18.39)ng/L、TNF-α(263.16±29.02 vs 217.78±30.56)ng/L明显下降(P<0.05);IL-2(1.47±0.33 vs 1.89±0.38)ng/L、IFN-γ(39.10±12.21 vs 54.77±6.63)ng/L明显升高(P<0.05)。结论清肝化瘀方药是治疗肝癌有效的药物。     

肿瘤坏死因子-α与转化生长因子-β1和癌症相关性乏力的关系

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与转化生长因子-β_1(TGF-β_1)和癌症相关性乏力的关系。方法选择92例癌症伴有轻、中度乏力患者为观察组,92例健康体检者为对照组。采用流式细胞仪测定血清TNF-α、TGF-β_1的含量。结果治疗前,患者血清TNF-α为(27.35±12.08)ng/L,显著高于健康对照组的(12.04±5.44)ng/L(t=11.080,P<0.001)。患者治疗后TNF-α明显降低为(18.57±10.32)ng/L(t=5.369,P<0.001)。治疗前,患者血清TGF-β_1为(39.26±10.65)ng/L,显著高于健康对照组的(16.53±6.37)ng/L(t=17.570,P<0.001)。患者治疗后TGF-β_1明显降低为(25.98±7.87)ng/L(t=8.952,P<0.001)。结论癌症相关性乏力的发病机制可能由于血清TNF-α、TGF-β_1等细胞因子的表达增强引起的。     

TGF-β2对豚鼠实验性近视眼后极部巩膜成纤维细胞MMP-2表达的影响

目的明确转化生长因子β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)对豚鼠镜片诱导型近视眼后极部巩膜成纤维细胞基质金属蛋白酶(matrix metallo proteinase,MMPs)表达的影响。方法选择2周龄已脱离母乳喂养的豚鼠12只,随机选取12只中各一眼用镜片诱导法制备近视动物模型(实验组),对侧眼不予任何处理(自身对照组)。30 d后采用组织块培养法培养豚鼠后极部巩膜成纤维细胞,并传2代。将每只眼(两组24只眼)培养出的细胞分别分为空白对照组、1 ng/mlTGF-β2组、10 ng/ml TGF-β2组、100 ng/ml TGF-β2组,利用实时荧光定量聚合酶链反应、western-blot蛋白印迹法对各组细胞MMP-2、MMP-2mRNA进行定量分析。结果经30 d镜片诱导,实验组诱导出(-6.70±1.93)D的相对近视,眼轴相对延长(1.53±0.31)mm,实验前后比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组中空白对照组与自身对照组中空白对照组比较,MMP-2、MMP-2mRNA表达量增高,差异有统计学意义(P<0.05)。TGF-β2浓度为10 ng/ml时实验组和自身对照组细胞MMP-2、MMP-2mRNA的表达量最高,与本组其他浓度比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论凹透镜诱导可引起豚鼠明显轴性近视,TGF-β2能有效刺激MMP-2的表达。     

阿魏酸钠对L-精氨酸诱导的重症急性胰腺炎大鼠的作用

目的 研究阿魏酸钠(soaium ferulate,SF)对L-精氨酸诱导的大鼠重症急性胰腺炎(severeacute pancreatitis,SAP)的治疗作用及其机制.方法 将60只成年SD大鼠随机分为对照组、SAP组、SF组,每组20只.采用腹腔内分两次注射大剂量L-精氨酸(2.5g/kg×2,间隔1 h)的方法制备SAP大鼠模型,SAP组和SF组大鼠分2次间隔1 h腹腔内注射20%L-精氨酸溶液(2.5 g/kg×2);对照组同法予等量生理盐水.5 min后,SF组大鼠再尾静脉注射SF注射液100 mg/kg,q d×3 d,其余两组同法予等量生理盐水.72 h后比较三组大鼠腹水性状、胰腺组织病理变化和血清淀粉酶(AMY)、内皮素-1(ET-1),TNF-α,IL-6水平和胰腺组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量及预后.计量资料组间比较用单因素方差分析,计数资料用Fisher确切概率法检验,以P<0.05为差异有统计学意义.结果 72 h后与对照组比较,SAP组出现典型的SAP病理形态改变,且大鼠血清AMY,ET-1,TNF-α,IL-6及胰腺组织NDA均显著升高[(9715.5±301.3)IU/L vs.(729.2±134.2)IU/L;(25.32±3.67)ng/L vs.(14.32±2.69)ng/L;(102.95±11.24)ng/L.vs.(38.62±3.87)ng/L;(538.63±9.53)ng/L vs.(186.35±1.19)ng/L;(34.8±3.9)mol/kg vs.(8.1±2.1)mol/kg,均P<0.01],胰腺组织抗氧化物质GSH,SOD明显降低[(7.1±0.6)mg/kg、vs.(16.9±1.9)mg/kg;(6423±1978)kU/kg vs.(29 905±z945)kU/kg,均P<0.01];与SAP组比较,SF组胰腺组织病理损害减轻且组织病理评分较低(P<0.05),血清AMY,ET-1,TNF-α,IL-6及胰腺组织NDA明显降低[(8104.6±149.9)IU/L vs.(9715.5±301.3)IU/L;(20.26±5.86)ng/L vs.(25.32±3.67)ng/L;(84.19±15.14)hg/L vs.(102.95±11.24)ng/L;(458±5.37)mol/kg vs.(538.63±9.53)ng/L;(28.3±2.5)mot/kg vs.(34.8±3.9)mol/kg,均P<0.05],胰腺组织GSH、SOD升高[(8.5±1.4)mg/kg vs.(7.1±0.6)mg/kg;(10316±2810)kU/kg、rs.(6423±1978)ldJ/kg,均P<0.05];SF组72 h死亡率低于SAP组,但差异无统计学意义(P=0.25).结论 SF能清除氧自由基、提高胰腺组织抗氧化物质SOD和GSH含量,降低血清促炎细胞因子及ET-1水平,减轻胰腺组织的病理损害,并且有可能降低死亡率,在SAP治疗中具有独特的优势.     

轮状病毒感染合并惊厥患儿外周血核转录因子-κB及相关炎性因子表达

目的探讨轮状病毒感染合并惊厥患儿外周血核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、外周血白细胞介素(interleukin,IL)-6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和IL-1β表达情况及其临床意义。方法 104例轮状病毒感染合并惊厥患儿为观察组,32例轮状病毒感染无惊厥患儿为对照组,2组采用Western blot法检测外周血白细胞NF-κB P65蛋白表达水平,采用反转录-PCR法检测IL-6、TNF-α和IL-1βmRNA表达水平,采用ELISA法检测血清IL-6、TNF-α和IL-1β水平。结果观察组患儿外周血白细胞IL-6mRNA(8.06±1.25)、TNF-αmRNA(12.13±3.73)、IL-1βmRNA(3.97±1.35)及白细胞细胞核NF-κB P65表达水平(1.21±0.42)明显高于对照组(1.15±0.65、2.64±1.06、0.93±0.34、0.41±0.13)(P0.05),白细胞细胞质NF-κB P65蛋白表达水平(0.25±0.10)明显低于对照组(1.87±0.32)(P0.05);观察组患儿血清IL-6[(228.31±54.40)μg/L]、TNF-α[(236.14±36.78)μg/L]和IL-1β[(618.17±30.42)μg/L]水平明显高于对照组[(69.12±12.15)、(57.87±15.43)、(148.14±29.04)μg/L](P0.05)。结论轮状病毒感染合并惊厥可诱发患儿外周血白细胞胞质内NF-κB P65核转位及IL-6、TNF-α和IL-1β等炎性因子表达,对判断病情进展、指导临床治疗有一定意义。     

补阳还五汤对大鼠脑缺血后白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 探讨补阳还五汤对脑缺血后大鼠脑组织白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响.方法 按随机数字表法将SD大鼠分为正常对照组、假手术组、模型组、补阳还五汤组,后3组再按给药后1、3和7 d分为亚组,每组5只.采用大脑中动脉闭塞法(MCAO)建立右侧局灶性脑缺血大鼠模型;补阳还五汤组于术后2 h起灌服补阳还五汤10 ml/kg(14.2 g/kg)、每日1次.分别于相应时间点处死大鼠后取脑组织,采用酶联免疫吸附法(ELISA)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定IL-1β和TNF-α的蛋白及mRNA表达.结果 正常对照组和假手术组有低水平的IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA表达.模型组IL-1β、TNF-α蛋白及mRNA表达于给药后1 d开始升高,IL-1β蛋白及mRNA表达在3 d时达高峰后开始下降,TNF-α蛋白及mRNA表达于7 d达高峰.与模型组比较,补阳还五汤组给药后1、3和7 d脑组织中IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA表达均明显下降[IL-1β蛋白(ng/L),1 d:90.290±8.693比102.556±13.934,3 d:129.632±11.050比150.117±8.552,7 d:66.185±9.020比91.362±9.901;TNF-α蛋白(ng/L),1 d:210.341±19.247比236.887±20.137,3 d:267.503±21.006比322.659±15.068,7 d:299.637±17.717比386.678±16.297;IL-1β mRNA,1 d:0.54±0.09比0.64±0.11,3 d:0.80±0.06比0.89±0.07,7 d:0.70±0.09比0.78±0.08;TNF-α mRNA,1 d:0.64±0.09比0.73±0.11,3 d:0.74±0.13比0.85±0.07,7 d:0.82±0.07比0.93±0.08],差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 补阳还五汤可能通过下调缺血脑组织IL-1β和TNF-α的蛋白及mRNA表达来调控炎症因子的释放,从而起到脑保护作用.     

系统性红斑狼疮中Th17细胞相关细胞因子的变化

目的探讨系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）血浆中T辅助17（Th17）细胞相关的细胞因子白细胞介素（interleukin,IL）-17、IL-6、IL-23、IL-27和转化生长因子β（transforming growth factor-beta,TGF-β）水平的变化。方法 SLE组43例;健康对照组20例。采用酶联免疫吸附测定法测定血浆中IL-17、IL-6、IL-23、IL-27和TGF-β水平,分析它们的相关性。结果 SLE组与健康对照组比较,血浆中IL-17（74.32±22.76）ng/L vs（32.12±5.68）ng/L,IL-6（62.06±9.92）ng/L vs（37.98±15.41）ng/L,IL-23（30.29±12.59）ng/L vs（15.10±12.31）ng/L和IL-27（27.61±11.16）ng/L vs（16.17±8.35）ng/L的浓度都明显升高（P〈0.01）,TGF-β的血浆浓度则明显降低（35.80±11.65）ng/L vs（69.08±28.76）ng/L（P〈0.01）。IL-17与IL-6,IL-23和IL-27之间呈正相关（r=0.542、0.887、0.757,均P〈0.05）,与TGF-β之间则呈负相关（r=-0.268,P〈0.05）。结论 IL-17及其相关的细胞因子在SLE表达异常,IL-17在SLE发病中具有重要作用。     

MIF在隐球菌脑膜炎患者外周血单个核细胞中升高及临床意义

目的检测巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)在隐球菌脑膜炎患者外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达水平,进一步探讨其临床意义。方法收集2012年8月~2015年11月到上海长海医院确诊的42例新型隐球菌脑膜炎患者及同期体检的42例健康个体外周血,以密度梯度离心法分离PBMCs,以PCR方法检测PBMCs中MIF的mRNA相对表达量,以ELISA法检测血浆中MIF,IL-17,IL-1β,TNF-α,IFN-γ和IL-4水平,两组间细胞因子表达的比较采用两独立样本t检验,MIF与细胞因子间的关系以Pearson相关系数表示。结果 MIF在实验组与对照组的蛋白表达水平为34.17±7.88 ng/ml vs 10.89±2.76 ng/ml(t=18.07,P0.0001);mRNA相对表达量为2.87±0.94 vs 1.95±0.89(t=4.606,P0.0001),差异具有统计学意义(P0.05)。Pearson相关性分析显示实验组MIF与IL-1β,IL-17呈正相关(r=0.467,0.401,P0.01),差异具有统计学意义。结论 MIF可能通过影响IL-1β和IL-17等细胞因子的分泌及功能参与了隐球菌脑膜炎的免疫调节过程,是该病潜在的靶位点和疾病监测指标。     

消化道肿瘤贫血患者血清铁调素及炎症介质的表达

目的 研究血清铁调素(Hepcidin)和炎症介质细菌脂多糖(LPS)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)和干扰素(IFN)等细胞因子在消化道肿瘤贫血患者中的表达特点以及与消化道肿瘤贫血之间的关系.方法 应用双抗夹心生物素-亲和素-酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)检测31例消化道肿瘤贫血患者的Hepcidin、LPS、IL-6、TNF-α、TNF-β 、IFN-β、IFN-γ的水平,分析Hepcidin与炎症介质之间的关系,以同期30例健康体检者作为对照.结果 1.实验组Hepcidin、IL-6、TNF-β、IFN-β、LPS分别为53.8±32.4μg/L、20.3±26.1ng/L、117.4±110.7ng/L、9.8±7.2ng/L、81.6±46.1μg/L,均明显高于对照组的23.1 ±5.2μg/L、7.9±9.6ng/L、65±23.0ng/L、6.0±2.3ng/L、49.0± 19.0μg/L (P＜0.05),而IFN-γ及TNF-α与对照组比较差异无统计学意义.2.Hepcidin与IL-6、LPS之间存在正相关关系(r=0.27,p＜0.01、r=0.222,P＜0.05),与TNF-β、IFN-β呈负相关关系(r=-0.348,P＜0.001,r=0.265,P＜0.01),与IFN-γ、TNF-α之间无相关关系.结论 消化道肿瘤贫血患者高表达Hepcidin、IL-6、TNF-β、IFN-β、LPS,Hepcidin与IL-6、LPS均呈正相关关系.     

胸腔积液中巨噬细胞细胞因子的表达

目的探讨在不同性质的胸腔积液患者中血清IL-6、TNF-α、IL-13、TGF-β1的含量及患者胸腔积液中IL-6、TNF-α、Arg-1 mRNA的表达水平,为临床胸腔积液的诊疗提供实验理论依据。方法回顾性分析我院在2016年5月至2017年12月期间在呼吸科住院治疗的70例胸腔积液患者,其中良性积液组39例,恶性积液组31例。采用酶联免疫吸附试验(Elisa)检测IL-6、TNF-α、IL-13、TGF-β1细胞因子的含量。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测胸腔积液IL-6、TNF-α、Arg-1 mRNA的表达水平。并对恶性胸腔积液中TGF-β1、Arg-1 mRNA的表达与胸腔积液癌胚抗原(pCEA)、血清癌胚抗原(sCEA)的表达作Pearson相关性分析。结果恶性胸腔积液组IL-6、TNF-α、TGF-β1、Arg-1 mRNA含量明显高于良性胸腔积液组,两组相比差异具有统计学意义(P0.01);IL-13在恶性胸腔积液中表达明显低于良性胸腔积液组,两组相比差异具有统计学意义(P0.01);在恶性胸腔积液中TGF-β1、Arg-1 mRNA的表达与胸腔积液癌胚抗原(pCEA)、血清癌胚抗原(sCEA)的表达呈正相关。结论巨噬细胞因子IL-6、TNF-α、IL-13、TGF-β1、Arg-1 mRNA水平对于良恶性胸腔积液鉴别具有一定的价值。     

大鼠低温爆震伤对肺组织中IL-1β和TNF-α表达的影响

目的:建立大鼠低温爆震伤致肺损伤模型,研究爆震伤后大鼠血清和肺组织中IL-1β和TNF-α表达的变化。方法:将40只大鼠随机分成空白对照组(10只)、低温对照组(10只)及低温实验组(20只),进行爆震伤造模,实验后对大鼠进行状态观察,行苏木精-伊红染色观察肺脏病理变化,采用ELISA方法检测大鼠血清中IL-1β和TNF-α含量,采用荧光定量PCR和Western blot方法测定IL-1β和TNF-α基因和蛋白相对表达量变化,并对其结果进行分析。结果:苏木精-伊红染色结果显示,低温对照组大鼠肺脏有少量炎性细胞,低温实验组大鼠肺组织肺泡壁增厚,有大量的血细胞及炎性细胞产生。血清ELISA结果显示,低温对照组和低温实验组大鼠血清中IL-1β和TNF-α含量高于空白对照组(P0.05)。荧光定量PCR和Western blot结果显示,低温对照组和低温实验组大鼠肺组织中IL-1β和TNF-α基因相对表达量高于空白对照组,且低温实验组大鼠肺组织中IL-1β和TNF-α基因相对表达量高于低温对照组(P0.05);低温对照组和低温实验组肺组织中IL-1β和TNF-α蛋白相对表达量高于空白对照组,且差异有统计学意义(P0.05);与低温对照组比较,低温实验组肺组织中IL-1β和TNF-α蛋白相对表达量较高,且差异有统计学意义(P0.05)。结论:大鼠低温肺爆震伤导致血清中IL-1β和TNF-α含量升高,肺组织中IL-1β和TNF-α基因和蛋白的相对表达量升高,其损伤机制可能是IL-1β和TNF-α表达量升高导致炎症反应的产生。     

肿瘤坏死因子样微弱凋亡诱导因子对骨关节炎软骨细胞作用实验研究

目的研究肿瘤坏死因子样微弱凋亡诱导因子（TWEAK）对体外培养骨关节炎（OA）软骨细胞的作用,同时探讨炎性细胞因子白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）与TWEAK之间的关系。方法体外培养OA患者原代软骨细胞,分别用TWEAK（75ng/mL）,TWEAK（75ng/mL）和IL-1β（5ng/mL）,TWEAK（75ng/mL）和TNF-α（5ng/mL）作用细胞48h,MTT检测细胞因子对软骨细胞的增殖作用影响;ELISA检测细胞培养上清液中MMP-13、IL-6和Fas的分泌表达。结果 MTT结果表明细胞因子刺激软骨细胞后对细胞增殖无明显影响。TWEAK和IL-1β组诱导MMP-13表达增加（P〈0.05）;TWEAK和IL-1β组,TWEAK和TNF-α组均诱导IL-6表达增加（P〈0.05）。3组Fas分泌表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 IL-1β与TWEAK,TNF-α与TWEAK分别诱导OA软骨细胞MMP-13和IL-6表达增加,可能参与关节软骨损伤和OA的病程发展。     

急性缺血性脑卒中患者血浆TAFI和炎性因子水平的变化及意义

目的探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血浆凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)和炎性因子水平变化,并阐述二者之间的联系,为AIS早期诊断或风险因素评估奠定实验基础。方法选取临床确诊的AIS患者86例为AIS组,以86例健康体检者为对照组。TAFI测定采用免疫比浊法,白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)测定采用酶联免疫吸附试验,C-反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)测定采用胶体金免疫层析法。结果 AIS患者血浆TAFI水平较对照组显著下降[(17.48±2.79)μg/mL vs.(27.23±3.27)μg/mL],炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平显著升高[(10.14±2.05)pg/mL vs.(4.54±0.78)pg/mL;(110.10±11.12)pg/mL vs.(81.18±7.58)pg/mL;(13.02±1.61)pg/mL vs.(6.90±1.55)pg/mL],急性期蛋白CRP和PCT也显著升高[(0.80±0.11)ng/mL vs.(0.43±0.10)ng/mL;(16.41±2.41)μg/mL vs.(5.60±1.11)μg/mL],差异均有统计学意义(P0.05)。两组血浆TAFI水平与相应炎性因子及急性期蛋白水平呈显著负相关(P0.05)。结论 TAFI对慢性血管内炎性反应有抑制作用;TAFI有可能成为辅助诊断早期AIS或评估其风险性的生物标志物。     

前列腺素E1预先给药对出血性休克复苏后大鼠肾组织Caspase-3表达的影响

目的 探讨PGE1预先给药对急性出血性休克复苏后大鼠肾组织活化Caspase-3以及TNF-α mRNA,iNOS mRNA表达的影响.方法 32只雄性SD健康大鼠随机分成4组(n=8),A:正常对照组,不进行任何处理;B:手术对照组,0.5 mL生理盐水尾静脉注射,1 h后切开左侧腹股沟皮肤暴露股动静脉;C:出血性休克复苏组,大鼠硫喷妥纳麻醉后,经股静脉穿刺置管放血,平均动脉血压降至25～35 mmHg,维持1 h,自体温血复苏30 min,维持平均动脉血压80～100 mmHg,制作失血性休克复苏模型;D:出血性休克复苏+lipo-PGEl预先给药组,lipo-PGEl按10 μg/kg溶于0.5 mL生理盐水尾静脉汴射,1 h后制作出血性休克复苏模型.各组分别于复苏后6 h时间点用Northern blotting法检测肾组织TNF-α mRNA和iNOS mRNA的表达;免疫组化检测肾脏组织活化Caspase-3的表达.数据采用单因数方差分析(SNK-q检验),以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 出血性休克复苏模型组肾组织出现Caspase-3阳性表达细胞;TNF-α mRNA和iNOS mRNA的表达也明显高于正常对照组[(0.651±0.028)vs.(0.030±0.003),(0.524±0.022)vs.(0.026±0.003),P<0.05]和手术对照组[(0.651±0.028)vs.(0.029±0.002),(0.524±0.022)vs.(0.025±0.003),P<0.05];预先给药组肾组织Caspase-3阳性细胞数量显著减少;TNF-αmRNA和iNOS mRNA的表达明显低于模型组[(0.250±0.019)vs.(0.651±0.028),(0.203±0.020)vs.(0.524±0.022),P<0.05],正常对照组和手术对照组间肾组织Caspase-3的表达以及TNF-α mRNA和iNOS mRNA的表达尢显著差异[(0.029±0.002)vs.(0.030±0.003),(0.029±0.002)vs.(0.030±0.003),P>0.05].结论 lipo-PGEl预先给药可以下调出血性休克复苏后大鼠肾组织Caspase-3的表达水平,其机制可能与在基因转录水平抑制TNF-α和I-NOS的表达有关.