桥本甲状腺炎患者外周血调节性T细胞/Th17细胞平衡动态变化的研究

目的 探讨桥本甲状腺炎(HT)患者外周血调节性T细胞(Treg)与Th17细胞的动态变化及其意义.方法 流式细胞术检测36例HT患者和30例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)中Treg和Th17细胞的比例,实时定量RT-PCR检测Treg和Th17细胞特异性转录因子Foxp3、RORγt mRNA的表达水平,ELISA检测血清中相关细胞因子TGF-β和IL-17A的含量.结果 HT患者PBMC中Treg细胞比例及Foxp3 mRNA表达水平均明显低于健康对照者(t=-10.62、-7.624,P均<0.01),HT亚组间差异具有统计学意义(F=4.414、4.512,P均<0.05);Th17细胞比例、RORγt mRNA表达水平及Th17/Treg比值均明显高于健康对照者(t=11.32、19.25、8.386,P均<0.01),HT亚组间差异均具有统计学意义(F分别为34.947、14.551、24.338,P均<0.01),亚组间两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05).HT患者血清TGF-β的含量较健康对照者略低,但差异无统计学意义(P>0.05);IL-17A的含量均较健康对照者显著升高(P<0.01),HT患者组内各亚组间血清IL-17A的含量差异具有统计学意义(F=11.077,P<0.01),两两比较差异亦具有统计学意义(P均<0.05).HT患者Th17/Treg比值与血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)滴度均呈显著正相关(r=0.349、0.502,P=0.037、0.002).结论 在HT发病过程中,Th17/Treg细胞轴呈动态改变,并且与甲状腺自身抗体滴度正相关,说明Th17/Treg细胞亚群的免疫失平衡可能参与了HT的发生发展.     

寻常型银屑病患者外周血单个核细胞转录因子RORγt与Foxp3 mRNA表达及相关性研究

目的探讨寻常型银屑病患者外周血中Th17细胞、Treg细胞特异性转录因子RORγt、Foxp3 mRNA的表达情况,分析其与发病及病情严重程度的相关性。方法选取78例寻常型银屑病患者作为研究对象,对研究对象分期并进行银屑病皮损面积及严重程度指数(PASI)评分,对照组60例,均为健康体检者。用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)分别检测外周血单个核细胞(PBMCs)中RORγt、Foxp3的mRNA的表达水平。结果寻常型银屑病组外周血中RORγt、Foxp3 mRNA相对表达量及RORγt/Foxp3表达量的比值分别为7.67±0.72、1.63±0.34、4.68±0.61,分别与正常对照组比较,差异有统计学意义(P均<0.01)。结果说明患病组外周血中RORγt mRNA的表达量明显高于对照组,Foxp3 mRNA的表达量则明显低于对照组,RORγt/Foxp3表达量的比值在患病组中也明显升高。同样在进行期外周血中RORγt mRNA的表达量明显高于静止期,Foxp3 mRNA的表达量则明显低于静止期,RORγt/Foxp3表达量的比值在进行期也明显高于静止期。进行期的PASI评分与RORγt mRNA相对表达量及RORγt/Foxp3表达量的比值呈正相关(r值分别为0.672、0.743,P均<0.01),与Foxp3 mRNA相对表达量呈负相关(r值为-0.795,P<0.01)。静止期PASI评分与RORγt mRNA相对表达量及RORγt/Foxp3表达量的比值呈正相关(r值分别为0.771、0.816,P均<0.01),与Foxp3 mRNA相对表达量呈负相关(r值为-0.863,P<0.01)。结论寻常型银屑病的发病及病情严重程度与外周血中RORγt mRNA表达的升高及Foxp3表达的降低有关,两种基因表达的失衡可能是引起寻常型银屑病外周血Th17/Treg失衡的一个重要原因。     

多发性骨髓瘤患者Treg细胞、Th17细胞及相关转录因子mRNA的表达及临床意义

目的:探讨多发性骨髓瘤(MM)患者外周血及骨髓中调节性T细胞(Treg细胞)和辅助性T细胞17(Thl7细胞)的比率及其相应特异转录因子Foxp3、RORγt的mRNA表达水平,分析Treg/Thl7平衡的临床意义。方法:将46例MM患者分为初发组(n=20)、平台期组(n=16)、复发/难治组(n=10),以健康体检者(n=20)为正常对照组。用流式细胞术检测研究对象外周血及骨髓中Treg细胞、Th17细胞占CD4~+T细胞的比率及Treg/Th17比值的变化;RT-PCR检测转录因子Foxp3及RORγt mRNA的表达水平;同时分析患者血清IL-6及CRP水平变化。结果:初发组及复发/难治组患者外周血和骨髓Treg细胞比率较正常对照组及平台期组患者升高(P0.05);初发组及复发/难治组患者外周血和骨髓中Th17细胞比率与正常对照组及平台期差异均无统计学意义。初发组及复发/难治组患者外周血和骨髓中Treg/Thl7比值高于平台期组及正常对照组(P0.05)。各组外周血及骨髓中Foxp3和RORγt mRNA的变化趋势与Treg/Thl7一致。MM患者血清中IL-6、CRP水平与外周血及骨髓中Treg/Thl7比值变化一致。结论:MM患者活动期外周血及骨髓中Treg/Thl7平衡向Treg倾斜,Foxp3表达水平升高;血清中IL-6、CRP水平与Treg/Th17比值变化趋势一致,可用于预测MM患者预后。     

慢性淋巴细胞白血病患者外周血Th17和Treg细胞比率的平衡关系研究

本研究通过检测慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者外周血中Th17和CD4+CD25+Foxp3+调节性T(Treg)细胞的比率及其平衡关系,探讨其在CLL发病机制中的作用及临床意义。CLL患者根据外周血淋巴细胞计数及治疗情况,分为初发组30例和治疗后缓解组15例,另设健康对照20例。用流式细胞术(FCM)检测CLL患者和健康对照者外周血中T细胞亚群及Th17和CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞的比率。结果显示,初发组CLL患者外周血CD3+CD4+T细胞和Th17细胞的比率均明显高于健康对照组(P<0.05),CD3+CD8+T细胞和CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达率明显低于健康对照组(P<0.05),Th17/Treg细胞比值明显高于健康对照组(P<0.05);缓解组CLL患者Th17细胞比率与健康对照组相当,而CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达率明显低于健康对照组(P<0.05),Th17/Treg细胞比值明显高于健康对照组(P<0.05);缓解组CLL患者Th17细胞比率显著低于初发组(P<0.05)。结论:CLL患者外周血T细胞紊乱以CD4+T细胞的增加为主,Th17细胞比率增加和CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比率降低导致Th17/Treg细胞比率失衡,该免疫失衡在CLL的发生发展中可能起重要作用。     

全反式维甲酸对川崎病患儿外周血Th17/Treg细胞平衡的影响研究

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对川崎病患儿外周血Th17/Treg细胞平衡的影响。方法研究纳入10名川崎病患儿为病例组,选择10名健康儿童作为对照组,采取外周静脉血后,无菌分离、制备外周血单个核细胞(PBMC),给予不同浓度ATRA诱导培养PBMC72h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液的细胞因子IL-10、IL-17A、TGF-β以及IL-6水平,实时PCR检测RORγt mRNA和FOXP3 mRNA表达水平,流式细胞术检测Th17/Treg占外周CD4+T细胞百分比。结果未加ATRA作用下,病例组Th17细胞比例,转录因子RORγt的mRNA表达水平以及相关细胞因子IL-10、IL-17A均高于对照组(P均0.01),而Treg细胞比例,FOXP3mRNA表达水平以及相关细胞因子TGF-β、IL-6低于对照组(P均0.01)。给予不同浓度ATRA作用后,病例组以及对照组Th17比例、IL-10、IL-17A、RORγt的mRNA均有所下降,而Treg细胞比例、FOXP3mRNA表达水平、TGF-β、IL-6均有所上升(P均0.01)。结论 ATRA在体外可促进川崎病患儿外周血Treg分化,同时抑制Th17分化,改变川崎病患儿外周血Th17/Treg失衡状态,该研究为阐明川崎病的免疫学发病机制及探索新疗法提供实验依据以及思路。     

阿维A对寻常型银屑病患者外周血Th17/Treg细胞转录因子RORγt和Foxp3表达影响的研究

目的探讨阿维A治疗银屑病的疗效以及对银屑病患者外周血单一核细胞RORγt和Foxp3 mRNA表达的影响,进一步阐明阿维A治疗寻常型银屑病的作用机制。方法 90例中、重度寻常型银屑病患者采用口服阿维A治疗8周,以银屑病皮损面积和严重程度(PASI)评分评价疗效;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)方法,检测正常对照组及寻常型银屑病患者治疗前后外周血单一核细胞中Th17和Treg细胞的特异性转录因子RORγt和Foxp3 mRNA表达水平。结果阿维A治疗后PASI评分明显下降(P<0.01);银屑病组和正常对照组比较,患者外周血RORγt mRNA表达量(8.72±1.64)显著高于正常对照组(2.53±0.71)(P<0.01);Foxp3 mRNA的表达量(1.56±0.92)则明显低于正常对照组(2.98±1.03)(P<0.01);患者RORγt/Foxp3的比值也明显高于正常对照组。阿维A治疗后患者外周血RORγt mRNA的表达量及RORγt/Foxp3的比值较治疗前明显降低(3.07±0.95,1.23±0.77),而Foxp3 mRNA的表达量较治疗前明显升高(2.72±0.83)(P<0.01)。结论银屑病的发生及病情严重程度与外周血RORγt mRNA的高表达及Foxp3 mRNA的低水平有关;阿维A治疗银屑病疗效明显,治疗后外周血RORγt mRNA的水平明显降低,Foxp3 mRNA的表达量明显升高;阿维A可下调外周血RORγt mRNA的表达,提高Foxp3 mRNA的表达,这可能是阿维A治疗银屑病的机制之一。     

Th17细胞/Treg细胞失衡在儿童过敏性紫癜发病机制中的作用

目的:探讨Th17细胞、CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)及其特异性转录因子RORγt和FoxP3在儿童过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)发病机制中的作用,为儿童HSP的治疗从调控Th17/Treg失衡作为切入点提供一条新思路。方法:以2012年2月——2013年3月我院(四川省人民医院)儿科诊治的初次发病的HSP急性期患儿40例作为研究对象,以及同期来我院体检的健康儿童40例作为对照,采用SYBR Green I实时荧光定量PCR技术测定外周血单个核细胞中RORγt mRNA和FoxP3 mRNA的表达水平;用流式细胞术测定外周血T淋巴细胞中Th17细胞和Treg细胞的表达水平;用双抗夹心ABC-ELISA技术测定血清IL-17A、TGF-β1、IL-2和IL-6浓度。结果:HSP组Th17细胞(2.75±0.60%)及RORγt mRNA(1.11±0.51)明显高于对照组Th17细胞(1.41±0.29%)及RORγt mRNA(0.65±0.24)(P0.01),而Treg细胞(4.56±1.26%)及FoxP3 mRNA(1.15±0.45)明显低于对照组Treg细胞(7.85±1.97%)及FoxP3 mRNA(2.32±1.13)(P0.01);HSP组血清IL-17A(40.40±11.81 pg/ml)、IL-6(75.38±27.19 pg/ml)、TGF-β1(309.41±81.03 pg/ml)与对照组IL-17A(20.32±10.70 pg/ml)、IL-6(25.16±8.31 pg/ml)、TGF-β1(236.34±66.01 pg/ml)相比明显升高(P0.01),而血清IL-2(25.60±13.19 pg/ml)水平与对照组(34.42±11.69 pg/ml)比较则降低(P0.01);在HSP组Th17细胞表达与RORγt mRNA、IL-17A、IL-6表达呈正相关,相关系数分别为0.887,0.938,0.934(P0.01);Treg细胞表达与FoxP3 mRNA,IL-2表达呈正相关,相关系数分别为0.834,0.932(P0.01)。结论:急性期HSP患儿存在Th17细胞、RORγt mRNA及IL-17A表达水平升高,Treg细胞和FoxP3 mRNA表达水平降低,Th17/Treg细胞的失衡;急性期HSP患儿存在血清TGF-β1、IL-6水平增高,IL-2水平降低,且Th17细胞表达水平与IL-6表达呈正相关,Treg细胞表达水平与IL-2表达呈正相关。     

银屑病患者 Th17和 Treg细胞及其相关细胞因子的表达

目的：探讨银屑病患者辅助性T细胞17（Th17）和调节性T （Treg）细胞及其相关因子表达的临床意义。方法用流式细胞术检测28例轻度和25例重度银屑病患者及25名健康对照者外周血中Th17和Treg细胞的比例;用逆转录聚合酶链反应（PCR）检测维甲酸相关孤儿受体γt（RORγt）和抗人叉头状转录因子（Foxp3） mRNA的表达;用酶联免疫吸附试验（ ELISA）检测血浆Th17和Treg相关细胞因子白细胞介素17（ IL-17）和转化生长因子β（ TGF-β）的水平。结果与健康对照组比较,银屑病患者组Th17细胞比例、RORγt的mRNA水平及IL-17的浓度显著上升,且重度组显著高于轻度组（P＜0．05）;而重度银屑病患者Treg细胞、Foxp3 mRNA和血浆TGF-β浓度均较健康对照组和轻度组显著降低（ P＜0．05）。结论 Th17和Treg细胞的比例及其相关因子的表达可作为银屑病病情进展的标志。     

过敏性紫癜患儿PBMC中Toll样受体2,4表达与T细胞亚群的关系研究

目的分析Toll样受体2,4(TLR2,TLR4)在过敏性紫癜(HSP)患儿外周血单个核细胞(PBMC)细胞中的表达,并探讨TLR2和TLR4水平与患儿T细胞亚群的关系。方法选取2015年3月~2017年2月上海儿童医学中心收治的经确诊为HSP的患儿65例为研究对象,其中单纯HSP 49例(HSP组),伴肾脏受累的16例(HSPN组);选取同期体检健康的儿童30例为对照组。采用实时荧光定量PCR检测PBMC细胞中TLR2和TLR4的表达;采用流式细胞仪检测Th1,Th2,Th17和Treg细胞比例,以及Th1/Th2,Th17/Treg比值;采用Pearson法分析TLR2,TLR4表达与Th1/Th2,Th17/Treg比值的相关性。结果 HSPN组,HSP组和对照组TLR2表达分别为2.13±0.36,1.64±0.27和1.05±0.12,差异有统计学意义(F=129.630,P0.01);TLR4表达分别为2.21±0.45,1.82±0.34和1.13±0.17,差异有统计学意义(F=81.241,P0.01)。HSPN组Th1,Treg细胞比例以及Th1/Th2比值均明显低于HSP组和对照组,差异有统计学意义(F=34.103,63.828,91.432,均P0.01);HSPN组Th2,Th17细胞比例以及Th17/Treg比值均明显高于HSP组和对照组,差异有统计学意义(F=48.559,48.475,34.909,均P0.01)。TLR2,TLR4与Th1/Th2比值呈负相关(r=-0.601,-0.652,P0.01),与Th17/Treg比值呈正相关(r=0.617,0.712,P0.01)。结论 HSP患儿PBMC细胞TLR2,TLR4表达增加,且可能与患儿Th1/Th2,Th17/Treg免疫应答失衡有关。     

血清中MRE11、TPO、Th 17Treg、IL-17、VEGF在儿童再生障碍性贫血免疫发病的诊断价值及治疗意义

目的探讨血清中MRE11、TPO、Th 17Treg、IL-17、VEGF在儿童再生障碍性贫血免疫发病的诊断价值及治疗意义。方法采用回顾性研究方法,收集2011年8月到2018年2月在北京市大兴区人民医院诊治的再生障碍性贫血患儿42例作为观察组,同期留取42名儿童保健科体检者外周血作为对照组。采集所有小儿的外周空腹静脉血,采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验定量检测法检测MRE11、TPO浓度,采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法检测IL-17、VEGF含量,采用qRT-PCR法检测Th 17TregRORΥ1、Foxp3表达水平并进行相关性分析。结果观察组的TPO、IL-17含量高于对照组,MRE11、VEGF含量低于对照组,对比差异有统计学意义(P0.05)。观察组的Th 17Treg细胞中的RORΥ1表达水平高于对照组,Foxp3表达水平低于对照组,对比差异有统计学意义(P0.05)。在观察组患儿中,直线相关性分析显示Th 17Treg细胞中的RORΥ1表达水平与TPO、IL-17、血小板计数、巨核细胞数呈正相关性(P0.05),与MRE11、VEGF含量呈负相关性(P0.05);Foxp3表达水平水平与TPO、IL-17、血小板计数、巨核细胞数呈负相关性(P0.05),与MRE11、VEGF含量呈正相关性(P0.05)。结论血清中MRE11、TPO、Th 17Treg、IL-17、VEGF在儿童再生障碍性贫血中呈现高表达情况,可互相影响,共同参与该病的免疫发病。     

尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒感染与调节性T淋巴细胞和辅助性T细胞17的关系

目的探讨尖锐湿疣（CA）患者人乳头瘤病毒（HPV）亚型及HPVDNA载量与调节性T淋巴细胞（Treg）和辅助性T细胞17（Th17）的关系。方法CA患者80例为CA组和健康者40例为正常对照组,检测外周血Treg、Th17细胞比例,Foxp3mRNA、ROR-γmRNA表达量及HPV亚型和HPVDNA载量。结果CA组和正常对照组及初发组和复发组外周血Treg、Th17细胞比例和Treg／Th17、Foxp3mRNA及ROR-γt mRNA表达量差异均有统计学意义（P〈0．05）,外周血Foxp3mRNA与ROR-γt mRNA表达量呈负相关（P〈0．05）。不同HPV亚型组和不同HPVDNA载量组外周血Treg细胞比例、Th17细胞比例、Treg／Th17、Foxp3mRNA及ROR-γt mRNA表达量差异均有统计学意义（P〈0．05）。外周血HPVDNA载量分别与Treg、Treg／Th17呈正相关（P〈0．05）,与Th17呈负相关（P〈0．05）。结论CA患者HPV感染可诱导Treg细胞活化增殖,Treg／Th17失衡抑制机体抗病毒免疫应答可能在尖锐湿疣发病和复发中起重要作用。     

习惯性流产患者绒毛和蜕膜中Treg/Th17免疫失衡的检测及其临床意义

目的探讨绒毛和蜕膜中调节性T细胞(Treg)/Th17免疫失衡在习惯性流产(RSA)患者免疫发病机制中的作用。方法收集RSA患者和自愿终止妊娠的早孕妇女(正常对照组)的绒毛和蜕膜,采用流式细胞术检测其中Treg和Th17细胞数量,采用RT-PCR检测其中叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)的mRNA水平;收集RSA患者和正常对照组的外周血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其中转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-10、IL-17A和IL-17F的水平;统计分析Treg细胞和其相关细胞因子、Th17细胞和其相关细胞因子之间的相关性。结果和正常对照组比较,RSA患者绒毛和蜕膜中Th17细胞明显增多(均P0.01),Treg细胞明显减少(均P0.01),RORγt的mRNA水平明显升高(均P0.01),Foxp3的mRNA水平明显降低(均P0.01);RSA患者外周血中IL-17A和IL-17F水平明显升高(均P0.01),TGF-β和IL-10水平明显降低(均P0.01);RSA患者和正常对照组Treg细胞数量和TGF-β及IL-10水平、Th17细胞数量和IL-17A及IL-17F水平均呈正相关(均P0.01)。结论绒毛和蜕膜中Treg/Th17免疫失衡可能与RSA的免疫发病机制有关。     

寿胎丸治疗对反复自然流产患者Th17/Treg细胞表达水平的影响

目的 探讨寿胎丸治疗对反复自然流产(RSA)患者调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)表达水平的影响.方法 流式细胞术检测20例RSA患者寿胎丸治疗前及治疗1、3个月后外周血Th17、Treg细胞表达水平,以26例健康孕妇作为对照组.结果 RSA患者Th17细胞表达水平显著升高(P＜0.05),Treg表达水平显著降低(P＜0.05).治疗3个月后,RSA患者Th17细胞数量降低(P＜0.05),Treg细胞数量升高(P＜0.05);治疗前Th17/Treg比值高于对照组(P＜0.05),治疗后逐渐降低,3个月后恢复至正常水平.结论 Th17和Treg细胞参与了RSA免疫应答,Th17/Treg细胞平衡在维持妊娠中发挥重要作用.寿胎丸可有效改善RSA患者Th17/Treg细胞失衡.     

沙利度胺对多发性骨髓瘤患者外周血Th17与Treg细胞比值及IL-17、IL-35表达水平的影响

目的:探讨沙利度胺对多发性骨髓瘤(MM)患者外周血辅助T细胞17(Th17)与调节性T细胞(Treg)的比值及白介素-17、-35表达水平的影响,为临床MM患者有效治疗提供参考。方法:选取2014年1月-2016年12月医院收治的82例沙利度胺治疗的多发性骨髓瘤患者(M M组)及同时期体检健康者30例(对照组)。流式细胞术检测外周血T细胞亚群与Treg细胞占CD4~+T细胞比率,ELISA法检测血清IL-17和IL-35表达水平,比较患者治疗前后各项指标差异。结果:与对照组比较,多发性骨髓瘤患者治疗前外周血Th17细胞比率、IL-17水平均显著升高(P0.05),Treg细胞比率和IL-35水平均显著降低,Th17/Treg细胞比值显著升高(P0.05),沙利度胺治疗有效的多发性骨髓瘤患者外周血Th17细胞比率和IL-17水平明显低于治疗前,Treg细胞比率和IL-35水平明显高于治疗前,Th17/Treg细胞比值较治疗前显著降低(P0.05);治疗无效者各指标无显著变化(P0.05)。结论:Th17/Treg细胞比例失衡和IL-17和IL-35水平异常与多发性骨髓瘤疾病进展相关,沙利度胺发挥抗M M的作用机制可能与调节Th17/Treg细胞比值及IL-17和IL-35表达水平有关。     

系统性红斑狼疮患者外周血Th17和CD4+CDhigh25Treg细胞及相关细胞因子的检测及意义

目的 探讨SLE患者外周血Th17及CD4+ CDhigh25Treg细胞及相关细胞因子IL-17、IL-21、TGF-β和IL-10的水平变化及意义.方法 选取2009-2010年河南省人民医院56例SLE患者(非活动期26例、活动期30例)及28名健康对照者.采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中Th17及CD4+ CDhigh25 Treg细胞水平;采用QRT-PCR检测RORγt mRNA和Foxp3 mRNA的表达水平;采用ELISA检测血浆IL-17、IL-21、TGF-β和IL-10水平,并分析其与SLE的相关性.结果 SLE患者组外周血Th17细胞水平为(3.44±0.96)％,显著高于健康对照组的(2.42±0.52)％,差异有统计学意义(t=5.38,P=0.000).SLE患者组外周血CD4+CDhigh25Treg细胞水平为(1.32±0.57)％,显著低于健康对照组的(2.07±0.67)％,差异有统计学意义(t=3.28,P=0.034).SLE患者的RORγt mRNA表达水平为(0.219±0.063),高于健康对照组的(0.087±0.045),差异有统计学意义(t=6.41,P=0.000);而SLE患者的Foxp3+ mRNA表达水平为(0.063±0.045),低于健康对照组的(0.128±0.056),差异有统计学意义(t=5.28,P=0.000).SLE患者组IL-17、IL-21、IL-10水平分别为122.4(60.5～188.3)、167.2(128.7 ～871.4)、51.3(20.9 ～123.7)ng/L,高于健康对照组的27.1(18.1 ～86.2)、31.0(31.0～424.5)、33.5(16.4～54.1) ng/L,差异有统计学意义(Z值分别为3.83、4.54、1.87,P均＜0.05),TGF-β水平为31.0(31.0 ～168.6) ng/L,低于健康对照组的159.8(63.4～389.7)ng/L,差异有统计学意义(Z=4.87,P＜0.05).SLE患者血浆IL-17水平与Th17细胞水平、SLEDAI积分、抗dsDNA抗体水平呈显著正相关(r=0.621、0.581、0.512,P＜0.05),与补体C3水平呈负相关(r=-0.543,P＜0.05).CD4+ CDhigh25Treg细胞与SLEDAI积分呈负相关(r=- 0.423,P＜0.05),与补体C3水平呈正相关(r=0.511,P＜0.05).结论 SLE患者Th17细胞数量增高,CD4+ CDhigh25 Treg细胞数量减少,以及相关细胞因子的紊乱在SLE的发病机制中可能起到重要作用.     

特应性皮炎患者外周血Th17细胞比例及不同细胞因子微环境对其分化的影响

目的探讨Th17细胞在特应性皮炎(AD)发病机制中的作用。方法采用流式细胞术检测39例AD患者外周血单一核细胞(PBMC)中Th17细胞的比例,实时定量RT-PCR(real-timeRT-PCR)检测PB-MC中Th17细胞相关细胞因子IL-1β、IL-6、IL-17、IL-23和TGF-βmRNA的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中上述细胞因子的含量;同时以34例性别、年龄匹配的健康儿童做对照。分离AD患者PBMC体外培养,加入不同细胞因子微环境,观察其对Th17细胞数量及特异性转录因子RORγt表达的影响。结果 AD患者外周血Th17细胞比例(CD4+IL17+T细胞/CD4+T细胞%)显著高于正常对照者(P<0.01)。PBMC中IL-1β、IL-6、IL-17和IL-23mRNA表达水平及血清中相应细胞因子含量均显著高于正常对照者(P<0.01),PBMC中TGF-βmRNA表达水平及其血清中含量与正常对照者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。AD患者PBMC在不同细胞因子微环境中培养,IL-1β+IL-23+IL-6处理组Th17细胞比例及RORγtmRNA表达最高,TGF-β处理组表达最低,与其余处理组比较差异均具有统计学意义(P均<0.05)。IL-1β+IL-6、IL-1β+IL-23、IL-6+IL-23处理组Th17细胞比例及RORγtmRNA表达水平低于IL-1β+IL-23+IL-6处理组,高于TGF-β处理组和未处理组,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。IL-1β+IL-6、IL-1β+IL-23、IL-6+IL-23处理组间差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 AD患者外周血Th17细胞比例及相应促分化细胞因子表达水平升高,IL-1β+IL-23+IL-6对Th17细胞具有明显的促分化作用,Th17细胞在AD发病机制中发挥作用。     

重度子痫前期患者外周血Th17和Treg细胞及相关细胞因子的表达及意义

目的探讨重度子痫前期(sPE)患者外周血Th17及CD4+CD25+Treg细胞及相关细胞因子白细胞介素(IL)-17、IL-21、IL-10和转化生长因子β(TGF-β)的水平变化及意义。方法选取30例sPE患者(sPE组)及30例正常妊娠者(对照组)作为研究对象。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中Th17及CD4+CD25+Treg细胞水平。采用QRT-PCR检测维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)mRNA和Foxp3 mRNA的表达水平。采用ELISA法检测血浆IL-17、IL-21、IL-10和TGF-β水平。结果 sPE组外周血Th17细胞水平为(1.16±0.78)%,显著高于对照组的(0.68±0.35)%,差异有统计学意义(t=3.447,P=0.002)。sPE组外周血CD4+CD25+Treg细胞水平为(1.65±0.49)%,显著低于对照组的(2.42±0.91)%,差异有统计学意义(t=-4.25,P=0.000)。sPE组RORγt mRNA表达水平为0.190±0.063,高于对照组的0.136±0.037,差异有统计学意义(t=3.776,P=0.001)。而sPE组Foxp3mRNA表达水平为0.069±0.025,低于对照组的0.127±0.027,差异有统计学意义(t=-8.218,P=0.000)。sPE组IL-17、IL-21、IL-10水平分别为(82.03±37.61)、(63.29±27.42)、(56.89±17.28)ng/L,高于对照组的(30.81±21.87)、(33.87±13.73)、(33.24±11.93)ng/L,差异有统计学意义(P0.01),TGF-β水平为(24.34±6.51)ng/L,低于对照组的(46.97±15.81)ng/L,差异有统计学意义(t=-7.781,P=0.000)。sPE患者血浆IL-17、IL-21水平与Th17细胞水平呈正相关(r分别为0.695、0.586,P0.01)。结论 sPE患者Th17细胞数量升高,CD4+CD25+Treg细胞数量减少,以及相关细胞因子的紊乱在sPE的发病机制中可能起到重要作用。     

外周血辅助性T细胞17与调节性T细胞的平衡与白癜风临床特征的相关性

目的分析白癜风患者外周血辅助性T细胞17(Th17)与调节性T细胞(Treg)的平衡与临床特征的关系。方法选取白癜风患者109例,其中进展期患者56例,稳定期患者53例,另选取同期本院健康体检者59例为对照组。采用流式细胞术检测3组受试者外周血Th17、Treg细胞数量;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测3组受试者白介素-17(IL-17)、叉头盒蛋白P3(Foxp3)水平;采用Pearson法分析白癜风患者Th17、Treg细胞及IL-17、Foxp3的关系。结果对照组、稳定期组、进展期组Th17细胞含量、Th17/Treg、IL-17水平逐渐升高,Treg细胞含量、Foxp3水平逐渐降低,差异有统计学意义(P0.05)。随着白癜风皮损面积的增加,Th17细胞含量、Th17/Treg、IL-17水平逐渐升高,Treg细胞含量、Foxp3水平逐渐降低,差异有统计学意义(P0.05)。白癜风患者Th17细胞与Treg细胞、IL-17与Foxp3均呈显著负相关(r=-0.449、-0.497,P0.05)。结论 Th17/Treg细胞平衡可能与白癜风的发生及临床特征有关。     

Tim-3在多发性骨髓瘤患者Th17/Treg细胞失衡中的意义

目的:探讨Tim-3在多发性骨髓瘤(MM)患者Th17/Treg失衡中的意义。方法:选取56例初诊MM患者及30例健康者,采用流式细胞术检测两组外周血CD4^+T细胞上Tim-3的表达、Th17和Treg细胞各占比例、Th17/Treg比值、Tim-3在Th17及Treg细胞上的表达、Tim-3^+Th17/Tim-3^+Treg比值。运用ELISA技术检测细胞因子IL-17和IL-10的水平。分析Tim-3^+Th17/Tim-3^+Treg平衡与临床指标的关系。结果:与对照组相比,MM患者外周血CD4^+T细胞上Tim-3表达明显增高(P<0.05)。MM患者组Th17细胞比例、Th17/Treg比值较对照组明显增高(P<0.05),MM患者Treg细胞比例较对照组低,差异无统计学意义(P>0.05)。MM患者组细胞因子IL-17、IL-10及IL-17/IL-10比值均较对照组明显增高(P<0.05)。MM患者组Tim-3^+Th17细胞水平及Tim-3^+Th17/Tim-3^+Treg比例较对照组明显增高(P<0.05),MM患者Tim-3^+Treg细胞水平较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05)。MM患者Tim-3^+Th17/Tim-3^+Treg比值与ISS分期、DS分期、染色体异常及sFLCR呈正相关(r=0.635、r=0.501、r=0.449、r=0.587)。结论:MM患者体内存在Th17/Treg、IL-17/IL-10及Tim-3^+Th17/Tim-3^+Treg比值增高,其中Tim-3^+Th17/Tim-3^+Treg比值与患者ISS分期、DS分期、染色体异常及sFLCR有关,提示Tim-3参与了MM患者Th17/Treg失衡。     

系统性红斑狼疮患者外周血Th17与Treg细胞及相关细胞因子表达的研究

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)与其相关细胞因子在外周血中的表达。方法选择38例SLE患者,根据病情严重程度SLEDAI评分进行分组;使用流式细胞仪检测38例SLE患者和对照组Th17和Treg细胞的数量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中相关细胞因子的表达。结果SLE患者外周血中Th17细胞及其相关细胞因子IL-17、IL-23和IL-6显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),且疾病活动组的表达也显著高于非活动组(P0.05);此外与对照组相比,SLE非活动组Treg的表达降低(P0.05),并且疾病活动组的表达也低于非活动组(P0.05);SLE活动组细胞因子TGF-β的表达高于非活动组和对照组(P0.05)。结论 SLE患者外周血中Th17细胞及其相关细胞因子表达水平显著升高,而Treg细胞的表达降低,两者平衡被打破,提示Th17/Treg的失衡可能在SLE发病机制中发挥重要作用。