人参皂苷Rb1对周围神经损伤后大鼠背根神经节神经生长因子及其受体酪氨酸激酶A表达的影响

目的 观察人参皂苷Rb1对周围神经损伤后大鼠背根神经节神经生长因子(nerve growth factor, NGF)及其受体酪氨酸激酶A(tyrosine kinase A,TrkA)表达的影响。 方法 将SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、甲钴胺组(10.8 mg/kg)、人参皂苷Rb1低剂量组(25 mg/kg)、人参皂苷Rb1高剂量组(50 mg/kg)。采用神经夹持损伤法建立周围神经损伤模型,造模完成后灌胃给药,持续14 d。末次给药后,采用光热耐痛阈测定法评价大鼠的感觉恢复情况,Western-blotting法检测大鼠背根神经节NGF及其受体TrkA蛋白表达情况,RT-PCR法检测基因表达情况。 结果 与假手术组比较,模型组大鼠对热痛感觉的灵敏度下降(11.23±2.11 vs. 7.14±0.67,P<0.01),背根神经节NGF及其受体TrkA蛋白和基因表达均显著下调(0.34±0.05 vs. 0.87±0.11,0.31±0.04 vs. 0.79±0.10,P<0.01);给予高剂量的人参皂苷Rb1干预后,模型大鼠的热痛感觉恢复良好,数值为(8.36±0.92)(P<0.01),背根神经节NGF、TrkA的蛋白和基因水平均得到回升,分别为(0.65±0.07)、(0.70±0.08)(P<0.01)。 结论 人参皂苷Rb1能通过提高背根神经节NGF及其受体TrkA的表达,维持神经元存活,促进受损神经修复,改善周围神经损伤后大鼠的感觉功能。     

莱菔硫烷对Aβ处理的SH-SY5Y细胞活力、组蛋白乙酰化水平及TrkA表达的影响

目的探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对β淀粉样肽(β-amyloid peptide,Aβ)处理的神经细胞的保护作用及其机制,为阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的防治提供理论依据。方法体外培养人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y),采用MTT法检测SFN(终浓度为2μmol/L)对Aβ染毒(终浓度分别为10、20、40、80μmol/L)的SH-SY5Y细胞活力的影响,并以Real time PCR、Western blot法分析SFN预处理后的Aβ染毒(终浓度为20μmol/L)细胞TrkA mRNA及其蛋白表达以及组蛋白乙酰化水平(Ace-H3K9、Ace-H4K12)的时相分布变化。结果细胞活力随着Aβ染毒剂量的增加而逐渐降低,其中40、80μmol/L Aβ染毒的细胞活力与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01或P0.001);SFN预处理后的各组细胞活力未见统计学差异(P0.05)。与对照组比较,Aβ处理后12、24 h时,细胞TrkA mRNA水平降低,24 h时TrkA蛋白表达水平降低,6、12、24 h时Ace-H3K9、Ace-H4K12水平降低,差异均有统计学意义(P0.01);与Aβ染毒细胞比较,SFN预处理后的Aβ染毒细胞12、24 h时TrkA mRNA水平升高,24 h时TrkA蛋白表达水平升高,12、24 h时Ace-H3K9以及6、12、24 h时Ace-H4K12水平升高,差异均有统计学意义(P0.001)。结论 Aβ可使细胞活力下降、TrkA mRNA及其蛋白表达水平降低以及Ace-H3K9、Ace-H4K12水平的升高,SFN对Aβ诱导的上述改变均具有抑制作用。     

肥胖儿童脂肪组织细胞死亡激活剂-DNA断裂因子相似蛋白C表达及与胰岛素抵抗的相关性研究

目的 研究脂肪组织中细胞死亡激活剂-DNA断裂因子相似蛋白C (CIDEC)表达与脂解、胰岛素抵抗的关系。方法 选取2014年7月-2016年9月在在西安交通大学第二附属医院和西安市儿童医院因疝气、隐睾等非炎症性疾病手术患儿共42例分为肥胖组和对照组,测量体重指数(BMI)、腰围、血压、血脂、空腹血糖、血清血游离脂肪酸(NEFA)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);取脂肪组织,用Western blot和RT-PCR检测CIDEC、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPARγ)的表达;脂肪组织中CIDEC与TNF-α表达、NEFA及HOMA-IR 水平相关性分析。结果 1)肥胖组BMI、腰围、收缩压、舒张压、HOMA-IR、血游离脂肪酸均相比正常对照组显著升高(P<0.01),HDL-C较对照组显著降低(P<0.05);2)肥胖组脂肪组织中CIDEC mRNA和蛋白表达均减低(P<0.01),TNF-α mRNA表达增高(P<0.01);3)相关性分析结果显示,脂肪组织CIDEC mRNA表达水平与TNF-α mRNA表达水平、HOMA-IR以及NEFA均呈显著负相关(r=-0.583,-0.560,-0.606,P<0.05)。结论 TNF-α可能通过下调CIDEC的表达,致使脂肪细胞脂解增加,进而引起胰岛素抵抗。     

促肾上腺皮质激素对N-甲基-D-天冬氨酸诱发幼鼠痉挛模型应激蛋白表达的影响

目的 分析促肾上腺皮质激素(ACTH)对婴儿痉挛模型应激蛋白表达的影响,为婴儿痉挛症的治疗提供理论依据。方法 将60只新生幼鼠随机分为对照组、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)组和ACTH组,每组20只。幼鼠出生第11天,ACTH组腹腔注射10 mg/(kg·d) ACTH,其他两组注射等量的生理盐水。幼鼠出生的第15天,NMDA组和ACTH组腹腔注射15 mg/(kg·d) NMDA,对照组注射等量生理盐水。对三组幼鼠痉挛症状进行评分,采用q-PCR法测海马白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)和ACTH的mRNA转录水平,Western Blot法测海马促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和促肾上腺皮质激素释放激素1型受体(CRHR1)蛋白表达。结果 NMDA组中幼鼠的痉挛症状评分高于对照组(t=11.236,P<0.001); ACTH组幼鼠的痉挛症状评分低于NMDA组(t=-6.347,P<0.001)。与对照组相比,NMDA组海马IL-1β和IL-6的mRNA转录水平升高(IL-1β: t=6.237,P<0.001;IL-6: t=6.553,P<0.001),ACTH组海马中IL-1β和IL-6的mRNA转录水平低于NMDA组(IL-1β:t=-7.669,P<0.001;IL-6:t=-8.125,P<0.001)。ACTH组海马中ACTH mRNA转录水平高于NMDA组(t=7.758,P<0.001)。与对照组相比,NMDA组海马体CRH和CRHR1蛋白表达上调(CRH: t=7.517,P<0.001;CRHR1: t=7.745,P<0.001),ACTH组海马CRH和CRHR1蛋白表达低于NMDA组(CRH: t=-6.120,P=0.003;CRHR1: t=-6.050,P=0.005)。结论 ACTH可缓解幼鼠的痉挛症状,推测与降低海马体中IL-1β和IL-6的mRNA转录水平,上调ACTH的mRNA转录水平,抑制CRH和CRHR1蛋白表达有关。     

潜在转化生长因子结合蛋白2在镉致人支气管上皮细胞氧化损伤中的作用

目的 研究潜在转化生长因子结合蛋白2基因(latent transforming growth factor-β binding protein 2,LTBP2)在氯化镉致人支气管上皮细胞(the human bronchial epithelial cells,16HBE)氧化损伤中的作用。 方法 分别用10、20、30、40 μmol/L氯化镉处理16HBE细胞24 h,用30 μmol/L 氯化镉处理16HBE细胞12、24、48 h,利用qRT-PCR法检测细胞LTBP2基因表达变化。针对目的基因设计特异性shRNA序列,退火并组装到慢病毒载体pCDH上,构建16HBE稳定LTBP2低表达细胞株。分别用硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力。 结果 30、40 μmol/L处理组细胞LTBP2 mRNA相对表达与氯化镉浓度为0 μmol/L对照组比较有统计学意义(P<0.05),且随着氯化镉染毒剂量的增加,LTBP2mRNA表达逐渐升高(P<0.01)。30 μmol/L氯化镉分别处理16HBE细胞24、48 h,细胞LTBP2 mRNA基因相对表达与氯化镉未染毒细胞比较差异有统计学意义(P<0.01)。不同浓度氯化镉处理16HBE及LTBP2低表达细胞株16HBE-shLTBP2不同时间,与16HBE相比,氯化镉处理的16HBE-shLTBP2 SOD含量显著升高(P<0.05),而MDA含量显著降低(P<0.05)。 结论 LTBP2低表达细胞减弱镉致细胞氧化损伤毒性,提示LTBP2基因可能在镉致细胞氧化损伤过程中发挥促氧化作用。     

肠道病毒71型感染乳鼠脑组织白介素1β与白介素6水平的研究

目的 检测肠道病毒71型(EV71)感染乳鼠脑组织白介素1β(IL-1β)与白介素6(IL-6)水平变化,探讨EV71致中枢损害可能的发病机制。方法 1日龄120只ICR乳鼠随机分为感染组及对照组。腹腔注射法建立EV71感染乳鼠模型。荧光定量RT-PCR法检测脑组织中EV71载量。光镜观察脑组织病理变化。酶联免疫吸附法(ELISA)检测脑组织匀浆液中IL-6与IL-1β含量。结果 感染组3 d、5 d与7 d乳鼠脑组织匀浆IL-1β浓度较对照组明显升高(P<0.01),感染组3 d、5 d、7 d与10 d乳鼠脑组织匀浆IL-6浓度较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),感染组1 d与14 d乳鼠脑组织匀浆IL-1β及IL-6浓度与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 EV71感染乳鼠早期脑组织中IL-1β及IL-6含量明显升高,其介导的免疫反应可能是EV71致中枢损害可能的机制之一。     

膳食诱导肥胖小鼠睾丸JAK2/STAT3蛋白表达变化研究

目的 通过检测膳食诱导肥胖小鼠血清中瘦素水平及睾丸中JAK2/STAT3蛋白表达水平变化,探讨睾丸JAK2/STAT3通路在肥胖影响雄性生殖中的作用。 方法 5周龄的C57bl/6雄性小鼠,共48只,随机分为对照组(CON)12只和实验组36只,对照组予以普通饲料,实验组予以高脂饲料,饲养19周后,将实验组小鼠按体重增加分为两组:肥胖倾向组(DIO)和肥胖抵抗组(DIO-R)。采集下腔静脉血,剥离睾丸、睾周脂肪、肾周脂肪并称重记录,采用ELISA试剂盒检测血清瘦素,Western blot检测睾丸中JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、蛋白表达量。 结果 DIO组和DIO-R组小鼠肾周脂肪、肾周脂肪系数、睾周脂肪、睾周脂肪系数明显高于对照组(P<0.05),DIO组和DIO-R组小鼠之间上述各指标差异无统计学意义(P>0.05);DIO组和DIO-R组小鼠血清瘦素显著高于CON组(P<0.05),而DIO组和DIO-R组之间差异无统计学意义(P>0.05);DIO组p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平显著低于CON组(P<0.05),DIO组小鼠睾丸中p-JAK2蛋白表达水平低于DIO-R组小鼠(P<0.05),而p-STAT3蛋白表达水平同DIO-R组小鼠相比差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 膳食诱导肥胖可导致雄性小鼠血清瘦素水平升高,而睾丸JAK2/STAT3蛋白表达降低。     

儿童血清维生素A、D、E水平与肺炎支原体肺炎相关性的临床研究

目的 研究儿童血清维生素A、D、E水平与肺炎支原体肺炎的相关性,为临床防治提供指导。方法 选取肺炎支原体肺炎住院治疗患儿415例为支原体肺炎组,儿保科非呼吸道感染儿童431例为对照组。分别检测两组儿童血清维生素A、D、E水平。结果 支原体肺炎组血清维生素A、D、E平均值均明显低于对照组(P<0.01);维生素A缺乏例数明显高于对照组(P<0.01),亚临床维生素A缺乏例数与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);维生素D缺乏及不足例数均明显高于对照组(P<0.01);维生素E缺乏例数明显高于对照组(P<0.01)。结论 维生素A、D、E缺乏与肺炎支原体肺炎的发病相关,特别是缺乏维生素A,补充维生素A、D、E有可能对预防肺炎支原体肺炎反复发作有益,其具体机制有待于进一步探讨。     

3β-羟类固醇脱氢酶对邻苯二甲酸二-(2-乙基己)酯处理细胞后诱导型一氧化氮合酶和蛋白激酶C信号通路的影响

目的 探讨邻苯二甲酸二-(2-乙基己)酯(di-(2-ethylhexyl) phthalate,DEHP)对MCF-7细胞中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)信号通路相关基因及蛋白表达的影响以及3β-羟类固醇脱氢酶(3β-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)基因在此过程中的作用。方法 用浓度为0.00~0.40 mmol/L的DEHP分别染毒MCF-7细胞、3β-HSD沉默细胞和3β-HSD高表达细胞24 h,检测细胞中iNOS/PKC相关基因表达水平的变化;应用信号通路抑制剂处理后再进行DEHP染毒,荧光定量PCR和免疫印迹法检测MCF-7细胞中iNOS/PKC相关基因和凋亡基因表达水平的变化。结果 DEHP染毒MCF-7细胞,iNOS、PKCα在基因和蛋白表达水平均高于对照组;与同一染毒剂量的MCF-7细胞比较,3β-HSD沉默细胞中iNOS、PKCα mRNA表达水平降低;而3β-HSD高表达细胞中iNOS、PKCα mRNA表达水平升高。应用iNOS 抑制剂(NG-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)50 μmol/L处理后,DEHP染毒组iNOS、Bax、Caspase-3、Caspase-8表达下调;PKCα抑制剂(chelerythrine chloride,CHE) 0.20 μmol/L处理后,DEHP染毒组PKCα表达下调;而各抑制剂处理组中与对照组比较无明显降低的基因,其变化趋势与未加抑制剂处理的染毒组无显著差异。结论 DEHP引起的毒性作用可能与iNOS/PKC信号通路有关,3β-HSD对iNOS/PKC信号通路相关基因的表达有一定作用。     

2014—2019年济南市市售畜肉中β-受体激动剂含量调查

目的 监测济南市市售畜肉中β-受体激动剂含量,为食品行业监管和暴露风险评估提供依据。方法 2014—2019年,在济南市采集不同市场来源的畜肉及内脏,用固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法检测其中的克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林,并分析残留水平。结果 六年共检测畜肉397份,β-受体激动剂检出率20.15%(80/397),其中克伦特罗检出率最高为15.62%(62/397)。采自农贸市场的畜肉中β-受体激动剂检出率明显高于采自超市的样品(P<0.01),羊、牛类样品中β-受体激动剂检出率明显高于猪类样品(P<0.05),内脏样品中的检出率明显高于肌肉(P<0.05)。结论 济南市畜肉中克伦特罗检出较多,牛、羊养殖、屠宰、销售等环节的监管需要加强,牛、羊肉特别是内脏中β-受体激动剂暴露风险较高。     

食管癌血清转化生长因子-β1、胰岛素样生长因子-1变化与疾病恶性程度及与预后的关系

目的 探讨食管癌患者血清中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)的变化及其意义。 方法 选取濮阳市油田总医院确诊的90例食管癌患者为食管癌组、选取45例体检健康对象作为对照组,检测分析两组的血清IGF-1、TGF-β1水平,并分析不同TNM分期、肿瘤分化程度、肿瘤浸润程度、淋巴结转移情况的食管癌患者血清IGF-1、TGF-β1水平差异;采用Cox比例风险回归模型分析血清IGF-1、TGF-β1水平与患者预后的相关性。 结果 食管癌组患者的血清IGF-1、TGF-β1分别为(254.9±88.4)μg/L、(49.6±14.1)μg/L,高于对照组的(40.1±13.0)μg/L、(28.5±8.0)μg/L,差异均有统计学意义(均P<0.05);在不同TNM分期、是否发生淋巴结转移、不同分化程度的食管癌组患者的血清IGF-1水平组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);在不同TNM分期、是否发生淋巴结转移的食管癌组患者的血清TGF-β1水平组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);Cox比例风险模型进行分析显示:食管癌患者的TNM分期增高、分化程度降低、发生淋巴结转移、血清IGF-1及TGF-β1水平升高是患者不良预后的独立性危险因素(P<0.05)。 结论 食管癌组患者的血清IGF-1、TGF-β1水平较健康人群升高,并且与患者肿瘤恶性程度增加及预后不良有关。     

支气管哮喘患儿血清IL-17和IL-36水平及临床意义

目的 探讨支气管哮喘患儿血清白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-36(IL-36)水平和嗜酸性粒细胞(EOS)计数及临床意义。方法 选取2017年7月-2018年7月在潍坊市人民医院小儿内科门诊就诊及病房住院哮喘儿童65名,其中哮喘急性发作期组儿童30名,缓解期组儿童35名,健康儿童25名作为对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清IL-17、IL-36水平,采用血细胞分析仪常规方法检测外周血EOS计数,并进行统计学分析。结果 1)急性发作期组和缓解期组IL-17水平分别为(45.73±8.86)pg/ml和(21.06±5.51)pg/ml,均显著高于对照组(7.29±4.29)pg/ml(P<0.01);且急性发作期组IL-17水平明显高于缓解期组(P<0.01)。2)急性发作期组和缓解期组IL-36水平分别为(53.76±10.60) pg/ml和(24.45±6.59) pg/ml,均显著高于对照组(8.46±4.86) pg/ml(P<0.01);且急性发作期组IL-36水平高于缓解期组,差异有统计学意义(P<0.01)。3)在哮喘患儿中,IL-17和IL-36水平呈正相关(P<0.01);且IL-17和IL-36水平分别与EOS计数呈正相关(P<0.01)。结论 IL-17和IL-36参与儿童哮喘发病过程,其血清水平可作为儿童哮喘诊断和病情评估较好的生物学指标。     

宫颈癌患者血清中SCC-Ag含量与肿瘤恶性生物学行为的关系

目的 探讨不同分期宫颈癌患者血清中鳞状细胞癌抗原(squamous cell carcinoma associated antigen,SCC-Ag)含量的检测及其与肿瘤恶性生物学行为的内在联系。 方法 71例原发性宫颈癌患者根据肿瘤分期不同分为早期宫颈癌组30例、中晚期宫颈癌组41例,同期在本院进行宫颈检查的宫颈息肉患者50例作为宫颈良性病变组。对比三组患者血清中SCC-Ag的含量以及宫颈病灶组织中增殖、侵袭、自噬基因表达量的差异,进一步分析宫颈癌患者血清SCC-Ag含量与病灶恶性分子表达量的内在联系。 结果 早期宫颈癌组、中晚期宫颈癌组患者血清中SCC-Ag的含量分别为(1.73±0.32)μg/L、(5.40±1.17)μg/L,高于宫颈良性病变组的(0.32±0.08)μg/L(P<0.001)。早期宫颈癌组、中晚期宫颈癌病灶组织中增殖基因FOXP3、INK4、NDRG3 mRNA的表达量高于宫颈良性病变组(均P<0.001);eIF4E3 mRNA的表达量低于宫颈良性病变组(均P<0.001);侵袭基因GOLPH3、EZH2、GRP94、PRPS2、Rab11 mRNA的表达量高于宫颈良性病变组(均P<0.001);自噬基因Beclin1、ARHI mRNA的表达量低于宫颈良性病变组(均P<0.001),p62 mRNA的表达量高于宫颈良性病变组(P<0.001)。且中晚期宫颈癌组上述指标的变化程度大于早期宫颈癌组,差异均有统计学意义(均P＜0.05)。相关性分析发现,宫颈癌患者血清SCC-Ag含量与肿瘤细胞增殖、侵袭及自噬活性均直接相关(P＜0.05)。 结论 随宫颈癌肿瘤分期进展,患者血清中SCC-Ag含量增加,且具体SCC-Ag含量可客观反映肿瘤细胞的增殖、侵袭、自噬等恶性生物学行为严重程度。     

组蛋白去乙酰化酶2在结核性气道狭窄组织中的表达

目的 检测结核性气道狭窄组织中组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)的表达情况。 方法 收集经湖南省胸科医院诊断的气管支气管结核患者的气道肉芽组织标本、气管支气管结核患者瘢痕支气管手术组织标本、因肺部病变手术后的正常支气管组织标本40例,用免疫组化方法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β,TGF-β1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、HDAC2的表达情况,比较各组的差异,分析TGF-β1、VEGF、NF-κB与HDAC2表达的关系。用Western blot方法检测HDAC2的表达情况,比较各组的差异。 结果 ①免疫组化结果显示结核性增生性气道狭窄组增生肉芽组织中TGF-β1、VEGF、NF-κB阳性表达率高于结核性瘢痕性气道狭窄组及正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);结核性增生性气道狭窄组和结核性瘢痕性气道狭窄组支气管组织中HDAC2阳性表达率低于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。Spearman相关分析结果显示TGF-β1、VEGF和NF-κB的阳性表达与HDAC2的阳性表达呈负相关,差异均有统计学意义(P＜0.05)。②Western blot结果显示结核性增生性气道狭窄组和结核性瘢痕性气道狭窄组支气管组织中HDAC2蛋白表达量低于正常对照组,差异有统计学意义(F=178.192,P＜0.05)。 结论 局部增强的炎症反应参与了结核性气道狭窄的发生,且与HDAC2的低表达相关,提示HDAC2可作为治疗结核性气道狭窄的潜在靶点。     

电离辐射对脾细胞p16、CyclinD、CDK4基因表达的影响

目的 研究X射线全身照射对小鼠脾细胞p16、CyclinD、CDK4基因转录及蛋白表达的影响。方法 采用Northern blot方法检测了2Gy X射线照射后p16、CDK4基因转录变化,半定量RT-PCR方法检测CyclinD mRNA水平,采用流式细胞术(FCM)检测三者蛋白表达变化。结果 研究证实,2Gy X射线全身照射后2~8 h脾细胞p16 mRNA水平明显增高,12 h恢复正常水平。p16蛋白表达于照射后24 h明显增高(P <0.05)。周期蛋白CyclinD mRNA水平轻度降低,其蛋白表达未见明显改变。照射后2 h,脾细胞CDK4 mRNA水平开始降低,持续到72 h,降至最低值,为假照射组的55.9%。照射后8~72 h,CDK4蛋白表达明显减少(P <0.05~P <0.01)。结论 电离辐射照射后脾细胞内p16基因表达增高;CDK4基因表达降低。     

子痫前期孕妇胎盘及血清中AT1-AA和VCAM-1表达水平变化及其与病情严重程度关系

目的 探讨子痫前期孕妇胎盘及血清中血管细胞黏附因子-1(vascular cell adhesion factor-1,VCAM-1)和抗血管紧张素Ⅱ1型受体自身抗体(anti-angiotensin II type 1 receptor autoantibody,AT1-AA)表达水平,并探讨其与病情严重程度的关系。 方法 选取30例正常分娩孕妇(对照组)、30例子痫前期孕妇(子痫前期组)和30例重度子痫前期孕妇(重度子痫前期组)。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测3组孕妇分娩前外周血清中VCAM-1和AT1-AA水平,采用Real-TimePCR技术检测3组胎盘组织中VCAM-1 mRNA和AT1-AA mRNA表达水平。 结果 3组孕妇外周血中VCAM-1和AT1-AA、胎盘组织中VCAM-1 mRNA和AT1-AA mRNA表达水平差异均存在统计学意义(P<0.05),重度子痫前期组(血清VCAM-1、AT1-AA含量以及组织VCAM-1,AT1-AA1mRNA表达水平分别为[(39.8±13.5)μg/L、(148.7±12.7 )ng/L、(0.67±0.15)、(0.59±0.14)]高于对照组[(42.7±5.5)μg/L、(59.8±6.7)ng/L,(0.20±0.04)、(0.18±0.05)]和子痫前期组[(99.2±8.7)μg/L、(113.7±10.8)ng/L,(0.35±0.09)、(0.33±0.10)],子痫前期组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。重度子痫前期组和子痫前期组孕妇中,外周血VCAM-1和AT1-AA表达水平呈正相关(P<0.05),胎盘组织中VCAM-1 mRNA和AT1-AA mRNA表达水平呈正相关(P<0.05)。 结论 子痫前期孕妇胎盘及血清中VCAM-1和AT1-AA表达上调,且与子痫前期严重程度密切相关,子痫前期发生可能与AT1-AA诱导VCAM-1表达有关。     

子痫前期患者胎盘组织中MMP-9、IFI16及NGAL的变化及其临床意义

目的 探讨子痫前期(preeclampsia,PE)患者胎盘组织中基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、人γ干扰素蛋白16(human gamma interferon protein 16,IFI16)及中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)的变化及其临床意义。 方法 选取信阳市第一人民医院2019年1月—2021年1月收集的78例PE患者胎盘组织(PE组)、30例正常妊娠及分娩产妇的胎盘组织(对照组),采用Western-blot技术检测两组标本中的MMP-9、IFI16、NGAL蛋白表达情况,并分析不同病情PE患者中的MMP-9、IFI16、NGAL蛋白表达,采用Pearson相关分析法探讨MMP-9、IFI16、NGAL与PE患者SBP、DBP的相关性。 结果 PE组的SBP、DBP及24 h尿蛋白水平均高于对照组(P<0.05);PE组的胎盘组织中MMP-9、IFI16、NGAL蛋白均高于对照组(P<0.05);重度PE组的胎盘组织中MMP-9、IFI16、NGAL蛋白均高于轻度PE组(P<0.05);PE患者的胎盘组织中MMP-9、IFI16、NGAL蛋白与患者的SBP、DBP均呈显著的正相关关系(P<0.05)。 结论 PE患者胎盘中MMP-9、IFI16、NGAL蛋白表达上调,并且与患者血压水平及病情程度有关。     

饲料中丙酸和丁酸对肥胖小鼠脂肪代谢的影响

目的 探讨外源性短链脂肪酸对高脂诱导的肥胖小鼠脂肪代谢的影响。方法 将40只3~4周龄C57BL/6J雄性小鼠分成4组,分别给予正常饲料、高脂饲料以及分别添加丙酸和丁酸的高脂饲料喂养4个月。喂养过程结束后,心脏采血,取性腺周围脂肪、肩胛骨下脂肪和肝脏。检测血浆甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)等浓度,观察脂肪和肝脏组织细胞形态变化,同时检测甘油三酯脂肪酶(atgl)、激素敏感脂肪酶(hsl)、二酯酰甘油酰基转移酶2(dgat2)、肉碱脂酰转移酶(cpt)及解偶联蛋白1(ucp1)等基因mRNA表达水平。结果 与正常饲料喂养组相比,高脂饲料组小鼠体重、血浆TG和TCH水平、肝脏脂肪聚集均显著增加(P<0.05);而高脂饲料中添加丙酸和丁酸则抑制了小鼠体重的增加和肝脏脂滴聚集,同时降低了血浆TG和TCH水平(P<0.05)。脂肪代谢相关基因表达检测显示,与正常饲料组小鼠相比,高脂饲料组小鼠性腺周围脂肪组织和肝脏中atgl、hsl、cpt1c基因mRNA的表达量均显著性降低,而dgat2基因mRNA的表达量明显升高(P<0.05);而高脂饲料中添加丙酸和丁酸提升了性腺周围脂肪组织和肝脏中agtl、hsl、cpt1c基因mRNA的表达,而抑制了dgat2的表达(P<0.05)。肩胛骨下脂肪中上述基因的表达几乎未受到饲料丙酸和丁酸添加的影响(P>0.05)。结论 丙酸和丁酸可能通过促进脂肪分解和氧化对高脂饲料诱导肥胖小鼠的体重增加发挥抑制作用。     

MACC1和CIP2A蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨结肠癌转移相关基因1(MACC1)蛋白和蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(CIP2A)蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义。 方法 收集2015年6月-2016年12月安徽医科大学附属巢湖医院收治的39例胃癌组织标本以及50例癌旁正常组织标本,采用免疫组织化学法对组织中MACC1、CIP2A蛋白进行测定,并分析其与胃癌病理特征的关系。 结果 胃癌组织中MACC1蛋白、CIP2A蛋白阳性表达率分别为79.49%、71.79%,高于癌旁正常组织中的18.00%、22.00%,差异有统计学意义(χ²=33.476、22.068,均P<0.01)。MACC1蛋白、CIP2A蛋白在胃癌组织中的阳性表达强度明显强于癌旁正常组织,差异有统计学意义(Z=-6.253、-5.303,P<0.05)。Ⅲ+Ⅳ期、低分化、有淋巴结转移胃癌患者胃癌组织中MACC1蛋白、CIP2A蛋白阳性表达率高于Ⅰ+Ⅱ期、中高分化、无淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤大小、病理类型胃癌患者胃癌组织中MACC1蛋白、CIP2A蛋白阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。胃癌组织中MACC1蛋白与CIP2A蛋白的Pearson列联系数为0.361,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 MACC1、CIP2A蛋白在胃癌组织中呈高表达水平,可能参与了胃癌的发生发展过程,联合检测可作为早期评估胃癌病情的重要指标。     

亚慢性氟虫腈暴露致小鼠肝脏脂质代谢紊乱的风险及机制研究

目的 研究氟虫腈(Fipronil, FPN)亚慢性暴露对不同营养条件下成年雄鼠肝脏脂质代谢稳态的影响与分子机制。方法 雄性C57BL/6J小鼠随机分为8组,每组7只,4组喂常规饲料饮食(normal-chow diet,ND),4组喂养高脂饲料饮食(high-fat diet,HFD),每种喂养条件下按FPN处理剂量分为对照组,0.25、1和4 mg/kg组,每日经口灌胃,于染毒5周后处死,称取体重、肝脏重量,并计算肝脏脏器系数;HE染色观察肝脏组织学形态变化,生化分析法检测甘油三酯(triglycerides, TG)、总胆固醇(total cholesterol, TC)、游离脂肪酸(free fatty acids, FFA)水平;Western Blot和qPCR法检测肝脏脂质代谢相关蛋白和基因的表达情况。结果 ND、HFD小鼠肝脏重量和体重均无明显变化。ND小鼠:HE染色未见显著病理性变化,血清TG升高(P<0.05),肝脏TG、TC在0.25 mg/kg组升高(P<0.05),在4 mg/kg组降低(P<0.05),肝脏FFA降低(P<0.05),过氧化物体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptor alpha, PPARα)表达增加(P<0.05),乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-coa carboxylase, Acc)在0.25 mg/kg组表达增加(P<0.05),4 mg/kg组表达下调 (P<0.05)。HFD小鼠:HE染色表明FPN暴露后有显著病理变化和脂质沉积。血清TG、TC水平下降(P<0.05),肝脏TG、TC、FFA水平升高(P<0.05)。蛋白PPARα表达随FPN染毒剂量增大而降低(P<0.05),蛋白Acc、胆固醇调节元件结合蛋白-1c (sterol regulatory element-binding protein-1c, Srebp-1c)表达下降(P<0.05)。结论 FPN慢性暴露可导致普通饮食小鼠肝脏脂质代谢紊乱,增加非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)发生风险,低剂量的FPN诱导NAFLD效应更明显;高脂饮食条件下,FPN暴露致小鼠肝脏出现明显病理性损害,且FPN对肝脏脂质代谢的干扰效应呈剂量依赖式变化,FPN暴露剂量越高,发生肝脏脂质异常积累和NAFLD的风险也越高。