胆固醇酯转运蛋白的提纯和鉴定

目的：分离纯化人血清胆固醇酯转运蛋白（ＣＥＴＰ），为制备ＣＥＴＰ单克隆抗体和ＣＥＴＰ浓度测定提供物质基础。方法：制备无脂血清，用Ｂｕｔｙｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４ＦＦ、ＣＭ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００三步柱层析分离、纯化ＣＥＴＰ。结果：纯化的ＣＥＴＰ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ与ＣＥＴＰ特异性单克隆抗体免疫反应和活性测定等鉴定证实为纯化ＣＥＴＰ。结论：经三步柱层析获得了纯化ＣＥＴＰ，得率约２５％，活性３０ｎｍｏｌ／（μｇ·ｈ）。     

胆固醇酯转运蛋白与动脉粥样硬化

胆固醇酯转运蛋白（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｙｌｅｓｔｅｒｔｒａｎｓｆｅｒｐｒｏｔｅｉｎ，ＣＥＴＰ）催化血浆脂蛋白之间非极性脂质，特别是胆固醇酯（ＣＥ）的交换和平衡，关系到各种脂蛋白颗粒大小和脂质组成，决定高密度脂蛋白（ＨＤＬ）和低密度脂蛋白（ＬＤＬ）质和量...     

胆固醇酯转运蛋白基因多态性与冠心病关系的研究进展

冠心病是一种受遗传和环境等多因素影响的疾病,高密度脂蛋白(HDL)与冠心病危险性呈负相关.已证实HDL每提高1 mg,冠心病的危险性可降低2%～3%[1].     

正常妊娠中胆固醇酯转运蛋白水平的研究

目的 :研究正常妊娠者血清胆固醇酯转运蛋白 (CETP)水平特征。　方法 :采用”Sandwich”酶免疫法测定 2 96例正常妊娠者血清CETP ,同时测定血脂和雌激素水平 ,并以年龄匹配的 92例正常非孕女性为对照。　结果 :早孕组 (孕 7～ 2 0周 )CETP浓度为 (3.79± 1.33)mg/L ,明显高于对照组 (2 .6 4± 1.2 5 )mg/L ,P <0 .0 0 0 1,同时也高于孕中期 (孕 2 1～ 2 8周 ) [(2 .84± 1.5 0 )mg/L ,P <0 .0 0 0 5 ]和孕晚期组 (孕 2 9- 4 0周 ) [(2 .79± 1.6 4 )mg/L ,P <0 .0 0 0 1];孕中、晚期组CETP水平与对照组相比有增加 ,但无明显差异。另外 ,三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白B随着妊娠周期的增加而逐渐增高 ,高密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白AI则在孕中期达到最大值。　结论 :妊娠期间激素 /血脂水平的变化以及与卵巢中一些因子协同作用而影响CETP水平     

血清胆固醇酯转运蛋白的变化及临床应用

目的 :了解胆固醇酯转运蛋白 (CETP)对动脉粥样硬化的致病关联性。方法 :以ELISA法检测正常健康者及患者血清中CETP的浓度 ,同时检测了血脂其他相关指标。进行统计学处理 ,进行正态性检验 ,相关性分析 ,参考值的确定。结果 :正态性检验呈正偏态分布。参考范围 0 .33～ 4 .7mg·L- 1 。CETP与脂类其它指标无明显的相关性。结论 :显示CETP浓度过高或过低或缺乏均与动脉粥样硬化的形成存在着明显的关联性 ,具有临床应用价值。     

心脑血管疾病患者胆固醇酯转运蛋白活性测定

目的 :探讨胆固醇酯转运蛋白 (CETP)活性与心脑血管疾病的关系。　方法 :应用体外合成 1 4 C标记的高密度脂蛋白 (HDL )样颗粒 ,测定了 45例冠心病患者、2 6例脑卒中患者和 40例健康人 CETP活性。　结果 :冠心病患者、脑卒中患者 CETP活性分别为 (17.6± 5 .4) %、(15 .2± 3.8) % ,而健康人为 (12 .7± 2 .0 ) % ,两组患者与健康人比较均有显著差异 (P<0 .0 1)。　结论 :提示 CETP与动脉粥样硬化的发生、发展密切相关。     

胆固醇酯转运蛋白变异体Ile405Val及其对HDL代谢的影响

通过聚合酶链反应技术扩增胆固醇酯转运蛋白基因，继而采用荧光直读法测定ＣＥＴＰ基因ＤＮＡ序列，首次发现一频发ＣＥＴＰ基因突变点，即ＣＥＴＰ第４０５位异亮氨酸残基为缬氨酸残基取代。用分子流行病学方法进一步研究表明该ＣＥＴＰ基因变异体在德意志和意大利人群中出现频率显著不同，但均与血清高密度脂蛋白－胆固醇的升高密度相关。     

胆固醇酯转运蛋白TaqIB基因多态性与脑梗死关系

目的探讨胆固醇酯转运蛋白(CETP)TaqIB基因多态性与动脉粥样硬化性血栓性脑梗死之间的关系。方法对220例脑梗死患者和220例健康者进行研究。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法测定所有研究对象血标本的CETP TaqIB基因多态性,通过对脑梗死组和对照组的CETP TaqIB基因多态性比较,对比分析。结果脑梗死组B1B1、B1B2、B2B2基因型比例分别是59.09%、32.73%、8.18%,对照组分别为47.27%、39.09%、13.64%,两者比较差异有统计学意义。B1、B2等位基因在脑梗死组的频率分别为75.45%、24.55%,在对照组为66.36%、33.64%,两者差异也有统计学意义。结论胆固醇酯转运蛋白TaqIB基因多态性可能与动脉粥样硬化性血栓性脑梗死的发生有关。其中B1等位基因可能是易感基因,而B2基因可能是保护基因。     

肥胖儿童血浆胆固醇酯转运蛋白与血脂相关性

目的探讨单纯性肥胖儿童血浆胆固醇酯转运蛋白（CETP）与血脂的相关性及其与动脉粥样硬化(AS)的关系。方法用本室建立的酶联免疫测定法（ELISA）检测49例单纯性肥胖儿童血浆CETP水平。结果肥胖儿童与健康儿童相比,其血浆胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、载脂蛋白B（apoB）的浓度均显著升高（P<0.05）,存在较明显的脂质代谢紊乱;高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、载脂蛋白A1（apoA1）水平与健康儿童差异不显著（P>0.05）;CETP水平显著高于正常儿童（P<0.05）,且与LDL-C、apoB、TC/HDL-C、LDL-C/HDL-C、apoB/apoA1显著相关,而与HDL-C、apoA1则不相关。结论肥胖儿童存在脂蛋白代谢紊乱,且可能与其CETP水平增高有密切关系;过量脂肪摄入和缺乏体育锻炼也是其CETP水平增高的重要因素。     

血清胆固醇酯转运蛋白测定的临床应用

目的：了解血清胆固醇酯转运蛋白（CETP）对动脉粥样硬化的致病关联性。方法：以ELISA法检测血清中CETP的浓度，同时检测了血脂其他相关指标。进行统计学处理，进行正态性检验，相关分析，参考值的确定。结果：正态性检验呈正偏态分布。参考范围0．33－4．7mg/L。CETP与脂类其它指标无明显的相关性。结论：显示CETP浓度过高或过低或缺乏均与动脉粥样硬化的形成存在着明显的关联性，很具临床应用价值。     

动脉粥样硬化患者CETP基因两种主要突变型的检测

目的 :检测中国人群动脉粥样硬化 ( AS)患者和正常人的胆固醇酯转运蛋白 ( CETP)基因 15外显子 D44 2 G突变和 14内含子 I14A突变。　方法 :应用聚合酶链反应 -限制性内切酶片段长度多态性分析 ( PCR- RFL P)的方法检测 110例脑梗死患者和 87例心肌梗死患者胆固醇酯转运蛋白基因 D44 2 G突变和 I14A突变。首先用 PCR分别扩增包含人 CETP基因 15外显子第 15 0 6位碱基和 14内含子 1位碱基的基因序列 ,扩增产物分别用限制性内切酶 Msp I和 Nde I酶切 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳后分析结果。　结果 :110例脑梗死患者中发现 4例 D44 2 G杂合子 ,1例 I14A杂合子 ,突变率分别为 3.6 %、0 .91% ;87例心肌梗死患者中发现 3例 D44 2 G杂合子 ,1例 I14A杂合子 ,突变率分别为 3.45 %、1.0 5 % ;10 0例正常人中发现 4例 D44 2 G杂合子 ,1例 D44 2 G纯合子 ,1例 I14A杂合子 ,突变率分别为 5 %、1% ,两病例组与对照组比较差异不明显 ( P>0 .0 5 )。　结论 :正常个体和动脉粥样硬化患者CETP基因 D44 2 G突变和 I14A突变的发生率无差异     

胆固醇酯转运蛋白基因变异与血脂和动脉粥样硬化性心血管病的关系

胆固醇酯转运蛋白（CETP）介导血浆脂蛋白之间胆固醇酯、磷脂和三酰甘油的转运，直接关联各种脂蛋白分子的组成、大小和浓度，与动脉粥样硬化的发生发展密切相关。CETP基因存在着多种变异，影响CETP浓度和活性，引起机体的脂代谢异常。作者就有关CETP基因变异与脂类参数、心血管疾病发生风险性关系的研究进展作一综述。     

Ⅰ型登革病毒NS1蛋白特异性血清型单克隆抗体的制备及鉴定

目的研制Ⅰ型登革病毒(DEN1)非结构蛋白1(NS1)蛋白特异性单克隆抗体,鉴定其特异性。方法以具有良好免疫原性的DEN1重组NS1蛋白、DEN1全病毒及两者混合免疫共3种免疫方案,分别免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,杂交瘤细胞经间接ELISA法双筛I、FA和Western Blot进行mAbs的类型及亚类、特异性等鉴定。结果采用3种免疫方案免疫Balb/c小鼠,获得9株抗NS1蛋白的mAb,其亚类测定一株为IgG2a,另外8株为IgG1。这些mAbs与DEN1重组NS1蛋白和DEN1全病毒均结合,而且特异性好,仅1株杂交瘤分泌的单抗和其余3型DEN有交叉反应。结论成功获得了特异性针对DEN病毒NS1蛋白的特异性血清型mAb,将为进一步研究NS1蛋白的结构和功能及临床诊断试剂研发奠定基础。     

家兔胆固醇酯转移蛋白基因克隆及其真核表达载体的构建

目的: 克隆家兔胆固醇酯转移蛋白(CETP) 基因,构建其真核表达载体,研究CETP基因的结构与功能,为进一步研究CETP在动脉粥样硬化(As)中的作用机制提供参考。方法: 采用TRIzol提取家兔肝组织总RNA,采用RT-PCR 方法将RNA逆转录为cDNA,以cDNA为模板,用LA Taq酶进行PCR扩增,克隆出CETP基因,将CETP cDNA片段克隆至pMD19-T载体上,对重组的CETP- pMD19-T测序后,登录GenBank进行序列比对,利用nnPredict软件分析预测CETP的二级结构。将CETP
cDNA片段克隆至pcDNA3.1真核表达载体上,对重组质粒进行PCR及酶切鉴定。结果：测序及序列比对显示与M27486基因序列98%相符;家兔CETP基因cDNA全长1 659 bp,编码序列(CDs区)长1 494 bp,编码498个氨基酸。CETP的二级结构以α螺旋结构为主,相对分子质量为142119.4, pI为4.91。结论: 成功克隆了家兔CETP基因,并成功构建了其真核表达载体,明确了CETP的二级结构。     

细胞色素B-245α链及胆固醇酯转运蛋白基因多态性与广泛型侵袭性牙周炎易感性的关系

目的: 探讨细胞色素B-245α链(cytochrome B-245 alpha chain,CYBA)rs4673及胆固醇酯转运蛋白(cholesteryl ester transfer protein,CETP)rs12720922基因多态性与广泛型侵袭性牙周炎(generalized aggressive periodontitis,GAgP)易感性的关系,为筛选GAgP的高危人群提供遗传学依据。方法: 采用病例对照研究方法,纳入GAgP患者372例和健康对照者133名。采用基于基质辅助的激光解吸电离飞行时间质谱技术进行CYBA rs4673及CETP rs12720922基因型测定,不同基因型与GAgP易感性的关系采用多重逻辑回归模型分析,对于两个基因多态性位点在GAgP易感性方面的交互作用采用似然比检验进行分析,交互作用模型采用相乘模型。结果: 372例GAgP患者平均年龄(27.5±5.2)岁,包括男性152例,女性220例;133名健康对照者平均年龄(28.8±7.1)岁,包括男性 53例,女性 80例;两组人群年龄差异有统计学意义(P<0.05),性别构成比差异无统计学意义(P>0.05)。CYBA rs4673位点CT/TT基因型频率在GAgP组显著高于对照组[18.0%(66/366) vs. 10.6%(14/132),P<0.05];调整年龄、性别后,与CC基因型个体相比,CT/TT基因型个体患GAgP风险明显增高(OR=1.86,95%CI:1.01~3.45,P<0.05)。CETP rs12720922位点基因型(GG、AA/AG)频率在GAgP组和对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。CYBA rs4673和CETP rs12720922在GAgP易感性方面存在显著交互作用,与CYBA rs4673CC基因型及CETP rs12720922 AA/AG基因型个体相比,当两个位点分别为CT/TT基因型及GG基因型时,个体的GAgP患病风险显著增加(OR=3.25,95%CI:1.36~7.75,P<0.01)。结论: CYBA rs4673 CT/TT基因型与GAgP易感性相关,且与CETP rs12720922 GG基因型在GAgP易感性方面存在显著交互作用。