非诺贝特对肝脏和肌肉肉毒碱脂酰转移酶1基因表达及胰岛素敏感性的影响

目的 探讨非诺贝特对肝脏、肌肉肉毒碱脂酰转移酶1表达及胰岛素敏感性的影响.方法 将8周龄雄性SD大鼠分为3组:正常饲养组(NC,10只)、高脂饲养组(HF,10只)、高脂饲养+非诺贝特组(FF,12只).FF组在高脂饲养的基础上给予非诺贝特50 mg·kg-1·d-1剂量进行灌胃.饲养20周时测定血清、肝脏及肌肉组织中甘油三酯(TG)含量,3组均行正常血糖高胰岛素钳夹试验,并用实时聚合酶链反应方法分析肝脏和肌肉组织中肉毒碱脂酰转移酶1(CPT-1)mRNA表达的变化.结果 高脂饲养20周时,与NC组比较,HF组血清TG增加45.0%(P＜0.01),肝脏和肌肉TG含量增加2.14倍和10.64倍(P＜0.01);正常血糖高胰岛素钳夹试验表明,HF组葡萄糖的输注率(GIR)下降61%(P＜0.01),存在明显的胰岛素抵抗;肝脏CPT-1mRNA表达无明显变化(P＞0.05)、肌肉组织CPT-1mRNA表达减少71%(P＜0.01).非诺贝特干预后血TG、肝脏TG、肌肉TG较HF组分别下降70%、81%及82%,GIR增加2.52倍,肝脏、肌肉CPT-1 mRNA表达较高脂组分别增加1倍、1.05倍.结论 非诺贝特通过上调肝脏、肌肉CPT-1 mRNA表达促进脂肪酸氧化,在改善高脂饲养SD大鼠胰岛素敏感性中起重要作用.     

替米沙坦与非诺贝特对高脂饮食大鼠血清脂联素水平的影响

目的 研究替米沙坦与非诺贝特对高脂饮食大鼠血清脂联素(APN)水平的影响.方法 从60只健康雄性Wistar大鼠中随机抽出12只给予普通饲料喂养,其余48只给予高脂饲料喂养.6周后,再将高脂饲料喂养的48只大鼠随机分为4组,每组12只,其中1组继续给予高脂饲料喂养,其余3组在继续给予高脂饲料喂养同时分别给予替米沙坦、非诺贝特和2种药物联合干预.4周后,比较5组大鼠的血清APN水平.结果 高脂饮食组大鼠血清APN水平低于普通饮食组;替米沙坦和非诺贝特组均高于高脂饮食组;替米沙坦与非诺贝特联合干预组高于单独用药组.结论 替米沙坦与非诺贝特可以改善高脂饮食大鼠血清APN水平,且联合用药效果更明显.     

非诺贝特对胰岛素抵抗大鼠血清脂联素及肿瘤坏死因子-α的影响

目的：观察非诺贝特对胰岛素抵抗（IR）大鼠血清脂联素、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响,探讨非诺贝特改善IR的机制。方法：36只Wistar大鼠随机分为正常对照组（12只）和高脂组（24只）,分别给予普通饮食和高脂饮食;6周后高脂组大鼠分为非诺贝特组（F组）和高脂对照组（HF组）,每组12只,分别给予非诺贝特和蒸馏水灌胃4周。以高胰岛素-正常葡萄糖钳夹技术评价胰岛素敏感性;ELLSA法检测血清脂联素和TNF～仅的水平。结果：HF组大鼠血清脂联素水平明显降低（P〈0．05）,而TNF-α水平显著升高（P〈0．01）,胰岛素敏感性显著下降（P〈0．01）。非诺贝特治疗后,血清脂联素水平明显升高,而TNF-α水平明显下降（P〈0．05）,胰岛素敏感性显著增加（P〈0．01）。结论：非诺贝特增加IR大鼠血清脂联素水平而降低TNF-α水平,改善IR。     

运动干预对胰岛素抵抗大鼠血清纤溶酶原激活物抑制剂-1水平的影响

目的 观察高脂膳食诱导的胰岛素抵抗(IR)大鼠血清纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)水平的变化以及运动干预对血清PAI-1水平的影响,以初步探讨非药物疗法-运动改善胰岛素抵抗可能的作用机制.方法 雄性Wistar大鼠(4周龄,体重70～80 g)随机分为基础饲料组(NC,n=20)和高脂膳食组(HF,n=35).HF组经特殊高脂膳食喂养10周,建立胰岛素抵抗大鼠动物模型,同时NC组以基础饲料喂养.10周后HF组再随机分为高脂膳食运动组(HFE,n=15)和高脂膳食非运动组(HFNE,n=15),HFE组游泳运动干预4周.以正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术观察高脂膳食喂养大鼠运动前后胰岛素敏感性的变化.酶联免疫吸附法测血清PAI-1水平.提取大鼠肠系膜和附睾周围脂肪代表内脏脂肪,称重.结果 以SPSS 16.0统计软件分析.结果 葡萄糖钳夹实验结果:10周后HF组葡萄糖输注率(GIK60-120)明显低于NC组(P＜0.01),14周后HFE组GIR60-120明显高于HFNE组(P＜0.01),HFE组经运动后,GIR60-120明显升高,但仍低于NC组(P＜0.01).与NC组相比,HF组大鼠血清PAI-1水平显著升高(P＜0.01),且与内脏脂肪重量成正相关(r=0.656,P＜0.05).运动后HFE组血清PAI-1水平与HFNE组比较显著降低(P＜0.01).结论 高脂膳食可构建胰岛素抵抗大鼠模型,其机制与内脏脂肪增加有关.高脂膳食大鼠PAI-1水平升高并与内脏脂肪含量相关.一定负荷量运动后内脏脂肪减少,胰岛素抵抗改善,PAI-1水平降低,提示PAI-1可能参与胰岛素抵抗的发生和发展.     

运动对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠血清脂联素水平的影响

目的 观察运动对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗(IR)大鼠血清脂联素(APN)水平的影响.方法 健康Wistar大鼠随机分为基础饲料喂养(NC)组和高脂饲料喂养(HF)组,喂养10周将HF组大鼠随机分为高脂饲料运动(HFE)组和高脂饲料非运动(HFN)组,HFE组大鼠进行4周游泳运动干预,采用正常葡萄糖-高血浆胰岛素钳夹技术评估运动前后大鼠胰岛素敏感性.应用ELISA方法检测大鼠血清APN水平.结果 喂养10周后HF组大鼠平均葡萄糖输注率(GIR)明显低于NC组(P<0.01),血清APN水平较NC组下降(P<0.01);内脏脂肪百分比明显升高(P<0.01).运动4周后,HFE组大鼠GIR较HFN组明显升高(P<0.01),HFE组大鼠血清APN水平较HFN组大鼠升高(P<0.05);内脏脂肪百分比较HFN组明显下降(P<0.01).大鼠血清APN水平与内脏脂肪百分比呈负相关(r=-0.646,P=0.000).结论 运动可提高IR大鼠血清APN水平,提高胰岛素敏感性.     

吡格列酮和非诺贝特对高脂饲养大鼠脂联素与胰岛素抵抗的影响

目的探讨吡格列酮、非诺贝特及两者联合应用对高脂饲养大鼠脂联素表达与胰岛素抵抗(IR)的影响。方法将75只SD大鼠随机分为普通饮食组(NC组)15只,高脂饮食组(高脂组)60只。高脂组随机分为非诺贝特组(FF组)、吡格列酮组(PIO组)、联合组(FF-PIO组)和高脂对照组(HF组),各15只。分别测定体重(BW)、血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)等指标。采用Westernblot方法对各组大鼠腹部皮下脂肪中脂联素蛋白水平进行检测。结果HF组的体重、FFA、TG、FPG、FINS显著高于NC组,皮下脂肪中脂联素蛋白表达明显低于NC组(P<0.01)。与HF组比较,FF组的体重减轻、FFA、TG、TCH、FPG、FINS降低(P<0.01),皮下脂肪中脂联素增加,但差异无显著性(P>0.05);PIO组FFA、FPG、FINS降低(P<0.01),皮下脂肪中脂联素增加(P<0.05);FF-PIO组的体重、FFA、TG、TCH、FPG、FINS降低(P<0.05或P<0.01),皮下脂肪中脂联素增加(P<0.01)。结论吡格列酮、非诺贝特及联合应用可以一定程度地减轻肥胖对大鼠皮下脂肪中脂联素蛋白表达的抑制作用,改善肥胖引起的IR。     

非诺贝特对高脂诱导肥胖SD大鼠Visfatin蛋白表达的影响

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-α(PARα)激动剂非诺贝特对SD大鼠visfatin蛋白表达的影响.方法 45只雄性SD大鼠适应性喂养1周后随机分为3组:普食组(NC组)、高脂组(HF组)、非诺贝特组(FF组).NC组喂以普通饲料,其余两组给予高脂饮食.喂养12周后,FF组以非诺贝特30 mg/(kg·d)灌胃治疗4周,空腹取血进行相关代谢指标测定,并检测腹部皮下脂肪、附睾脂肪和骨骼肌组织中visfatin蛋白表达.结果HF组大鼠体重(BW)、血清visfatin、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、游离脂肪酸(FFA)和甘油三脂(TG)明显高于NC组(P<0.05),非诺贝特能减少BW、下调血清visfatin表达(P<0.05),改善高脂血症和高胰岛素血症.Visfatin在附睾脂肪组织中表达显著高于皮下脂肪组织和肌肉组织,非诺贝特下调附睾脂肪组织visfatin表达.相关分析显示血清visfatin与FFA、TG、FBG呈正相关(P<0.05).结论 PPAR-α激动剂非诺贝特具有改善高脂饮食诱导的脂质异常、改善胰岛素抵抗以及下调visfatin作用.     

非诺贝特对糖尿病大鼠脂联素及内皮细胞功能的影响

目的:观察非诺贝特对糖尿病(DM)大鼠血脂联素和脂联素基因的表达及内皮细胞功能的干预作用.方法:采用小剂量链脲佐菌素(STZ,25 mg/kg)和高脂饮食诱导的方法建立DM大鼠模型.DM大鼠20只随机分为两组:DM (DM)组10只和DM非诺贝特(DF)组10只,正常Wistar大鼠10只为正常对照(NC)组.DM组及DF组大鼠给予高脂喂养,NC组大鼠给予正常饮食,3组大鼠每日摄取的热量相等,同时DF组大鼠给予非诺贝特灌服.8周后,腹主动脉取血测定空腹血糖(FBG)、游离脂肪酸(FFA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、脂联素和可溶性血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1),并计算低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C);取肾周脂肪组织RT-PCR技术半定量分析脂联素基因表达.结果:与NC组相比,DM组FPG、FFA、TC、TG、LDL-C、TNF-α和sVCAM-明显增多(P＜0.05～P＜0.01),血HDL-C、脂联素和脂肪组织内的脂联素基因表达下降(P＜0.01).与DM组相比,DF组的血FFA、TG 、FBG、LDL-C、TNF-α和sVCAM-1水平下降(P＜0.05),同时血HDL-C、脂联素和脂肪组织内的脂联素基因表达显著升高(P＜0.01).结论:非诺贝特治疗可能通过改善脂联素基因的表达和血脂联素水平起到保护内皮细胞的作用.     

胰岛素抵抗和2型糖尿病大鼠内皮依赖性舒张功能的变化

目的 观察胰岛素抵抗(IR)和2型糖尿病大鼠胸主动脉内皮依赖性舒张功能和一氧化氮(NO)的变化,探讨IR和高血糖状态下内皮功能障碍的发生机制.方法 4～6周龄雄性SD大鼠高糖高脂喂养6周,建立IR模型(IR组),再从中取20只予小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型(DM组),并用正常葡萄糖高胰岛素钳夹技术的葡萄糖输注率(GIR)评价IR.观察大鼠离体主动脉对乙酰胆碱依赖性血管舒张功能和NO含量的变化,同时检测空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)和胆固醇(TC)水平.结果 IR组和DM组体重、FINS、TG和TC均显著高于正常对照组(NC组)(P＜O.01),DM组FPG显著高于NC组和IR组(P＜O.01);IR组和DM组的GIR均显著低于NC组(P＜0.01),但IR组和DM组GIR无显著差异.IR和DM组大鼠胸主动脉对乙酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张功能和NO含量均显著低于NC组(P＜0.05和P＜0.01),且DM组上述指标又低于IR组(P＜0.05).大鼠主动脉对乙酰胆碱诱导的最大舒张反应与FPG、TG、TC和FINS呈显著负相关(r-0.637,-0.622,-0.663,-O.645,均P＜0.01).结论 IR和2型糖尿病大鼠主动脉内皮依赖性舒张功能和NO水平显著下降,且DM组比IR组下降更显著,表明高血糖和IR是内皮功能障碍的重要影响因素.     

不同药物对高脂饮食诱导肥胖大鼠体重、体脂及空腹血清Ghrelin水平等的影响

目的：探讨西布曲明、非诺贝特、二甲双胍及托吡酯对高脂饮食诱导的肥胖雄性Wistar大鼠体重、体脂、血糖、血脂、胰岛素及空腹血清Ghrelin水平的影响。方法：将35只雄性高脂饮食诱导的肥胖大鼠按照体重随机分为五组,在继续高脂饲料喂养的基础上分别给予西布曲明（10mg/kg）、非诺贝特（83.4mg/kg）、二甲双胍（400mg/kg）、托吡酯（53.6mg/kg）4种药物干预以及空白干预,8周后处死大鼠,测量体重、体脂重量,取血检测血脂、血糖、胰岛素和Ghrelin。结果：非诺贝特和托吡酯均可显著减少肥胖大鼠的摄食量（P均＜0.01）和体重（P＜0.01, P＜0.05）,二甲双胍和西布曲明在对食欲没有显著影响的情况下也能减重（P＜0.05, P＜0.01）;另外,西布曲明和非诺贝特可以显著减少体脂含量（P＜0.05, P＜0.01）。各组大鼠的血脂、血糖、胰岛素和空腹血清Ghrelin均无统计学差异（P＞0.05）。结论：西布曲明、非诺贝特、二甲双胍及托吡酯均可较好地控制高脂饮食肥胖大鼠的体重,但对血清Ghrelin水平均无显著影响;其中西布曲明及非诺贝特还可以显著降低肥胖大鼠的脂肪含量。     

高脂饮食喂养大鼠脂肪组织GRP78mRNA的表达及意义

目的 通过观察高脂喂养的胰岛素抵抗大鼠内脏脂肪组织中GRP78mRNA的表达,探讨其在胰岛素抵抗发病机制中的意义.方法 30只雄性Wistar大鼠随机分为正常饮食组（NC组）和高脂饮食组（HF组）,每组15只.喂养10周后,应用高胰岛素-正常血糖钳夹实验技术评估胰岛素抵抗模型的建立.采用实时荧光定量PCR（Real time PCR）法检测脂肪组织GRP78mRNA的表达.同时检测血清胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、测定血糖（BG）、胰岛素（INS）,测定各组大鼠内脏脂肪的重量与体重的比值.结果 （1）喂养10周后HF组的葡萄搪输注率（GIR）明显低于NC组（P〈0.01）,HF组胰岛素明显高于NC组（P〈0.05）;（2）HF组大鼠内脏脂肪组织中GRP78mRNA的表达明显增高,与NC组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;（3）10周末,HF组大鼠甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、及内脏脂肪相对含量均明显升高（P〈0.01）.结论 高脂喂养10周大鼠胰岛素抵抗模型建立成功,高脂饮食可诱导内脏脂肪组织GRP78mRNA表达增强.     

白藜芦醇对胰岛素抵抗大鼠肝脏的影响

目的：研究白藜芦醇对胰岛素抵抗大鼠肝脏的影响。方法：将30只SD雄性大鼠随机分为标准饮食组（NC组）、高脂饮食组（HF组）和白藜芦醇治疗组（HR组）,每组各10只。对照组采用标准饲料饮食,另两组予高脂饮食,白藜芦醇组从第8周开始给予白藜芦醇灌胃。16周后行高胰岛素-正常葡萄糖钳夹试验,结束后将大鼠处死,观察大鼠胰岛素抵抗情况以及白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-a（TNF—α）的表达情况。结果：NC组和HF组大鼠饲养16周后,HF组大鼠的血糖和胰岛素水平较Nc组大鼠明显升高,而葡萄糖输注率（GIR）明显降低（P〈0．05）;3组大鼠血糖、胰岛素含量以及IL-6和TNF—α的免疫组化结果具有明显差异（P〈0．05）,且水平表现出HF组〉HR组〉NC组的特点。结论：白藜芦醇可有效降低胰岛素抵抗大鼠的血糖和胰岛素水平,其机制可能是通过调节其IL-6和TNF—α水平所致。     

坎地沙坦改善高脂饮食大鼠胰岛素抵抗的效应

目的 研究血管紧张索Ⅱ受体1拮抗剂(ARB)--坎地沙坦改善高脂饮食诱导大鼠胰岛素抵抗的效应及其可能机制.方法 45只雄性Wistar大鼠随机分为普通饲料组(NC组,15只),高脂饲料组(HF组,15只)和高脂饲料坎地沙坦药物组(HF+C组,15只).HF+C组每天灌胃坎地沙坦西酯8 mg/kg,其他两组分别给予等量生理盐水.治疗4周后测定血清生化、胰岛素,进行口服葡萄糖耐量和高胰岛素-正常葡萄糖钳夹实验,评估坎地沙坦对胰岛素敏感性的影响.并用免疫组化法检测肝脏和脂肪组织过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)的表达.结果 HF组大鼠体重、肝脏、附睾及肾周脂肪重量均明显高于NC和HF+C组(均P<0.01),空腹血糖差异无统计学意义(P>0.05),但HF+c组葡萄糖负荷后2 h血糖明显低于HF组[(6.3±0.5)mmol/L vs(7.3±1.2)mmol/L,P<0.01].钳夹结果显示HF+C组葡萄糖输入率明显高于HF组[(22±5)mmoL/L vs(14±4)mmol/L,P<0.01].HF+C组肝脏和脂肪PPAγ蛋白表达水平明显高于HF组.结论 坎地沙坦可明显改善高脂饮食大鼠的胰岛素抵抗,肝脏和脂肪组织PPARγ的高表达.     

大剂量抗氧化剂对高脂饲养大鼠胰岛β细胞分泌功能的影响及机制

目的:探讨大剂量抗氧化剂-N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-l-cysteine,NAC)对高脂饲养大鼠胰岛β细胞分泌功能的影响及可能机制。方法:将59只8周龄SD大鼠随机分为正常饲料组(NC组)、高脂饲料组(HF组)和高脂 NAC组(NAC组)。饲养20周,(1)测血浆及胰腺组织丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平;(2)正常血糖高胰岛素钳夹实验,评价外周组织胰岛素抵抗程度;(3)胰岛细胞表面灌注实验,评价离体胰岛β细胞动态分泌功能;(4)实时荧光定量PCR方法比较各组大鼠胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)和葡萄糖转运子-2(Glut-2)mRNA表达的变化。结果:(1)HF组血浆及胰腺MDA水平明显高于NC组,GSH水平低于NC组,NAC可以改善以上变化;(2)HF组葡萄糖输注率(GIR)比NC组降低(P<0.01),用NAC后GIR明显改善(P<0.01);HF组葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)功能下降,用NAC后可逆转上述变化;(3)HF组胰岛细胞IRS-1、IRS-2、Glut-2mRNA表达降低42.3%、28.1%、22.9%(P均<0.05);NAC组胰岛细胞IRS-1、IRS-2、Glut-2 mRNA表达与HF组相比增加40.2%、30.2%,19.1%(P均<0.05)。结论:大剂量抗氧化干预治疗能改善胰岛细胞胰岛素信号传导,逆转高脂饲养导致的大鼠胰岛细胞分泌功能紊乱,其机制可能与NAC纠正机体氧化及抗氧化失衡有关。     

胰岛素抵抗大鼠脂肪组织chemerin mRNA的表达和意义

 目的 探讨胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中脂肪因子chemerin mRNA的表达情况,探讨其与胰岛素抵抗之间的关系及意义。 方法 采用高脂饲料喂养建立胰岛素抵抗大鼠模型,将30只雄性SD大鼠随机分为正常饮食组（NC,n=15）和高脂饮食组（HF,n=15）,喂养10周后,以大鼠清醒状态下正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术进行评估,处死后取肾周脂肪组织,应用Real-time PCR方法检测大鼠脂肪组织中chemerin mRNA的表达水平。结果 (1)与NC组比较,HF组60～120 min的平均葡萄糖输注率（GIR60～120）明显降低[(13.87±1.45) mg·kg-1·min-1 vs (24.10±2.87) mg·kg-1·min-1,P<0.05]。(2)与NC组比较,HF组大鼠脂肪组织中chemerin mRNA的表达明显升高[(1.86±1.02) vs (0.92±0.32),P<0.01]。结论 胰岛素抵抗大鼠脂肪组织chemerin mRNA升高,提示脂肪因子chemerin可能参与胰岛素抵抗的发生。     

腺苷酸活化蛋白激酶与LKB1在肥胖大鼠脂肪组织中的表达及其对糖脂代谢的影响

目的:探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)与LKB1在肥胖大鼠脂肪组织的表达及其对糖脂代谢的影响。方法:将30只6周龄雄性S-D大鼠随机分为普通饮食组(NC组)和高脂饮食组(HF组),各15只,分别予普通饲料喂养和高脂饲料喂养。喂养16周后,HF组大鼠体重高于NC组20%者为成功建立模型。所有大鼠过夜禁食后,麻醉状态下测量体重(BW),取静脉血测定血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)。处死大鼠后,采用Western blot法测定各组大鼠骨骼肌组织中AMPKα、磷酸化AMPK(P-AMPKα)和磷酸化LKB1蛋白(P-LKB1)的表达。计算AMPK活性。结果:与NC组比较,HF组大鼠BW、FFA、TG、FPG、FINS均升高(P<0.05~P<0.01),脂联素水平降低(P<0.05),骨骼肌组织中P-AMPKα和P-LKB1蛋白表达降低,AMPK活性降低(P<0.05)。结论:高脂饮食诱导大鼠营养性肥胖,降低LKB1和AMPK的活性,从而导致TG和TCH的合成增加,血糖升高,形成胰岛素抵抗。     

Relationship between islet beta cell dysfunction and gene expression of uncoupling protein-2 and possible mechanism thereof

OBJECTIVE: To study the effects of high fat diet on the functions of islet beta cells and the role of uncoupling protein-2 (UCP2) therein and possible mechanism. METHODS: Forty SD rats were randomly divided into two equal groups: high-fat-(HF) diet group, fed with HF diet for 20 weeks, and normal diet control (NC) group, fed with normal diet. At the end of the twentieth week blood samples were collected from the heart to determine the serum fasting blood glucose (FBG) and fasting insulin (FINS), and plasma nitrotyrosine, malondialdehyde (MDA), and glutamylcysteinylglycine (GSH), indicators of oxidative stress. Glucose infusion rate (GIR) was measured using euglycemic hyperinsulinemic clamp test to evaluate the peripheral insulin resistance. Pancreatic islets were isolated and collected. Islet perfusion was conducted to evaluate the insulin secretion in the islet beta cells. Real-time PCR was used to detect the expression of insulin receptor substrate-1 (IRS-1), IRS-2, and uncoupling protein 2 (UCP2) genes in the islet. Immunohistochemistry was used to detect the protein expression of IRS-1 and IRS-2. RESULTS: (1) The concentrations of plasma nitrotyrosine and MDA of the HF group were both significantly higher than those of the NC group (both P < 0.05). However, the plasma GSH of the HF group was significantly lower than that of the NC group (P < 0.01). (2) The blood glucose of both groups became stable since 60 min after the experiment and the GIR of the HF group was (5.25 +/- 1.2) mg x min(-1) x kg(-1), significantly lower r than that of the NC group [(13.6 +/- 1l.7) mg x min(-1) x kg(-1), P < 0.01). (3) The peak of glucose-stimulated insulin secretion (GSIS) of the HF group was significantly lower than that of the NC group; and the GSIS peak increase In comparison with the NC group. (4) In comparison with the NC group, the mRNA expression levels of IRS-1 and IRS-2 genes of the HF group were significantly lower, by 42.3% and 28.1% respectively (both P < 0.05), and the expression of UCP2 was significantly higher, by 32.5% (P < 0.05). (5) Compared with the NC group, the protein expression levels of IRS-1 and IRS-2 in the islets of the HF group were lower, by 26.3% and 11.2% respectively, however not significantly (both P > 0.05). (6) There was a significantly negative correlation between the UCP2 and IRS-1/IRS-2 gene expression in islet beta cells in the HF group (r = -0.621 and r = -0.436, both P < 0.05). CONCLUSION: High-fat-diet impairs the expression of insulin signal transduction molecules and the function of islet beta cells that may be correlated with overexpression of UCP2. The basic insulin secretion of HF group was significantly higher than that of the NC group; but the glucose-stimulated insulin secretion (GSIS) peak decreased in comparison with the NC group. Compared with the NC group, the protein expression levels of IRS-1 and IRS-2 in the islets of the HF group were lower, by 26.3% (P < 0.05) and 11.2% (P > 0.05) respectively.     

解偶联蛋白2基因表达与胰岛β细胞分泌功能的关系及机制

目的 观察长期高脂饮食对大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌功能的影响,探讨解偶联蛋白2(UCP2)及相关的氧化应激在其中的作用及机制.方法 8周龄SD大鼠随机分为正常饲料组(NC组,20只)和高脂饲料组(HF组,20只).饲养20周检测以下指标:(1)血浆硝基酪氨酸,丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平;(2)正常血糖高胰岛素钳夹试验,评价外周组织胰岛素抵抗程度;(3)胰岛细胞表面灌注试验,评价离体胰岛β细胞动态分泌功能;(4)实时荧光定量PCR方法比较两组大鼠胰岛细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)以及UCP2mRNA表达的变化.(5)免疫组织化学染色及图像分析检测IRS-1,IRS-2在两组大鼠胰岛中的表达.结果 (1)HF组血浆硝基酪氨酸(0.17±0.01)μmol/L和MDA(22±5)nmol/L水平高于NC组(0.14±0.02)μmol/L,(13±3)nmol/L,(P均＜0.05),GSH水平(103±9)mg/ml明显低于NC组(142±9)mg/l,(P＜0.01);(2)HF组葡萄糖输注率(GIR)较Nc组明显降低(P＜0.01);HF组葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)功能明显下降(P＜0.01);(3)HF组胰岛细胞IRS-1及IRS-2mRNA表达分别降低42.3%、28.1%,UCP2表达增高32.5%(P均＜0.05).(4)HF组胰岛IRS-1和IRS-2的表达较对照组分别降低26.3%(P＜0.05)和11.2%(P＞0.05).(5)UCP2与胰岛细胞IRS-1 mRNA表达呈负相关(r=-0.621,P＜0.05);且与IRS-2mRNA表达也呈负相关(r=-0.416,P＜0.05).结论 长期高脂饲养能导致大鼠胰岛细胞胰岛素信号分子表达下降,β细胞胰岛素分泌功能受损,具体机制推测与UCP2相关的氧化应激增强有关.