临床感染患者分离的肠球菌属耐药性及耐药基因的研究

目的研究分析临床感染患者分离的肠球菌属细菌耐药性及耐药基因。方法对临床分离出的72株肠球菌属进行菌株鉴定、药敏试验和氨基糖苷类[aac（6’）／aph（2”）、aph（3’）-Ⅲ、ant（6）-I]、大环内酯类（ermB）、四环素类（tetM）、糖肽类耐药相关基因（vanA、vanB）和I类整合子（IntI）检测。结果72株肠球菌属对抗菌药物耐药率分别为青霉素（41．67％）、高浓度庆大霉素（86．11％）、高浓度链霉素（88．88％）、红霉素（83．33％）、四环素（52．78％）、呋喃妥因（16．67％）、左氧氟沙星（27．78％）、万古霉素（O）；72株肠球菌属共检出aac（6’）／aph（2”）基因60株，aph（3’）-Ⅲ基因44株，ant（6）-I基因56株，ermB基因52株，tetM基因38株，Int I基因32株，未检出vanA和vanB基因。结论肠球菌属对临床常用的抗菌药物皆不同程度存在耐药，尚未发现耐万古霉素肠球菌，临床医生应重视肠球菌属所致感染的诊断与治疗，合理应用抗菌药物，避免耐药菌株造成的医院感染暴发流行。     

肠球菌属耐药性与耐药基因的比较研究

目的研究分析临床感染患者分离的肠球菌属细菌耐药性及耐药基因,为临床治疗提供参考依据。方法收集2012年医院分离的383株肠球菌属进行菌株鉴定和敏感试验,并对284株多药耐药菌株进行耐药分析及基因检测,数据采用SPSS 17.0软件进行统计分析。结果 383株肠球菌属中屎肠球菌和粪肠球菌位居前两位,分别占59.5%和34.2%;284株多药耐药菌株中阳性基因TEM、aac(6′)/aph(2″)、aph(3′)-Ⅲ、ant(6)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ、tetM、ermB,检出率依次为77.5%、62.3%、26.1%、13.4%、36.6%、31.3%、66.5%,粪肠球菌和屎肠球菌耐药基因阳性率不同,而同一种细菌其耐药表型与耐药基因型一致。结论临床分离的肠球菌属多药耐药性严重,携带抗菌药物相关耐药基因是导致菌株对抗菌药物产生耐药的重要原因,因此加强对细菌耐药基因的检测,对肠球菌属的感染治疗具有重要的意义。     

肠球菌属产酶耐药基因研究

目的为了解肠球菌属产酶耐药基因存在状况. 方法 20株肠球菌属进行了β-内酰胺酶TEM基因、氨基糖苷类修饰酶aac(6′)/aph(2″)和aph(3′)-Ⅲ基因和红霉素甲基化酶ermB基因检测. 结果 20株肠球菌属中有9株表型为青霉素/阿莫西林耐药并均检出TEM基因;12株对高浓度庆大霉素耐药并均检出aac(6′)/aph(2＂)和(或)aph(3′)-Ⅲ基因;19株耐红霉素肠球菌中,12株检出ermB基因;肠球菌中产β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶、红霉素甲基化酶的基因检出率均>50%. 结论肠球菌属耐药率已较高,且多数耐药菌已同时获得3～4个耐药基因.     

肠球菌属耐药基因检测

目的了解临床分离的肠球菌属抗菌药物耐药基因存在状况。方法采用聚合酶链反应(PCR)检测7种耐药相关基因。结果 20株粪肠球菌中,tetM基因阳性为40.0%,ermB基因为60.0%,aac(6′)/aph(2′)为75.0%,ant(6)-Ⅰ为50.0%,TEM为5.0%,aph(3′)-Ⅲ为50.0%;20株屎肠球菌tetM基因阳性为40.0%,ermB为65.0%,aac(6′)/aph(2′)为90.0%,ant(6)-Ⅰ为70.0%,TEM为25.0%,aph(3′)-Ⅲ为70.0%。结论临床分离的肠球菌属耐药相关基因携带率高,肠球菌属对多种抗菌药物耐药率高,注意消毒隔离。     

宁夏地区临床分离肠球菌属对高浓度庆大霉素耐药基因的研究

目的研究分析医院2007-2009年临床分离耐高浓度庆大霉素肠球菌的耐药性及耐药基因流行分布。方法采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,PCR方法检测aac(6′-)Ie-aph(2″-)Ia、aph(2″-)Ib、aph(2″-)Ic、aph(2″-)Id、aph(3′-)IIIa基因。结果 383株肠球菌属中以屎肠球菌和粪肠球菌最多见,分别占47.0%和38.6%,其中耐高浓度庆大霉素屎肠球菌和粪肠球菌分别为79.3%和44.6%;耐药基因检测显示,aac(6′-)Ie-aph(2′-)Ia基因的阳性率为62.8%,其中143株耐高浓度庆大霉素屎肠球菌中129株含有aac(6′-)Ie-aph(2″-)Ia基因,66株耐高浓度庆大霉素粪肠球菌均含有aac(6′)-Ie-aph(2″-)Ia基因,未检测到aac(6′-)Ie-aph(2″)-Ib、aac(6′-)Ie-aph(2″-)Ic和aac(6′-)Ie-aph(2″-)Id基因。结论 aac(6′)-Ie-aph(2″-)Ia基因是医院临床分离耐高浓度庆大霉素肠球菌的惟一耐药基因,监测肠球菌属对高浓度氨基糖苷类抗菌药物的耐药性及检测高浓度庆大霉素耐药基因,为临床治疗肠球菌属感染提供依据。     

肠球菌多重耐药性及耐药基因的研究

目的:研究北京妇产医院临床感染患者分离的肠球菌属耐药情况,并对耐药基因进行检测。方法:临床分离出50株肠球菌进行菌株鉴定,采用KB法做药敏试验,PCR检测氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类及糖肽类相关基因。结果:50株肠球菌中,共检出aac(6')/aph(2')基因16株,aph(3')-Ⅲ基因46株a,nt(6)-Ⅰ基因31株t,etM基因15株,ermB基因42株,未检出vanA和vanB基因。结论:肠球菌对临床常用的抗生素已经存在多重耐药,临床医生必须重视肠球菌所致感染的治疗,合理使用抗生素,避免耐药菌株造成医院感染的暴发流行。     

儿童肠球菌耐药性分析和部分耐药基因检测

【目的】了解儿童肠球菌感染抗生素耐药性状况,检测肠球菌部分耐药基因。【方法】采用Kirby-Bauer纸片扩散法进行药敏试验,聚合酶链反应(PCR)的方法分析25株粪肠球菌和屎肠球菌中,β-内酰胺类耐药相关基因(TEM)、氨基糖苷类抗生素耐药相关基因(氨基糖苷类修饰酶基因)(aac(6’)/aph(2")、aph(2")、aph(3")-Ⅲ、ant(6)-Ⅰ基因)、万古霉素耐药相关基因(VanA、VanB、VanC)、耐喹诺酮类耐药相关基因(GyrA、ParC)和耐药外排EmeB基因。【结果】26株肠球菌全部对万古霉素敏感,粪肠球菌对青霉素类抗生素敏感性高,对其他抗生素高度耐药,屎肠球菌对除万古霉素以外的所有临床常用抗菌药物显示高水平耐药。25例粪肠球菌和屎肠球菌共检出各种耐药基因57个,未检出耐万古霉素基因,屎肠球菌耐药基因检出率高于粪肠球菌检出率。【结论】儿科肠球菌感染主要为粪肠球菌和屎肠球菌,除对万古霉素高度敏感外,对常用抗生素均产生了不同程度的耐药性。肠球菌具有多重耐药基因;相关耐药基因是导致肠球菌对抗生素产生耐药的重要原因。     

148例儿童肠球菌性尿路感染临床特点与耐药性分析

目的 分析儿童肠球菌性尿路感染的临床特点,了解其病原菌的分布及耐药性,为临床预防与治疗儿童肠球菌属感染提供依据.方法 对住院的肠球菌性尿路感染148例患儿临床资料进行回顾性分析.结果 病原菌以屎肠球菌和粪肠球菌为主,两者对抗菌药物均有比较高的耐药性,屎肠球菌对各种抗菌药物的耐药率明显高于粪肠球菌；屎肠球菌检出耐青霉素菌株68株,对青霉素耐药率为79.1％；检出对呋喃妥因、万古霉素、利奈唑胺耐药菌株分别为4、4、2株,耐药率分别为4.7％、4.7％、2.3％；多药耐药菌株检出率85.7％；粪肠球菌检出耐青霉素菌株10株,耐药率为1 6.7％；检出对呋喃妥因、利奈唑胺耐药菌各1株,耐药率为1.7％；未检出耐万古霉素粪肠球菌；粪肠球菌多药耐药菌株检出率67.2％；婴幼儿、肾脏疾病以及过度使用抗菌药物及免疫抑制剂是医院感染、主要易患因素.结论 肠球菌属是导致尿路感染的较常见致病菌,临床表现无明显特异性,耐万古霉素及耐利奈唑胺肠球菌属有增加趋势,多药耐药现象严重.     

肝癌患者腹水肠球菌属感染及耐药研究

目的 了解肝癌患者腹水肠球菌属感染现状及其耐药状况,指导临床医师合理选择抗菌药物.方法 收集2007-2012年医院住院的肝癌患者腹水培养检出的157株肠球菌属,分析其耐药性.结果 对住院的475例肝癌患者进行腹水培养,检出肠球菌属157株,其中粪肠球菌72株占45.86％,屎肠球菌47株占29.94％,铅黄肠球菌27株占17.20％,鹑鸡肠球菌9株占5.73％;肠球菌属对四环素、利福平耐药率均＞75.0％,而对万古霉素、利奈唑胺及替考拉宁的敏感率均＞90.0％,另外高水平氨基糖苷类耐药比例近50.0％;屎肠球菌仍旧是耐药性最严重的肠球菌属.结论 肝癌患者腹水肠球菌属感染以粪肠球菌和屎肠球菌为主,铅黄肠球菌等较为少见的肠球菌的比例正在逐渐增加,多药耐药和高耐药现象相当严重.     

122株肠球菌属的临床分布及其耐药性分析

目的 了解肠球菌属感染的临床分布及耐药现状,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 统计2006年1月-2007年12月从各类临床标本分离的肠球菌属资料,并用K-B法测定菌株对13种抗菌药物的敏感性.结果 共分离122株肠球菌属,其中粪肠球菌76株,占62.3%,尿肠球菌29株,占23.8%,其他肠球菌17株,占13.9%;检出菌株数最多的标本足阴道分泌物、尿液、引流液、宫颈拭子和咽拭子,不同标奉检出的菌种类别不尽相同;药敏结果表明,万古霉素和替考拉宁仍有极好的敏感性,利福平、红霉素、环丙沙星和四环素是耐药率最高的抗菌药物,屎肠球菌的总体耐药率高于粪肠球菌.结论 肠球菌属的检出率和耐药率都呈上升趋势,应引起临床的重视,对于疑似有肠球菌属感染的患者时,应及时做细菌培养,并根据药敏结果选择用药,可提高疗效.     

合肥市生猪肉沙门菌分离株耐药表型与耐药基因的相关性研究

目的:了解生猪肉中沙门菌分离株耐药表型与耐药基因的携带关系。方法:采用K-B纸片法对生猪肉中26株沙门菌分离株进行22种抗菌药物敏感试验,并应用PCR技术对沙门菌分离株进行耐药基因检测。结果:26株沙门菌总耐药率为61.54%(16/26),其中14株(53.85%)对至少3种以上抗菌药物耐药,属于多重耐药株,强力霉素-四环素-氯霉素-卡那霉素是主要多重耐药谱;3类抗菌药物耐药基因以tetB、Flor和aph(3)-IIa与aadB基因分别检出最高。结论:沙门菌耐药表型测定结果与耐药基因检测结果一致,耐药及多重耐药性与耐药基因的携带相关。     

Distribution of aminoglycoside resistance genes in recent clinical isolates of Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium and Enterococcus avium

Aminoglycoside modifying enzymes (AMEs) are major factors which confer aminoglycoside resistance on bacteria. Distribution of genes encoding seven AMEs was investigated by multiplex PCR for 279 recent clinical isolates of enterococci derived from a university hospital in Japan. The aac(6')-aph(2"), which is related to high level gentamicin resistance, was detected at higher frequency in Enterococcus faecalis (42.5%) than in Enterococcus faecium (4.3%). Almost half of E. faecalis and E. faecium isolates possessed ant(6)-Ia and aph(3')-IIIa. The profile of AME gene(s) detected most frequently in individual strains of E. faecalis was aac(6')aph(2") + ant(6)-Ia + aph(3')-IIIa, and isolates with this profile showed high level resistance to both gentamicin and streptomycin. In contrast, AME gene profiles of aac(6')-Ii+ ant(6)-Ia+aph(3')-IIIa, followed by aac(6')-Ii alone, were predominant in E. faecium. Only one AME gene profile of ant(6)-Ia+aph(3')-IIIa was found in Enterococcus avium. The ant(4')-Ia and ant(9)-Ia, which have been known to be distributed mostly among Staphylococcus aureus strains, were detected in a few enterococcal strains. An AME gene aph(2")-Ic was not detected in any isolates of the three enterococcal species. These findings indicated a variety of distribution profiles of AME genes among enterococci in our study site.     

胆道感染患者的病原菌分布及耐药性分析

目的 了解胆道感染患者的病原菌分布及耐药性特点,指导合理用药.方法 送检标本275例,菌种分离培养和药物敏感试验执行《全国临床检验操作规程》(第3版)标准;分析仪器采用全自动微生物(VITEK-32法国)分析仪鉴定,用K-B法进行药物敏感试验,操作规程执行《全国临床检验操作规程》,结果判断执行美国临床实验室标准化研究所(CLSI)标准.结果 送检标本275份,检出病原菌183株,检出率为66.55％;其中革兰阴性菌95株,占51.91％,革兰阳性菌63株,占34.43％,真菌12株,占6.56％;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对亚胺培南/西司他丁的耐药率为0,粪肠球菌、屎肠球菌、葡萄球菌属对喹诺酮类耐药率较低.结论 胆道系统感染的病原菌分布广泛且变化较大,有些菌株产生多药耐药性;建议临床医师重视监测病原菌菌群动态分布和药敏变化,用药敏结果指导临床合理用药,才能取得良好效果.     

2014-2015年烟台市副溶血性弧菌临床分离菌株的生物学特征及分子分型研究

目的 了解烟台市副溶血性弧菌临床分离株的耐药特性、毒力基因分布情况以及分子分型特征。方法 对2014-2015年的副溶血性弧菌临床分离菌株按照美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的微量肉汤稀释法进行14种抗生素的药敏试验;通过实时荧光PCR检测tlh、trh、tdh、orf8 4种毒力基因;采用脉冲场凝胶电泳对菌株基因组DNA进行分子分型。结果 (1)20株副溶血性弧菌仅对头孢唑啉耐药或处于耐受敏感之间,耐药率为5.0%,对其他13种抗生素100.0%敏感。(2)20株副溶血性弧菌均携带特异性基因tlh,其他3种毒力基因trh、tdh、orf8的阳性率分别为30.0%(6/20)、100.0%(20/20)、65.0%(13/20),毒力基因组成以orf8-tdh型为主,占60.0%(12/20)。(3)20株菌被限制性内切酶NotⅠ切出6个PFGE types(PT),带型相似度60.7%～100.0%,根据PT相似系数大于80.0%的菌株,可以分成A群和B群2个聚类群。结论 烟台市副溶血性弧菌临床分离菌株耐药较轻,毒力基因tdh、orf8的携带率较高,PFGE带型聚类群内相似度较高且存在优势明显的分子型别。     

2019年内蒙古包头市细菌耐药监测

目的 监测2019年包头市11所三级医院所有临床分离菌株的构成及对常用抗菌药物的耐药情况,为临床科室选择抗菌药物提供可靠依据。方法 对上述医院的临床分离菌采用纸片扩散法（KB法）或全自动药敏仪法进行药敏试验,按CLSI 2018年版 M - 100标准判读药敏结果,采用WHONET 2019软件进行数据分析。结果 2019年共收集上述医院非重复临床分离菌8 430株,其中革兰阳性菌2 278株,占比27.0%,革兰阴性菌6 152株,占比73.0%。葡萄球菌属中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA）检出率分别为65.5%和12.8%,未检出利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁耐药菌株。粪肠球菌（EFA）对多数抗菌药物的耐药率均低于屎肠球菌（EFM）,EFA中检出2株利奈唑胺耐药菌株,EFM中检出1株替考拉宁耐药菌株、2株万古霉素耐药菌株。产超广谱β- 内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌（ECO）和ESBLs（+）克雷伯菌属菌株的检出率分别为46.0%和16.8%。耐碳青霉烯大肠埃希菌（CREC）和耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌（CRKP） 的检出率分别为0.5%和1.1%,CREC对左旋氧氟沙星的耐药率为100%,远高于CRKP的29.4%。结论 本地区ECO对喹诺酮类抗菌药物耐药率较高,应继续做好耐药监测工作,加强抗菌药物的合理使用,预防耐药菌的产生与传播。     

金黄色葡萄球菌耐药相关基因及SCCmec分型研究

摘要:目的　对郑州地区分离的金黄色葡萄球菌进行耐药性研究,了解其耐药基因携带情况,为临床抗感染治疗提供依据。方法　对2013年7月-2014年7月郑州某三甲医院分离的86株金黄色葡萄球菌,测定25种药物敏感性,应用普通PCR测定10种耐药基因,同时采用多重PCR方法对28株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin Resistant S. Aureus,MRSA）进行葡萄球菌染色体mec基因盒（Staphyloccoccal Cassette Chromosome mec,SCCmec）分型。结果　菌株对抗菌药物呈多重耐药,其中青霉素耐药率最高,为95.3%。有11种抗生素的耐药率大于50%;10种耐药相关基因检测结果显示acc（6'）/aph（2"）、aph（3'）-III、ant（4',4"）、ermA、ermB、ermC、msrA、tetM、tetK阳性率分别为100%、72.1%、86.0%、95.3%、79.1%、93.0%、58.1%、97.7%、81.4%,未检测出blaTEM;28株MRSA中14株为SCCmecⅢ型,8株为SCCmecⅠ型,4株为SCCmecⅣE型,2株未能分型。结论　郑州地区分离的金黄色葡萄球菌呈多重耐药,携带较多耐药基因,本地区MRSA以SCCmecⅢ型为主。     

攀枝花地区老年患者肠球菌尿路感染的细菌分布及耐药性分析

目的 调查攀枝花地区老年尿路感染患者的肠球菌分类、临床分布及耐药情况,为攀西地区合理选用抗生素治疗老年肠球菌尿路感染提供依据。方法 对老年尿路感染患者尿培养检出的216株肠球菌行回顾性分析,应用Whonet 5. 6软件及SPSS 15.0统计软件进行数据分析。结果 216株肠球菌主要来源于泌尿外科（40.28%）和重症监护病房（28.70%）。肠球菌属主要为粪肠球菌136株（62.96%）和屎肠球菌75株（34.72%）;体外药敏显示肠球菌对青霉素、氨苄青霉素、红霉素、左氧氟沙星、高浓度庆大霉素及高浓度链霉素的总耐药率均超过＞60%,对青霉素及氨苄青霉素的耐药率逐年上升;对呋喃妥因、万古霉素及利奈唑胺耐药率低,分别为17.13%、1.39%和0.00%。共检出3株屎肠球菌对万古霉素耐药。结论 攀西地区老年患者肠球菌尿路感染的细菌耐药率高,患者主要分布于泌尿外科和重症监护病房。肠球菌仅对呋喃妥因、万古霉素及利奈唑胺敏感,临床应加强抗生素合理用药。     

环丙沙星体外诱导肺炎链球菌耐药机制研究

目的探讨环丙沙星体外诱导肺炎链球菌耐药的分子机制。方法10株临床分离的肺炎链球菌体外用不同浓度梯度环丙沙星逐级诱导成为耐药株,检测诱导前后菌株对环丙沙星的MICs,PCR扩增诱导前后菌株parC/parE和gyrA/gyrB基因喹诺酮耐药决定区(QRDR)、测序并与GenBank公布序列比对。结果8株临床菌株成功诱导为耐药株,诱导后MICs是诱导前16倍以上,诱导后2株只发现parC/parE基因的QRDR有突变其耐药水平较低MICs分别为8μg/ml和16μg/ml,6株parC/parE和gyrA/gyrB基因的QRDR同时存在点突变耐药水平较高,MICs分别为64μg/ml和128μg/ml。结论逐步增加药物浓度可以诱导肺炎链球菌parC/parE和/或gyrA/gyrB基因的QRDR点突变导致对环丙沙星耐药。     

2018—2021年北京市沙门菌血清型及喹诺酮类耐药表型和基因型分析

目的 分析2018—2021年北京市肠道门诊哨点医院分离到的沙门菌血清型及喹诺酮类药物耐药表型和耐药基因的流行情况。方法 采用玻片凝集法鉴定血清型;微量肉汤稀释法测定药物敏感性;全基因组测序数据通过与MLST和ResFinder数据库比对,查询ST型别和耐药基因。结果 228株沙门菌共检出42种血清型,51种ST型。其中肯塔基沙门菌、肠炎沙门菌和黄金海岸沙门菌等9种血清型比较常见。77株沙门菌（33.8%）对萘啶酸耐药;40株（17.5%）对环丙沙星和左氧氟沙星耐药;38株（16.7%）对吉米沙星耐药。不同血清型对喹诺酮类药物的耐药性不同。228株沙门菌共筛选出5种喹诺酮耐药基因:qnrS（23.7%）、aac(6’)-Ib-cr（8.3%）、qnrB（6.6%）、OqxAB（1.3%）和qepA（0.4%）;喹诺酮耐药决定区存在gyrA和parC的7种氨基酸突变:以parC:T57S（70.2%）最常见,其次是gyrA:D87N（14.9%）、parC:S80I（14.5%）、gyrA:S83F（14.5%）、gyrA:D87Y（7.9%）、gyrA:D87G（5.3%）和gyrA:S83Y（1.8%）。在组合突变中,以parC:S80I-gyrA:D87N-gyrA:S83F三突变,并伴随parC:T57S最多。耐药基因和突变位点在9种常见血清型中的检出率存在差异。结论 北京市沙门菌血清型及ST型种类繁多,携带喹诺酮耐药基因以qnrS、aac(6’)-Ib-cr和 qnrB为主,存在gyrA和parC多个位点突变并协同作用。应持续监测血清型和耐药性,以指导临床有针对性合理用药。