地高辛标记的原位杂交法检测神经肽Y表达的条件优化

目的:优化用地高辛标记的原位杂交法检测小鼠海马结构中神经肽Y的表达.方法:用体外转录法获得地高辛标记的神经肽Y的反义和正义RNA探针.用kainic acid诱导小鼠脑组织中神经肽Y表达,2 h后牺牲小鼠,制备12μm厚的海马组织切片.然后比较不同pH值(7.5～9.5)的固定剂,不同的固定时间,不同的杂交前预处理,以及不同预杂交及杂交液对杂交信号的影响.结果:从pH 7.5～9.5,不同碱性固定液对杂交信号没有明显影响.30 min的固定时间足以获得满意的杂交结果.用蛋白酶K部分消化切片或用TritonX-100打孔反而降低了杂交信号.40 mg/L Salmon sperm DNA或250 mg/L bakers yeast RNA可获得与Denhardt's杂交液相同的杂交信号.结论:通过优化,我们获得了一种简便而又有效的地高辛标记的原位杂交法,用于检测神经肽Y表达.     

灯盏花素对糖尿病大鼠心肌及神经肽Y水平的影响

目的:探讨灯盏花素对糖尿病大鼠心肌的干预作用及对神经肽Y(NPY)水平的影响? 方法: 建立T1DM大鼠模型,将成模后的成年Wister大鼠随机分为糖尿病模型组?胰岛素治疗组 ?灯盏花素低剂量干预组 ?灯盏花素高剂量干预组,另设正常对照组?观察血糖?体重?心脏重量指数?心系数,放免法测定NPY水平,常规 HE 染色观察心肌组织的形态学改变?结果:糖尿病大鼠心脏重量指数?心系数以及血浆?心肌组织内NPY水平显著升高,HE染色显示心肌细胞存在等多种病理改变?胰岛素治疗与灯盏花素干预后均能改善糖尿病大鼠心肌组织的病理变化,其中灯盏花素高剂量干预效果同胰岛素治疗组?在干预和治疗过程中血浆NPY水平降低,心肌组织NPY水平升高?结论:糖尿病大鼠血浆NPY水平增高,灯盏花素可以降低血浆NPY水平,改善糖尿病大鼠心功能?心肌细胞肥大现象,并可改善糖尿病大鼠的一般生理状况?     

神经肽Y在雌性大鼠尾壳核的分布

目的观察神经肽Y免疫反应阳性物质在成年雌性大鼠尾壳核及其周围区域的分布。方法采用亲合免疫组织化学SABC法。结果NPY免疫反应阳性神经元大量分布于尾壳核,NPY免疫反应阳性纤维分布稀疏。近侧脑室处可见阳性细胞存在于尾壳核室管膜下区域,其串珠状突起可伸入室管膜内;也有细胞出现在紧邻胼胝体处,其膨体突起可伸入胼胝体。结论NPY可能参与尾壳核多种功能的调节并通过脑-脑脊液神经体液回路发挥重要功能。     

雌激素对去势雌性大鼠下丘脑的神经肽Y神经元分布的影响

目的　观察雌激素对去势后雌性大鼠下丘脑区神经肽Y(NPY)免疫反应阳性神经元的影响。方法　采用免疫组织化学法 (SABC) ,在光学显微镜下对下丘脑视上核的NPY免疫反应阳性细胞进行形态学观察。结果　①正常雌性大鼠下丘脑区的NPY阳性神经元分布较广 ,以视上核反应较强 ,卵圆形细胞居多 ,密集成簇。②去势后雌性大鼠下丘脑视上核的NPY阳性神经元表达增多 ,胞内免疫反应产物着色增强。③去势后补充雌激素的大鼠下丘脑视上核的NPY阳性神经元比单纯去势组表达减少 ,着色略浅。结论　外源性雌激素对去势雌性大鼠下丘脑视上核的NPY阳性神经元的分布有影响。     

神经肽Y在杏仁中央核内对禁食大鼠摄食的调节方式

目的：观察神经肽Y（NPY）在杏仁中央核（CeA）内对禁食大鼠摄食的调节方式,并探讨其可能的作用机制。方法：选择雄性SD大鼠34只,将其中10只大鼠随机分为正常摄食组与禁食24 h组,每组5只,取大鼠脑组织,应用免疫组织化学方法检测大鼠CeA内NPY及其Y1受体的表达;剩余24只大鼠行CeA内套管植入术,术后12只大鼠随机分为2组,1组CeA内注射NPY,另1组CeA内注射生理盐水(对照1组),1、2及4 h后分别观察大鼠摄食量;另12只术后大鼠随机分为2组,1组CeA内注射Y1受体阻断剂,另1组CeA内注射生理盐水(对照2组),1、2 及4 h后分别观察大鼠摄食量。结果：与正常摄食组比较,禁食24 h组大鼠CeA内NPY表达显著增多（P<0.05）,其Y1受体表达显著减少（P<0.05）;与对照1组比较,大鼠CeA内注射NPY后1 h内摄食量明显增加（P<0.05）;与对照2组比较,大鼠CeA内注射NPY的Y1受体阻断剂后1 h内摄食量明显减少（P<0.05）。结论：NPY在 CeA内对禁食大鼠的摄食具有促进作用,其机制可能是通过Y1受体调节。     

神经肽Y和一氧化氮合酶阳性神经元在大鼠大脑皮质枕叶的分布及其衰老变化

目的：研究大鼠皮质枕叶神经肽Y（NPY）和一氧化氮合酶（NOS1）阳性神经元的分布及其衰老变化。方法：采用免疫组化SABC法,观察3个不同年龄组大鼠大脑皮质枕叶NPY和NOS1阳性神经元的分布及形态特征,并进行比较。结果：NPY和NOS1阳性细胞在皮质Ⅱ-Ⅳ层均有分布,两者都属于非锥体形神经元;比较3个年龄组两种阳性细胞的数量和截面积的变化,发现老年组与幼年组及中年组相比,两项指标都显著减少（P＜0.01)。结论：NPY和一氧化氮（NO）作为神经递质,可能与在脑皮质枕叶功能的调节有关;随着衰老这两种阳性神经元的变化可能影响NPY及NO发挥正常的生理功能。     

大鼠心脏中神经肽Y的Y1受体样免疫反应物质的定位

目的 为在细胞水平精确地确定神经肽Y（NPY）的Y1受体样免疫反应物质（-LI）在大鼠心脏中的分布。方法 用免疫组织化学方法对Y1受体-LI细胞进行了检测。结果 （1）一些心肌细胞含有Y1受体-LI,可见清晰的Y1受体免疫反应性（-Ir)条纹,此类细胞在心脏呈斑点状分布,接近外膜侧和室间隔的内膜侧分布较多,Y1受体-LI主要分布于心肌细胞膜、横小管膜和小泡上;（2）心脏内有Y1受体=LI的心内神经元,此类细胞有较长的突起呈离散分布,与Y1受体-LI心肌细胞或血管相邻,Y1受-LI神经元的外膜和胞质内有较强的Y1受体-LI,尤以其突起明显。结论 NPY对心脏作用的复杂性可能与Y1受体在心脏中多种细胞的广泛分布有关。     

Expression and significance of IL-6 mRNA and its protein in liver after injury in rats

Thereisagraduallyincreasedinterestoninterle'ukin--6(II---6)anditbecomesahotspotofresearchbecauseofitsrelationshipwithothercytokines,itsparticipationinthesynthesisofacutephaseproteinsanditseffectsontheearlydamagesoforgansinsystemicinjury['j.ThisstudywasdesignedtoobservethedistributionandcelllocalizationofII---6andIL--6mRNAinliverafterburninjury,endotoxemiaorthecombinationofthetwoinrats1andtheeffectsofII---6onthedevelopmentofliverdamageswereinvestigated.MATERIALSANDMETHODSOnehundreda…     

神经肽Y对成年大鼠睡眠的影响

目的 :探讨神经肽Y(NPY)与睡眠 -觉醒周期的关系。方法 :4 4只成年雌性SD大鼠 ,随机分为 6组 ,分别为侧脑室微量 (5 μl)注射NPY(1g/L)、α - 1受体阻断剂育亨宾 (30 μmol/L) ,育亨宾 +NPY ,α - 2受体阻断剂哌唑嗪 (30 μmol/L) ,哌唑嗪 +NPY及生理盐水 (对照组 )。采用多导描记技术观察大鼠在清醒状态下 ,统计给药后各组大鼠 6h的慢波睡眠 (SWS)、快眼动睡眠 (REMS)及总睡眠 (TS)时间。结果 :单独注射NPY可以促进大鼠的SWS ;先给予育亨宾再给予NPY ,大鼠SWS、REMS及TS时间较生理盐水对照组显著降低 (P <0 .0 1 )。单独给予育亨宾、哌唑嗪或哌唑嗪 +NPY ,对大鼠睡眠无明显影响。结论 :NPY具有一定的促眠作用 ,且与α- 2受体有关     

大鼠电休克后血浆神经肽Y与去甲肾上腺素含量的变化

目的　探讨血浆神经肽Y(NPY)和单胺类递质去甲肾上腺素 (NE)在癫痫发作过程中对心脏的影响及其发生机制。方法　动态检测电惊厥大鼠癫痫发作前、发作时及发作后的NPY和NE变化 ,并同时记录相应各个时段心电图。选 2 0只SD大鼠用电惊厥仪致痫动物。NPY采用放射免疫法测定 ,NE采用高效液相 -电化学法测定。用电镜观察心脏超微结构变化。结果　大鼠癫痫发作时血浆NPY和NE均有明显升高 (与惊厥前比较P <0 .0 1) ,而且这种状态持续约 1h以上。大鼠癫痫发作时ECG表现为以窄QRS复合波为特征的窦性心动过速。这种改变在惊厥发作停止后仍持续约 3min。部分大鼠ECG还出现一过性心脏停搏、ST段下降、T波倒置、Q -T延长等异常改变。电镜观察证实癫痫发作可引起心脏损害。结论　癫痫发作可导致心脏结构性的损害或心律失常的发生。NPY和NE的升高在癫痫发作致心脏的损害过程中起重要作用     

慢性肾衰竭患者血浆内皮素、神经肽Y的变化

目的探讨慢性肾衰竭(CRF)患者血浆内皮素(ET)、神经肽Y(NPY)的变化及其临床意义。方法采用放射免疫分析法测定55例CRF患者血浆ET、NPY的含量,30例健康者为对照组。结果CRF患者血浆ET、NPY含量明显高于健康组,且尿毒症期明显高于氮质血症期。结论CRF患者体内血浆ET、NPY水平与CRF的发展过程密切相关。     

P~(16) mRNA及其蛋白在胃癌中的表达和临床意义

目的　探讨P16mRNA及其蛋白产物在胃癌、癌旁及正常胃粘膜中的表达和临床意义。方法　采用原位杂交和免疫组化技术检测 33例胃癌、17例癌旁和 13例正常胃粘膜中P16mRNA及蛋白的表达。结果　胃癌P16mRNA和蛋白阳性表达率均高于正常胃粘膜 (P <0 .0 5 )。伴淋巴结转移胃癌阳性细胞密度明显高于未转移者 (P <0 .0 5 )。P16mRNA及其蛋白表达与胃癌的其它病理学特征无相关性 ,二者在不同胃组织中表达呈正相关。结论　P16基因异常可能参与胃癌的发生与发展 ,并有促进胃肿瘤转移的效应 ,可作为胃癌预后的一个参考指标。     

糖皮质激素对肥胖大鼠和普通大鼠下丘脑神经肽Y mRNA的影响

目的:研究糖皮质激素对肥胖大鼠和普通大鼠下丘脑中神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)mRNA表达的影响。方法:高脂饲料构建肥胖大鼠模型,肥胖大鼠和普通大鼠分别随机分为生理盐水组、小剂量组和大剂量组,分别连续20天腹腔注射生理盐水0.2 ml/100 g、琥珀酸氢化可的松5 mg/kg和15 mg/kg。并观察其摄食变化,用实时荧光定量PCR方法,检测大鼠下丘脑中NPY mRNA的表达水平。结果:应用大剂量糖皮质激素后普通大鼠和肥胖大鼠的摄食量低于盐水组(P<0.05);应用大剂量糖皮质激素后普通大鼠和肥胖大鼠的下丘脑中NPY mRNA的表达水平低于盐水组(P<0.01);应用小剂量糖皮质激素后普通大鼠的下丘脑中NPY mRNA的表达水平低于盐水组(P<0.01)。结论:大剂量糖皮质激素使普通大鼠和肥胖大鼠食欲下降,抑制肥胖大鼠和普通大鼠NPY mRNA的表达;小剂量糖皮质激素抑制普通大鼠NPY mRNA的表达,NPY在食欲调节中起重要作用。     

雌性大鼠生殖器官神经肽Y免疫反应神经纤维的分布

本实验采用亲合免疫组化SABC法对雌性大鼠动情间期神经肽Y（NPY）的分布进行了研究。在生殖管道NPY阳性纤维呈串珠状，弯曲走行，其分布在子宫体、子宫颈和阴道部位较多，而在子宫角和卵巢部位中毒。在各生死管道，阳性纤维走行与肌束方向一致，在血管周则交织成网。提示NPY可能与排卵及平滑肌运行调节有关，是调节生殖活动的重要因子。     

肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭营养不良大鼠下丘脑神经肽Y mRNA及原阿片黑皮素mRNA表达的影响

目的 观察肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭 (CRF) 营养不良大鼠下丘脑神经肽 Y (NPY) mRNA 及原阿片黑皮素 (POMC) mRNA 的表达及其营养状态的影响。方法 采用含 0.5% 腺嘌呤及 4% 酪蛋白饲料联合喂养的方法制作 CRF 营养不良大鼠模型,观察其营养不良发生时间,符合 CRF 营养不良模型的随机分为模型组、肾衰养真胶囊组和开同组。治疗4周后,检测下丘脑 NPY mRNA 和 POMC mRNA 表达水平。结果 肾衰养真胶囊组大鼠营养状况明显改善,下丘脑的 NPY mRNA 表达上调及 POMC mRNA 表达下调。结论 肾衰养真胶囊可改善 CRF 营养不良大鼠的营养状况,其机制可能是通过上调下丘脑 NPY mRNA 表达,下调下丘脑 POMC mRNA 表达,从而促进大鼠摄食。     

舒郁散对慢性应激抑郁大鼠神经肽及海马神经元5-HT 表达的影响

目的观察中药舒郁散对慢性应激抑郁大鼠神经肽(neuropeptide Y,NPY)及海马5-HT表达的影响。方法 50只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、百忧解组、舒郁散小剂量组、舒郁散大剂量组;对大鼠进行21 d的应激刺激建立慢性应激抑郁大鼠模型,采用open-field方法观察各组处理前、后2 min内大鼠行走路线及格子交叉点数的变化,了解大鼠行为的改变,用竞争酶联免疫分析法测定各组大鼠血浆、海马NPY的含量变化,采用免疫组织化学染色,观察各组大鼠额叶皮质、海马5-HT的表达。结果模型组大鼠血浆、海马NPY含量明显下降,与对照组比较,P<0.05;舒郁散大剂量组、百忧解组治疗后大鼠血浆、海马NPY含量较模型组显著升高,与模型组比较,P<0.05。免疫组化结果显示:舒郁散、百忧解组大鼠额叶皮层、海马区5-HT免疫反应阳性神经元数目明显增加,平均光密度明显增加,与模型组比较差异有显著性。结论舒郁散能显著提高慢性应激抑郁大鼠血浆、海马NPY含量,明显增加大鼠额叶皮层、海马区5-HT免疫反应阳性神经元数目,上述作用与其剂量呈正相关。     

匹罗卡品致痫大鼠海马神经肽Y中间神经元数目变化及其轴突出芽

目的:探讨神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)中间神经元在颞叶癫痫的发生和自我修复中的作用.方法:建立匹罗卡品致痫模型,应用免疫组织化学技术动态观察大鼠海马NPY中间神经元的数目变化及其轴突出芽.结果:实验组大鼠腹腔注射氯化锂-匹罗卡品后,癫痫持续状态(status epilepticus, SE)诱发成功率为92.9%,死亡率19.2%.免疫组织化学结果显示,实验组大鼠海马门区NPY中间神经元数目在SE后下降,至7 d时降至最低(P<0.01),慢性期开始恢复,SE后60 d时NPY神经元数目与对照组相比仍有减少(P<0.05);CA区域除SE后7 d CA3区NPY神经元数目稍减少外(P<0.05),其余时间点均无明显变化(P>0.05);SE后30 d齿状回分子层可见增多的NPY阳性纤维.结论:NPY中间神经元在不同部位不同时段对颞叶癫痫所致损伤的敏感性不同,NPY中间神经元的缺失在颞叶癫痫发生中起重要作用,NPY中间神经元的轴突出芽在颞叶癫痫的自我修复中起作用.     

恶性淋巴瘤组织中内皮细胞特异性分子-1mRNA及其蛋白的表达

目的探讨恶性淋巴瘤组织中内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)mRNA和蛋白的表达及其与临床病理特征的关系.方法采用免疫组化S-P法、原位杂交方法对58例淋巴瘤组织和10例正常淋巴结的ESM-1蛋白及mRNA进行检测.结果 ESM-1蛋白及 mRNA 在淋巴瘤组织中均有表达,在血管中较少表达.结论 ESM-1分子可能参与了淋巴瘤的发生发展过程.     

神经肽Y标记神经元在大鼠脑桥的分布

目的:观察了神经肽Y（NPY）样神经元在大鼠脑桥的分布,为探讨脑桥NPY样神经元的功能提供实验形态学依据。方法:免疫组织化学方法（PAP法）。结果:在脑桥可见到前庭神经上核、耳蜗神经腹侧核及脑桥尾侧网状核NPY样免疫反应胞体。前庭神经上核的NPY样胞体较多且密集,细胞大小均匀,呈梭形或椭圆形,有明显突起;耳蜗神经腹侧核内的NPY样胞体呈大小均匀分布,圆形且较小,突起不明显;脑桥尾侧网状核内的NPY样胞体分布较稀疏,且大小不一,呈菱形或梭形,有明显较长的突起。结论:NPY样神经元不仅广泛存在于端脑和下丘脑,在脑桥也同样有着广泛的分布。     

神经肽Y对抑郁症模型大鼠大脑皮质NE和5-HT表达的影响

目的探讨神经肽Y(NPY)对抑郁症模型大鼠大脑皮质去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)表达的影响。方法将30只SD大鼠随机分成3组:NPY干预组,生理盐水干预组和空白对照组;对NPY干预组和生理盐水干预组大鼠进行强迫游泳制模,模型成功后给予不同干预;干预24h后行为检测;之后快速处死,取脑固定,空白对照组不予任何处理,采用免疫组织化学方法检测大鼠大脑皮质NE和5-HT的表达。结果(1)NPY干预组和生理盐水干预组大脑皮质5-HT和NE的表达没有显著性差异(P>0.05),但二者均显著低于空白对照组表达(P<0.01);(2)NPY在干预后24h显示出抗抑郁样作用即大鼠强迫游泳不动时间开始缩短。结论NPY的抗抑郁样作用可能是通过调节大脑皮质NE和5-HT的表达而起作用的。