气相色谱检样新的前处理试剂

<正> 气相色谱(Gas Chromatography)分析简称GC,须将难气化的化合物变为易气化又稳定的衍生物,方可进行。衍生物化是体内成分等进行GC分析时不可缺少的前处理步骤。GC前处理试剂随着应用GC分析的化合物种类不断增加而增多。本文仅对近年来几个较新的GC前处理试剂分为两类加以扼要叙述,有关特长也一并作简单介绍。一、有机硅试剂有机硅化物作为官能团保护试剂或作为合成试剂参加有机反应,开始于1960年的后半年。短短十几年的时间,抛开官能团保护的目的不计,仅用于宫能团转换和碳-碳键的生成,据报导已有1000种以上的新方法和有机硅试剂被应用。此外,还用于复杂天然有机合成的关键反应,以期减少化合物的合成难度,提高收率,降低反应工艺的条件等。     

GC-MS分析布托啡诺的衍生化方法

布托啡诺是用于人和动物止痛的一种阿片类药物。该药物的GC行为差,因此,需要衍生化使它转换成易挥发的化合物,使极性基团被掩蔽,而改善GC分析结果。本文论述了既经济又可实施的布托啡诺硅烷化,使用N,O-双(三甲基硅烷基)-三氟乙酰胺(BSTFA)+1%三甲基氯硅烷(TMCS)和N-甲基-N-三甲基硅-三氟乙酰胺(MSTFA)作为衍生化试剂,在甲苯中3∶7(v/v)衍生化,并试验了在衍生化前,用甲苯稀释和蒸发对这些试剂的影响,选择了衍生化最佳温度及时间,采用GC-MS内标法测定布托啡诺。布托啡诺标准品:原始溶液为0.1%甲醇液,加入5～10ng布托啡诺;纳布啡(内…     

柱前衍生化RP-HPLC法分离苯乙醇胺类化合物对映体

目的以2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)为手性衍生化试剂,建立苯乙醇胺类化合物对映体RP-HPLC分离分析方法。方法采用RP-HPLC法。考察了衍生化反应中碱化试剂和衍生化试剂的浓度等反应条件对衍生化产率的影响,并考察流动相的组成和pH值等因素对生成的非对映异构体分离的影响。讨论了化合物的分子结构对手性衍生化及衍生后的非对映异构体色谱分离的影响。结果在三乙胺和GITC的浓度分别为10和5 mmol.L-1的乙腈溶液中,室温下反应20 min后,有5个苯乙醇胺化合物转化成相应的非对映异构体的硫脲衍生物。在色谱条件为:Diamonsil C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),30 mmol.L-1醋酸铵(pH6.0)-乙腈(体积比为50∶50)为流动相,检测波长254 nm,流速1.0 mL.min-1,室温下,5个苯乙醇胺化合物对映体衍生化后非对映异构体的分离度达到4以上。结论该方法可作为苯乙醇胺类化合物对映体分离的方法之一。     

高效液相层析法中的衍生化技术

高效液相层析法(HPLC)建立10年以来,紫外、萤光标记试剂已有显著的进展,很多化合物可以在紫外、萤光检测器中得到检测,从而使HPLC法的应用更加广泛。1977年前HPLC法中的衍生化技术已有报道。本文就1978～1980年上半年以来新发表的紫外、萤光试剂的衍生化进展,选出有代表性的例子作一介绍。由于篇幅所限,本文仅讨论柱前试剂,未涉及柱后试剂,因后者需要采用特殊装置,非一般试验室可以方便利用。     

超临界流体色谱法及其在药物分析中的应用

超临界流体色谱法(SFC)是同时具有GC和HPLC优点的新一代色谱法.它可以在较低温度下对遇热不稳定的和不挥发性的化合物进行高分辨的分离,克服了GC有时要作衍生化的缺点;同时SFC除了可采用HPLC常用的UV检测器外,还可以使用GC中的FID,MS,IR等通用检测器,大大提高分析的灵敏度和应用范围,明显优越于HPLC.本文在阐明SFC的基本原理之后,列举若干实例介绍80年代以来SFC在药物分析中的应用情况.     

高效液相色谱间接光度检测法及其应用现状

高效液相色谱间接光度检测(HPLC-IPD)法是在流动相中添加具有检测响应的探针试剂(检测剂、背景试剂)来完成响应低或无响应化合物分离检测的一种有效方法。与HPLC柱前、柱后衍生化技术相比，此法具有操作简便，灵敏度高和线性关系好等特点。     

衍生化HPLC/MS法测定有机羧酸物质的研究进展

利用高效液相色谱-质谱联用 (HPLC/MS) 法对体液中微量的羧酸化合物进行定量检测仍然是一个难题。近年的研究显示采用衍生化质谱增敏法成为解决这一问题的重要方法。本文综述了近年来应用此类方法测定微量羧酸物质的研究,并对研究中所采用的衍生化试剂和化学反应进行了总结。     

表面响应曲面法优化牛磺罗定衍生化条件的研究

目的:在单因素实验的基础上,利用表面响应曲面法(RSM)对HPLC-UV法测定牛磺罗定含量中的牛磺罗定衍生化条件进行优化。方法:以衍生化试剂不同的浓度、反应时间和反应温度为因子,以反应后衍生化产物的量(用峰面积表示)为响应因子,对衍生化条件进行优化。结果:最佳衍生化条件是反应温度为100℃,衍生化试剂浓度为20 g.L-1,反应时间为88 min。结论:本方法结果准确可靠,可应用于牛磺罗定的衍生化。     

衍生化GC法测定生物转化产品L-山梨糖及其中残余D-山梨醇的含量

设计了生物转化产品L-山梨糖及其中残余D-山梨醇的衍生化GC测定方法。以乙酸酐—吡啶(1∶1)为衍生化试剂对样品中残余D-山梨醇进行乙酰化GC测定,再以四氢硼钠为还原剂、乙酸酐为乙酰化试剂对样品中L-山梨糖进行还原乙酰化GC测定。结果表明,D-山梨醇及L-山梨糖分别在0.01999～2.999μg及4.00～24.00μg范围内呈线性。本法精密度及回收率均较好,可用于监测L-山梨糖生物转化终点及其成品中L-山梨糖及残余D-山梨醇的含量。     

利用Pirkle型手性固定相柱拆分对映体药物:用异氰酸-α萘酯作衍生化试剂拆分胺类、醇类药物

本文首次介绍了利用异氰酸-α萘酯(NI)作衍生化试剂,在Pirkle型DNBPG柱上对五种含胺基、醇基的药物对映体进行了拆分。其中拆分美西律(mexiletine)、氯胺酮(ketamine)、本芴醇(benflumelol)和苯丙醇(phenylpropanol)药物尚未见报道。结果表明,用异氰酸-α萘酯作衍生化试剂的方法,具体简便易行、分离度好、几乎没有衍生化带来的杂质、不需分离出未反应的异氰酸-α萘酯便可直接进行拆分实验等优点。可以预计,NI将可能成为一种很有发展前途的新衍生化试剂,而且为Pirkle型DNBPG柱开发了新的领域。     

一种新的异氰酸酯类手性衍生化试剂用于药物对映体高效液相色谱拆分性能的研究

在已报道的四十多种手性衍生化试剂中,异氰酸酯是应用研究最活跃的一类。目前,这类试剂只有(R)-(-)或(S)-( )-naphthylethyl isocyanate(NEIC)和(R)-( )或(S)-(-)-phenylethyl isocyanate(PEIC)两种。它们均由相应的手性伯胺化合物,经光气或氯甲基硅烷作用得到的。但光气是毒性极大的气体,在一般实验室条件下难以得到     

群勃龙及其人尿代谢物的GC/MSD分析

群勃龙(去甲雄三烯醇酮,trenbolone)在MsTFA,MBTFA,MO-MSTFA衍生化后形成的TMS醚式和TFA酯化产物,经GC/MSD分析,获得各自的特征图谱,讨论了有关的衍生化问题。群勃龙阳性尿样分析结果显示,其主要代谢产物是表群勃龙(epitrenbolone)和可能的羟基群勃龙(hydroxy-trenbolone),另有少量原型以及可能有去甲雄三烯二酮(triendione)存在。     

利用Pirkle型手性固定相柱拆分对映体药物:用异氰酸-α萘酯作衍生化试剂拆分胺类、醇类药物

本文首次介绍了利用异氰酸-α萘酯(NI)作衍生化试剂,在Pirkle型DNBPG柱上对五种含胺基、醇基的药物对映体进行了拆分。其中拆分美西律(mexiletine)、氯胺酮(ketamine)、本芴醇(benflumelol)和苯丙醇(phenylpropanol)药物尚未见报道。结果表明,用异氰酸-α萘酯作衍生化试剂的方法,具体简便易行、分离度好、几乎没有衍生化带来的杂质、不需分离出未反应的异氰酸-α萘酯便可直接进行拆分实验等优点。可以预计,NI将可能成为一种很有发展前途的新衍生化试剂,而且为Pirkle型DNBPG柱开发了新的领域。     

高效液相色谱柱前衍生技术在低浓度药物分析中的应用

围绕衍生化试剂2, 4-二硝基氟苯、酰氯、醛类、异硫氰酸苯酯和对溴苯甲酰甲基溴等, 总结柱前衍生处理方法、高效液相色谱(HPLC)的分析和方法的检测限, 阐明柱前衍生法在低浓度药物分析中的应用及其意义.     

电泳中介微分析法手性分离抗生素制剂中氨基酸的可行性探讨

目的 应用电泳中介微分析(EMMA)技术手性分离抗生素制剂中的氨基酸.方法 以邻苯二甲醛和非手性巯基试剂或手性巯基试剂为衍生化试剂,采用柱上衍生化EMMA技术,以手性毛细管区带电泳或非手性胶束电动色谱为分离手段,分别对抗生素制剂中的4种常用氨基酸进行全自动的在线手性分离.结果 采用新建立的柱上衍生化EMMA技术可手性分离精氨酸、门冬氨酸、谷氨酸和赖氨酸,抗生素或其衍生物均不干扰氨基酸衍生物的检测,分析快速,专属性强,成本低廉,自动化程度高.结论 该方法可应用于抗生素制剂中氨基酸的手性分离.     

用均匀设计法优化β-环糊精手性固定相的衍生化反应工艺条件

采用均匀设计法对衍生化β-环糊精(β-CD)键合固定相的合成条件进行优化,考察的主要因素包括衍生化试剂异氰酸苯酯的用量、反应时间及反应温度.衍生化后β-CD键合相的碳含量优化结果预测值和实测值分别为17.95%和18.10%.采用红外光谱、热重分析曲线对衍生化前后β-CD键合固定相进行表征,探讨了衍生化前后β-CD键合相的手性拆分能力.     

气-质联用结合衍生化法分析血浆中甲基苯丙胺和氯胺酮

目的:考察家兔血浆中甲基苯丙胺和氯胺酮同时衍生化后GC/MS检测分析结果。方法:血浆样品中加入内标物丙基解痉素(SKF525A)后碱化,乙醚萃取,三氟醋酸酐(TFA)衍生化,GC/MS全扫描定性、内标法和工作曲线法定量分析。结果:甲基苯丙胺和氯胺酮在血浆中的线性检测范围分别为0.010 0~10.0μg.mL·1和0.010 0~20.0μg.mL·1;方法回收率为95.26%~101.10%;日内及日间相对标准差均小于15%。结论:建立了衍生化后同时测定血浆中甲基苯丙胺及氯胺酮的GC/MS定性定量分析方法,该法简便、灵敏、重复性好,适用于甲基苯丙胺和氯胺酮混合滥用中毒案例的快速鉴定。     

高效液相色谱法测定氨碘肽滴眼液中5种氨基酸的含量

目的采用HPLC法测定氨碘肽滴眼液中丝氨酸(Ser)、甘氨酸(Gly)、组氨酸(His)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)的含量。方法采用Ocean-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A:乙腈-水(4∶1),流动相B:0.1 mol·L-1乙酸钠-乙腈(97:3);流速为1.0 mL·min-1;柱温:25℃;检测波长:254 nm;用异硫氰酸苯酯(PITC)作为柱前衍生化试剂,采用柱前衍生HPLC法进行分析。结果各种氨基酸能良好地分离,衍生化试剂对氨基酸分析无干扰;平均回收率在98%¹02%,RSD均<3%。结论该方法简便、准确、可靠,可用于氨碘肽滴眼液中氨基酸含量的检测。     

柱前衍生化高效液相色谱法分离分析奥美拉唑对映体

目的 建立柱前衍生化高效液相色谱法分离奥美拉唑对映体.方法 以(S)-(+)-樟脑磺酰氯为柱前手性衍生化试剂,衍生物在Diamonsil C18色谱柱上,以10 mmol·L-1醋酸铵(pH 7.5)-异丙醇(75:25,v/v)为流动相分离,流速为0.5 mL· min-1.结果 奥美拉唑衍生物可达到基线分离,分离度为1.72.结论 采用柱前衍生化高效液相色谱法,在普通C18色谱柱上分离奥分析美拉唑衍生物,为此类手性药物的分离分析提供一个新方法.     

高效液相色谱法测定L-缬氨酸甲酯盐酸盐中L-异亮氨酸甲酯盐酸盐

目的:采用衍生化为辅助手段,建立高效液相色谱法测定缬沙坦起始物料L-缬氨酸甲酯盐酸盐中杂质L-异亮氨酸甲酯盐酸盐含量的方法。方法:采用岛津VP-ODS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);以乙酸钠缓冲液(pH 7.2)-甲醇-乙腈(20∶45∶30)为流动相,流速为1.0 mL.min-1;检测波长为262 nm;柱温为40℃。采用9-芴基甲酰氯为衍生化试剂,考察衍生化试剂浓度,反应静置时间,超声时间等衍生化条件,确定衍生化的方法并进行方法学验证。结果:衍生化反应条件为:衍生化试剂浓度10 mg.mL-1,反应静置时间20 min,超声10 s。经方法学验证,L-异亮氨酸甲酯盐酸盐在15～75μg.mL-1范围内线性良好,其平均回收率为92.943%,RSD为4.965%,溶液在5 h内稳定性。结论:该方法简便、快速、耐受性好,符合有关物质方法学验证要求,可用于杂质L-异亮氨酸甲酯盐酸盐的含量测定。