脂联素通过LKB1途径激活腺苷酸活化蛋白激酶

目的 探讨脂联素是否通过LKB1途径激活骨骼肌及肝脏中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK).方法 将28只6周龄雄性Sprague-Dawley大鼠分为普通饮食组(NC组,n=15)和高脂饮食组(HF组,n=13).喂养16 周后,取空腹静脉血测定血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)及脂联素.采用Western印迹法测定各组大鼠骨骼肌及肝脏组织中AMPKα、磷酸化的AMPKcα和LKB1蛋白的表达.将原代培养的骨骼肌细胞及肝细胞分别予以脂联素和根赤壳菌素干预,免疫荧光技术测定各组细胞中AMPKα、磷酸化AMPKα和LKB1蛋白的表达.结果 与NC组比较,HF组大鼠体重、FFA、TG、FPG、FINS均升高(均P＜0.05),脂联素水平降低(P＜0.05).骨骼肌及肝组织巾AMPKα磷酸化和LKB1蛋白表达水平降低(均P＜0.05).原代培养大鼠骨骼肌细胞及肝细胞中脂联素显著增加AMPKα磷酸化及LKB1表达水平(均P＜0.05).加入根赤壳菌素表达明显降低(均P＜0.05).结论 脂联素在大鼠骨骼肌和肝脏组织可能通过LKB1途径激活AMPK.     

罗格列酮对老年胰岛素抵抗大鼠肝脏腺苷酸活化蛋白激酶α表达及活性的影响

目的 探讨罗格列酮(RGZ)对老年胰岛素抵抗(IR)大鼠肝脏脂肪酸代谢和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)α表达及活性的影响. 方法 22～24月龄雄性Wistar大鼠随机分为老年对照(OC)组和高脂喂养组.4周后高脂喂养组IR状态形成,再随机分为高脂(HF)组和RGZ干预(RGZ)组,RGZ组予RGZ 3mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,继续喂养4周.测定肝脏TG和AMPKα1、AMPKα2 mRNA表达,以及AMPKα1、AMPKα2、p-AMPKα蛋白表达. 结果 (1)HF组FPG、FIns、FFA、TC和TG高于OC组;而RGZ干预后这些指标均下降;葡萄糖输注率HF组低于OC组,RGZ组高于HF组(P<0.05或P<0.01).(2)肝脏TG HF组高于OC组,RGZ组低于HF组(P<0.01).(3)肝脏AMPKα1、AMPKα2mRNA表达和蛋白表达三组问无统计学差异(P>0.05);肝脏P-AMPKα蛋白表达HF组低于OC组,RGZ组高于HF组(P<0.05或P<0.01). 结论 高脂饮食导致老年大鼠肝脏脂肪酸代谢异常及IR;RGZ干预后AMPKα活性增加和肝脏脂质堆积减少,IR改善.     

桑叶总黄酮对2型糖尿病大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体α和腺苷酸活化蛋白激酶α2蛋白表达的影响

目的探讨桑叶总黄酮对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)α2蛋白表达的影响及机制。方法建立高脂饲料喂养且用链脲佐菌素诱导T2DM雄性Wistar大鼠模型,将模型大鼠随机分为5组:模型组、二甲双胍组(100 mg/kg灌胃)、桑叶总黄酮组(200,100,50 mg/kg灌胃),同时设立正常对照组。4 w后检测大鼠空腹血糖(FPG)、血清胰岛素(FINS)水平,Western印迹检测肝脏PPARα和AMPKα2蛋白表达。结果桑叶总黄酮能降低T2DM大鼠的FPG、FINS水平,Western印迹显示模型组大鼠肝脏PPARα和AMPKα2蛋白表达较正常对照组均明显下降(P<0.01)。经桑叶总黄酮干预治疗后,AMPKα2蛋白表达较模型组显著增加(P<0.01),PPARα蛋白水平改变不明显(P>0.05)。结论桑叶总黄酮对T2DM大鼠有一定的治疗作用,可能与其增加大鼠肝脏AMPKα2蛋白表达有关。     

二甲双胍对高脂饲养大鼠肝脏脂肪变的干预作用

目的:探讨胰岛素抵抗在非酒精性脂肪性肝发病中的作用及机制,观察二甲双胍对高脂饲养大鼠肝脏脂肪变的干预效果.方法:21只(?) Wistar大鼠分为3组,每组7只,普通饮食组(SD),高脂饮食组(HF),二甲双胍组(HF- Met)在高脂饮食的同时给予二甲双胍,共8wk.8 wk末处死大鼠,称量附睾脂肪,计算肝指数,生化方法测定ALT、AST、TG、TC、FFA、SOD和MDA.放免法测定空腹胰岛素,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和ELISA法检测肝脏TNF-αmRNA和蛋白的表达,用葡萄糖输注率(GIR)来评价胰岛素敏感性,并观察肝组织病理变化.结果:与HF相比,HF-Met肝细胞脂肪变和小叶炎症明显减轻,肝指数、胰岛素、AST、ALT、TG、FFA显著下降(3.25±0.26 vs 4.29±0.12,33.37±8.34 vs 46.73±5.24,17.29±5.34 vs 43.48±6.21,4.10±2.47 vs 12.05±4.05,P<0.01;106.0±31.04 vs 141.37±24.87,48.31±16.11 vs 88.34±21.94,P<0.05)TNF-α的表达也显著下降,GIR增加(7.58±1.05 vs 6.31±1.28,P<0.05).结论:二甲双胍干预能明显改善高脂饲养大鼠的胰岛素抵抗,降低肝脏TG、FFA和TNF-α的表达,减轻肝脏脂肪变的程度,提示胰岛素增敏治疗可能是NAFLD防治的一种积极策略.     

越鞠丸对非酒精性脂肪肝病大鼠肝脏PPARα表达的影响

目的 观察越鞠丸对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物活化受体α(PPARα)表达的影响.方法 采用喂饲高脂饲料的方法复制NAFLD大鼠模型,实验分组为正常对照组、模型组、东宝肝泰对照组和越鞠丸高、低剂量组.提取肝脏总RNA,运用半定量RT-PCR方法观察各组大鼠肝脏PPARα mRNA的表达情况,同时测定各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)和肝组织匀浆TC、TG的含量,并做病理切片.结果 模型组大鼠PPARα mRNA的含量明显降低,血脂和肝脏脂质含量明显升高,肝脏呈明显脂肪变性,经药物治疗后,各治疗组大鼠肝脏PPARα mRNA表达明显增强,血脂和肝脏脂质含量显著降低,肝脂变程度明显减轻.结论 越鞠丸能增强NAFLD大鼠肝脏PPARα mRNA的表达,可能是其治疗NAFLD的分子机制之一.     

二甲双胍对2型糖尿病大鼠脂肪组织中AMPKα2表达的影响

目的观察二甲双胍对2型糖尿病大鼠脂肪组织中腺苷酸活化蛋白激酶α2（AMPKα2）表达及对糖、脂代谢的影响,探讨其改善血糖、血脂的可能机制。方法高脂饮食伴一次性腹腔注射链脲佐菌素的方法制备2型糖尿病大鼠模型,造模成功后随机分为模型组和治疗组,后者给予盐酸二甲双胍灌胃治疗。测定大鼠治疗前后的体质量,实验末测定各组大鼠肾周及睾周脂肪重量,并检测各组空腹血糖（FBG）、胰岛素（FINS）、TC、TG、HDL、LDL水平,计算大鼠脂体比、胰岛素敏感指数（ISI）。同时以半定量RT-PCR检测脂肪组织AMPKα2 mRNA的表达。结果与模型组比较,治疗组脂肪组织AMPKα2的表达及血清FINS、HDL、ISI增高,FBG、TC、TG、LDL降低,P均〈0.05。结论二甲双胍可能通过上调2型糖尿病大鼠脂肪组织AMPKα2表达,调节机体糖、脂代谢,改善胰岛素敏感性。     

二甲双胍对高脂喂养诱导小鼠脂肪肝和肝脏内质网应激的干预作用

目的 观察高脂饮食诱导小鼠肝脏脂质沉积及对肝脏内质网应激的影响,探讨二甲双胍对其的干预作用.方法 雄性C57BL/J6小鼠分为健康对照组、高脂组和二甲双胍组,每组14～15只.健康对照组小鼠常规喂养.高脂组及二甲双胍组均给予高脂饮食喂养,二甲双胍组于高脂喂养4周后给予二甲双胍干预,喂养8周后对小鼠行葡萄糖耐量实验,处死小鼠后测定各组肝脏TG含量,并测定内质网应激相关因子的基因和蛋白表达水平.组间数据进行单因素方差分析.结果 与健康对照组相比,高脂组的葡萄糖耐量曲线下面积(AUC)、肝组织TG均显著增加[998±87比1409±106,(10.05±0.29) umol/g比(27.11±4.76) μmol/g],而二甲双胍组的葡萄糖耐量和肝脏脂质沉积均显著改善,AUC和TG均显著低于高脂组[1178±90和(15.12±2.11) μmol/g],三组间比较差异均有统计学意义(F=55.328和89.212,P均＜0.01).与健康对照组相比,高脂组的肝脏内质网伴侣分子葡萄糖调节蛋白94(GRP94)的mRNA表达水平显著增加,反映内质网应激的磷酸化真核翻译起始因子2α(eIF2α)的蛋白表达水平(磷酸化eIF2α/总eIF2α)亦显著增加,而二甲双胍组GRP94 mRNA和eIF2α蛋白表达水平均显著低于高脂组,三组间比较差异均有统计学意义(F=84.002和137.321,P均＜0.05).结论 高脂饮食可引起小鼠肝脏脂质沉积,并伴肝细胞内质网应激;二甲双胍治疗可显著改善高脂饮食喂养小鼠的脂肪肝,其机制可能与二甲双胍改善肝脏内质网应激有关.     

二甲双胍对心力衰竭大鼠心功能的影响及其机制

目的 探讨二甲双胍对心力衰竭大鼠心功能的影响及其可能的作用机制.方法 选择成年Wistar大鼠67只,采取结扎冠状动脉前降支的方法建立心力衰竭模型,随机分为二甲双胍治疗组19只、AMPK激动剂(AIC-AR)治疗组20只、生理盐水对照组13只,同时设假手术组15只,分别给予相应的处理.4周后,观察各组左室射血分数(LVEF)、血流动力学指标、血浆BNP水平,并留取心肌组织检测p-AMPKαThr-172蛋白表达.结果 与生理盐水对照组比较,二甲双胍治疗组、AICAR治疗组LVEF、左室收缩压和左室压力最大上升和下降速率均显著提高(P均＜0.05),左室舒张末压显著降低(P均＜0.05).所有心力衰竭大鼠用药前血浆BNP水平高于假手术组(P均＜0.05);药物干预4周后,二甲双胍治疗组、AICAR治疗组血浆BNP水平较生理盐水对照组明显降低(P均＜0.05).免疫组化显示,二甲双胍治疗组、AICAR治疗组P-AMPKαThr-172蛋白表达明显升高(P均＜0.05).结论 二甲双胍可明显改善心力衰竭大鼠的心功能状态,这种作用与激活AMPK信号转导通路有关.     

肌肉生长抑制素前肽基因干预对高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂代谢的影响

目的 探讨肌肉生长抑制素前肽(MPRO)基因对高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂代谢的影响及其分子机制.方法 60只雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为4组(每组15只):正常对照组(NC组),高脂饮食组(HF组),高脂饮食+绿色荧光蛋白组(HF+ GFP组)及高脂饮食+MPRO组(HF+ MPRO组).高脂饮食诱导肥胖小鼠模型,以重组腺相关病毒(rAAV)为载体介导MPRO基因或对照基因GFP在小鼠体内表达,观察并检测小鼠体重、皮下及内脏脂肪、血及肝脏甘油三酯水平的变化.Western印迹法检测肝脏AMP活化蛋白激酶α(AMPKα)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、肉碱棕榈酰基转移酶-1(CPT-1)的表达情况.结果 HF组体重、皮下及内脏脂肪、血及肝脏甘油三酯水平较NC组显著升高(t=9.033 ～ 35.459,P均＜0.05),HF+ MPRO组体重、皮下及内脏脂肪、血及肝脏甘油三酯水平较HF组显著降低(t=5.233～21.500,P均＜0.05).Western印迹法显示HF组肝脏AMPKα、ACC磷酸化水平及CPT-1的表达较NC组显著降低(t=16.630～ 23.671,P均＜0.05);HF+ MPRO组肝脏AMPKα、ACC磷酸化水平、CPT-1的表达较HF组显著升高(t=8.143 ～ 10.314,P均＜0.05).结论 MPRO基因可能通过激活AMPK通路,明显改善肥胖小鼠的脂代谢紊乱.     

有氧运动联合KGM对高脂膳食大鼠胰岛素抵抗形成中肝脏Adiponectin/PPARα通路的影响

目的探讨胰岛素抵抗(IR)形成及其运动和KGM干预的机制。方法将6周龄50只雄性SD大鼠随机分为五组:对照组(C组)、高脂饮食组(HF组)、高脂饮食+运动组(HE组)、高脂饮食+葡甘聚糖组(HK组)、高脂饮食+运动训练+葡甘聚糖组(HEK级)。同时将HE、HK、HEK分别进行11 w无负重游泳训练。11 w后测定大鼠空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、肝脏胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、脂联素(APN)、APN受体2(AdipoR2)、过氧化物增殖物激活受体α(PPARα)的蛋白含量。结果①HF组大鼠与C组相比,FPG、FINS含量以及胰岛素抵抗指数(HOMAIR)显著升高。②有氧运动和(或)KGM可以降低高脂膳食大鼠FPG水平、FINS以及HOMA-IR,并能显著降低肝脏中TG和TC含量。③与C组相比,HF组大鼠肝脏APN、PPARa含量显著降低,而HF组肝脏AdipoR2含量却升高,而通过双因素方差分析可知,有氧运动和(或)KGM可以显著增加肝脏APN含量和PPARα含量,降低肝脏AdipoR2含量。结论①11 w的高脂饮食可以诱导大鼠IR的形成,而高脂膳食引起的血脂代谢紊乱可能是引起IR产生的重要原因。②有氧运动或补充KGM可能通过改善高脂膳食大鼠肝脏Adiponectin/PPARα信号通路来调节血脂代谢,从而有效预防高脂膳食大鼠IR的形成。同时,有氧运动联合补充KGM对改善高脂大鼠肝脏Adiponectin/PPARα具有交互作用。     

胰岛素抵抗大鼠肝脏组织p-IRE-1α的表达及意义

采用高脂饲料喂养并经高胰岛素-正常血糖钳夹技术评估,建立胰岛素抵抗大鼠模型.与正常饮食组相比,高脂饮食组大鼠血清游离脂肪酸和基础胰岛素水平升高(P＜0.05),平均葡萄糖输注率(GIR60-120)降低(P＜0.01),肝脏组织p-IRE-1α蛋白表达升高(P＜0.05).并且肝脏组织p-IRE-lα蛋白表达与血清游离脂肪酸水平呈正相关(r=0.627,P＜0.05).提示高脂饲料喂养可能通过升高血清游离脂肪酸水平,引起肝脏内质网应激,并通过p-IRE-1 α参与胰岛素抵抗的发生.

Abstract：

Fed with high-fat diet and assessed by hyperinsulinemia-euglycemia clamp technique, rat models with insulin resistance were successfully induced. Compared with normal chow group ( NC ), serum concentrations of free-fatty acids(FFAs) and baseline insulin in high-fat diet group(HF) was higher( P＜0.05 ), the average glucose infusion rate from 60 to 120 min( GIR60-120 ) was lower( P＜0.01 ), and the expression of p-IRE-lα in the liver was higher( P＜0.05 ). Furthermore, the expression of p-IRE-1α in the liver was positvely correlated with the serum concentration of FFAs. All these data indicate that high-fat diet may induce endoplasmic reticulum stress in the liver by elevating serum concentration of FFAs, and may participate in the genesis of insulin resistance via p-IRE-1α.     

富硒酵母对高脂血症大鼠脂代谢的影响

目的 探讨富硒酵母对高脂血症大鼠脂代谢的影响及调节机制.方法 将40只雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠按体重随机区组分组法分为空白对照组、模型对照组(HF组)和低剂量富硒酵母组(HF+ LSe组,硒剂量为0.83 μg/kg)、高剂量富硒酵母组(HF+ HSe组,硒剂量为8.33 μg/kg),每组10只.空白对照组正常饮食,其他组高脂饮食.实验期为90 d,其中造模30 d,干预60 d.干预期间每周记录动物进食量和体重,并计算食物利用率.结束时(即干预第60天)全自动生化仪检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST),计算血清动脉粥样硬化指数(AI)和血浆致动脉粥样硬化指数(AIP).全部动物进行大体解剖,取肝组织HE染色和油红O染色观察肝组织病理学形态,并制作10％肝匀浆测肝组织中胆固醇和甘油三酯水平.应用实时PCR检测羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoA-R)、低密度脂蛋白受体(LDLR)、酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶(ACAT)和卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(LCAT)的mRNA表达水平.结果 HF+ LSe组在干预第56天平均体重显著低于HF组(F=3.028,P＜0.05).HF+ HSe组及HF+ LSe组的进食量和总增重均显著低于HF组(F=19.706、5.776,P均＜0.05),HF+ LSe组总食物利用率显著低于HF组(F =23.791,P＜0.05).HF+ LSe组和HF+ HSe组的肝脏总胆固醇、甘油三酯、AI均明显低于HF组(F=55.413、5.322、42.405,P均＜0.05).HF+ LSe组的AIP显著低于HF组(F =9.522,P＜0.05).HF+ HSe组的肝功能指标ALT和HF+ LSe组的AST均显著低于HF组(F=5.942、3.489,P均＜0.05).与HF组相比,HF+ HSe组和HF+ LSe组肝细胞均有不同程度的修复,以HF+ LSe组修复效果最佳.HF+ LSe组的HMG-CoA-R mRNA表达水平与HF组比较显著降低(F=5.972,P＜0.05).结论 富硒酵母可以抑制高脂饲料引起的大鼠体重增加,具有降血脂和抗动脉粥样硬化作用;对高脂血症大鼠的肝脏组织具有明显的修复功能.其主要通过下调HMG-CoA-R mRNA表达水平,调节脂代谢.     

衰老对大鼠过氧化体增殖物激活受体α表达的影响与脂质代谢的关系

目的　观察衰老对过氧化体增殖物激活受体α和目标基因脂蛋白脂酶、载脂蛋白CⅢ组织表达的影响 ,从而探讨衰老过程中出现脂质代谢异常的可能机制。方法　雄性SD年轻大鼠 (4～ 6周龄 ) 16只和老年大鼠 (2 4月龄 )16只 ,随机分为对照组和给药组 (非诺贝特喂养 2周 ) ,测定血清中甘油三酯 (TG)和总胆固醇 (TC)水平 ,采用半定量逆转录 聚合酶链反应法检测过氧化体增殖物激活受体α及脂蛋白脂酶、载脂蛋白CⅢmRNA水平 ,用Western印记法检测过氧化体增殖物激活受体α蛋白表达情况。结果　与年轻对照组比较 ,老年对照组的血脂中TG和TC水平升高 ,过氧化体增殖物激活受体αmRNA及过氧化体增殖物激活受体α蛋白表达随年龄增长而减少 ,同时脂蛋白脂酶、载脂蛋白CⅢ也受年龄的影响。给药组与对照组比较 ,给药后老年对照组TG下降。非诺贝特对不同年龄组过氧化体增殖物激活受体α的表达均无影响 ,但可影响脂蛋白脂酶、载脂蛋白CⅢ的表达。结论　衰老过程中过氧化体增殖物激活受体α表达减少可能与老年脂质代谢异常有关。     

罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌腺苷酸活化蛋白激酶α表达及活性的影响

目的 探讨罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌脂肪酸代谢及腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)α表达和活性的影响.方法 根据随机数字表将40只4～5月龄雄性Wistar大鼠随机分至健康对照组(n=16;给予基础饲料)和高脂喂养组(n=24;给予高脂饲料).喂养4周末,两组各取8只大鼠行高胰岛素.正葡萄糖钳夹实验,评价高脂喂养组胰岛素抵抗状态.造模成功后根据随机数字表将高脂喂养组(n=16)随机分至高脂喂养亚组(n=8)和罗格列酮干预亚组(n=8),继续喂以高脂饲料4周,罗格列酮干预亚组同时给予3 mg·kg-1·d-1罗格列酮灌胃.骨骼肌甘油三酯经氯仿-甲醇抽提后采用全自动生化分析仪测定.运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应方法 测定骨骼肌AMPKα1及AMPKα2 mRNA表达水平;运用聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot方法 测定骨骼肌AMPKα1、AMPKα2及P-AMPKα蛋白表达水平.组间比较采用完伞随机设计的单因素方差分析.结果 第8周末,高脂喂养亚组葡萄糖输注率低于健康对照组[分别为(19.3±3.7)和(30.4±4.2)mg·kg-1·min-1,P<0.01],罗格列酮干预亚组葡萄糖输注率高于高脂喂养亚组[分别为(25.8±1.6)和(19.3±3.7)mg·kg-1·min-1,P<0.05].高脂喂养亚组骨骼肌甘油三酯含量高于健康对照组[分别为(4.4±1.2)和(2.0±0.5)μmol/g,P<0.01],罗格列酮干预亚组骨骼肌甘油三酯含量低于高脂喂养亚组[分别为(3.3±1.1)和(4.4±1.2)μmol/g,P<0.05].骨骼肌AMPKαl mRNA及蛋白表达无组问差异(P>0.05);骨骼肌AMPKα2 mRNA、蛋白表达和P-AMPKα蛋白表达高脂喂养亚组低于健康对照组,而罗格列酮干预亚组高于高脂喂养亚组(均P<0.05).结论 高脂饮食可导致大鼠骨骼肌脂质堆积及胰岛素抵抗.罗格列酮干预可增加胰岛素抵抗大鼠骨骼肌AMPKα2表达和AMPKα活性,降低骨骼肌脂质含量,提高胰岛素敏感性.     

针灸联合自拟茶方调节肝AMPK、p38 MAPK、PPARγ信号改善脂肪肝大鼠脂质代谢紊乱的机制

目的探讨针灸联合自拟茶方改善脂肪肝大鼠脂质代谢紊乱的疗效及机制。方法以高脂饲料建立脂肪肝胰岛素抵抗模型大鼠,将大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组及治疗组,对照组及模型组不经药物干预,阳性对照组以吡格列酮进行治疗,治疗组以针灸联合自拟茶方进行治疗。检测肝脏组织匀浆三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量。对各组大鼠肝脏病理、肝指数、肝酶[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)]、血脂水平[TC、TG、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]、血清炎症相关因子α肿瘤坏死因子[(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1、IL-6]及肝组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)γ蛋白表达进行测定。结果模型组各指标与对照组相比有明显差异,表明造模成功。治疗组肝脏细胞脂肪变性程度明显优于模型组,肝指数明显低于模型组(P<0.05),血清ALT、ALP、TC、TG、LDL-C、IL-1、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.05),肝组织AMPK及PPARγ表达水平升高(P<0.05),p38MAPK表达水平降低(P<0.05)。治疗组在改善肝指数、降低血清TC、ALT、AST、IL-1、TNF-α水平及降低肝脏TC、TG水平、升高HDL-C、下调肝脏p38MAPK水平方面与阳性对照组无显著差异(P>0.05)。结论针灸联合自拟茶方可明显改善脂肪肝胰岛素抵抗模型大鼠的脂质代谢紊乱及胰岛素抵抗,该作用可能与上调肝脏AMPK及PPARγ表达水平、下调p38MAPK表达水平有关。     

甜菊苷甙对高脂饮食大鼠胰岛β细胞功能和脂肪代谢的影响

目的 探讨甜菊苷甙(RA)对高脂饮食大鼠B细胞功能和脂肪代谢的影响.方法 将10周龄雄性SD大鼠30只按随机数字表法分为健康对照组、高脂饲养组和高脂饲养干预组(腹腔注射RA 30 mg·kg-1·d-1),每组10只.所有受试大鼠8周后腹腔注射葡萄糖耐最试验.测定肝脏、肌肉中甘油三酯的含最,使用逆转录-实时聚合酶链反应吸附试验分析肝脏和肌肉巾脂代谢调控基因mRNA的表达.结果 (1)腹腔注射匍萄糖耐量试验30 min时胰岛素水平在健康对照组、高脂饲养组和高脂饲养干预组分别为(16.0±6.1)、(5.4±0.8)和(23.9±7.1)μg/L,三组间比较有统计学意义(F=3.77,P均<0.05);30 min时高脂饲养干预组血糖明显高于健康对照组、高脂饲养组(F=3.83,P均<0.05).(2)高脂饲养组和高脂饲养干预组较健康对照组肌肉(F=4.39,P<0.05)和肝脏甘油三酯(F=5.97,P<0.01)含量显著增加,其中高脂饲养干预组肌肉含量最高.(3)高脂饲养组和高脂饲养干预组肌肉中乙酰辅酶A羧化酶-2(ACC-2)的表达分别是健康对照组的1.74倍和19.97倍(F=13.48,P<0.01);肌肉肉毒碱脂酰转移酶-1(M-CPT-1)表达仅在高脂饲养组显著增加.结论 甜菊苷甙能保护脂毒性对葡萄糖耐量试验早时相的胰岛素分泌损害,但能升高血糖水平.推测可能与甜菊苷甙改变肌肉脂肪酸代谢,使肌肉的脂肪沉积增加有关.     

肥胖大鼠肝脏、骨骼肌叉头状因子O1基因表达对胰岛素抵抗的影响

目的观察肥胖大鼠肝脏和骨骼肌叉头状因子O1（FoxO1）的表达,探讨Fox01在肥胖和胰岛素抵抗发生中的作用。方法30只SD大鼠随机分为对照组（NC,常规饲料）和高脂组（HF,高脂饲料）。饲养10周后测定有关指标。结果10周后与NC组相比,HF组体重、血糖、胰岛素、TG、TC、腹内脂肪／体重均升高,肝脏和骨骼肌FoxO1mRNA表达量分别增加84％和88％（P〈0．01）。TG、HOMA-IR及腹内脂肪／体重是肝脏FoxO1mRNA表达的独立相关因素,HOMA-IR及腹内脂肪／体重是骨骼肌FoxO1表达水平的主要影响因素。结论肥胖大鼠肝脏和骨骼肌FoxO1表达量升高,可能是肥胖状态下引发胰岛素抵抗的机制之一。     

丹栀逍遥散对非酒精性脂肪性肝病大鼠LKB1/AMPK/ACC通路及肝脂肪变性的影响

目的:探讨丹栀逍遥散对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝脏激酶B1(LKB1)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/乙酰辅酶A羧化酶(ACC)通路及肝脂肪变性的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、水飞蓟宾组(26.25 mg·kg^-1)、丹栀逍遥散高、中、低剂量组(38.0、19.0、9.5 g·kg^-1),每组13只。采用高脂饲料连续喂养8周复制非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠模型。模型复制成功后水飞蓟宾组和丹栀逍遥散各剂量组大鼠开始灌胃给予相应的药物,连续给药4周,给药结束后进行取材和相关指标的检测。给药期间,观察各组大鼠的精神状况、毛色、饮食、活动等一般状态,记录给药前后大鼠体重变化;取大鼠肝、肾、脾脏并称重,计算脏器指数;生化法检测肝组织中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(NEFA)含量;苏木精-伊红染色(HE)观察各组大鼠肝组织病理变化;Western blot检测肝组织中LKB1、AMPKα1、AMPKα2、ACC及其磷酸化水平。结果:与空白组相比,模型组大鼠毛色发黄暗淡,精神萎靡;体重增量、肝脏指数、肝组织中ALT、AST、TG、TC、NEFA水平均显著升高(P<0.05),肝细胞排列紊乱,胞界不清晰,较多的脂肪空泡;肝细胞中LKB1、p-LKB1、AMPKα1、p-AMPKα1、AMPKα2、p-AMPKα2、p-ACC蛋白表达水平明显降低,ACC蛋白表达升高(P<0.05);与模型组相比,水飞蓟宾组和丹栀逍遥散高、中剂量组大鼠一般状态有不同程度的改善,体重增量、肝脏指数、肝组织中ALT、AST、TG、TC、NEFA水平均显著降低(P<0.05),病理损伤程度减轻;肝细胞中LKB1、p-LKB1、AMPKα1、p-AMPKα1、AMPKα2、p-AMPKα2、p-ACC蛋白表达水平明显升高,ACC蛋白表达降低(P<0.05)。结论:丹栀逍遥散可能通过LKB1/AMPK/ACC信号通路,降低脂肪的合成,改善肝功能,减轻NAFLD模型大鼠肝脂肪变性。     

山楂叶提取物对非酒精性脂肪性肝病大鼠糖脂代谢作用的研究

目的：观察山楂叶提取物对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠糖脂代谢的影响。方法：用高脂饲料诱导建立大鼠NAFLD模型,分为正常组、模型组、阳性药物对照组、山楂叶提取物组、自然恢复组和节食组,观察各组大鼠血清中甘油三酯（TC）,总胆固醇（TG）,游离脂肪酸（FFA）,脂蛋白酯酶（LPL）、空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（INS）和胰岛素抵抗指数（IRI）以及大鼠肝脏组织过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）mRNA的表达情况及其肝组织病理学改变情况。结果：与模型组和自然恢复组相比,山楂叶提取物组大鼠体重明显降低,血清TC、FFA、FPG、INS、IRI明显降低（P〈0．05）,同时LPL升高以及PPARαmRNA表达量升高亦有统计学意义（P〈0．05）。结论：山楂叶提取物能够改善NAFLD大鼠的糖脂代谢异常,这可能与提高LPL的含量和增加PPARctmRNA表达有关。     

阿卡波糖、二甲双胍及吡格列酮对糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织肿瘤坏死因子α及细胞色素P4502E1的影响

目的 观察二甲双胍、吡格列酮及阿卡波糖对糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠肝脏中TNF-α、细胞色素P4502E1 （CYP2E1）的影响. 方法 高糖高脂饮食8周＋腹腔注射小剂量STZ（15 mg/kg）建立糖尿病NAFLD模型.造模成功后将大鼠随机分为4组：NALFD组（NF,10只,高糖高脂饲料）;二甲双胍干预组[DM,10只,高糖高脂饲料＋二甲双胍500mg/（kg· d）];吡格列酮干预组[DP,10只,高糖高脂饲料＋吡格列酮15 mg/（kg·d）];阿卡波糖干预组[DA,10只,高糖高脂饲料＋阿卡波糖100mg/（kg·d）].干预4周后应用Real-time PCR和免疫组织化学法检测肝组织中TNF-α、CYP2E1 mRNA及蛋白表达. 结果 与NF组比较,DM、DP及DA组的TNF-α及CYP2E1 mRNA表达均明显降低（P＜0.05）,DM、DP组间差异无统计学意义（P＞0.05）;DA组降低程度小于DM、DP组（P＜0.05）.同时,TNF-α及CYP2E1蛋白表达呈现相同趋势TNF-α：NF（51.86±3.78）％,DM（20.78±2.51）％,DP（19.34±3.17）％,DA（41.37±2.98）％,P＜0.05; CYP2E1：NF（33.87±4.15）％,DM（16.78±2.54）％,DP（15.69±1.79）％,DA（22.67±4.02）％,P＜0.05]. 结论 二甲双胍、吡格列酮及阿卡波糖均可减少大鼠肝脏TNF-α、CYP2E1的表达,其中二甲双胍、吡格列酮作用相似,阿卡波糖作用较弱.