重组结核分枝杆菌多表位肽的免疫原性研究

目的探讨纯化的重组结核分枝杆菌多表位肽激发细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic Tlymphocyte,CTL)免疫应答的能力,为新型结核疫苗的设计打下基础。方法通过细胞增殖和细胞毒性实验,研究纯化的重组表达多表位肽刺激外周血单个核细胞(PBMC)产生的增殖反应和细胞毒活性,初步鉴定重组多表位肽的免疫原性。结果以刺激系数(SI)>3为界,多表位肽(10μmol)能刺激全部10例HLA-A*0201阳性(A2+)结核菌素阳性(PPD+)健康个体的PBMC发生增殖,SI为46.2±5.6;增殖反应明显高于单肽(平均SI为10.2±2.3)以及PPD(平均SI为15.6±3.6)引起的细胞增殖反应(P<0.01)。在多表位肽诱导的CTL细胞毒活性分析中以负载抗原肽(10μmol)的T2细胞作为靶细胞,多表位肽诱导的CTL作为效应细胞,多表位肽能诱导全部的10例A2+PPD+健康个体中CTL杀伤活性,平均活性分别为(86.2±9.6%),显著高于单肽[平均为(25.4±3.6)%]和PPD[平均为(22.6±2.8)%](P<0.01)。结论重组优化多表位肽在细胞水平具有较好的免疫原性,能有效刺激PBMC产生细胞增殖反应和细胞毒活性。     

低剂量辐射对多巴胺β羟化酶活性及其基因表达的影响

低剂量电离辐射增强机体的免疫功能 ,已被国内外大量流行病学及实验室研究所证实[1 ,2 ] ,其发生机理尚未完全阐明。交感神经主要通过改变免疫器官内部的血液、淋巴液而影响免疫器官中和血流中各种淋巴细胞亚群之间的比例 ,从而影响其细胞间相互作用[3 ,4] 。多巴胺 β羟化酶 (ＤβＨ)作为一个反映交感神经系统活动的可靠指标 ,已被国内外许多学者所公认[5,6] 。本文作者通过观察胸腺和脑干组织中的多巴胺 β羟化酶活性及其基因表达 ,探讨低水平辐射兴奋效应中外周交感神经和中枢交感神经的调节作用 ,以期为低水平辐射兴奋效应机理提供新的…     

低剂量辐射诱导胸腺细胞凋亡的适应性反应

低剂量电离辐射对机体的影响是当前国内外放射生物学界研究的重要内容。阐明低剂量电离辐射生物效应及其适应性反应 ,对放射生物学理论和辐射防护实践均具有重要意义。我室通过流行病学调查和大量的实验研究证实 ,低剂量辐射可增强免疫功能 [1],降低胸腺细胞凋亡 [2 ],具有与高剂量辐射迥然不同的细胞和分子机理[3 ]。低剂量辐射可诱导适应性反应 ,已得到确认[4]。在此基础上 ,我们进一步观察了低剂量辐射诱导小鼠胸腺细胞凋亡适应性反应的剂量、剂量率和时间效应 ,以阐明低剂量辐射诱导适应性反应的规律 ,为深入探讨其机理提供有意义的实验…     

PTC对2Gy全身照射小鼠辐射损伤的防护作用

较大剂量的电离辐射可直接分解水分子产生·ＯＨ,造成细胞ＤＮＡ、蛋白质和膜脂等大分子的氧化损伤,从而导致细胞凋亡。自由基清除剂和抗氧化剂能够预防这种氧化损伤而阻止细胞的凋亡[1-3]。为了进一步探讨辐射损伤的自由基作用机理和自由基清除剂的抗放作用,我们进行了以下实验研究。一、材料和方法1试剂和仪器:原儿茶醛缩氨基硫脲铜(Ⅱ)配合物(ＰＴＣ)由本室合成。60Ｃｏ放射源(第四军医大学钴源室)。ＤＧ3030化学发光光度计(南京华东电子管厂产品)。2实验动物及分组;ＢＡＢＬ/ｃ小鼠(第四军医大学实验动物中心购买),雄性,体重(20±10)ｇ,…     

气管内插管全麻导管口贴壁1例

患者 ,男性 ,60岁。入院诊断 :蝶鞍部肿瘤。病人一般情况较好 ,检查无特殊。在静吸复合麻醉下行肿瘤摘除术。术前用药 :哌替啶 1ｍｇ·ｋｇ-1、异丙嗪 0 .5ｍｇ·ｋｇ-1、阿托品 0 .0 1ｍｇ·ｋｇ-1。入室吸氧去氮 ,麻醉诱导 :异丙酚 2ｍｇ·ｋｇ-1、司可林 2ｍｇ·ｋｇ-1、芬太尼 0 .1ｍｇ、泮可罗宁 0 .0 1ｍｇ·ｋｇ-1。使用安氟醚吸入维持麻醉 ,静脉辅助给予芬太尼 ,泮可罗宁。切皮前追加咪唑安定 15ｍｇ,术中生命体征平稳。手术 2ｈ后 ,需Ｘ线下定位。在透视过程中搬动病人头部 ,麻醉机监测参数显示气道压从 13ｃｍＨ2 Ｏ升至 2 6ｃｍ…     

低剂量辐射刺激作用的实验研究

本文报告低剂量,低LET辐射对小鼠免疫功能、染色体畸变和DNA损伤修复影响的实验资料。低剂量单次x线或持续γ线全身照射后,出现辐射刺激效应,表现为(1)增强免疫功能,包括抗体形成反应增强、自介素2产生增多、NK活性增高、胸膜细胞增殖加快和ConA诱导的大分子合成激活,(2)诱导细胞遗传学适应性反应,即低剂量辐射预先作用使相继较大剂量所致染色体损伤减轻； (3)促进DNA修复,包括非程序DNA合成增强和DNA聚合酶活性增高。对辐射刺激效应的发生机理和意义进行了讨论。     

低剂量电离辐射细胞及亚细胞水平的辐射效应研究

简述了低剂量辐射细胞及亚细胞水平辐射效应的研究概况,重点介绍了高本底地区居民,职业性和医疗照射受照人员、核事故受照人员及实验研究中有关低剂量辐射细胞遗传学和免疫学生物效应及其诱导的适应性反应的最新研究进展,许多研究结果进-步证实了低剂量辐射的刺激效应及其诱导的适应性反应.     

辐射诱导pEgr-sHemopexin在MCF-7细胞的表达和侵袭能力及人脐静脉内皮细胞小管形成的影响

将治疗基因克隆于可被辐射诱导激活的Egr-1启动子下游,利用Egr-1基因的调控序列可被辐射刺激的特点,形成基因和射线对肿瘤的双重杀伤作用,是近年来放射治疗研究的热点[1-2].下游目的基因的选择,对提高肿瘤基因放射治疗疗效至关重要.基质金属蛋白酶2(MMP-2)C端血色素结合蛋白样片段PEX可阻断血管生成和细胞外基质的降解,从而抑制肿瘤的生长、侵袭和转移[3-5].本研究根据Egr-1基因启动的辐射激活特性和PEX的抗血管生成和阻断细胞外基质的降解作用,将肿瘤抑制基因治疗和放射治疗二者联合起来,在构建pEgr-sHemopexin(pEgr-sPEX)重组表达质粒的基础上,观察体外pEgr-sPEX重组质粒辐射诱导表达特性,检测辐射诱导pEgr-sPEX对MCF-7细胞侵袭能力及人脐静脉内皮细胞(HUVEC)小管形成的影响,探讨抑癌作用.     

白细胞介素-12抗乙型肝炎病毒作用机制的研究进展

白细胞介素 12 (ＩＬ 12 )是由巨噬细胞、Ｂ淋巴细胞等抗原递呈细胞在免疫应答中产生的细胞因子。近年研究表明 :ＩＬ 12是一种重要的抗乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ )细胞因子[1] 。本文就近年来有关ＩＬ 12抗ＨＢＶ作用机制综述如下。1　ＩＬ 12的来源及生物学效应ＩＬ 12最初称作自然杀伤细胞刺激因子 (ｎａｔｕｒａｌｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙｆａｃｔｏｒ,ＮＫＳＦ) [2 ] 或细胞毒性淋巴细胞成熟因子 (Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｍａｔｕｒａｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ ,ＣＬＭＦ) [3 ] 。现已证明 :ＮＫＳＦ与Ｃ…     

理化因子影响EL-4细胞增殖反应的剂量效应关系

近年来环境理化因子对人体和哺乳动物的作用愈来愈受到人们的重视。有关低剂量化学因子诱导兴奋效应的研究已有系统资料[1 ] ,但对化学因子增强免疫的报道尚少。本文作者选择有机物 (丝裂霉素Ｃ)和无机物 (氯化镉 )两种化学因子与电离辐射进行比较 ,用3Ｈ ＴｄＲ掺入法 ,观察 3种因子对ＥＬ 4细胞增殖反应的影响 ,以揭示低剂量理化因子的免疫增强效应机理。一、材料和方法1 细胞培养 :ＥＬ 4细胞由日本引进。取处于指数生长期的细胞 ,用ＲＰＭＩ 16 40培养液 (含 10 %ＦＣＳ)调浓度为 5×10 5 个·ｍｌ- 1 ,取 180 μｌ加至 96孔培养板中 ,4…     

代谢重编程在电离辐射及其旁效应中的研究进展

代谢重编程是指肿瘤细胞为满足自身生长和能量的需求, 通过改变代谢模式来调节细胞生物学功能, 帮助自身抵御外界胁迫, 从而使细胞适应低氧、酸性、营养物质缺乏等微环境而快速增殖的现象。放射生物学研究发现, 电离辐射可通过诱导细胞代谢重编程产生辐射抗性;也可通过旁效应促进未受照射细胞发生代谢重编程, 从而赋予细胞癌变和辐射抗性能力。因此, 探索电离辐射和电离辐射旁效应中代谢重编程机制, 可以为辐射防护、放射治疗、放射损伤诊断等提供新的思路和理论依据。本文对代谢重编程在电离辐射及其旁效应中的研究进展进行综述。     

电离辐射旁效应信号因子的研究进展

通常人们认为细胞受到直接照射后,能量沉积在细胞核中,引起DNA损伤,继发产生一系列生物学效应,没有受到照射的细胞则不会产生任何生物学效应.然而,近来的研究表明,电离辐射所致的损伤效应并不局限于受照细胞本身.还可在周围未受照射细胞中得到表达,如Nagasawa等[1]发现,当人原初成纤维细胞中的1%受到a粒子的照射可在30%的细胞中引起姐妹染色体交换(SCE),此即辐射诱导的旁效应(Bystander effect).     

OPTIMIZING BONE HEALTH:IMPACT OF NUTRITION,EXERCISE,AND HOR MONES

ＫＥＹＰＯＩＮＴＳＳｔｒｏｎｇｂｏｎｅｓｒｅｑｕｉｒｅａｂａｌａｎｃｅｄ“3 -ｌｅｇｇｅｄｓｔｏｏｌ”ｏｆ(1 )ｒｅｇｕｌａｒｐｈｙｓｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｙ,(2 )ａｄｅｑｕａｔｅｉｎｔａｋｅｏｆｃａｌｃｉｕｍ ,ａｎｄ(3 )ｎｏｒｍａｌｈｏｒｍｏｎａｌｌｅｖｅｌｓ.·Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｔｉｃｆｒａｃｔｕｒｅｓａｒｅｐｒｅｖｅｎｔａｂｌｅｂｙｍａｘｉｍｉｚｉｎｇ“ｂｏｎｅｉｎｔｈｅｂａｎｋ”ｂｙａｇｅ 3 0ａｎｄｂｙｒｅｄｕｃｉｎｇｒａｔｅｏｆｂｏｎｅｌｏｓｓｔｈｅｒｅａｆｔｅｒ.·Ｏｐｔｉｍａｌｅｘｅｒｃ…     

低水平辐射兴奋效应研究进展

低水平辐射诱导的兴奋效应包括细胞和机体的适应性反应,免疫功能增强和致癌作用减弱。本文概述了以上几方面研究的最新进展,并着重分析了低水平辐射增强免疫的细胞和分子机制及其整体调节,指出了这一领域科学研究的实用前景和理论意义。     

CD3＋CD28抗体组诱导CD3AK细胞对肿瘤细胞杀伤效果的实验观察

CD3AK细胞是用于恶性肿瘤过继性免疫治疗的效应细胞之一,一般情况下即使小剂量的CD3抗体在白细胞介素-2（IL-2）的协同下也可诱导出具有杀伤活性的CD3AK细胞[1]。T细胞介导的细胞免疫是机体抗肿瘤免疫的主要机制,随着对抗原的识别和递呈、T细胞激活等免疫应答机制认识的不断深入,发现有效的抗肿瘤免疫反应必须在共刺激信号的参与下,将肿瘤抗原多肽递呈给T细胞而激发T细胞的免疫应答[2]。     

血管紧张素II对体外培养的牛眼小梁细胞3H-TdR掺入率的影响

目的 :观测血管紧张素II(AngiotensinII ,AngII)对体外培养的牛眼小梁细胞 (bovinetrabecularmeshworkcells ,TMcell ) 3H胸腺核苷酸 (3H -thymidine,3H -TdR)掺入率的影响 ,探讨原发性开角青光眼 (primaryopen -angleglaucoma ,POAG)的发病机制。方法 :AngII(1× 10 - 7mol·L - 1及 1× 10 - 8mol·L - 1)以及其I型受体 (an giotensinreceptortypeI,AT1)拮抗剂Losartan孵育TM细胞 ,采用检测 3H -TdR掺入率的方法了解细胞增殖状态。结果 :AngII明显的增加了TM细胞的 3H -TdR摄入率 ,Losartan可部分阻断其增殖效应。结论 :AngII可以诱导体外培养的牛眼TM细胞的细胞增殖率升高 ,AT1受体拮抗剂可以部分阻断此促增殖效应     

低水平辐射诱导适应性反应的普遍性

低水平辐射诱导适应性反应的普遍性刘树铮辐射兴奋效应是当前放射学界研究活跃和争论纷纭的一个重要领域。兴奋效应（ｈｏｒｍｅｓｉｓ）一词源于希腊语＂ｈｏｒｍｅｉｎ＂，意指任一因子在低剂量时引发任一系统的刺激效应。物理、化学和生物因子均可引起此类效应。辐射兴...     

SKP2表达对受照食管癌细胞诱导辐射旁效应的影响

目的：探究SKP2表达水平对受照食管癌细胞所诱导辐射旁效应的影响。方法：Western blot法筛选出SKP2高表达和低表达的食管癌细胞系,微核检测法探讨SKP2对受照食管癌细胞所诱导辐射旁效应的影响。建立SKP2高表达和低表达的转染细胞系,Western blot法验证转染效率,微核检测法进一步验证SKP2对受照食管癌细胞所诱导辐射旁效应的影响。通过γ-H2AX聚集点检测法探究SKP2影响受照食管癌细胞所诱导辐射旁效应的作用机制。结果：微核检测结果表明,SKP2高表达的受照细胞诱导的辐射旁效应显著低于SKP2低表达的受照细胞诱导的辐射旁效应（t=8.06,P<0.01）。SKP2转染细胞系的微核检测结果进一步验证了SKP2的表达对受照食管癌细胞诱导的辐射旁效应的抑制作用,SKP2表达升高,辐射旁效应减弱（t=11.12、10.16,P<0.01）;SKP2表达降低,辐射旁效应增强（t=8.39、8.83,P<0.01）。γ-H2AX聚集点检测结果表明,受照细胞SKP2表达升高可提高旁效应细胞的DNA损伤修复能力（t=6.85、7.10,P<0.01）。反之,会抑制旁效应细胞的DNA损伤修复能力（t=7.66、8.47,P<0.01）。结论：SKP2的表达抑制受照食管癌细胞诱导的辐射旁效应,并且这一机制至少部分是通过SKP2对DNA损伤修复能力的调节来实现的。     

重组人Flt3配体联合其它细胞因子对免疫细胞的体外抗辐射作用研究

目的：研究重组人Flt3配体(rhFL）及其他细胞因子在体外免疫细胞的抗辐射作用及其可能机理。方法：用流细胞仪分析照射前后外周血单个核细胞（PBMC）表型及rhFL对受PBMC有型的影响。[^3H]-TdR测定细胞的增殖能力。PBMC来源贴壁细胞经细胞因子诱导树突状细胞（DC）,并观察辐射对诱导DC的影响及rhFLDC的抗辐射效应;用PI－Annexin,V、DNALadder分析细胞凋亡。结果：PBMC在体外经15Gy照射后,CD^8 、CD^56 细胞明显减少,照射产细胞培养液中加入100ng/mlrhFL,可促进CD^56 细胞的;有应用rhFL及照射后联合应用IL－2等细胞因子,可促进受照射CD^8 、CD^56 细胞的恢复;rhFL可协调,GM－CSF、IL－4、TNFα产生DC,并使DC细胞的数量较常规方法诱导产生的数量增加6倍,而rhFL对DC分化诱导的辐射作用有明显的抗性;rhFL可抑制照射所致的细胞凋亡。结论：rhFL单独或与其他细胞因子联合应用,对人外周血免疫细胞具有明显的抗辐射效应,对这辐射损伤机体遥调节和恢复具有重要的使用价值。     

温热刺激致bcr/abl融合基因阳性的CML细胞表面形态的改变

肿瘤热疗（hyperthermia）是通过多种方式提高人体中的恶性组织细胞的温度并维持一定时间,导致癌细胞功能不可逆损伤或增加细胞对药物的敏感性,从而加速癌细胞的凋亡或死亡。我们在前期研究中发现,温热刺激K562细胞可增高细胞热休克蛋白和胱天蛋白酶（caspase）-3的表达,提示温热刺激可能诱导K562细胞凋亡[4,5]。