应用DNA分子杂交技术检测乙型肝炎病毒DNA

近年来,由于基因工程技术发展,推动了病毒分子生物学技术的进步。DNA分子探针诊断技术是应用HBV—DNA拼接在大肠杆菌的质粒建立起无性繁殖体系,使HBV—DNA能得到大量复制,并能获得纯系的DNA分子供标记探针应用。由于DNA分子杂交只和同源     

PCR法在检测HBV DNA上的应用

作者应用聚合酶链反应(PCR)检测了12份乙型肝炎两对半阳性血清,并将PCR分析结果与两对半结果相比较,以探讨其在检测HBV DNA上的应用。     

用溶液杂交法定量测定急性乙型肝炎病人血清HBV DNA

作者采用以~(125)Ⅰ标记的DNA探针对HBV DNA序列互补的溶液杂交法,对30例急性(非暴发性)乙型肝炎成人患者的244份系列血清标本进行了HBV DNA定量检测。同时,用酶免疫试验测定血清HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc、抗-HD、IgM抗-HAV和IgM抗-HBc。30例病人中男性22例,女性8例,平均年龄为33     

用聚合酶链反应技术检测血清中HBV－DNA

本文报道了以聚合酶链反应技术检测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的方法。将血清在０．１ＭＮａＯＨ中３７℃孵育６０分钟使ＨＢＶ－ＤＮＡ从病毒中释放出来。再经琼脂糖检测２７ＤｂＰ的ＨＢＶ－ＤＮＡ片段。本方法检测ＨＢＶ的最低检测限为１０￣（－２）ｐｇ。用建立的方法检测５０例已被证实或怀疑为慢性乙型肝炎感染的病人血清。在１６例ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ为阳性的病人中，斑点杂交和ＰＣＲ分析均为阳性；１９例ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｂ为阳性的病人中，斑点杂交法检出５例，ＰＣＲ法检出１４例；在１５例抗－ＨＢｃ病人中，杂交法检出４例，ＰＣＲ法检出１０例阳性。结果表明ＰＣＲ法比杂交法敏感。     

应用碘－淀粉反应法检查餐具洗净度

本文利用碘与淀粉反应变兰色，判定餐具淀粉洗净度。以５００：２０：１的水、碘化钾、碘试剂对５２个食堂的２６０个消毒或洗涤后的公用饭碗进行了检查，其中阳性率为４２．６９％。未检出阳性碗的食堂２１．１５％。本法简单易行、定性准确，检验周期短，便于监督者及时掌握餐具卫生情况，是检查餐具卫生较好的方法。     

HBV DNA聚合酶在评价抗HBV药物中的应用

本文应用微量直接法检测血清中 HBV DNAP并对海洋药物“911”抗 HBV作用进行了评价 ,结果表明 :PFA对DNAP有较强的抑制作用 ,5 0μg/ ml剂量能全部阻断 DNAP的活性 ,1.2 5μg/ ml能抑制 5 .6 %的 DNAP活性 ,与有关报道一致。“911”对 HBV DNAP有一定的抑制作用 ,经两次平行样本重复实验 ,其结果基本一致。其平均半数抑制剂量为 4.15 mg/ ml。证明微量直接法体外测定药物对 HBV DNAP的抑制作用 ,是评价抗 HBV药物的一种快速简便的方法。     

餐具在传播HBV中的流行病学意义

DNA分子杂交技术的问世,为研究HB的传播开辟了一个新天地,它能可靠地、直接地反映出HBV复制及其传染的程度。为进一步探讨餐具在传播HBV方面的流行病学意义,1990年我们采用该项技术对不同人群在不同使用情况下的餐具（碗、勺）和部分茶具进行了HBV-DNA的检测。现报告如下。     

ELISA HBV 7种血清学模式和HBV－DNA的关系

ＥＬＩＳＡＨＢＶ７种血清学模式和ＨＢＶ－ＤＮＡ的关系淮南市卫生防疫站（２３２００１）余寿杰，孙友岭，高聪，朱向秀乙型肝炎是由乙型肝炎病毒引起的一种世界性疾病。我国是乙型肝炎的高流行区，约５０～７０％人群受过ＨＢＶ感染．由于ＨＢＶ是呈球形的ＤＮＡ病毒，...     

用Logistic回归模型预测血清中HBV－DNA的活动性

多聚酶链反应（简称ＰＣＲ）技术检测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的活动性具有很高的敏感性，但因自身的特点，应用受到限制．结合乙肝三系检测结果，用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型配合ＰＣＲ检测结果具有较好的配合适度，在没有条件开展ＰＣＲ检测项目的情况下根据乙肝三系检测结果用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型预测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的活动性。     

DNA－蛋白交联物在人群中的应用及其正常值初探

利用简便、快速、经济、敏感的￣（１２５）Ｉ后标记法检测某水电站４７名工人的血白细胞ＤＮＡ－蛋白交联物（ＤＰＣ），结果显示性别、年龄、文化程度、吸烟、饮酒等对ＤＰＣ的量无影响。该人群的ＤＰＣ（ｃｐｍ／μｇ）呈正态分布，均数为１４４６．４，标准差为３９６．５。本文还介绍了￣（１２５）Ｉ后标记法检测ＤＰＣ的原理和方法。     

DNA浓缩液在HBV DNA检测中的价值

目前检测HBV DNA浓度广泛应用实时荧光定量PCR技术,该方法具有高敏感性、特异性和重复性。在样品前处理中,HBV DNA提取多采用热裂解法,但一些病例抗HBc lgG与抗HBc lgM同时阳性且肝功能有不同程度的异常,而HBV DNA却是阴性,为使低拷贝DNA样品不致漏诊,本文在DNA提取中,加入了DN     

分子佐剂在DNA疫苗中的应用

如何增强和提高DNA疫苗的免疫效果是新一代DNA疫苗分子设计和研究的关键问题,其中之一就是应用分子佐剂来优化DNA疫苗。分子佐剂可将以基因方式传递的免疫刺激分子与DNA疫苗共免疫,在体内表达相应的蛋白,增强T、B细胞对疫苗成分的体液及细胞免疫应答。目前研究较多的分子佐剂有:细胞因子如干扰素(IFN)、白细胞介素2(IL-2)、IL-12、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)等;共刺激分子如B7-2、CD40L等;补体佐剂如C3;免疫刺激序列如CpG、寡核苷酸(ODN)等。分子佐剂在体内与疫苗基因共表达,改善抗原的周边微环境,提高疫苗的免疫效果。因此,分子佐剂是目前DNA疫苗研究中的热点问题之一。     

分子佐剂在DNA疫苗中的应用

如何增强和提高DNA疫苗的免疫效果是新一代DNA疫苗分子设计和研究的关键问题,其中之一就是应用分子佐剂来优化DNA疫苗.分子佐剂可将以基因方式传递的免疫刺激分子与DNA疫苗共免疫,在体内表达相应的蛋白,增强T、B细胞对疫苗成分的体液及细胞免疫应答.目前研究较多的分子佐剂有:细胞因子如干扰素(IFN)、白细胞介素2(IL-2)、IL-12、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)等;共刺激分子如B7-2、CD40L等;补体佐剂如C3;免疫刺激序列如CpG、寡核苷酸(ODN)等.分子佐剂在体内与疫苗基因共表达,改善抗原的周边微环境,提高疫苗的免疫效果.因此,分子佐剂是目前DNA疫苗研究中的热点问题之一.     

DNA—DNA分子杂交技术检测EIEC侵袭力基因的探讨

本文用福氏志贺氏菌5型致病性质粒PWR100,内切酶ECORl限制产生的17kb片段为探针,经~(32)P缺口翻译(Nick translation)标记,对30株EIEC进行DNA-DNA分子杂交。结果杂交阳性率为90%,高于豚鼠角膜结膜侵袭力试验(67%)。不同血清型两项实验结果看不出明显差别。证实EIEC与志贺氏菌侵袭力基因序列具有同源性。     

应用PCR检测HBV DNA方法探讨

目前PCR的检测方法和使用的仪器均在不断地完善和改进,使用的范围也在不断扩大。为了使PCR技术得到进一步推广应用,我们根据现阶段常规实验室的条件,对该技术的实验方法作了某些改进,并用该项技术对健康人、肝炎病人及部分肿瘤病人血清HBVDNA携带情况进行检测,与HBV标志常规测定方法进行比较,结果满意。现介绍如下。     

纸片法在船舶餐具检测中的应用研究

本文报道了用“食具消毒专用大肠菌群快速检验纸片”对部分国际航运船舶的餐具实施工生学调查的情况。调查结果表明:船舶上的餐具均有不同程度的大肠菌群污染,每艘舶船的餐具均有污染。餐具总污染率为78.0％,其中筷子为73.2％,盘子为69.6％,熟食板为91.1％。为确保检测结果的准确性,对纸片法与国标发酵法进行了对比实验;结果阳性率纸片法为78.9％,发酵法为76.7％,无显著性差异。     

PCR法检测血清HBV DNA及与若干HBV免疫学指标关系

本文比较了PCR法检测血清HBVDNA与ELISA法检测HBsAg、HBeAg的结果。用血清加热-PCR法检测HBV549bp特异DNA片段，用ELISA法检测HBsAg和NBeAg。133份食品从业人员体检血清样品中．57份HBsAg（－），其中未检出HBVDNA；60份HBsAg（＋）、HBeAg（－），其中检出8份HBVDNA（＋），HBVDNA检出率为13.3％；16份HBsAg（＋）、HBeAg（＋），其中检出15份HBVDNA（＋），HBVDNA检出率为93．8％。PCR法检测HBVDNA能更直接地反映HBV传染性。结果初步提示正常人体检中．仅凭HBsAg（＋）、HDeAg（－）确定其无传染性是不够充分的。     

餐具纸片法对大肠菌群快速检验的调查研究

餐具纸片法对大肠菌群快速检验的调查研究鹤壁市卫生防疫站郭晓玲，阎文海，李金学，邓秀琴，裴保河，张新鸿，赵学林目前饮食行业餐具卫生问题突出，大多数不消毒或消毒不彻底，常引起食源性疾病，对人群健康造成威胁，传统的大肠菌群发酵法由于时间长，不适于现场监督检...