益气活血方对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡影响的研究

目的观察益气活血方对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡和B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-Associated X protein,Bax)、活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase 3,C-caspase 3)表达情况的影响,探讨益气活血方影响心肌细胞凋亡的作用机制。方法结扎左冠状动脉前降支构建心肌梗死大鼠模型,并随机分为模型组、益气活血组、培哚普利组,假手术组(即对照组,只穿线不结扎),每组大鼠10只。术后第二天开始灌胃给药,以28天作为观察时间点。小动物超声检测各组大鼠心脏结构和功能的变化,HE染色观察心肌组织病理形态变化,TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色法检测大鼠心肌细胞凋亡指数,Western blot技术检测心肌梗死边缘区Bax、Bcl-2、C-caspase 3蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠左心室射血分数(left venteicular ejection fraction,LVEF)、左室短轴缩短率(left ventricular shortening fraction,LVFS)均显著降低(P<0.01),左心室收缩末期内径(left ventricular end-systolic dimension,LVESD)、左心室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic dimension,LVEDD)均升高(P<0.01);两用药组LVEF、LVFS相较于模型组均显著升高(P<0.01),LVESD、LVEDD均降低(P<0.01)。与假手术组相比,模型组心肌细胞凋亡指数明显上升(P<0.01);与模型组比较,益气活血组与培哚普利组大鼠心肌细胞凋亡指数明显降低(P<0.01)。Western blot结果显示,模型组大鼠Bax、C-caspase 3表达与假手术组相比均有明显升高(P<0.01),Bcl-2表达及Bcl-2/Bax相较于假手术组有所降低(P<0.01)。与模型组比较,益气活血组大鼠Bax蛋白表达有所下降(P<0.01),Bcl-2蛋白表达与Bcl-2/Bax显著升高(P<0.05,P<0.01),C-caspase 3蛋白表达有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05);相较于模型组,培哚普利组大鼠Bax表达降低(P<0.01),Bcl-2/Bax比值上升(P<0.05),Bcl-2呈升高趋势,C-caspase 3有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论益气活血方能够提高心肌梗死大鼠心功能,下调促凋亡蛋白Bax的表达,上调抗凋亡蛋白Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值,从而减轻心肌凋亡损伤以保护心脏。     

真武汤通过SIRT1信号通路减轻心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体损伤及心肌细胞凋亡

目的:观察真武汤通过Sirt1信号转导通路蛋白抑制心肌细胞凋亡的影响,探讨真武汤治疗心力衰竭的机制。方法:复制心梗后心衰模型,通过检测脑钠肽(BNP)来确定心衰造模成功,将心力衰竭大鼠随机分为治疗组(真武汤低、中、高剂量组)、阳性药物对照组(卡托普利)、模型组,分别给药15 d,同时设空白对照组。通过彩超测量左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)等评价心功能,用酶联免疫法(ELISA)检测心衰大鼠血清中BNP,电镜观察心肌细胞内线粒体形态和数量变化,Westernblotting来检测心肌Bax,Bcl-2,Caspase-3,和Sirt-1的表达。结果:1.与正常组相比,治疗组与模型组的BNP表达均升高;2.与正常组相比,模型组LVEF、LVFS水平明显降低(P0.01);与模型组相比,中、高剂量组LVEF、LVFS水平明显升高(P0.01)。3.电子显微镜可观察到模型组大鼠的心肌细胞线粒体数量下降以及移位,并出现其他形态学改变,主要表现为线粒体数量和大小的变化,治疗后,数量和大小均有提升。4.与正常组比较,各组sirt-1蛋白表达均有不同程度减少,Bax及Caspase-3蛋白表达显著增加,Bcl-2的表达有不同程度的降低;与模型组相比,各治疗组sirt-1的表达均有所升高,其中阳性药物及真武汤中高剂量组的表达较高,各组Bax、Caspase-3的表达均有所下降,阳性药物对照组及真武汤中高剂量组表达最低,各治疗组Bcl-2的表达均升高,阳性药物对照组及中药中高剂量组较显著。结论:真武汤可通过调节心肌细胞中线粒体通路,影响凋亡相关蛋白的表达,抑制心肌细胞的凋亡,从而延缓充血性心衰的发展。SIRT1信号通路在抑制心力衰竭心肌细胞的凋亡中起着关键的作用。     

参芪利心汤对心力衰竭大鼠心肌细胞的保护作用及机制研究

目的研究参芪利心汤对阿霉素诱导心力衰竭大鼠心肌细胞的保护作用及机制。方法雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、依那普利(2.1 mg/kg)组以及参芪利心汤低、中、高剂量(9.975、19.950、39.900 g/kg)组,除对照组外,其余大鼠ip阿霉素诱导心力衰竭模型;各给药组ig相应药物,对照组和模型组ig等体积蒸馏水,1次/d,连续4周。给药结束后,采用心脏彩色多普勒超声仪测定各组大鼠左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS)以及每搏心输出量(stroke volume,SV);采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠心肌组织病理变化;采用透射电镜观察各组大鼠心肌细胞超微结构;采用ELISA法检测各组大鼠血浆N端B型利钠肽(N-terminal B-type natriuretic peptide,NT-pro BNP)及心肌组织三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量;采用流式细胞仪检测各组大鼠心肌细胞凋亡情况;采用qRT-PCR法检测各组大鼠心肌组织B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2associated X protein,Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(peroxisome proliferator activated receptorγcoactivator-1α,PGC-1α)m RNA表达情况;采用Western blotting法检测各组大鼠心肌组织Bcl-2、Bax、Caspase-3和p53蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠LVEF、LVFS和SV显著降低(P0.01),血浆NT-pro BNP含量显著升高(P0.01),心肌组织ATP含量显著降低(P0.01),心肌细胞凋亡率显著升高(P0.01);心肌组织Bcl-2和PGC-1αmRNA表达水平显著降低(P0.01),Bax和Caspase-3 mRNA表达水平显著升高(P0.01);心肌组织Bcl-2蛋白表达显著降低(P0.01),Bax、Caspase-3和p53蛋白表达水平显著升高(P0.01)。与模型组比较,参芪利心汤中、高剂量组和依那普利组大鼠LVEF、LVFS和SV均显著升高(P0.01);血浆NT-pro BNP含量显著降低(P0.01),心肌组织ATP含量显著升高(P0.01),心肌细胞凋亡率显著降低(P0.01);心肌组织Bcl-2和PGC-1αmRNA表达水平均显著升高(P0.01),Bax和Caspase-3 mRNA表达水平均显著降低(P0.01);心肌组织Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P0.01),Bax、Caspase-3和p53蛋白表达水平均显著降低(P0.05、0.01)。结论参芪利心汤能够改善心力衰竭大鼠的心肌结构、能量代谢及心功能,并减少心肌细胞凋亡,其作用机制可能与调控PGC-1α和线粒体凋亡通路相关蛋白表达有关。     

参芎化瘀胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马CA1 区细胞凋亡 及Bcl-2,Bax蛋白表达的影响

目的:探讨参芎化瘀胶囊对血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠海马CA1区细胞凋亡及B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2),Bax蛋白表达的影响。方法:采用反复夹闭、再通双侧颈总动脉同时ip硝普钠制备大鼠血管性痴呆模型,应用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组织化学SABC法检测Bcl-2,Bax蛋白表达。结果:①与正常组及假手术组相比,模型组大鼠海马CA1区凋亡细胞增多(P<0.01);与模型组比较,参芎化瘀胶囊治疗组大鼠海马CA1区凋亡细胞减少(P<0.01)。②与正常组及假手术组相比,模型组大鼠海马CA1区Bcl-2,Bax阳性细胞均增多(均P<0.01),Bcl-2/Bax降低(P<0.01);与模型组比较,参芎化瘀胶囊治疗组大鼠海马CA1区Bcl-2阳性细胞增多(P<0.01),Bax阳性细胞减少(P<0.01),Bcl-2/Bax增加(P<0.01)。结论:参芎化瘀胶囊可能通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,减少细胞凋亡,从而改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力。     

真武汤对慢性心力衰竭大鼠心室重构的影响

目的：通过观察真武汤对慢性心力衰竭(chronic heart failure, CHF)大鼠基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-1、基质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinase, TIMP)-1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3和Caspase-9的影响,探讨其治疗CHF的作用机制。方法：将24只大鼠随机分为空白组、模型组、美托洛尔组、真武汤组,除空白组外其余大鼠腹腔注射阿霉素建立CHF模型。给药28 d后检测大鼠左心室射血分数(ejection fraction, EF)及左心室短轴缩短率(fractional shortening, FS),Elisa法检测心肌组织Caspase-3、Caspase-9含量,Western blot检测心肌组织MMP-1、TIMP-1、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达。结果：与空白组比较,模型组大鼠的EF、FS值显著降低(P<0.01),心肌组织Caspase-3、Caspase-9、MMP-1水平明显上升(P<0...     

黄芪保心汤对慢性心力衰竭模型大鼠心室重构及内质网应激凋亡的抑制作用

目的:研究黄芪保心汤对慢性心力衰竭模型大鼠心室重构及内质网应激凋亡的抑制作用。方法:选取健康雄性SD级大鼠60只进行研究,将其按照随机抽签法等分成干预组、对照组以及模型组,每组20只。干预组与模型组大鼠建立慢性心力衰竭模型,对照组大鼠予以假手术处理。造模成功后,干预组予以黄芪保心汤干预,模型组、对照组大鼠予以等量生理盐水注射干预。比较3组大鼠干预4周后的心功能,血清NT-proBNP、ST2水平,心肌细胞凋亡率以及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结果:模型组大鼠左室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(FS)、每搏输出量(SV)水平显著低于对照组,而左室收缩末期直径(LVESD)、左室舒张末内径(LVEDD)水平显著高于对照组;干预组大鼠LVEF、FS、SV水平显著高于模型组,且LVESD、LVEDD水平显著低于模型组(均P<0.05)。模型组大鼠NT-proBNP、ST2水平均显著高于对照组,而干预组大鼠N端脑钠肽前体(NT-proBNP）、基质裂解素2(ST2）水平均显著低于模型组(均P<0.05)。模型组大鼠的心肌细胞凋亡率显著高于对照组,而干预组大鼠的心肌细胞凋亡率显著低于模型组(均P<0.05)。模型组大鼠心肌Bcl-2蛋白表达水平显著低于对照组,而Bax以及Caspase-3蛋白表达水平显著高于对照组;干预组大鼠心肌Bcl-2蛋白表达水平显著高于模型组,且Bax以及Caspase-3蛋白表达水平显著低于模型组(均P<0.05)。结论:黄芪保心汤可有效抑制慢性心力衰竭模型大鼠心室重构及内质网应激凋亡,其主要作用机制可能和影响心肌Bcl-2、Bax以及Caspase-3蛋白表达有关。     

补肾活血方对卵巢早衰模型大鼠性激素水平及颗粒细胞凋亡调控相关因子的影响

  目的：探讨补肾活血方对卵巢早衰大鼠性激素水平及颗粒细胞凋亡调控因子B淋巴细胞瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响  方法：将SD大鼠随机分为6组,包括空白组、模型组、生理盐水对照组(简称对照组)及补肾活血方中药低、中、高剂量组。除空白组外,其余各组均用雷公藤多苷(终浓度50 μg/g)连续灌胃14天建立卵巢早衰大鼠模型。其后各组给予相应干预。观察大鼠动情周期改变及大鼠卵巢组织形态学变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测大鼠血清雌二醇(E₂)、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)水平;采用免疫组化方法检测颗粒细胞凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Caspase-3 的表达  结果：①与空白组比较,模型组大鼠血清FSH水平明显升高(P<0.05),LH水平有一定程度升高,且E₂水平有所降低,但LH及E₂的改变差异不显著(P>0.05);中药各剂量组大鼠FSH水平较模型组显著降低(P<0.01);LH水平除中药高剂量组外,低、中剂量组明显低于模型组(P<0.01);补肾活血方组大鼠E₂水平与模型组比较,除中剂量组外均有明显升高(P<0.01)。②免疫组化染色结果显示,模型组大鼠颗粒细胞Bax、Caspase-3蛋白表达较空白组明显上升(P<0.01),Bcl-2 蛋白有所下降,但下降幅度不明显(P>0.05);中药各剂量组大鼠卵巢颗粒细胞Bax及caspase-3的表达均显著下降(P<0.01),而Bcl-2 蛋白表达仅略有增强(P>0.05)  结论：雷公藤多苷可诱发大鼠卵巢颗粒细胞凋亡致卵巢早衰;补肾活血方能降低Bax 及Caspase-3蛋白的表达,减轻颗粒细胞的凋亡,从而对雷公藤多苷所致卵巢早衰起到治疗作用。     

真武汤对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察真武汤对慢性心力衰竭（CHF）大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法大鼠随机分为假手术组,模型组,真武汤组,依那普利组。采用腹主动脉缩窄法制作CHF大鼠模型,术后4周开始灌胃给药,连续给药6周。检测血流动力学指标,RT-PCR和Western Blot法检测大鼠心肌组织Bcl-2、Bax mRNA和蛋白的表达。结果与模型组相比,真武汤组LVEDP、＋dp/dtmax明显下降,MBP、-dp/dtmax、HR明显上升,Bax表达下降,Bcl-2表达上升。结论真武汤可通过降低Bax在心肌细胞中的表达,调节Bcl-2和Bax平衡来改善CHF大鼠的心功能。     

心复力颗粒对阿霉素致扩张型心肌病心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨心复力颗粒对阿霉素（adriamycin,ADR）致扩张型心肌病（dilated cardiomyopathy,DCM）心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法72只SD大鼠随机分为正常组,模型组,厄贝沙坦组,心复力颗粒低、中、高剂量组,除正常组外均予ADR腹腔注射制备DCM心衰大鼠模型,正常组注射等量生理盐水,每周1次,持续6周。从注射ADR第5周各组开始灌胃给药,将心复力颗粒用蒸馏水配成0.5 g/mL的混悬液,心复力颗粒低、中、高剂量组的灌胃剂量分别为0.675、1.350、2.700 g/（kg·d）,厄贝沙坦组剂量为50 mg/（kg·d）,正常组和模型组给予与中剂量组等量生理盐水,每天上午灌胃1次,连续给药4周。用原位末端转移酶标记（terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL）技术法检测大鼠心肌细胞凋亡,免疫组化方法检测心肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与正常组比较,模型组心肌细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显升高,Bcl-2蛋白表达水平及Bcl-2/Bax比值明显下降（P<0.05）。与模型组比较,心复力颗粒高剂量组和厄贝沙坦组Bcl-2表达水平及 Bcl-2／Bax比值显著升高（P<0.01）;心复力颗粒各剂量组和厄贝沙坦组Bax蛋白表达水平明显下降（P<0.01）。结论心复力颗粒能明显减轻DCM心衰大鼠心肌细胞凋亡,逆转心脏重构的发生、发展,其机制可能与调控Bcl-2、Bax蛋白表达有关。     

燧心胶囊对慢性心力衰竭大鼠凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响

目的:以慢性心力衰竭大鼠为研究对象,测定心肌组织Bcl-2、Bax mRNA水平及其蛋白表达,以探究燧心胶囊干预心室重塑的作用机制。方法:将60只大鼠随机分为假手术组、模型对照组、地高辛组、卡托普利组、燧心胶囊低剂量组、燧心胶囊高剂量组。采用腹主动脉缩窄术建立大鼠慢性心力衰竭模型,连续给药12周。Real time PCR检测心肌细胞凋亡基因Bcl-2 mRNA、Bax mRNA水平;免疫组化法观察大鼠心肌细胞凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:与模型对照组比较,卡托普利组、燧心胶囊低、高剂量组大鼠Bcl-2 mRNA水平及其蛋白表达增高,Bax mRNA水平及其蛋白表达降低,Bcl-2/Bax则显著性增高,差异具有统计学意义(P0.05或P0.01)。其中燧心胶囊高剂量组对Bcl-2和Bax mRNA及其蛋白的调控程度较低剂量组显著(P0.05)。结论:高剂量燧心胶囊能够调控凋亡基因Bcl-2和Bax mRNA水平及其蛋白表达,抑制心肌细胞程序性死亡,延缓心力衰竭的进程。     

蕲艾提取液对免疫性肝纤维化大鼠肝组织Bcl-2表达的影响

目的 研究蕲艾提取液对免疫性肝纤维化大鼠肝组织Bcl-2表达的影响.方法 72只Wister大鼠被随机分为正常对照组、肝纤维化模型组、蕲艾提取液低、中、高剂量组和丹参组.猪血清腹腔内注射法构建肝纤维化大鼠模型.采用荧光定量PCR和Western blot检测大鼠肝脏组织Bcl-2蛋白和,mRNA表达水平.结果 与肝纤维化模型组比较,蕲艾提取液组可下调Bcl-2 mRNA及蛋白表达(P<0.05,P<0.01).结论 蕲艾提取液可下调Bcl-2的表达,促进细胞凋亡,这可能是蕲艾提取液药物血清抗肝纤维化作用机制之一.     

127 蟾蜍毒素的抗肿瘤作用

中药蟾酥的主要活性成分蟾蜍毒素通过促进肿瘤细胞分化、诱导肿瘤细胞凋亡而具有很强的抗肿瘤作用，其作用机理与干扰细胞生长周期、抑制细胞膜Na+／K+-ATP酶、降低拓扑异构酶活性、增强有丝分裂原激活蛋白酶活性、改变肿瘤细胞基因表达等有关。     

活血祛瘀法对真性红细胞增多症细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的探讨活血祛瘀法治疗真性红细胞增多症的作用机理.方法选取真性红细胞增多症初治或未缓解的住院及门诊患者10例,以活血祛瘀药治疗12周,并设立正常对照组.在治疗前,治疗1周、4周、8周、12周采用TUNEL法检测患者骨髓单个核细胞的凋亡率,以免疫组化法检测治疗前后Bcl-2、p53基因,用原位杂交法检测上述基因mRNA表达.结果治疗后1周、4周、8周,患者骨髓单个核细胞凋亡率较前一个观察时点逐步增高(P值均小于0.05);但治疗后12周与治疗后8周比较,无显著性差异(P＞0.05).治疗前患者Bcl-2基因及其mRNA、p53基因及其mRNA水平均高于正常对照组(P＜0.05);治疗后4周Bcl-2 mRNA、治疗后8周Bcl-2基因及其mRNA、治疗后4周和8周p53基因及其mRNA表达均低于治疗前(P＜0.05).结论活血祛瘀法治疗真性红细胞增多症的起效时间可能在治疗后第8周达到高峰,此后若继续用药,其疗效可能趋于平稳.其机理之一可能是通过调节Bcl-2、P53基因及其mRNA水平表达,从而诱导真性红细胞增多症骨髓单个核细胞凋亡.     

清热利湿中药对梗阻性黄疸肝细胞凋亡及Bcl-2表达的影响

目的：探讨清热利湿中药对梗阻性黄疸大鼠肝细胞凋亡及Bcl-2表达的影响。方法：建立梗阻性黄疸大鼠模型，在此基础上将模型大鼠分为中药组和盐水组、模型组，并设立假手术组作对照。分别于第3、7、14、21天处死大鼠，观察血清胆红素、肝组织细胞凋亡指数（AI）、Bcl-2表达等。结果：模型组血清胆红素水平明显升高，与假手术组比较，差异有显著性意义（P〈0．05），提示造模成功。盐水组与中药组分别在第3、7、14、21天各时间段血清胆红素比较，差异均无显著性意义（P〉0．05），提示清热利湿中药不能从根本上降低血清胆红素；随着时间推移，血清胆红素将逐渐增高。不同时期盐水组、中药组AI均较高。与假手术组比较，差异均有显著性意义（P〈0．05），但中药组不同时期AI均较盐水组低（P〈0．05）。假手术组Bcl-2表达较低，与盐水组第3、7天比较，差异无显著性意义（P〉0．05），但与盐水组第14天、第21天比较，差异有显著性意义（P〈0．05）；假手术组与中药组第3、7天比较，差异无显著性意义（P〉0．05），但与中药第14、21天比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。盐水组第3、7天与中药组同时期比较，差异无显著性意义（P〉0．05），盐水组第14、21天与中药组同时期比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：清热利湿中药可促进梗阻性黄疸状态下Bcl-2表达，抑制肝细胞凋亡。     

荷瘤小鼠中医证型与肿瘤生长及转移关系的实验研究

目的：通过复制动物阴虚、阳虚、血瘀等不同病理状态,研究不同中医“证”对肿瘤生长及转移的影响。以期找到对肿瘤生长及转移具有较大影响的中医证候,为临床辨证用药提供理论依据,在防治肿瘤过程中,选用更有效的方药提高防治效果。方法：将荷瘤小鼠做成不同中医证型的模型,研究中医证型与荷瘤小鼠肿瘤生长、转移、Bel-2表达关系。结果：荷瘤小鼠证型对肿瘤的生长及转移有一定影响,其中阴虚组与脾虚组实验动物3项指标的改变是一致的,即实验动物的存活期缩短、实体瘤加大、肺转移病灶增多。血虚组与血瘀组动物与对照组相比,存活期延长,其中血虚组动物与对照组相比差异具有显著性。各实验组中的Bcl-2表达均高于正常对照组。结论：荷瘤小鼠证型对肿瘤的生长及转移有一定影响;脾虚与血瘀证型可以通过促进肿瘤细胞DNA的异常合成途径,促进肿瘤细胞的恶性变;不同中医证型对于肿瘤的生长的确有影响,其机制可能是通过提高Bcl-2的表达水平,抑制瘤细胞的凋亡。     

中药诱导肿瘤细胞凋亡过程中对Bcl-2基因表达的研究

Bcl-2基因抗凋亡作用包括:抗氧化,调节细胞内的Ca2+浓度,调节凋亡信号通路等.Bcl-2与多种肿瘤的关系密切,Bcl-2抑制细胞凋亡,保证肿瘤细胞生存,Bcl-2的表达延长肿瘤细胞的寿命,使肿瘤以较慢速度生长,而其它癌基因引起肿瘤较快生长,这表明Bcl-2对上皮性肿瘤发生发展中凋亡的调控起重要作用,Bcl-2在多种肿瘤中的表达已得到证实[1].基因可抑制多种类型细胞凋亡,在人类很多肿瘤组织中,发现有c-myc基因的扩增或高表达.     

雪旺细胞-藻酸钠凝胶移植促进脊髓损伤修复的实验研究

目的：观察雪旺细胞-海藻酸钠凝胶移植对大鼠脊髓损伤后脊髓细胞凋亡、Bcl-2及功能恢复的影响,探讨其对脊髓损伤修复的促进作用机制。方法：选择清洁级SD大鼠120只,按随机数字表法分为4组：正常对照组、单纯损伤组、雪旺细胞组、雪旺细胞-海藻酸钠凝胶组,每组30只大鼠。制作T10节段脊髓全横断损伤模型。分别于12h、24h、3d、7d、21d等5个时间段对动物进行BBB评分后处死。取损伤区1cm范围脊髓节段,常规石蜡包埋,水平切片进行TUNEL、Bcl-2染色,观察脊髓内凋亡细胞、Bcl-2细胞的数量及分布变化。按BBB评分法对大鼠术后运动功能的恢复情况进行评分。结果：正常对照组仅有少量淡染Bcl-2阳性细胞;损伤对照组神经元Bcl-2免疫反应阳性细胞表达的高峰在第3和第14天时Bcl-2免疫反应阳性细胞表达接近正常水平。雪旺细胞酶藻酸钠凝胶移植后损伤脊髓细胞Bcl-2免疫反应阳性细胞表达具有显著增高（P〈0．05）,7d高度表达并持续2周以上。单纯损伤组脊髓内细胞凋亡最多,并于损伤后第1和第7天形成两个高峰,多分布于白质中。雪旺细胞-海藻酸钠凝胶组细胞凋亡数量较单纯损伤组,差异有统计学意义（P〈0．05）。雪旺细胞-海藻酸钠凝胶组BBB评分较单纯损伤组及雪旺细胞组明显提高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：雪旺细胞-海藻酸钠凝胶移植能抑制大鼠脊髓损伤后脊髓细胞凋亡、促进Bcl-2的表达以及脊髓的功能恢复。     

黄芪注射液对诱发性小鼠胸腺萎缩的干预作用及对胸腺淋巴细胞凋亡相关基因Bcl-2的影响

目的:观察黄芪注射液(AI)对小鼠胸腺萎缩的干预作用.方法:将昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、IL-2组、黄芪注射液高(2 g/kg)、中(1 g/kg)、低(0.5 g/kg)剂量组,除正常对照组外,均采用地塞米松(25 mg/kg)腹腔注射复制小鼠胸腺淋巴细胞凋亡模型.观察黄芪注射液对小鼠胸腺指数的影响及胸腺的形态学改变,TUNEL及胸腺琼脂糖凝胶电泳测胸腺淋巴细胞凋亡,采用免疫组织化学与医学图像分析系统结合的方法检测小鼠胸腺淋巴细胞相关凋亡基因Bcl-2的表达.结果:黄芪注射液能明显改善萎缩的胸腺,增加胸腺指数(P＜0.05);黄芪各剂量组小鼠胸腺皮质细胞明显增多,胸腺淋巴细胞凋亡数目及阳性细胞百分比与模型组比较显著减少(P＜0.05或P＜0.01),DNA琼脂糖凝胶电泳与模型组相比有显著变化,DNA的梯状图谱显色变浅甚至消失,同时还发现黄芪注射液能提高Bcl-2的表达(P＜0.05或P＜0.01).结论:黄芪注射液有明显的抗胸腺萎缩及抑制胸腺淋巴细胞凋亡的作用,其作用机制可能与上调Bcl-2基因表达相关.     

黄连提取物对角质形成细胞增殖活性的影响

目的探讨黄连提取物对角质形成细胞株HaCaT增殖的影响及其机制。方法将不同浓度的黄连提取物作用于培养的HaCaT细胞,采用台盼蓝染色法检测细胞活力;光镜观察细胞的形态变化;MTT比色法测定药物对细胞增殖的影响;RT-PCR半定量检测角蛋白K6和原癌基因Bcl-2的mRNA表达水平变化。结果不同浓度(10.46～167.3μg/mL)黄连提取物处理HaCaT细胞24～72h后,细胞增殖受到明显抑制,抑制率最高达75.5%,且呈现一定的浓度依赖性和时间依赖性。黄连提取物可以下调HaCaT细胞内的角蛋白K6和Bcl-2 mRNA转录水平,随着浓度的增高,诱导其表达水平降低的趋势越明显,呈现一定的浓度依赖性。结论黄连提取物可以明显抑制HaCaT细胞的增殖,其机制可能与下调角蛋白K6和原癌基因Bcl-2的表达有关。     

珍珠丸对兔视网膜缺血再灌注的神经保护作用及Bcl-2基因的表达

目的:观察珍珠丸对兔视网膜缺血再灌注损伤Bcl-2基因表达的影响,探讨珍珠丸对视神经的保护作用。方法:采用升高兔眼压到14.63Kpa持续1小时的方法制作视网膜缺血再灌注模型。将35只日本大耳白兔随机分为正常组、缺血再灌注组及治疗组。采用光镜观察再灌注后不同时间段视网膜组织学变化,运用免疫组化SABC法观测不同时间段治疗组与对照组视网膜组织中Bcl-2基因的表达,进行图像分析。结果:光镜下,缺血再灌注组神经节细胞比正常组明显减少,空泡形成和核固缩现象多见,内网状层、内核层轻度变薄,内核层细胞排列紊乱,外核层变化不明显。Bcl-2基因表达有所增高。而珍珠丸组内核层、神经节细胞层厚度及神经节细胞数目与正常组比较无明显差异,内核层和节细胞层细胞排列比较规整。Bcl-2基因表达量比缺血再灌注组明显增加(P<0.05),与维生素E组比较有显著性差异(P<0.05),但168小时后缺血再灌注组与正常组比较无显著性差异,各组两个时间段Bcl-2基因的表达均有显著性差异。结论:珍珠丸能减少神经元细胞凋亡的数目,并能促成Bcl-2基因的表达,有保护神经元细胞的作用。对于视网膜缺血再灌注损伤具有保护作用,提示珍珠丸可能用于临床上视网膜缺血再灌注损伤的治疗。