转化牛蒡子苷牛蒡内生菌的分离及L2菌株的鉴定

从牛蒡(Arctium lappa L.)的根、茎、叶、总苞、种子中分离纯化了57株内生菌。以牛蒡子粉为底物,采用高效液相色谱法定量测定转化培养液中牛蒡子苷和牛蒡子苷元的含量,筛选得到6株转化牛蒡子苷的内生菌。其中L2的转化率最高,可达76.9%。利用LC-MS方法对其转化产物牛蒡子苷元进行了验证。L2经过形态观察、生理生化特征分析及16S rDNA序列分析,鉴定为氧化微杆菌(Microbacterium oxydans)。本试验结果为探索牛蒡内生菌转化牛蒡子苷成主要药效成分牛蒡子苷元技术提供了科学依据。     

牛蒡子苷元诱导人白血病细胞凋亡的作用及机制

牛蒡子来源于菊科两年生草本植物牛蒡子属牛蒡(Aictium lappa L.)的干燥成熟果实,为常用中药.有疏风散热、解毒透疹、利咽消肿等功效,现代药理学研究表明牛蒡子有抗病毒[1,5]、抗炎[2]、抗癌[3,4]、抑制热休克反应[6]等广泛的药理活性.其主要活性成分是牛蒡子苷元(arctigenin,ARG)[1].     

牛蒡子水煎液及牛蒡苷、牛蒡苷元体外抗菌实验研究

目的：探讨牛蒡子的抗茵作用。方法：取牛蒡子作为研究对象，对其有效成分进行提取、分离，考察牛蒡子水煎液、提取产物牛蒡苷、牛蒡苷元体外对8种细菌的抗茵作用。结果：牛蒡苷元、牛蒡苷、牛蒡子水煎液2：1与1：1浓度与阳性对照药双黄连相比的效果较好。结论：牛蒡子具有一定的抗茵作用，可以开发为一种新型的抗感染药物。     

牛蒡子-甘草药对抗咽炎的网络药理学研究及其13个活性成分同时测定的HPLC方法建立

目的:研究分析牛蒡子-甘草药对治疗咽炎的潜在活性成分群及可能作用机制,并建立同时检测活性成分群中多种成分的HPLC条件与方法,为阐明其药效物质基础及分子机制的实验研究提供基础。方法:通过文献数据挖掘对牛蒡子-甘草药对治疗咽炎的潜在活性成分群进行初步筛选;运用网络药理学对筛选得到的活性成分进行分析;采用HPLC建立同时检测牛蒡子-甘草药对中13个活性成分的定量分析方法。结果:筛选得到由13个主要化学成分组成的牛蒡子-甘草抗咽炎潜在活性成分群;“成分-靶点”网络构建、PPI网络构建、GO功能分析与KEGG通路分析等的综合研究结果显示,牛蒡子-甘草药对抗咽炎可能性作用机制为：以甘草酸、异甘草素、异甘草苷、牛蒡苷元、牛蒡子苷、绿原酸等为主的活性成分群通过与STAT3、MAPK1、RELA、VEGFA等蛋白靶点结合,可调控癌症通路、T细胞受体信号通路、PI3K/AKT信号通路等多条与炎性反应和免疫调节密切相关的信号通路发挥作用。结论:筛选得到牛蒡子-甘草药对抗咽炎的药效物质基础是由13个主要成分组成的活性成分群;通过“多成分-多靶点-多通路”的潜在作用机制,达到调节机体免疫应答,抗炎、抗病原微生...     

牛蒡子水煎液、牛蒡苷和牛蒡苷元体外抗菌实验

目的:对照研究牛蒡子水煎液、牛蒡苷和牛蒡苷元的体外抗菌作用.方法:采用系统溶剂提取法提取牛蒡苷,再用水浴水解法制得牛蒡苷元,以双黄连粉针为对照,用纸片扩散法进行抗菌实验.结果:牛蒡苷元和双黄连粉针的抑菌圈直径均大于15 mm,对5种菌株均有高度敏感,具有很强的抑菌能力.牛蒡苷的抑菌圈稍小,直径为10～14 mm,但也比较明显,属于中等敏感,抑菌能力良好.浓度为2:1、1:1和1:2的牛蒡子水煎液的抑菌圈较小,直径均小于10mm,属于低度敏感,抑菌能力较差.稀释至1:4的牛蒡子水煎液,对试验菌株基本无抑菌效果.结论:牛蒡子具有一定的抗菌作用,可以开发为一种新型的抗感染药物.     

牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的测定

目的：测定牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量。方法采用 Agilent-C18（4.6mm ×250mm,5μm）色谱柱;流动相：甲醇-水二元梯度洗脱,流速0.8mL· min －1,检测波长280nm。结果牛蒡苷和牛蒡苷元分别在0.36～2.8μg（r＝0.9995）,0.006～0.56μg（r＝0.9996）范围内线性关系良好。平均回收率牛蒡苷为100.3％,RSD为2.3％;牛蒡苷元为99.5％,RSD为2.9％。结论该方法简便、准确,实验结果可为牛蒡子的质量控制提供参考。     

正交实验优化牛蒡子的提取工艺

目的:优选牛蒡子乙醇提取的最佳工艺.方法:采用L9(34)正交试验筛选醇提工艺条件,用HPLC法测定牛蒡苷的含量.结果:牛蒡子的最佳醇提条件为:乙醇浓度70%,加8倍溶剂量,回流3次,回流时间1h.结论:采用本工艺牛蒡子的活性成分牛蒡苷提取率达95.43%,工艺可行.     

甘肃产牛蒡子的质量评价研究

目的 对甘肃部分地区产牛蒡子进行质量评价研究,为完善甘肃产牛蒡子饮片的质量规范提供技术支持。方法 采用HPLC测定牛蒡苷、牛蒡苷元含量;采用UV测定总木脂素含量;采用醚浸出物法测定脂肪油含量。结果 收集到的甘肃地区产8个牛蒡子样品中牛蒡苷含量均达到中国药典标准要求,且甘肃定西、临洮、庆阳、和政和甘南产牛蒡子中所含牛蒡苷、牛蒡苷元、总木脂素及醚浸出物含量均不低于收集到的吉林、银川、康定、河南等地产的牛蒡子。结论 甘肃地区产牛蒡子药材质量较好,牛蒡子可作为甘肃开发引种药材新品种的选择。     

牛蒡子苷元与顺铂联合对人肺癌H460细胞系增殖和凋亡的影响

目的研究牛蒡子苷元与顺铂联合对人肺癌H460细胞系增殖和凋亡的影响。方法将不同浓度的牛蒡子苷元作用于肺癌H460细胞,应用MTT法测定牛蒡子苷元单独或联合顺铂对H460细胞的影响。应用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡。应用蛋白免疫印迹法检测切割型Caspase-3和切割型PARP的表达水平。结果与对照细胞相比较,牛蒡子苷元处理可显著抑制H460细胞增殖,并且这种抑制作用具有剂量依赖性。牛蒡子苷元在10μM时可增强顺铂介导的抑制H460细胞增殖(P<0.05)。牛蒡子苷元处理后显著诱导H460细胞凋亡发生,较对照细胞,牛蒡子苷元处理H460细胞具有更高水平的切割型caspase-3和PARP表达(P<0.05)。2和10μM顺铂处理H460细胞48h后分别诱导(8.4±1.9)%和(15.6±2.3)%细胞发生凋亡。当2μM顺铂和10μM牛蒡子苷元联合后,H460细胞发生凋亡的比率增加为(27.2±3.1)%,这表明牛蒡子苷元可增强顺铂对H460细胞凋亡的诱导作用(P<0.05)。结论牛蒡子苷元通过增强切割型caspase-3和PARP的表达,剂量依赖性地抑制H460细胞增殖和促进其凋亡。与顺铂联合后,牛蒡子苷元增强H460细胞对顺铂诱导的细胞增殖抑制和凋亡促进作用。因而,牛蒡子苷元可能在基于铂制剂抗NSCLC治疗中有临床应用价值。     

牛蒡子苷代谢动力学与分布研究

目的研究牛蒡子苷代谢动力学与分布。方法单剂量随机灌胃,高效液相色谱法测定大鼠体内牛蒡子苷浓度及其在脏器中的分布,代谢动力学分析采用3P87软件。结果口服牛蒡子苷300 mg/kg在大鼠体内呈二室模型分布,其主要动力学参数为A=(37.374 5±8.964 7)μg·mL-1;B =(6.210 6±1.489 3)μg·mL-1;α=(0.004 3±0.000 9)min-1;β=(0.000 4±0.000 2)min-1;Kα=(0.420 2±0.167 5)min-1;t1/2α=(115.192 6±14.382 4)min ;t1/2β=(1 485.578 1±161.173 3)min;K10=(0.001 0±0.000 4)min-1;K21=(0.001 4±0.000 6)min-1;K12=(0.002 3±0.001 3)min-1;Cmax=(41.786 3±7.521 7)μg·mL-1;Tmax=(9.891 9±4.341 4)min;AUC =(22 503.272 7±4 120.182 8)μg·min·mL-1。牛蒡子苷在心、肝、肾、脑等脏器也有分布,以肝脏中最高。结论高效液相色谱法测定牛蒡子苷在动物体内代谢变化,快速、受杂质干扰小,且稳定性和重现性较好,适合牛蒡子苷代谢产物含量测定。牛蒡子苷在体内吸收很快,消除也快。     

不同粒度的炒牛蒡子煮散工艺比较

目的：比较不同粒度炒牛蒡子中各成分煎出率及浸膏得率。方法：以传统炒牛蒡子饮片为对照,记为1号,将炒牛蒡子粉碎制成3种不同粒度的煮散饮片,分别记为2号、3号、4号,以HPLC法测定含量,对比各组绿原酸、异绿原酸A、牛蒡苷、牛蒡子苷元煎出率及浸膏得率。结果与结论：对各成分煎出率及浸膏得率进行综合加权评分,4号炒牛蒡子煮散饮片总评分高于其它组别。     

Plasma pharmacokinetics and tissue distribution of arctiin and its main metabolite in rats by HPLC-UV and LC-MS

The pharmacokinetic profile of arctiin, the major active lignan in fruits of Arctium lappa L., was investigated. Its main meta"bolite arctigenin was identified by an LC-MS method, and an HPLC-UV technique was developed for the simultaneous quantification of the metabolite and arctiin in plasma and organs. Chromatographic separation was performed on an Agilent? C?? HPLC column with acetonitrile and water by linear gradient elution. Arctiin and arctigenin were identified on-line by LC-MS. The pharmacokinetics and tissue distribution of arctiin and arctigenin were determined for the first time by using a simple, selective, and accurate HPLC method. The AUC0-t values of arctigenin were larger compared with arctiin after oral administration of arctiin. The concentration of the metabolite was significantly higher than the concentration of arctiin in the stomach and small intestine in rats after oral administration of arctiin, indicating that the stomach and small intestine were the major organs of arctiin metabolism. These findings could provide support for the clinical studies conducted with Fructus Arctii.     

不同牛蒡子中牛蒡苷的鉴别及含量考察

目的:采用薄层色谱法和高效液相色谱法对牛蒡子、炒牛蒡子及其免煎剂中主要成分牛蒡苷进行鉴别及含量测定。方法:鉴别采用TLC法,含量测定采用HPLC法。色谱柱:Diamonsil C₁₈柱（200 mm×4.6 mm,5μm）;流动相:甲醇-水（1:1.1）;柱温:30℃;流速:1 ml·min^-1;检测波长280 nm。结果:TLC图谱显示,斑点清晰。含量测定方法学考察结果,平均回收率为97.56%,RSD为1.41%（n=6）。牛蒡子生品与炮制品中牛蒡苷的含量均符合药典限度要求,免煎剂中牛蒡苷含量仅为炮制品中的1/3。结论:该实验方法简便、准确、专属性强,可用于牛蒡子及其制剂的质量控制;牛蒡子免煎剂的生产提取工艺有待于进一步完善。     

牛蒡子中牛蒡子苷元的分离及结构表征

目的：从牛蒡子中分离纯化出有效成分,并对其分子结构进行鉴定与表征。方法：采用醇提酸解法提取,分离出粗品,经过对粗品进行脱脂、结晶处理,得到无色棱状晶体。采用紫外光谱（UV）、红外光谱（FTIR）、质谱（MS）、氢谱（H-NMR）、碳谱（C-NMR）及单晶衍射对该有效成分进行组成和分子结构的鉴定与表征。结果：从牛蒡子粗粉中经提取分离,得到结晶,提取率为4.46%,显色反应及波谱分析均显示为木脂素类化合物。结论：该有效成分鉴定为牛蒡子苷元,即（3R,4R）-4-[（3,4-二甲氧基苯基）甲基]二氢-3-[（4-羟基-3-甲氧基苯基）甲基]-2（3H）-呋喃酮,分子式为C21H24O6。     

感冒停配方颗粒质量标准研究

目的对感冒停配方颗粒质量标准进行研究。方法采用薄层色谱法对感冒停配方颗粒进行定性鉴别,采用高效液相色谱法对牛蒡子中的牛蒡苷进行含量测定。结果牛蒡苷的进样量在0.550～2.750μg范围内与峰面积积分值线性关系良好,平均回收率为95.46%,RSD=1.23%(n=6)。结论该方法准确、重复性好,能有效地控制感冒停配方颗粒的质量。     

基于抗氧化活性与有效成分关联分析的连翘商品规格品质评价

目的：对连翘药材的不同商品规格"青翘"、"老翘"、"青翘心"及"老翘心"进行品质评价。方法：采用清除DPPH自由基方法对不同商品规格连翘的抗氧化活性进行测定,以量效关系、IC₅₀等指标进行直观和定量比较;同时,通过高效液相色谱法（HPLC）测定样品中连翘苷、连翘酯苷A、槲皮素、牛蒡子苷元及牛蒡子苷的含量,以相关分析及多元线性逐步回归分析进行抗氧化活性与化学成分之间的关联。结果：连翘具有较强清除DPPH自由基活性,IC₅₀大小为：青翘心 > 青翘 > 老翘心 > 老翘 > 维生素E,HPLC测连翘酯苷A与槲皮素的含量为：青翘心 > 老翘心 > 青翘 > 老翘,连翘酯苷A及槲皮素、牛蒡子苷元分别与IC₅₀呈极显著及显著负相关关系,多元线性逐步回归分析显示槲皮素的含量增加有助于清除DPPH自由基水平的提高,槲皮素与牛蒡子苷元可能有协同作用。结论：不同商品规格的连翘抗氧化活性为"青翘"优于"老翘"、"心"优于"皮",连翘酯苷A含量最高,且连翘酯苷A及槲皮素含量越多,连翘商品的抗氧化性越强,所建立方法把抗氧化活性与化学成分关联对不同规格连翘商品的品质进行评价,可以为完善和提高连翘的质控水平提供技术支持与研究思路的参考。     

山东地区药用牛蒡子的质量评价

目的对山东地区商品牛蒡子的质量状况进行分析。方法按照《中国药典》2005年版牛蒡子项下方法对性状、显微、总灰分、酸不溶性灰分进行检测。结果发现二批牛蒡子伪品大鳍蓟,比较牛蒡子生品与炮制品炒牛蒡子中牛蒡苷的含量。结论建议增加炒牛蒡子的含量测定等质控项目,严格控制牛蒡子药材质量,保证用药安全。     

Arctigenin isolated from the seeds of Arctium lappa ameliorates memory deficits in mice

The seeds of Arctium lappa L. (AL, family Asteraceae), the main constituents of which are arctiin and arctigenin, have been used as an herbal medicine or functional food to treat inflammatory diseases. These main constituents were shown to inhibit acetylcholinesterase (AChE) activity. Arctigenin more potently inhibited AChE activity than arctiin. Arctigenin at doses of 30 and 60?mg/kg (p.?o.) potently reversed scopolamine-induced memory deficits by 62?% and 73?%, respectively, in a passive avoidance test. This finding is comparable with that of tacrine (10?mg/kg p.?o.). Arctigenin also significantly reversed scopolamine-induced memory deficits in the Y-maze and Morris water maze tests. On the basis of these findings, arctigenin may ameliorate memory deficits by inhibiting AChE.