检测MUC-1 mRNA对诊断非小细胞肺癌患者外周血微转移的意义

背景与目的:粘蛋白家族,包括MUC-1,通常被认为是上皮组织及其来源的肿瘤的产物.理论上如果在间叶组织来源的血液中找到MUC-1 mRNA即意味着癌转移.本研究探讨MUC-1 mRNA作为分子指标检测非小细胞肺癌患者外周血微转移的可行性.方法:应用巢式RT-PCR技术检测60例非小细胞肺癌患者外周血中MUC-1基因的表达,并以15例肺良性疾病患者及20名健康人外周血作为对照,同时使用相同的方法,扩增非上皮细胞来源的细胞株K562,HL-60及上皮细胞来源的细胞株A549、MCF-7,以观察靶基因的表达情况.结果:病患组MUC-1 mRNA表达阳性率达80.0%(48/60).15例肺良性疾病患者及20例健康人外周血中MUC-1 mRNA表达阳性率分别为60.0%(9/15),65.0%(13/20),K562、HL-60及A549、MCF-7细胞株经巢式RT-PCR也可以扩增出靶基因的条带.结论:MUC-1 mRNA不是检测非小细胞肺癌外周血微转移的可靠指标.     

巢式PCR检测CK19 mRNA和LUNX mRNA诊断肺癌淋巴结微转移

目的：探讨非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）淋巴结微转移的基因诊断方法，并分析CK19 mRNA、LUNX mRNA作为肺癌微转移检测分子标记物的可行性。方法：采用巢式RT—PCR技术检测39例NSCLC患者的149枚淋巴结和20例肺良性病变患者的47枚淋巴结中的细胞角蛋白19（CK19 mRNA）、肺特异性X蛋白（LUNX mRNA）的表达。结果：39例NSCLN患者的149枚淋巴结中，46枚（30．9％）淋巴结存在CK19 mRNA阳性表达，56枚（37．6％）存在LUNX mRNA阳性表达，常规病理组织学检出20枚（13．4％）有癌转移，巢式RT—PCR方法和常规病理方法比较差异有统计学意义（P〈0．01）；20例肺良性病变患者的47枚淋巴结中CK19 mRNA和LUNX mRNA表达均为阴性，与肺癌组比较均有统计学意义（P〈0．01）。淋巴结微转移与病理类型、细胞分化程度和临床分期有密切关系（P〈0．05）。结论：CK19 mRNA、LUNX mRNA可作为检测NSCLC患者淋巴结微转移的分子标记物，联合检测可能有助于早期诊断肺癌转移，从而指导临床个体化治疗。     

肺癌患者三种微转移标志物临床意义的比较研究

目的评价肺癌患者外周血LUNX mRNA 、CK19 mRNA、CEA mRNA诊断微转移的特异性、敏感性,探索肺癌患者微转移的早期诊断.方法以肺部良性疾病30例、健康人10例的外周血为对照,以LUNX mRNA 、CK19 mRNA、CEA mRNA的表达为指标,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测48例肺癌患者外周血、手术切除区域44个淋巴结的微转移,并根据淋巴结病理切片、临床分期、随访过程中复发转移率评价微转移的临床意义.结果①LUNX mRNA、CK19 mRNA、CEA mRNA在肺癌组织的表达率均为100%(35/35).②48例肺癌患者外周血中LUNX mRNA阳性30例(62.5%),CK19 mRNA阳性24例(50.0%),CEA mRNA阳性32例(66.7%);44枚肺癌患者手术切除的区域淋巴结,LUNX mRNA阳性16枚(36.4%),CK19 mRNA阳性12枚(27.3%),CEA mRNA阳性18枚(40.9%).③30例肺部良性疾病患者外周血中,CK19 mRNA表达阳性2例(6.7%),LUNX mRNA或CEA mRNA表达均阴性;10例健康人外周血和11枚取自肺良性疾病患者的淋巴结,3个指标检测结果均为阴性.④44枚肺癌区域淋巴结中,普通病理组织学检出6枚(13.6%)有癌转移,阳性率明显低于RT-PCR检测结果(P<0.05).⑤3种微转移指标的阳性率均随TNM分期的增加而升高(P=0.01).⑥随访发现外周血微转移阳性患者的复发率高于阴性患者.结论 LUNX mRNA、CK19 mRNA 、CEA mRNA有可能成为监测肺癌微转移的分子标志.     

CK19mRNA,MUC1mRNA,LUNX mRNA在非小细胞肺癌微转移中的表达及临床意义

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)和非肿瘤患者骨髓和外周血中肿瘤特异性标志物细胞角蛋白19(CK19)、黏蛋白1(MUC1)和肺特异性蛋白X(LUMX) mRNA表达情况,探讨微转移与肿瘤的病理类型、分期的关系.方法:选取肺癌患者30例,健康对照组15例,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测CK19、MUC1和LUNX三项标志物.结果:患者骨髓和外周血中CK19 mRNA阳性率分别为36.7%和30%,其表达状况与患者的肿瘤病理类型、吸烟史无明显关系,而与肿瘤的病理分期关系密切;MUC1 mRNA 阳性率分别为6.7% 、6.7%,其表达与肿瘤的分期、病理类型、患者的吸烟史均无显著关系,与骨髓及外周血中微转移的关系尚待确定;LUNX mRNA阳性率分别为16.7%和13.3%,可以作为指示NSCLC微转移的敏感特异的指标.结论:三种检测标志物中CK19 mRNA对微转移的诊断敏感性较高,但存在假阳性的可能;LUNX mRNA作为一个新的检测指标对微转移的诊断有一定的作用,但特异性和敏感性不高;MUC1 mRNA与骨髓及外周血中微转移的关系尚待确定.     

CK19 mRNA,MUC1 mRNA,LUNX mRNA在非小细胞肺癌微转移中的表达及临床意义

目的：检测非小细胞肺癌（NSCLC）和非肿瘤患者骨髓和外周血中肿瘤特异性标志物细胞角蛋白19（CK19）、黏蛋白1（MUC1）和肺特异性蛋白X（LUMX）mRNA表达情况,探讨微转移与肿瘤的病理类型、分期的关系。方法：选取肺癌患者30例,健康对照组15例,应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测CK19、MUC1和LUNX三项标志物。结果：患者骨髓和外周血中CK19 mRNA阳性率分别为36.7%和30%,其表达状况与患者的肿瘤病理类型、吸烟史无明显关系,而与肿瘤的病理分期关系密切;MUC1 mRNA阳性率分别为6.7%、6.7%,其表达与肿瘤的分期、病理类型、患者的吸烟史均无显著关系,与骨髓及外周血中微转移的关系尚待确定;LUNX mRNA阳性率分别为16.7%和13.3%,可以作为指示NSCLC微转移的敏感特异的指标。结论：三种检测标志物中CK19 mRNA对微转移的诊断敏感性较高,但存在假阳性的可能;LUNX mRNA作为一个新的检测指标对微转移的诊断有一定的作用,但特异性和敏感性不高;MUC1 mRNA与骨髓及外周血中微转移的关系尚待确定。     

检测肺癌患者外周血和骨髓微转移的临床意义

目的探讨检测肺癌患者外周血和骨髓微转移的特异性、敏感性及临床意义。方法应用巢式RT-PCR技术,检测59例肺癌患者、11例肺部良性病变患者和20例健康人外周血、骨髓中CK19 mRNA表达。结果巢式RT-PCR检测技术的敏感性达到10-6。59例肺癌患者中,20例检测出外周血微转移,13例检测出骨髓微转移,其阳性检出率分别为33.9％(20/59)和22.0％(13/59),二者有显著正相关(P<0.05)。肺癌患者外周血和骨髓微转移与肺癌组织学类型、细胞分化程度及P-TNM分期均存在密切关系(P<0.05或P<0.01)。肺良性病变患者、健康人外周血和骨髓中均未检测出CK19 mRNA表达。结论肺癌患者外周血和骨髓中均存在用常规方法检测不出的微转移;应用巢式RT-PCR技术检测肺癌患者外周血和骨髓中CK19 mRNA表达,对肺癌微转移的分子诊断具有重要的理论意义和临床应用前景。     

检测LUNX mRNA表达诊断非小细胞肺癌微转移的可行性及其临床意义

背景与目的 微转移的检测对非小细胞肺癌的个体化治疗和指示预后具有重要意义。LUNX为近年新发现的人类肺组织特异性基因。本研究的目的是检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者LUNX mRNA的表达情况，探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性。方法 选择初治的NSCLC患者62例，以肺部良性疾病10例与健康人10例作为对照组，采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ-RT—PCR）和普通RT—PCR技术，检测肺癌、良性病变肺组织、骨髓和外周血LUNX mRNA的表达。结果肺癌和良性病变肺组织中LUNX mRNA阳性表达率均为100％。肺良性病变组骨髓及外周血标本和健康对照组外周血标本中LUNX mRNA表达皆为阴性。62例NSCLC患者骨髓LUNX mRNA阳性表达率为38．7％（24／62），外周血LUNX mRNA阳性表达率为29．0％（18／62），至少一项阳性表达者占45．2％（28／62）；骨髓LUNX mRNA阳性表达率随分期升高且有统计学意义（P=0．02），与病理类型、肿瘤分化程度无明显关系；外周血LUNX mRNA表达与病理分期、病理类型、肿瘤分化程度均无明显关系。NSCLC患者骨髓和外周血LUNX mRNA表达有相关性（P〈0．001）。结论 LUNX mRNA可作为检测NSCLC患者微转移的特异、敏感的分子标志物，可能有助于早期诊断肺癌转移，从而指导临床分期和治疗。     

检测CK19 mRNA、CEA mRNA诊断非小细胞肺癌外周血微转移

目的 探讨检测细胞角蛋白(cytokeratin 19，CK19)mRNA、癌胚抗原(cancer embryonic antigen，CEA)mRNA诊断非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)患者外周血微转移的临床意义。方法 应用RT-PCR法检测35例NSCLC患者外周血中的CK19mRNA、CEAmRNA，并以20例良性病变、20例健康人作对照。结果 35例NSCLC患者外周血CK19mRNA、CEAmRNA阳性表达率分别为40％和57％，两者均阳性者40％，两者均阴性者43％；肺良性疾病患者20例，CK19mRNA阳性2例(10％)，无CEAmRNA阳性者；20例健康对照2个指标检测结果均为阴性。随访发现CK-19mRNA阳性、CEAmRNA阳性和二者均阴性患者的远处转移率分别为50％、56％和27％。结论CEAmRNA和CK19mRNA是检测肺癌患者外周血微转移的良好标志物，检测外周血微转移有助于预测肺癌患者预后。     

肺癌术中肺血管结扎顺序对肺癌微转移影响的研究

目的:探讨肺癌患者术中肺血管结扎顺序对肺癌微转移影响及临床意义.方法:60例非小细胞肺癌手术患者,术前随机分为先扎动脉组和先扎静脉组,每组30例,术前、术中和术后取患者外周静脉血,巢式RT-PCR方法检测外周血中CK19 mRNA、LUNX mRNA表达.选取10名健康成年人(健康组)外周静脉血做阴性对照.结果:术前先扎动脉组患者外周血中CK19 mRNA、LUNX mRNA表达率与健康组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),术前先扎静脉组患者外周血中CK19 mRNA、LUNX mRNA表达率与健康组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),而先扎动脉组和先扎静脉组间术前比较差异均无统计学意义(χ2=0.000,P=1.000),但术中与术后比较差异均有统计学意义(P<0.05).CK19 mRNA、LUNX mRNA在术前、术中、术后间差异有统计学意义(P<0.05),而CK19 mRNA、LUNX mRNA两者之间差异无统计学意义(P>0.05).腺癌与鳞癌间差异无统计学意义(P>0.05).Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期肺癌间差异有统计学意义(P<0.05).结论:肺癌术中先结扎肺静脉可减少癌细胞的微转移.CK19 mRNA、LUNX mRNA可以作为检测肺癌外周血中癌细胞微转移的2个指标,预测肺癌微转移.     

RT-PCR法检测非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA的临床意义

目的:检测非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA的表达情况,探讨其表达的临床意义.方法:采用逆转录PCR(RT-PCR)方法,分别检测非小细胞肺癌患者和对照组患者外周血中CK19 mRNA的表达.结果:43例非小细胞肺癌患者外周血中CK19 mRNA表达阳性率为56%,对照组阳性率为5%,两组外周血CK19 mRNA阳性率比较有显著性差异(P＜0.01);外周血CK19 mRNA阳性率与病理类型无相关性;淋巴结转移阳性和阴性患者的外周血中CK19 mRNA阳性率分别为66%(21/32)和18%(2/11),二者差异显著(x2=6.65,P＜0.05).随TNM分期上升,CK19mRNA阳性率增加(x2=18.03,P＜0.01).结论:CK19 mRNA可作为RT-PCR法检测非小细胞肺癌患者外周血微转移的分子标志物,该方法敏感性高,有助于早期诊断肺癌血行转移,指导临床分期和治疗.     

COX-2mRNA、CD105mRNA在骨肉瘤中表达的临床意义

目的研究环氧合酶-2mRNA（COX-2mRNA）在骨肉瘤中的表达及其与CD105mRNA的相关性。方法应用原位杂交的方法检测人骨肉瘤中COX-2mRNA和CD105mRNA的表达，并计算CD105mRNA标记的微血管密度（MVD）。结果COX-2mRNA在骨肉瘤中表达阳性率为77.5％，COX-2mRNA的表达与外科分期和肿瘤的转移密切相关（P〈0．05）；外科分期的I期与IIb期、III期间的MVD值的差异有统计学意义（P〈0．05），而I期与IIa期、IIa期与IIb期之间的差异无统计学意义（P〉0．05）；转移组的骨肉瘤其MVD值高于未转移组，二者之间的差异有统计学意义（P〈0．05）；COX-2mRNA表达与MVD值呈正相关（P〈0．05）。结论COX-2mRNA在骨肉瘤组织中呈现高表达，其高表达可能促进了骨肉瘤新生血管的生成。     

上皮性卵巢癌组织中EGFR、EGFR mRNA、LRP和LRP mRNA表达水平及其临床意义

目的 探讨上皮性卵巢癌卵巢组织中表皮生长因子受体(EGFR)、卵巢组织中表皮生长因子受体信使RNA(EGFR mRNA)、肺耐药蛋白(LRP)和肺耐药蛋白信使RNA(LRP mRNA)表达水平及临床意义.方法 选取经过手术治疗且确诊为上皮性卵巢癌的98例患者进行研究.另选择取同期体检为健康人群的30例女性作为对照组.通...     

胆囊腺癌中KAI 1mRNA、Kiss 1mRNA表达的临床病理意义

目的 研究胆囊腺癌、慢性胆囊炎和胆囊结石组织中KAI 1mRNA和Kiss 1mRNA表达水平及其临床病理意义。方法 108例胆囊腺癌、15例慢性胆囊炎和20例胆囊结石组织标本常规制作石蜡包埋切片,KAI 1mRNA和Kiss 1mRNA染色方法为原位杂交染色法。结果 胆囊腺癌组织中KAI 1mRNA和Kiss 1mRNA阳性表达率明显低于慢性胆囊炎和胆囊结石组织（P＜0.05,P＜0.01）;腺瘤癌变或高分化腺癌、肿块最大径≤3cm、无淋巴结转移及未侵犯周围组织的病例KAI 1mRNA和Kiss 1mRNA阳性表达率明显高于低分化腺癌或粘液腺癌、肿块最大径＞3cm、淋巴结转移及侵犯周围组织的病例（P＜0.05,P＜0.01）。结论 KAI 1mRNA和Kiss 1mRNA表达可能是反映胆囊腺癌发生、进展、转移或侵袭潜力及预后的重要生物学标记物。     

p16mRNA和MDM2mRNA在恶性纤维组织细胞瘤中的表达及意义

[目的]探讨p16mRNA和MDM2mRNA在恶性纤维组织细胞瘤组织中的表达及其与肿瘤浸润、转移的关系，分析两者表达的临床意义。[方法]应用原位杂交方法检测66例恶性纤维组织细胞瘤组织中P16mRNA、MDM2mRNA的表达。[结果]P16mRNA和MDM2mRNA在肿瘤组织中的阳性表达率分别为48.5％和66.7％；P16mRNA和MDM2mRNA的阳性表达率与临床分期、病理分化程度和生存期显著性相关（P〈0.05）；而与患者的性别、年龄和组织学类型无关（P〉0.05）。[结论]p16和MDM2在恶性纤维组织细胞瘤发生、发展中起重要作用,而且可能是预测恶性纤维组织细胞瘤预后的生物学指标。     

胃癌术中腹腔冲洗液CK20mRNA、COX-2 mRNA检测及与腹膜微转移的相关性

目的：运用细胞学及实时荧光定量RT-PCR方法对胃癌术中腹腔冲洗液进行检测,以探讨对预测胃癌腹膜微转移的意义。方法：胃癌50例和胃良性病变10例,收集患者术中腹腔冲洗液,用实时荧光定量RT-PCR方法测定腹腔冲洗液中游离细胞的CK20mRNA、COX-2 mRNA表达,同时作冲洗液细胞学检测（PLC）。结果：50例胃癌患者腹腔冲洗液中CK20mRNA阳性表达为62.0%（31/50）;COX-2 mRNA阳性表达率60.0%（30/50）,CK20mRNA、COX-2 mRNA联合检测阳性率为68.0%（34/50）,皆高于腹腔冲洗液细胞学28.2%（11/50）,CK20mRNA、COX-2 mRNA的阳性率与肿瘤分期、浸润深度、淋巴结转移、浆膜侵犯程度呈正相关。结论：CK20mRNA、COX-2 mRNA实时荧光定量RT-PCR方法检测腹腔微量游离癌细胞较PLC有更高的灵敏度,是一种检测胃癌腹膜微转移的有效方法。     

VEGF、COX-2 mRNA在食管癌中的表达及其意义

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)剪接变异体、环氧合酶-2(COX-2)与食管癌发生的关系.方法 应用RT-PCR方法对40例食管癌组织及其相应癌旁组织中VEGF、COX-2 mRNA的表达进行了研究.结果 VEGF121mRNA在癌组织中及相应癌旁组织中均有表达,两组差异无统计学意义.40例癌组织中,VEGF165高表达25例,占62.5%;COX-2高表达28例,占70%;40例癌旁组织中,VEGF165高表达6例(15.0%);COX2高表达5例(12.5%).结论 VEGF165、COX-2与食管癌的发生密切相关.     

胃癌多药耐药相关蛋白mRNA表达及临床意义

目的 研究胃癌组织中MRP1 mRNA、MRP2 mRNA表达水平及其临床意义。方法 常规石蜡包埋切片原位杂交染色法。结果 50例胃癌MRP1 mRNA和MRP2 mRNA表达阳性率分别为64％和68％,其评分分别为(3.4±1.6)和(3.5±1.4)。高分化腺癌和区域淋巴结未转移癌MRP1 mRNA、MRP2 mRNA表达阳性率及其评分均明显高于未分化癌和伴淋巴结转移癌,差异均有显著性或高度显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:MRP1 mRNA和MRP2 mRNA表达水平对了解胃癌发生发展、生物学行为和预后,以及指导化疗均有重要意义。