温石棉对大鼠肺泡巨噬细胞膜脂质过氧化的研究

温石棉对大鼠肺泡巨噬细胞膜脂质过氧化的研究肖国兵，马藻骅，邱华士宁波市卫生防疫站３１５０１０众所周知，长期接触石棉尘可引起石棉肺、肺癌等，但其致病机制尚不明了。已有试验表明石棉纤维可增加巨噬细胞脂质样化［１］。肺泡巨噬细胞作为肺纤维化的主要反应细胞，...     

柠檬酸铝对温石棉致肺泡巨噬细胞酶释放的抑制作用

用柠檬酸铝溶液于室温下浸泡茫崖或涞源温石棉一小时，观察了两种温石棉致肺泡巨噬细胞酶释放能力的改变。结果表明，示经柠檬酸铝处理的茫崖或涞源温石棉，均可致肺泡巨噬细胞释放乳酸脱氢酶及酸性磷酸酶，该作用存在时间及剂量依赖关系。经柠檬酸铝处理后，两种温石棉致细胞释放两种酶的能力，随柠檬酸铝剂量增加而逐渐降低。表明柠檬酸铝能抑制温石棉对肺泡巨噬细胞的损伤作用。这为预防温石棉的危害提供了重要信息。     

温石棉对肺泡巨噬细胞膜Fc变体的影响

肺泡巨噬细胞可以一种或多种机制参与石棉相关疾病的发生过程。研究表明,巨噬细胞膜Fc受体与细胞的许多生物学功能有关,如花生四烯酸代谢及前列腺素的合成,触发细胞产生活性氧自由基及释放溶酶体酶。最近有人报道Fc受体还具有离子通道作用。因此,本研究拟就国产茫崖及涞源温石棉(简称茫棉及涞棉)对肺泡巨噬细胞膜Fc受体的影响进行了初步探讨。 1 材料与方法 1.1 温石棉的制备将来自茫崖及涞源石棉矿的长纤维石棉剪成1cm,置于冰冻切片机上切断,将切下的纤维置于60℃烤箱内烘干。用前以生理盐水稀释成一定浓度。     

Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞氧化损伤的缓解作用

目的 探讨Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞氧化损伤的影响。方法 应用支气管灌洗的方法获得大鼠肺泡巨噬细胞(AM),纯化后与终浓度50μg／ml的温石棉分别孵育2h和4h,在孵育的同时加入不同浓度的Oncolyn,检测AM中DNA损伤状况以及抗氧化酶SOD、GSH—Px的活性。结果 肺泡巨噬细胞与温石棉共同培养2h后,DNA损伤和SOD、GSH—Px活性增加,表现出彗星出现率和DNA迁移长度增加;当培养4h后,彗星出现率比培养2h更高,DNA迁移长度不再增加,而SOD、GSH-Px活性均下降。在AM与温石棉作用的同时加入不同浓度的Oncolyn后,DNA损伤减轻,抗氧化酶SOD、GSH—Px的活性上升。结论 Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞的氧化损伤有一定的缓解作用。     

石棉对大鼠肺泡巨噬细胞毒作用的体外研究

本文研究了新康温石棉,加拿大(UICC)温石棉和石英粉尘,经5,10,15小时体外染尘对大鼠肺泡巨噬细胞的毒作用,结果表明各组细胞的存活率均随培养时间而下降,以石英组下降最快,加拿大组次之,各染尘组与对照组间有明显差异,染尘细胞的形态与功能有明显改变经光镜和电镜检查可见细胞迅速增大,内含多量不同大小的空泡,两石棉组不少细胞成锥形或梭形,肾形核双核和三核细胞明显增加,并有两巨噬细胞共吞长石棉纤维,三种粉尘均无例外地被吞噬,毒性有所差异以石英最大,认为此种差异由粉尘性质和形状不同所致.     

石英和温石棉致兔肺泡巨噬细胞谷胱甘肽过氧化物酶活性改变的比较研究

为了探讨石英、石棉对抗氧化酶活性的影响,利用改良Ｍｙｖｉｒｋ 法收集兔肺泡巨噬细胞进行体外培养,采用酶－ 底物反应形成有色物来测定巨噬细胞的细胞裂解液中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）的酶活性。结果发现,随着粉尘浓度的增加,石英组和温石棉组巨噬细胞内的ＧＳＨＰｘ的酶活性相应降低,存在显著的剂量反应关系（Ｐ＜ ０．０１）。在不同的粉尘剂量组,温石棉组和石英组的ＧＳＨＰｘ 酶活性均显著低于二氧化钛组（Ｐ＜ ０．０５）,温石棉组低于石英组,但未发现显著的统计学差异。石英组和温石棉组的巨噬细胞死亡率均随粉尘浓度的增加而增大,存在着剂量反应关系,且温石棉组的死亡率高于石英组。石英组、温石棉组巨噬细胞内ＧＳＨＰｘ 酶活性和巨噬细胞的死亡率之间的相关系数分别为－ ０．９３１８ 和－ ０．８９８４,而二氧化钛组只有－ ０．３６３７。这说明石英、温石棉均可致巨噬细胞内ＧＳＨＰｘ 酶活性呈剂量反应关系的降低,使得胞内自由基Ｈ２Ｏ２ 不能正常消除,促使脂质过氧化加重,损害细胞;且温石棉的效应强于石英。提示ＧＳＨＰｘ 酶活性的降低在石英、温石棉致病中具有一定的作用     

二氧化硅和青石棉对小鼠肺泡巨噬细胞的影响

肺泡巨噬细胞(PAM),在炎症及免疫反应中起着重要作用,是肺的第一道防御屏障。目前,对PAM的吞噬功能方面研究较多,而对PAM体外集落形成能力方面报道较少。本文通过对小鼠经气管注入致纤维化粉尘(SiO_2和青石棉)及非致纤维化粉尘(TiO_2)后,着重观察其PAM体外集落形成能力的变化,以阐明吸入物质对PAM的增殖与分化的影响。 材料和方法 1.动物 C_3H/HeN纯系、健康雌性小鼠,6～7周龄。由日本SLC实验动物场提供。 2.实验粉尘 SiO_2(Min-u-sil;美国宾夕     

温石棉对细胞膜脂质流动性及通透性的影响

用荧光探针ＤＰＨ标记肺泡巨噬细胞，观察到随温石棉剂量增加，茫棉及涞棉均可增加细胞膜脂质的流动性，表现为膜脂质荧光偏振度及脂区徽粘度的降低。茫棉及涞棉亦可增加膜通透性，使胞内Ｋ＋含量下降，该作用存在剂量一效应关系。茫棉及涞棉所致膜脂质流动性改变与膜通透性改变存在明显相关关系。因此，两种温石棉所致的膜脂质流动性增加可能与膜通透性增加一样与细胞受损有关。     

柠檬酸铝对温石棉诱发巨噬细胞活性氧抑制作用的研究

利用电子自旋共振自旋捕获技术、细胞色素Ｃ还原法及酚红氧化法，分别探讨了茫崖及沫源温石棉诱发肺泡巨噬细胞活性氧及柠檬酸铝的抑制作用。结果表明，两种温石棉在一定条件下，均可刺激巨噬细胞产生ＯＨ、Ｏ＿２及Ｈ＿２Ｏ＿２，并具有剂量依赖关系。经柠檬酸铝溶液室温下浸泡１ｈ，茫崖及涞源温石棉诱发活性氧产生的能力明显减弱。     

硒对染尘肺泡巨噬细胞脂质过氧化和抗氧化酶影响的实验研究

目的探讨硒(Se)抗石英尘的细胞毒作用及其机理.方法采用体外细胞培养法,观察在不同浓度硒作用下,染石英尘的肺泡巨噬细胞(AM)膜脂质过氧化物丙二醛(MDA)生成量和AM内抗氧化酶-超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果在体外染石英尘中加入硒有效抑制AM膜丙二醛生成量,其中以1.0×10-4mo/L硒作用最为明显,并可提高AM内超氧化物歧化酶活性,且有一定的剂量反应关系.结论硒具有抗石英尘对肺泡巨噬细胞脂质过氧化的作用.     

石棉尘及保护剂对肺泡巨噬细胞分泌细胞因子的影响

石棉尘及保护剂对肺泡巨噬细胞分泌细胞因子的影响王为民，施中华，魏自来，孙义敏（８１１０１部队医院）本文通过石棉尘及保护剂对肺泡巨噬细胞（ＰＡＭ）产生几种细胞因子的影响，探讨石棉致病机理及保护剂的作用。１材料与方法（１）粉尘制备：四川石棉矿的温石棉（０...     

温石棉与吸烟对肺泡巨噬细胞产生一氧化氮的影响

为探讨石棉与吸烟对人体健康影响的机制，用Ｇｒｅｉｓｓ法测定了温石棉及香烟烟雾溶液分别与共同作用下肺泡巨噬细胞（ＡＭ）产生的ＮＯ终产物ＮＯ－２。结果显示：温石棉可使ＡＭ产生的ＮＯ－２明显增加，且有剂量－效应关系，但烟溶液不能使ＡＭ产生的ＮＯ－２增加或减少，在两者共同作用时，烟溶液反而抑制温石棉诱导ＡＭ产生ＮＯ－２。当测定ＡＭ的吞噬功能时，发现烟溶液可明显抑制ＡＭ的吞噬功能。提示：烟溶液对温石棉诱导ＡＭ产生ＮＯ具有抑制作用，这种作用主要是由于其抑制了ＡＭ吞噬温石棉的能力造成的     

几种化合物对石棉诱发肺泡巨噬细胞产生一氧化氮的抑制作用

为了寻求一种适宜的石棉表面改性剂，利用体外细胞培养技术，通过测定培养液中亚硝酸根（ＮＯ－２）含量，观察了茫崖产温石棉对豚鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）产生一氧化氮（ＮＯ）的诱导作用以及混合稀土、亚硒酸钠、柠檬酸铝对石棉诱发ＡＭ产生ＮＯ的影响。结果显示，温石棉纤维可使培养液中ＮＯ－２浓度升高，并呈明显的剂量反应关系；混合稀土、亚硒酸钠、柠檬酸铝均可抑制石棉诱发ＡＭ产生ＮＯ，而且随上述化合物浓度的升高，抑制作用增强。提示用混合稀土和亚硒酸钠拮抗石棉的致病作用有实际应用的可能。     

螺旋藻抗石英尘对肺泡巨噬细胞影响的实验研究

观察不同时点螺旋藻对染尘肺泡巨噬细胞的保护功能。方法采用肺泡巨噬细胞体外培养方法。结果随培养时间延长,各组ＬＤＨ、ＭＤＡ含量均明显升高,ＳＯＤ含量均明显下降,尤其在１２小时前变化较明显,但经ＳＰ处理的两组则有明显的拮抗作用;表现在：各孵育时点ＳｉＯ２组ＬＤＨ、ＭＤＡ含量最高,ＳＯＤ最低,其次分别为ＳｉＯ２＋ＳＰ、生理盐水组、ＳＰ组,各组ＬＤＨ、ＭＤＡ、ＳＯＤ含量经统计学处理均有显著性差异（Ｐ＜００１）。结论（１）ＳＰ具有提高染尘ＰＡＭ体外抗氧化水平和保护ＰＡＭ、增强ＰＡＭ吞噬功能作用。（２）ＳＰ提高ＰＡＭ体外抗氧化水平作用可能与其含有丰富营养成分有关。     

石棉染尘后肺泡巨噬细胞内钾离子浓度的测定

钾（K＋）是维持生命的主要电解质［1］，机体内K＋主要分布在细胞内，约占钾总量的98％，以离子的形式存在。当细胞生物膜受损伤后，其通透性发生改变，可使K＋由细胞内外溢。本实验应用豚鼠肺泡巨噬细胞体外培育的方法，以不同分散度、不同剂量的石棉纤维进行染尘，经不同时间培育后，测定细胞内K＋浓度的改变，以评价不同条件下石棉纤维粉尘细胞毒性的强弱。同时设立空白组和石英组进行对照分析。1实验材料和方法1．1仪器：恒温CO2培养箱（日本）；超净无菌台；火焰原子光谱仪（日本岛津）；1．2实验过程1．2．1：石棉样品制备：石棉…     

温石棉刺激后的肺泡巨噬细胞对肺成纤维细胞(V_(79))的体外作用

本实验采用家兔肺泡细胞分组染10、20,100、200μg/ml 浓度的新康温石棉24小时后,其上清液加至非增生期的V_(79)细胞,观察该上清液对V_(79)细胞增殖、功能及形态方面的影响,~3H-TdR 细胞掺入,组织化学染色并经显微分光光度计定量等结果表明,各浓度组上清液均能刺激V_(79)细胞增殖和促进(?)原蛋白合成、沉积,尤以高浓度组明显,并有形态学基础。     

肺泡巨噬细胞对石英、石棉等粉尘吞噬作用的扫描电镜研究

本文报道了兔肺泡巨噬细胞对石英、石棉等粉尘吞噬作用的扫描电镜研究,结果表明,吞噬石英粉尘的巨噬细胞表现膜皱褶疏密不一,出现泡状结构,伪足消失。濒死前的细胞膜呈光滑均质或呈大小不等的凹陷,细胞固缩。吞噬石棉尘的巨噬细胞出现膜改变时间较迟。扫描电镜所观察到的生物膜改变对尘肺防治措施提供科学依据。     

几种化合物对温石棉溶血活性抑制作用的比较研究

应用体外溶血试验，就混合稀土，亚硒酸钠，柠檬酸铝对温石棉溶血性的影响进行了研究。结果显示，用上述三种化合物浸泡温石棉纤维，均可抑制其溶血活性，并且随着浊石棉浓度的升高，抑制作用愈加明显。表明上述三种化合物浸泡温石棉纤维，均可降低其体外细胞毒性。