菖蒲郁金汤对多发性抽动症模型大鼠单胺类神经递质的影响

目的:观察菖蒲郁金汤对多发性抽动症(TS)模型大鼠单胺类神经递质的影响,探讨其治疗多发性抽动症的作用机理。方法:72只雄性SD大鼠随机分为空白组12只,造模组60只,造模组大鼠腹腔注射亚氨基二丙腈(IDPN)制备多发性抽动症动物模型,空白组大鼠腹腔注射等体积的生理盐水,每天1次,连续7天,造模完成后,造模组大鼠表现出不同程度的运动行为及刻板行为,评分均≥2分,表明造模成功。造模成功后,将造模组大鼠再次分为:模型组、泰必利组、菖蒲郁金汤77.28g/kg、38.64g/kg、19.32g/kg组,各12只。从造模完第2天开始给予灌胃,泰必利组给予泰必利(3.194mg/ml)混悬液,菖蒲郁金汤77.28g/kg、38.64g/kg、19.32g/kg组分别给予相应浓度的菖蒲郁金汤(5.152、2.576、1.288g生药/ml)药液,空白组与模型组给予等体积纯净水,每天1次,连续给药4周。在最后一次给药后24 h采集标本,用ELISA法检测大鼠脑组织及血浆多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)及高香草酸(HVA)水平。结果:(1)模型组大鼠纹状体DA含量明显下降,脑干5-HT含量明显升高;治疗后泰必利组大鼠纹状体DA含量明显升高,菖蒲郁金汤77.28g/kg组大鼠纹状体DA、HVA含量及脑干5-HT含量明显升高。(2)模型组大鼠血浆HVA含量明显降低;治疗后,泰必利组大鼠血浆HVA含量明显升高,菖蒲郁金汤77.28g/kg、38.64g/kg组大鼠血浆HVA含量明显升高,菖蒲郁金汤77.28g/kg、38.64g/kg、19.32g/kg组大鼠血浆5-HT含量明显升高。结论:单胺类神经递质间的平衡失调可能与多发性抽动症发病有关,而菖蒲郁金汤可能具有调节单胺类神经递质间平衡的作用。     

菖蒲郁金汤对TS模型大鼠抗抽动效应及脑组织IL-6、TNF-α的影响

目的:探讨菖蒲郁金汤对多发性抽动症模型大鼠行为及脑组织IL-6及TNF-α的影响。方法:82只雄性大鼠随机分为空白组12只,造模组70只,采用亚氨基二丙腈(IDPN)腹腔注射法制备多发性抽动症动物模型,造模成功后,除去体重偏差较大的10只大鼠,将造模组其余60只大鼠再次分为:模型组、泰必利组、菖蒲郁金汤高、中、低剂量组,各12只。从造模成功后第2天开始给予灌胃,泰必利组给予泰必利(47.91mg/kg),菖蒲郁金汤各剂量组给予菖蒲郁金汤(77.28g/kg、38.64g/kg、19.32g/kg),空白组与模型组给予等体积纯净水,连续给药4周。造模成功后及每周灌胃后1小时,观察大鼠行为。在最后一次给药后24小时计算胸腺指数、脾脏指数,用ELISA法检测IL-6、TNF-α水平;观察纹状体组织病理学变化。结果:1造模后,各组大鼠均出现刻板行为和运动行为;治疗4周后,泰必利组及菖蒲郁金汤组(77.28/kg、38.64g/kg)刻板行为评分明显下降;泰必利组及菖蒲郁金汤组(77.28/kg)运动行为评分明显下降。2模型组大鼠胸腺指数和脾脏指数均明显下降;菖蒲郁金汤高剂量(77.28g/kg)组可明显提高胸腺指数和脾脏指数。3各组大鼠脑组织中IL-6含量无明显变化;模型组大鼠脑组织中TNF-α水平明显下降;泰必利(47.91mg/kg)组大鼠脑组织中TNF-α水平无明显变化;菖蒲郁金汤高剂量(77.28/kg)组大鼠脑组织中TNF-α水平明显升高。4空白组大鼠纹状体神经细胞分布均匀、大小适中、形态如常;模型组大鼠纹状体神经细胞减少,以神经元细胞减少为主,且神经元细胞体积缩小,形态不规则;泰必利(47.91mg/kg)组大鼠纹状体神经细胞数量及形态变化与模型组无明显区别;菖蒲郁金汤各剂量(77.28g/kg、38.64g/kg、19.32g/kg)组纹状体神经元细胞数量及形态均有所改善,以高剂量(77.28g/kg)组为最显著。结论:菖蒲郁金汤具有抗抽动作用,其抗抽动作用可能与改善多发性抽动症模型大鼠免疫功能及修复神经细胞有关。     

IDPN诱导TS模型大鼠纹状体DA系统的变化及菖蒲郁金汤的干预作用

目的观察3,3-亚氨基二丙腈(IDPN)诱导下抽动-秽语综合征(TS)模型大鼠纹状体多巴胺(DA)系统变化及菖蒲郁金汤的干预作用。方法 82只雄性SD大鼠随机分为空白组12只,造模组70只,采用IDPN腹腔注射法制备TS动物模型,造模成功后,除去体重偏差较大的10只大鼠,其余大鼠再次分为:模型组、西药组、中药高、中、低剂量组,各12只。从造模完第2天开始给予灌胃,西药组给予泰必利(47.908mg/kg),中药高、中、低剂量组给予菖蒲郁金汤(77.292,38.646,19.323g/kg),空白组与模型组给予等体积纯净水,连续给药4周。造模后及每周灌胃后1h记录TS大鼠刻板行为积分。在最后一次给药后24 h处死大鼠,取出纹状体,用ELISA法检测DA、多巴胺D1受体(D1R)、多巴胺D2受体(D2R)、高香草酸(HVA)水平。结果模型鼠表现出抽动症特征性的刻板行为,中药组大鼠的刻板行为呈平稳下降趋势。大鼠脑纹状体单胺类神经递质水平,模型组较空白组DA、D1R、HVA水平无明显变化(P0.05),而D2R水平明显升高(P0.01);西药组较模型组DA水平明显升高(P0.01)DIR水平明显下降(P0.01);D1R、HVA水平无明显变化;中药高剂量组较模型组DA、D2R及HVA水平明显升高(P0.01,P0.01)DIR水平明显下降(P0.01);D1R水平无明显变化。中药中剂量组较模型组DA、HVA水平明显升高(P0.05,P0.01)。结论菖蒲郁金汤具有抗抽动作用,其抗抽动作用机理可能与阻断D2R、促进DA代谢有关。     

菖蒲郁金汤对TS模型大鼠行为及纹状体单胺类神经递质的影响

目的:探讨菖蒲郁金汤对多发性抽动症(TS)模型大鼠行为及纹状体单胺类神经递质的影响。方法:将雄性SD大鼠82只随机分为空白组12只,造模组70只,采用亚氨基二丙腈(IDPN)腹腔注射法制备TS动物模型,造模成功后,除去体质量偏差较大的10只大鼠,将其余大鼠分为模型组、泰必利组及中药高、中、低剂量组各12只。从造模后第2天开始灌胃给药,空白组与模型组给予纯净水,其余各组给予相应药物,1次/d,连续给药4周。观察各组大鼠行为评分变化及纹状体神经递质含量变化情况。结果:1)与模型组比较,泰必利组大鼠刻板行为及运动行为评分降低(P0.05);中药高剂量组大鼠刻板行为及运动行为评分降低(P0.05);中药中剂量组大鼠刻板行为评分降低(P0.05)。2)与空白组比较,模型组多巴胺、去甲肾上腺素、5-羟色胺及高香草酸含量均无明显变化(P0.05);与模型组比较,泰必利组多巴胺、去甲肾上腺素含量升高(P0.01),中药高剂量组多巴胺、高香草酸含量升高(P0.01),中药中剂量组多巴胺、高香草酸含量升高(P0.05)。结论:菖蒲郁金汤具有降低模型大鼠刻板行为及运动行为评分的作用;具有抑制多巴胺受体超敏感、促进多巴胺代谢的作用,且其疗效与剂量有关。     

文静汤对抽动障碍模型小鼠脑内多巴胺系统的影响

目的观察文静汤对抽动障碍模型小鼠脑内多巴胺(DA)系统的影响,探讨其作用机制。方法将72只ICR雄性小鼠随机分为空白组、模型组、西药组、文静汤低剂量组、文静汤中剂量组及文静汤高剂量组,每组12只。模型组、西药组、文静汤低剂量组、文静汤中剂量组及文静汤高剂量组以腹腔注射亚氨基二丙腈(IPDN)的方式建立抽动障碍模型,空白组腹腔注射等容积0.9%氯化钠注射液。造模成功后,西药组予盐酸硫必利片25 mg/(kg·d)灌胃,文静汤低、中、高剂量组分别予1、2、4 g/m L文静汤混悬液14 m L/(kg·d)灌胃,空白组及模型组予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃。均连续灌胃给药4周后比较各组小鼠行为学评分(包括刻板行为及运动行为)及脑内DA水平、巴胺转运蛋白(DAT)表达情况。结果 (1)与空白组比较,模型组、西药组、文静汤低剂量组、文静汤中剂量组及文静汤高剂量组刻板行为评分及运动行为评分均明显升高(P0.05);与模型组比较,西药组、文静汤中剂量组及文静汤高剂量组刻板行为评分及运动行为评分均明显降低(P0.05),文静汤低剂量组与模型组相当(P0.05);与西药组比较,文静汤高剂量组刻板行为评分及运动行为评分明显低于西药组(P0.05),文静汤中剂量组与西药组相当(P0.05)。(2)与空白组比较,模型组DA含量与之相当(P0.05);与模型组比较,西药组、文静汤中剂量组及文静汤高剂量组DA含量均明显降低(P0.05),文静汤低剂量组与模型组相当(P0.05);与西药组比较,文静汤高剂量组DA含量明显降低(P0.05),文静汤中剂量组与西药组相当(P0.05)。(3)与空白组比较,模型组、西药组、文静汤低剂量组、文静汤中剂量组及文静汤高剂量组DAT表达均明显降低(P0.05);与模型组比较,西药组、文静汤中剂量组及文静汤高剂量组DAT表达均明显升高(P0.05),文静汤低剂量组与模型组相当(P0.05);与西药组比较,文静汤高剂量组DAT表达明显升高(P0.05),文静汤中剂量组与西药组相当(P0.05)。结论文静汤对抽动障碍模型小鼠具有确切治疗作用,可改善小鼠行为学表现,且其作用效果与剂量浓度成正相关,其作用机制可能与调节DA系统功能失衡有关,降低脑内DA含量,增加DAT表达,使DA能神经元功能亢进受到抑制,从而改善患者抽动等临床症状。     

柴胡加龙骨牡蛎汤对多发性抽动症模型大鼠行为学和多巴胺系统的影响

目的观察柴胡加龙骨牡蛎汤对多发性抽动症(Tourette syndrome,TS)模型大鼠运动行为和刻板行为,以及纹状体多巴胺(dopamine,DA)、血浆DA和纹状体多巴胺受体(dopamine D2 receptors,D2R)含量的影响。方法 40只雄性SD大鼠随机分为4组,正常组、模型组、硫必利组、中药组,每组10只。腹腔注射3,3-亚氨基二丙腈(3,3'-iminodipropionitrile,IDPN)建立TS大鼠模型。正常组和模型组给予生理盐水,其余2组分别给予盐酸硫必利[37.8 mg/(kg·d)]和柴胡加龙骨牡蛎汤颗粒剂[15.5 g/(kg·d)],连续灌胃4周,每周记录大鼠行为学积分变化。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测纹状体DA、血浆DA及纹状体D2R的含量。结果 (1)造模后模型组运动行为学积分高于正常组(P0.01)。用药4周后,硫必利组、中药组运动行为和刻板行为学积分低于模型组(P0.05)。(2)用药4周后,与正常组比较,模型组血浆DA、纹状体D2R含量升高(P0.01),纹状体DA降低(P0.05);与模型组比较,硫必利组血浆DA含量下降(P0.05),纹状体DA含量升高(P0.05);中药组血浆DA含量下降(P0.05),纹状体DA含量升高(P0.05)。结论柴胡加龙骨牡蛎汤对TS模型大鼠的运动行为、刻板行为有显著抑制作用,其抗抽动作用可能与调节外周及脑纹状体DA含量有关。     

龟板对多发性抽动症模型大鼠的干预作用与对DA及D_2受体的影响

目的探究龟板对多发性抽动症(tourette syndrome,TS)模型大鼠的行为学改变,及其对纹状体多巴胺(dopamine,DA)、多巴胺D_2受体(dopamine D_2receptor,D_2R)、血浆中DA的含量的影响。方法将40只大鼠分为空白组、模型组、硫必利组和龟板组。腹腔注射亚氨基二丙腈(iminodipropionitrile,IDPN)建立TS模型,并给予每组相应的生理盐水或药物灌胃。造模完成后每周进行行为学检测,并于造模第4周采用ELISA法检测纹状体DA、D_2R、血浆中DA的含量。结果 (1)与模型组比较,两周后硫必利组大鼠刻板行为减少(P0.05),三周后运动行为减少(P0.05),四周后运动行为明显减少(P0.01)。与模型组比较,龟板组两周后大鼠刻板行为与运动行为均减少(P0.05);(2)模型组大鼠较空白组大鼠血浆中DA含量升高(P0.05),纹状体DA含量降低(P0.05),纹状体D_2R含量升高(P0.05)。与模型组比较,龟板组大鼠血浆DA含量减少(P0.05),硫必利组血浆DA明显减少(P0.01),纹状体DA含量两组均升高(P0.05),两组纹状体D2R未发生明显变化(P0.05)。结论龟板对TS有良好的治疗作用,其原因可能与调节DA的代谢有关。     

红景天苷对Tourette综合征模型大鼠抽动行为的影响

目的观察红景天苷对Tourette综合征(Tourette syndrome,TS)模型大鼠抽动行为及体内多巴胺(dopamine,DA)、5-羟色胺(serotonin,5-HT)的影响。方法将40只大鼠随机分为空白组、模型组、氟哌啶醇组[(西药组,0.5mg/(kg·d)]、红景天苷组[(中药组,50mg/(kg·d)],每组10只,采用亚氨基二丙腈(imino-dipropio-nitrile,IDPN)诱导的大鼠作为TS动物模型。造模后第4日开始腹腔注射干预,空白组及模型组予生理盐水,连续干预7日。对造模前、造模后及干预后各组大鼠进行刻板行为评分并测定血浆及纹状体中DA、5-HT含量。结果与空白组比较,模型组造模后抽动行为评分升高(P0.01),血浆及纹状体DA、5-HT含量降低(P0.01,P0.05)。与本组造模后比较,两个给药组干预后抽动行为评分降低(P0.01),血浆DA含量升高(P0.01),中药组5-HT含量升高(P0.01)。与模型组同期比较,两个给药组干预后抽动行为评分均降低(P0.01),血浆及纹状体DA含量升高(P0.01,P0.05),中药组血浆及纹状体5-HT含量升高(P0.01,P0.05)。与西药组同期比较,中药组干预后抽动行为评分升高(P0.01),血浆及纹状体DA含量降低,5-HT含量升高(P0.01,P0.05)。结论红景天苷能减少TS模型大鼠的抽动行为,并使血浆及纹状体的DA水平增高。红景天苷对抽动行为的疗效与调节纹状体DA能神经元活动有关。     

安神定志灵对ADHD模型大鼠纹状体多巴胺转运体表达的影响

目的:研究安神定志灵对注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)动物模型-自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)纹状体多巴胺转运体(DAT)表达的影响,探讨该药治疗ADHD的作用机制。方法:30只SHR鼠随机分为5组(模型组、利他林组、安神定志灵高、中、低剂量组),每组6只,Wistar-Kyoto(WKY)大鼠6只作为正常对照组。安神定志灵高、中、低剂量组分别按生药剂量34.1,17.1,8.5 g.kg-1 ig;利他林组以2.1 mg.kg-1利他林ig;模型组和正常对照组以10 mL.kg-1生理盐水ig。连续给药2周后处死大鼠,取脑分别用RT-PCR和激光共聚焦显微镜检测各组大鼠纹状体多巴胺转运体(DAT)mRNA和蛋白表达水平。结果:大鼠纹状体中DAT的蛋白表达水平,组间存在差异(P<0.05),SHR模型组大鼠纹状体中DAT的蛋白表达与正常对照组比较显著增高(P<0.01);安神定志灵中、高剂量组DAT的蛋白表达显著低于模型组(P<0.01),利他林组DAT的蛋白表达显著低于模型组(P<0.05),安神定志灵低剂量组和模型组DAT蛋白表达相比无统计学意义。蛋白表达量从高到低依次为安神定志灵低剂量组、利他林组、安神定志灵中、高剂量组。结论:安神定志灵可以降低SHR大鼠纹状体中DAT mRNA及蛋白的表达水平,减少突触前神经元对DA的重摄取,增加突触间隙的DA浓度,改善了中枢DA的神经信号传导功能,起到对ADHD的治疗作用。     

肉苁蓉颗粒剂对帕金森病大鼠模型黑质纹状体多巴胺能神经元的保护作用研究

目的:探讨肉苁蓉颗粒剂对帕金森病大鼠模型黑质纹状体多巴胺能神经元的保护作用。方法:采用6-羟基多巴胺单侧双靶点颅内定向注射法制备帕金森病大鼠模型,3周后据阿朴吗啡诱导的不自主运动,筛选造模成功大鼠,随机分为空白组,模型组,假手术组,肉苁蓉颗粒剂低剂量组(1 g·kg-1·d-1)和肉苁蓉颗粒剂高剂量组(3 g·kg-1·d-1),灌胃相应药物共4周。记录阿朴吗啡诱导的大鼠向健侧旋转的圈数;采用免疫组化研究观察黑质内酪氨酸羟化酶(TH)的表达;和免疫印迹法检测(Western-blot)观察纹状体内α-突出核蛋白(α-synuclein)、酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运蛋白(DAT)的表达;高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法检测定大鼠纹状体多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)的含量。结果:用药4周后,肉苁蓉组向健侧旋转的圈数与模型组比较明显减少(P0.05),黑质内TH阳性细胞较模型组明显增多,纹状体内α-synuclein表达下调、TH、DAT表达上调。纹状体DA、DOPAC含量明显升高(P0.05或P0.01)。高剂量组效果优于低剂量组。结论:肉苁蓉颗粒对帕金森病大鼠模型黑质和纹状体的多巴胺能神经元具有神经保护作用。     

菖蒲郁金汤对抽动秽语综合征大鼠突触胞吞相关蛋白表达的影响

目的 研究菖蒲郁金汤对抽动秽语综合征模型大鼠神经元胞吞相关蛋白表达的影响。方法 大鼠随机分为空白组、模型组、硫必利组及菖蒲郁金汤组。采用腹腔注射亚氨基二丙腈制备抽动秽语综合征模型，连续灌胃给予相应药物4周，在第0、7、14、21、28天，采用刻板行为及运动行为评分法评定行为学变化，Percoll密度梯度离心法制备突触体，RT-qPCR和Western blot法检测突触体中clathrin、AP-2、dynamin-1 mRNA及蛋白表达，免疫组织化学法检测纹状体clathrin、AP-2、dynamin-1蛋白表达。结果 与模型组比较，硫必利组和菖蒲郁金汤组行为学评分随时间延长逐渐降低(P<0.05,P<0.01);在给药第28天，菖蒲郁金汤组刻板行为和运动行为评分均低于硫必利组(P<0.01)。与空白组比较，模型组各观察点突触体/纹状体clathrin、AP-2、dynamin-1 mRNA及蛋白表达均升高(P<0.01);与模型组比较，硫必利组和菖蒲郁金汤组在给药期间突触体/纹状体clathrin、AP-2、dynamin-1 mRNA及蛋白表达随时间延长...     

延胡索及其有效成分抗吗啡成瘾多巴胺系统作用机制研究和效果比较

为了观察延胡索和左旋延胡索乙素(L-tetrahydropalmatine,L-THP)对吗啡条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)大鼠学习记忆相关脑区海马(Hip)和纹状体(Str)内多巴胺递质含量,多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)和多巴胺D2受体(D2R)表达的影响。对各组大鼠颈背部皮下注射生理盐水或吗啡后(吗啡起始剂量为10 mg·kg-1,逐日递增,至第10天为100 mg·kg-1),末次训练48 h进行CPP测试确认模型建立成功,立即处死生理盐水对照组和模型组大鼠,分别取海马、纹状体脑组织。延胡索高、中、低剂量组大鼠则分别给予延胡索2,1,0.5 g·kg-1水提液(内含L-THP的量分别为0.274,0.137,0.069 mg),L-THP高、中、低剂量组分别给予L-THP 3.76,1.88,0.94 mg·kg-1灌胃治疗,生理盐水治疗组灌胃生理盐水,持续治疗6 d,再次CPP测试后处死,同前取材。采用高效液相色谱法检测多巴胺递质含量;Western blot技术检测DAT和D2R的表达。结果显示,与生理盐水治疗组比较,延胡索和L-THP高、中剂量组大鼠在白箱停留的时间显著减少(P0.01),同时海马和纹状体脑区内多巴胺递质含量明显降低(P0.01或P0.05),DAT表达上调(P0.01),D2R表达上调(P0.01)。学习记忆相关脑区海马和纹状体是延胡索和L-THP治疗精神依赖的又一神经解剖学作用位点,其机制与下调其升高的DA递质含量以及上调DAT和D2R的表达有关;对吗啡CPP效应消退的药效作用,以及对学习记忆相关脑区海马、纹状体中DA递质含量、DAT和D2R的影响,含1倍量L-THP单体的延胡索中药相当于单独应用约14倍L-THP单体的效果。     

健脾止动汤对多发性抽动症模型鼠纹状体多巴胺通路的影响

目的研究健脾止动汤对多发性抽动症（TS）模型鼠纹状体多巴胺通路的影响,为健脾止动汤干预小儿TS提供神经生化学依据。方法90只雄性ICR小鼠随机分成6组,即空白组、模型组、泰必利组、健脾止动汤组、六君子汤组、泻青汤组。除空白组外,其余5组小鼠腹腔注射亚氨基二丙腈建立TS小鼠模型。除空白组和模型组给予生理盐水外,其余4组分别灌胃给予相应药物。4周后采用高效液相色谱电化学法测定TS模型鼠脑纹状体单胺类递质的含量。结果TS模型鼠表现出抽动症特征性的运动行为和刻板行为。小鼠脑纹状体单胺类递质含量,模型组较空白组脑多巴胺（DA）、二羟苯乙酸（DOPAC）、高香草酸（HVA）、5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NB）含量无明显变化（P〉0．05）：泻青汤组较模型组DA、DOPAC含量降低（P〈0．05）,泻青汤组较泰必利组脑DA、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）、NE含量降低（P〈0．01或P〈0．05）,泻青汤组较六君子汤组脑DA、5-HIAA、NE含量降低（P〈0．01或P〈0．05）。结论健脾止动汤的主要作用组分为泻青汤,其抗抽动作用可能与兴奋脑纹状体多巴胺间接通路、降低DA含量有关。     

基于JAK2/STAT3信号通路探讨升清降浊制动颗粒对多发性抽动症模型大鼠的作用及机制

[目的]基于Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活子3(STAT3)信号通路探讨升清降浊制动颗粒对多发性抽动症(TS)模型大鼠的作用及机制。[方法]将SD大鼠分为对照组、TS组、升清降浊制动颗粒低剂量组(0.645 mg/kg)、升清降浊制动颗粒高剂量组(2.58 mg/kg)、氟哌啶醇组(200μg/kg)、Coumermycin A1(JAK2通路激活剂)组(4 mg/kg)、升清降浊制动颗粒高剂量+Coumermycin A1组(2.58 mg/kg+4 mg/kg),每组12只。除对照组外,其他组大鼠均需构建TS模型。建模成功后,进行给药处理,给药每日1次,持续21 d。检测大鼠运动行为评分、刻板行为评分变化;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6水平及纹状体中多巴胺(DA)、多巴胺转运蛋白(DAT)、多巴胺D2受体(DRD2)含量;DNA缺口末端标记法(TUNEL)染色检测大鼠纹状体中神经元凋亡;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠纹状体中p-JAK2、p-STAT3蛋白表达。[结果]与对照组比较,TS组大鼠运动行为评分、刻板行为评分、IL-1β、TNF-α、IL-6水平、DRD2含量、神经元凋亡率、p-JAK2、pSTAT3蛋白表达升高,DA、DAT含量降低(P＜0.05)。与TS组比较,升清降浊制动颗粒低剂量组、升清降浊制动颗粒高剂量组、氟哌啶醇组大鼠运动行为评分、刻板行为评分、IL-1β、TNF-α、IL-6水平、DRD2含量、神经元凋亡率、pJAK2、p-STAT3蛋白表达降低,DA、DAT含量升高(P＜0.05)。与TS组比较,Coumermycin A1组大鼠运动行为评分、刻板行为评分、IL-1β、TNF-α、IL-6水平、DRD2含量、神经元凋亡率、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达升高,DA、DAT含量降低(P＜0.05)。Coumermycin A1减弱了高剂量升清降浊制动颗粒对TS模型大鼠的保护作用。[结论]升清降浊制动颗粒可抑制TS大鼠神经炎症、神经元凋亡及促进DA平衡,该机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。     

参苓白术散对脾虚湿困型UC大鼠结肠组织IL-6、IL-10及c-fos基因蛋白表达的影响

目的探讨参苓白术散对脾虚湿困溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)及c-fos基因蛋白表达的影响。方法受试大鼠按随机数字表法分为空白组和造模组,造模组采用综合法复制脾虚湿困型UC动物模型。造模3周并评价造模成功后将UC大鼠分为模型组、参苓白术散高、中、低剂量组和阳性对照组(美沙拉嗪组)。空白组和模型组大鼠每日给予容积为10 ml·kg-1蒸馏水灌胃,参苓白术散大、中、小剂量组分别给予24,12,6 g·kg-1·d-1参苓白术散药剂灌胃,阳性对照组给予0.2g·kg-1·d-1美沙拉嗪颗粒灌胃,持续治疗21 d后,分别对各组大鼠肠黏膜IL-6、IL-10含量进行检测,并采用蛋白免疫印迹法检测结肠组织c-fos基因及蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠一般生存状况较差,结肠组织中IL-6含量显著升高,IL-10含量降低(P0.05),c-fos基因和蛋白表达水平显著升高(P0.05);与模型组比较,参苓白术散组大鼠一般生存状况明显改善,结肠组织中IL-6含量显著降低(P0.05)而IL-10含量升高(P0.05),c-fos基因和蛋白表达水平显著降低(P0.05),且以参苓白术散高剂量作用显著。结论参苓白术散具有改善脾虚湿困型UC大鼠一般生存状况,调节结肠组织Th1/Th2细胞因子平衡分泌及下调c-fos基因蛋白表达的作用。     

导痰汤合菖蒲郁金汤对卒中后抑郁症的实验研究

目的观察导痰汤合菖蒲郁金汤对卒中后抑郁症(PSD)大鼠模型行为学能力及脑内神经递质含量的影响。方法将80只大鼠随机分为4组,即模型组、导痰汤合菖蒲郁金汤组(中药组)、氟西汀组及假手术组,每组20只。模型组、中药组、氟西汀组采用双侧颈总动脉永久性结扎后行为限制法制备大鼠PSD模型,假手术组仅做颈正中切口即缝合。造模成功后第2d模型组、假手术组均予0.9%氯化钠注射液灌胃,中药组予导痰汤合菖蒲郁金汤灌胃,氟西汀组予盐酸氟西汀水溶液灌胃,均连续给药28d。测定大鼠海马区5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)含量的变化,并进行糖水消耗试验。结果假手术组、中药组及氟西汀组糖水消耗量均高于模型组(P0.05),纯水消耗量均低于模型组(P0.05);假手术组、中药组及氟西汀组NE、DA、5-HT及5-HIAA含量均高于模型组(P0.05);中药组NE、5-HT及5-HIAA含量均低于假手术组(P0.05);氟西汀组NE、DA含量均低于假手术组(P0.05)。结论导痰汤合菖蒲郁金汤可以改善PSD大鼠的行为及脑内单胺类神经递质的含量。     

基于NLRP3炎性小体探讨芍药甘草汤对神经根型颈椎病大鼠的抗炎镇痛机制

目的研究芍药甘草汤对神经根型颈椎病(CSR)的可能作用机制。方法将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组和造模组,假手术组不予以处理,造模组采用椎管插线法制备CSR模型大鼠。造模成功后,造模组随机分为模型组、芍药甘草汤低、中、高剂量组,于造模后第2天后予相应药物灌胃,连续干预1周。比较各组机械痛阈数值、脊髓前角运动神经元数量、颈部脊髓NLRP3蛋白表达及血清IL-18炎症因子表达水平。结果与造模组比较,中、高剂量组大鼠术后7 d机械痛阈明显升高(P0.01),血清IL-18含量明显降低(P0.01);各剂量组脊髓前角运动神经元数量明显增多(P0.01),颈部脊髓NLRP3蛋白表达明显下降(P0.05);中、高剂量组各指标改善程度均优于低剂量组(P0.01)。结论芍药甘草汤对急性期神经根型颈椎病有良好的抗炎镇痛效果,其作用可能与抑制脊髓组织中NLRP3炎性小体的合成和释放,进而抑制IL-18炎症因子的表达有关。     

自拟菖蒲郁金汤对抽动秽语综合征大鼠突触超微结构及突触素、突触后致密物-95蛋白的影响北大核心CSCD

目的观察自拟菖蒲郁金汤(CPYJD)对抽动秽语综合征(TS)模型大鼠纹状体突触超微结构及突触素(SYN)、突触后致密物-95(PSD-95)蛋白表达的影响,探讨其抗抽动的作用机制。方法依据随机数字表法将140只SD大鼠分为空白组(35只)和造模组(105只),采用腹腔注射亚氨基二丙腈制备TS动物模型,随后将造模组大鼠随机分为模型组、硫必利组及CPYJD组,每组35只。从造模完成后次日开始灌胃给药,空白组与模型组给予生理盐水,其余各组给予相应药物,1次/d,连续给药4周。各组大鼠分别于治疗前、治疗7、14、21、28 d,随机抽取7只大鼠,行为学评定后麻醉剥离出纹状体,利用透射电镜观察突触超微结构,免疫组织化学法检测大鼠纹状体中SYN、PSD-95蛋白水平的变化。结果与空白组比较,模型组各时间刻板、运动行为评分、突触间隙升高(P<0.05),突触致密物厚度、SYN、PSD-95蛋白表达降低(P<0.05)。与本组治疗前比较,硫必利组和CPYJD组28 d刻板、运动行为评分、突触间隙降低,SYN、PSD-95蛋白升高(P<0.05),CPYJD组28 d突触致密物厚度增加(P<0.05)。与模型组比较,硫必利组及CPYJD组28 d刻板、运动行为评分、突触间隙降低,SYN、PSD-95蛋白表达升高(P<0.05),CPYJD组28d致密物厚度增加(P<0.05)。与硫必利组比较,CPYJD组14 d刻板行为及7 d运动行为评分升高(P<0.05),21、28 d刻板行为评分、突触间隙降低,28 d运动行为评分降低,28 d突触致密物厚度增大,7、14、21、28 d PSD-95蛋白表达升高(P<0.05)。结论CPYJD可改善TS大鼠刻板及运动行为,相较于硫必利起效时间晚,但起效后抗抽动效应稳定,其机制可能与改善突触结构及功能,提高SYN及PSD-95蛋白表达相关。     

益气化瘀解毒法对慢性萎缩性胃炎伴异型增生大鼠DNA甲基化酶3b基因的影响

目的观察益气化瘀解毒法对慢性萎缩性胃炎伴异型增生模型大鼠DNA甲基化酶3b(DNMT3b)基因的影响。方法将60只SPF级健康雄性Wistar大鼠随机分为造模组50只、空白组10只。造模成功后将造模组剩余的33只大鼠随机分为模型组、维酶素组、消痞颗粒组,每组11只。模型组予0.9%氯化钠注射液,维酶素组予维酶素悬浊液,消痞颗粒组予消痞颗粒中药制备药液,各组均每日灌胃1次,连续治疗12周后检测各组大鼠DNMT3b蛋白表达量。结果维酶素组、模型组DNMT3b蛋白表达量较空白组均明显升高(P0.01);消痞颗粒组与空白组比较差异无统计学意义(P0.05)。维酶素组、消痞颗粒组DNMT3b蛋白表达量较模型组降低(P0.01);消痞颗粒组低于维酶素组(P0.01)。结论中医益气化瘀解毒法可以逆转胃黏膜异型增生,其作用机制可能是通过下调DNMT3b而实现的。     

基于PERK信号通路介导的细胞凋亡及杯状细胞破坏探讨芍药汤对溃疡性结肠炎大鼠的作用机制

目的:通过检测溃疡性结肠炎(UC)大鼠p-PERK通路蛋白、C/EBP 同源蛋白的表达及结肠杯状细胞数量,探讨芍药汤对UC大鼠的作用机制。方法: 84只SD大鼠中随机抽取14只作为空白组,余下70只大鼠通过三硝基苯磺酸建立UC大鼠模型,除去死亡大鼠,随机分为模型组12只、柳氮磺吡啶组13只、芍药汤低剂量组12只、芍药汤中剂量组13只、芍药汤高剂量组13只。空白组、模型组用等体积的0.9%氯化钠溶液灌胃,柳氮磺吡啶组采用柳氮磺吡啶灌胃,芍药汤高、中、低剂量组按照芍药汤不同剂量灌胃。第14天进行疾病活动指数(DAI)评分。随后将大鼠处死并解剖,进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分,并检测大鼠结肠p-PERK通路蛋白、C/EBP 同源蛋白的表达及结肠杯状细胞数量。结果: 与空白组比较,柳氮磺吡啶组及芍药汤不同剂量组大鼠DAI、CMDI评分均增高(P<0.05),与模型组比较,柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中、低剂量组DAI、CMDA评分均降低(P<0.05),柳氮磺吡啶组与芍药汤高、中、低剂量组DAI、CMDA评分比较无统计学差异(P>0.05); 与空白组比较,模型组、柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中、低剂量组p-PERK、CHOP蛋白表达均上升(P<0.05); 与模型组比较,柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中、低剂量组p-PERK、CHOP蛋白表达均下降(P<0.05); 与芍药汤低剂量组比较,柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中剂量组p-PERK、CHOP蛋白表达均下降(P<0.05); 柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中剂量组p-PERK、CHOP蛋白表达无统计学差异(P>0.05); 与空白组比较,其他各组杯状细胞数量均下降(P<0.05); 与模型组比较,柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中、低剂量组杯状细胞数量均明显增加(P<0.05); 与芍药汤低剂量组比较,柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中剂量组杯状细胞数量均增加(P<0.05); 柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中剂量组杯状细胞数量比较无统计学差异(P>0.05)。结论: 芍药汤能抑制内质网应激PERK信号通路被激活,降低CHOP表达活性,减少细胞凋亡,抑制杯状细胞被破坏,保护肠黏膜屏障,改善UC大鼠的症状和体征,这可能是芍药汤治疗UC的作用机制。