麸炒苍术对脾虚大鼠结肠组织MEK/ERK信号通路的影响

目的 探讨麸炒苍术对脾虚大鼠结肠组织丝裂原活化细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的影响。方法 将SD大鼠随机分为正常组、模型组、复方谷氨酰胺组(9 mg·kg^-1)及麸炒苍术高、中、低剂量组(10.0、5.0、2.5 g·kg^-1),每组10只。采用慢性束缚、苦寒破气联合饥饱失常复制脾虚大鼠模型。观察动物的宏观表征、摄食情况,记录每日体质量增加情况,测定粪便含水率,对大鼠脾虚证进行评分。采用HE染色法及透射电镜观察结肠组织病理形态学改变;ELISA法检测结肠黏膜组织中密封蛋白2(Claudin-2)、Claudin-3、黏蛋白(MUC2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的含量;免疫组化法检测结肠组织中磷酸化肌球蛋白轻链激酶(p-MLCK)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Raf)蛋白表达水平;Real-time PCR法检测结肠组织中MEK、ERK、MLCK mRNA表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠的脾虚证积分、粪便含水率显著升高(P<0.01),每日体质量增加量显著降低(P<0.01);...     

清肝九味散对肝纤维化大鼠Raf/MEK/ERK信号通路的影响

目的?观察清肝九味散对肝纤维化大鼠的干预作用及其潜机制。方法?采用随机数字表法将50只SD大鼠分为正常组、模型组、阳性对照组、蒙药低剂量组及蒙药高剂量组，每组10只。除正常组外，其余各组大鼠均通过腹腔注射四氯化碳（CCl4）建立肝纤维化模型。造模成功后，正常组大鼠给予蒸馏水灌胃，阳性对照组灌服水飞蓟素（SIL） 10 mg/kg；蒙药低、高剂量组每日分别灌服清肝九味散水煎液0.525、4.725 g/kg。各组均每天灌胃1次，连续8周。采用全自动生化仪检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性水平；HE染色法观察肝组织病理变化；免疫组化法检测肝组织平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达；实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测基质金属蛋白酶2 （MMP2）、Ⅰ型胶原α （COL1α）、基质金属蛋白酶抑制剂1 （TIMP1） mRNA水平； 蛋白免疫印迹（Western Blot ）检测肝组织MMP2、TIMP1蛋白表达及Raf蛋白激酶1（Raf-1）、丝裂原活化细胞外信号调节激酶（MEK）、细胞外调节蛋白激酶（ERK）磷酸化水平的变化。结果?与正常组比较，模型组大鼠明显消瘦、暴躁，肝脏经HE染色后可见典型纤维化病理表现；阳性对照组和蒙药低、高剂量组大鼠一般状态有明显改善，肝脏病理损伤减轻，血清ALT、AST水平较模型组显著下降（P<0.01）； RT-PCR结果显示：与正常组比较，模型组MMP2、COL1α、TIMP1 mRNA表达显著升高（P<0.01）；与模型组比较，阳性对照组、蒙药低、高剂量组MMP2 mRNA表达明显升高，TIMP1、COL1α mRNA表达明显降低（P<0.01）。免疫组化结果显示：与正常组比较，模型组α-SMA蛋白阳性面积显著升高（P<0.01）；与模型组比较，蒙药低、高剂量组α-SMA蛋白表达均显著降低（P<0.01）。Western Blot结果显示：与正常组比较，模型组MMP2、TIMP1、p-Raf、p-MEK、p-ERK蛋白表达均显著升高（P<0.05）：与模型组比较，阳性对照组及蒙药高剂量组MMP2蛋白表达明显升高，阳性对照组及蒙药各剂量组TIMP1、p-Raf、p-MEK、p-ERK蛋白表达明显下降（P<0.05，P<0.01），且蒙药高剂量组较蒙药低剂量组下降更明显（P<0.01) 。结论?蒙药清肝九味散对CCl4诱导的肝纤维化大鼠一般状态有改善作用，能减轻大鼠肝脏的纤维增生程度，并通过调节MMPs/TIMPs体系促进细胞外基质（ECM）降解，其抗肝纤维化机制可能与抑制Raf/MEK/ ERK信号通路有关。     

溃结安康汤对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠黏膜MEK/ERK信号通路调控作用

目的:观察溃结安康汤对TNBS诱导的大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用,并探讨其可能机制。方法:将48只清洁级SD大鼠,体质量(200±20)g,将其随机分为4组,分别为正常组、模型组、溃结安康汤组、SASP组。造模并治疗21d后,进行DAI评分,观察结肠HE染色病理涂片,MEKmRNA、ERKmRNA表达。结果:与模型组相比较,溃结安康汤组DAI评分降低,结肠HE染色病理示炎症细胞明显减少,MEKmRNA、ERKmRNA表达均升高,均具有显著性差异(P<0.05)。结论:溃结安康汤可以显著改善UC大鼠症状、病理形态,通过调高MEKmRNA、ERKmRNA表达,从而达到抑制炎症、改善症状的效果。     

基于MEK/ERK信号通路探讨阳和汤含药血清对乳腺癌4T1细胞的影响

目的 通过阳和汤含药血清干预小鼠乳腺癌4T1细胞,探索阳和汤对乳腺癌4T1细胞及其内丝裂原活化蛋白激酶（MEK）/细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路的影响。方法 制备阳和汤SD大鼠含药血清。将其随机分组为空白组、阳和汤低、中、高剂量组（5.8、11.6、23.2 g·kg^-1）,空白组用生理盐水代替。各组按10%含药血清和90% RMPI 1640完全培养基均匀混合,干预细胞。采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法分别在24、48、72 h检测阳和汤含药血清对4T1细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测4T1细胞的凋亡情况;采用划痕实验检测4T1细胞迁移情况;采用Transwell实验检测细胞侵袭能力;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测MEK1/2、磷酸化（p）-MEK1/2、ERK1/2、p-ERK1/2、大鼠肉瘤病毒（RAS）蛋白的表达水平。结果 与空白组比较,阳和汤干预24、48、72 h,阳和汤含药血清低、中、高剂量组对4T1细胞增殖具有明显抑制作用（P<0.05,P<0.01）;阳和汤干预48 h,阳和汤含药血清低、中、高剂量组细胞凋亡率显著升高（P<0.01）;阳和汤含药血清低、中、高剂量组在24、48 h的细胞划痕愈合能力显著降低（P<0.01）;阳和汤含药血清低、中、高剂量组细胞侵袭能力显著降低（P<0.01）;阳和汤含药血清低、中、高剂量组细胞内MEK1/2、ERK1/2表达差异无统计学意义,p-MEK1/2、p-ERK1/2、RAS蛋白表达显著降低（P<0.01）。结论 阳和汤可抑制乳腺癌细胞4T1增殖、迁移、侵袭,促进其凋亡。其凋亡机制与MEK/ERK信号通路受抑制,p-MEK1/2、p-ERK1/2、RAS蛋白表达下调有关。     

左、右归丸对肾虚质大鼠海马区MEK/ERK/CREB信号通路的影响

目的观察左、右归丸对肾虚质大鼠海马区MEK/ERK/CREB信号通路的影响,探讨其治疗肾虚质学习记忆障碍的作用靶点。方法采用"猫吓鼠"方法,构造先天不足+后天惊恐的复合型肾虚质仔鼠,分为肾虚组、左、右归丸组,空白组产自正常孕鼠。实验组予左、右丸浓缩液灌胃,2次/d,连续4周,空白组和肾虚组予等体积生理盐水。Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力。酶联免疫吸附法(ELISA)检测MEK、ERK、CREB蛋白含量。结果①水迷宫实验:对比空白组,肾虚质组逃避潜伏期、总路程、首次穿越目标时间延长;目标区域停留时间减少;实验组明显改善。②测定蛋白含量实验:对比空白组,肾虚质组MEK、ERK、CREB蛋白表达下降;实验组蛋白表达均明显上调。实验组间无显著性差异。结论海马区MEK/ERK/CREB信号通路可能是左、右归丸治疗肾虚质学习记忆减退的作用靶点之一。     

基于Raf/MEK/ERK 信号通路探讨黄芪建中汤治疗大鼠脾胃虚寒型十二指肠溃疡的作用机制

目的探讨黄芪建中汤通过Raf/MEK/ERK 信号通路治疗大鼠脾胃虚寒型十二指肠溃疡（DU）的作用机 制。方法将60 只SD 大鼠随机分为正常对照组、模型组、埃索美拉唑组（4.17 mg·kg-1）以及黄芪建中汤高、 低剂量组（18.54、9.27 g·kg-1）。采用“苦寒泻下+劳倦过度”法联合阿司匹林、无水乙醇构建脾胃虚寒型DU 大鼠模型。灌胃给药,每天1 次,连续4 d。观察大鼠十二指肠黏膜损伤情况并计算溃疡指数和治疗指数;采 用HE 染色法观察十二指肠黏膜组织病理形态学改变;采用酶联免疫吸附试验检测十二指肠组织中前列腺素 E2（PGE2）、白细胞介素10（IL-10）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平;免疫荧光法检测十二指肠黏膜磷酸化丝氨 酸/苏氨酸蛋白激酶（p-Raf）、磷酸化有丝分裂原活化蛋白激酶激酶1/2（p-MEK1/2）、磷酸化细胞外信号调节激 酶1（p-ERK1）蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠的十二指肠溃疡指数显著升高（P < 0.01）;小 肠绒毛脱落,隐窝脓肿,小肠绒毛长度和隐窝深度均显著降低（P < 0.01）;肠黏膜PGE2、IL-10 含量均明显降 低（P < 0.01）,TNF-α 含量显著增加（P < 0.01）;肠黏膜p-Raf、p-MEK1/2 和p-ERK1 蛋白表达量均明显增 加（P < 0.01）。与模型组比较,黄芪建中汤各剂量组的大鼠十二指肠溃疡指数均明显降低（P < 0.01）;肠黏膜 损伤得到明显改善,黏膜形态趋于完整,小肠绒毛长度和隐窝深度均明显增加（P < 0.01）;肠黏膜PGE2 和 IL-10 含量均明显提高（P < 0.01）,TNF-α 含量显著降低（P < 0.01）;肠黏膜p-Raf、p-MEK1/2 和p-ERK1 蛋 白表达均显著下调（P < 0.01）。结论黄芪建中汤对脾胃虚寒型DU 大鼠具有治疗作用,其机制可能与调控 PGE2、TNF-α、IL-10 等炎症介质水平,抑制Raf/MEK/ERK 信号通路活化有关。     

贝母素乙抑制MEK/ERK的磷酸化对新生小鼠柯萨奇B病毒性心肌炎心肌细胞凋亡和炎症水平的影响

目的:探究贝母素乙抑制MEK/ERK的磷酸化对新生小鼠柯萨奇B病毒性心肌炎心肌细胞凋亡和炎症水平的影响。方法:48只新生BALB/c小鼠中随机挑8只作正常对照组,剩余小鼠采用柯萨奇B3病毒感染小鼠构建CVB3心肌炎动物模型,建模成功后再随机分为曲美他嗪1 mg/kg阳性对照组、模型对照组和贝母素乙2. 5、5、10 mg/kg组;分别尾静脉注射或者灌胃相应药物,连续处理28 d,1次/d;检测小鼠心脏功能指标(心率HR、左心射血分数LVEF、左心室缩短分数FS、左心室壁厚度LVWT及左心室收缩末期容积LVESV);采用ELISA法检测血清中心损标记物肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)、炎症因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及一氧化氮合酶(i NOS)的含量,HE染色观察心肌损伤情况,RT-PCR和Western blotting检测Caspase-3、Caspase-9、丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)的磷酸化水平。结果:与正常对照组相比,CVB3模型组小鼠心肌细胞...     

柴朴汤对哮喘模型大鼠气道炎症及ERK/p38 MAPK信号通路的影响

目的:观察柴朴汤对哮喘模型大鼠气道炎症及细胞外信号调节激酶(ERK)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的影响。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、柴朴汤低、中、高(0.75,1.5,3.0 g·kg-1)组,地塞米松组。采用卵蛋白(OVA)致敏激发建立大鼠哮喘模型。柴朴汤低、中、高剂量组于激发前0.5 h给予相应剂量柴朴汤灌胃;地塞米松组于激发前0.5 h给予地塞米松(0.005 g·kg-1)灌胃;模型组于激发前0.5 h给予等体积生理盐水灌胃;空白组以生理盐水代替OVA进行腹腔注射及雾化吸入;隔日1次,共激发28 d。观察各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及分类细胞计数的变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织磷酸化ERK(p-ERK),磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)的活性;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析检测ERK,p38 MAPK mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测ERK,p-ERK,p38MAPK,p-p38 MAPK蛋白的表达;光镜下观察病理组织形态学变化及进行炎症评分。结果:模型组大鼠BALF中细胞总数和分类细胞计数;肺组织p-ERK,p-p38 MAPK的活性,ERK,p38 MAPK mRNA的表达,p-ERK,p-p38 MAPK的表达,炎症评分均明显高于空白组(P0.01);柴朴汤低、中、高剂量组和地塞米松组上述指标则明显低于模型组(P0.05,P0.01)。结论:柴朴汤可改善哮喘模型大鼠气道炎症,其机制可能与其抑制ERK/p38 MAPK信号通路有关。     

复心合剂对心衰大鼠信号通路Raf-MEK-ERK的影响

目的:初步探索复心合剂对信号通路Raf-MEK-ERK的影响。方法:75只Wistar雄性大鼠,随机分为5组,对照组、卡托普利组、复心合剂低剂量组、复心合剂高剂量组均为15只。实验过程中阿霉素干预4周后测定大鼠心功能;6周后应用Western blot法检测大鼠心肌组织中Raf、MEK、ERK蛋白表达情况。结果:(1)与正常对照组比较,模型组大鼠BNP值显著升高(P0.01),心衰模型成功建立。(2)与正常对照组相比,模型组大鼠心肌组织Raf水平显著升高(P0.01),复心合剂高剂量组、卡托普利组大鼠心肌组织Raf水平显著降低(P0.01),与卡托普利组相比,复心汤高剂量组大鼠心肌组织Raf无统计学意义(P0.05)。(3)与正常对照组相比,模型组大鼠心肌组织MEK水平显著升高(P0.01),复心合剂高剂量组、卡托普利组大鼠心肌组织MEK水平显著降低(P0.01)。(4)与正常对照组相比,模型组大鼠心肌ERK蛋白表达明显升高(P0.01),卡托普利组及复心合剂高剂量组ERK蛋白表达无显著差异性(P0.05),与模型组相比,复心合剂高剂量组、卡托普利组大鼠心肌组织ERK水平显著降低(P0.01)。结论:复心合剂对心衰大鼠信号通路Raf-MEK-ERK的蛋白激活具有一定的抑制作用,延缓心衰进程。     

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨绿原酸对糖尿病肾病大鼠肾组织炎症和凋亡的影响

目的 探讨绿原酸对糖尿病肾病大鼠肾组织炎症、细胞凋亡及TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法 将60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、绿原酸低剂量组、绿原酸中剂量组、绿原酸高剂量组、二甲双胍组,每组10只。除正常组外,其他各组大鼠腹腔注射柠檬酸钠缓冲液稀释的链脲佐菌素建立糖尿病肾病模型。造模成功后第2天,绿原酸低、中、高剂量组大鼠分别灌胃30 mg/kg、60 mg/kg、120 mg/kg的绿原酸,二甲双胍组大鼠灌胃200 mg/kg的二甲双胍,正常组和模型组大鼠灌胃等剂量的生理盐水,均1次/d,连续灌胃8周。测定各组大鼠24 h尿蛋白定量、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、空腹血糖(FPG)水平,采用HE染色和PAS染色观察大鼠肾组织形态,ELISA法检测血清炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,TUNEL染色检测肾组织细胞凋亡情况,Western blot法检测肾组织凋亡蛋白和Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白定量、...     

熊果酸通过MAPK/ERK 信号通路对变应性鼻炎小鼠炎症反应的影响

目的：探讨熊果酸对变应性鼻炎小鼠模型炎症状态的影响。方法：将40只BALB/c小鼠随机分为模型组、熊果酸组和对照组,熊果酸组小鼠根据熊果酸干预浓度差异(150 mg/mL和300 mg/mL)分成2组亚组(低剂量和高剂量熊果酸组)。模型组小鼠：将100μg卵清蛋白联合2 mg Al(OH)₃溶于0.1 mL浓度为0.9%氯化钠溶液中,第0、2、4、6、8、10、12、14天对小鼠进行腹腔注射,第15天开始将500μg卵清蛋白溶于10μL 0.9%氯化钠溶液中并对小鼠进行滴鼻(每个鼻孔10μL)处理,连续激发11 d,制备变应性鼻炎小鼠模型;熊果酸组：将熊果酸溶于浓度为0.9%氯化钠溶液中配置成150 mg/mL和300 mg/mL浓度,造模的同时额外进行腹腔注射熊果酸溶液每天0.3 mL;对照组：参照模型组,采用0.9%氯化钠溶液进行处理。观察小鼠过敏性症状如喷嚏、流涕、挠鼻等行为并进行评分。检测各组小鼠鼻黏膜组织中磷酸化细胞外信号调节激酶(P-ERK)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(P-MAPK)、白细胞介素-17 (IL-17)和白细胞介素-33 (IL-33)的...     

搜风愈喘方基于ERK/p38MAPK 信号通路对支气管哮喘模型大鼠气道炎症的作用机制探讨

目的 探讨祛风、化痰、活血法并施的搜风愈喘方对哮喘大鼠气道炎症的作用机制以及对ERK/p38MAPK信号通路的调节作用。方法 将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、搜风愈喘方组。先以卵蛋白（OVA）致敏及雾化激发制备哮喘大鼠模型。造模成功后,各组大鼠给予相应药物干预治疗21d。ELISA法检测血清及肺泡灌洗液（BALF）中的白细胞介素13(IL-13）、肿瘤坏死因子α(TNF-α）含量;HE染色、PAS染色观察大鼠肺组织病理形态学变化;RT-PCR法检测肺组织匀浆中IL-13、ERK1、ERK2、p38MAPK的mRNA表达;Western Blot法检测肺组织中ERK、p-ERK、p-38MAPK、p-p38MAPK的表达。结果 ELISA法测定结果显示,与正常组比较,模型组血清中IL-13、TNF-α的含量升高（P<0.05）,肺组织中IL-13、ERK1、ERK2、p38MAPK的mRNA表达及p-ERK、p-38MAPK的蛋白表达均明显增强（P<0.05）;与模型组相比,地塞米松组及搜风愈喘方组可降低血清中IL-13、TNF-α的含量、肺组织中I...     

电针对慢性炎性疼痛大鼠Wnt/β-catenin以及ERK/MAPK信号通路相关蛋白表达的影响＊

目的 探究电针（EA）对慢性炎性疼痛大鼠Wnt/β-catenin信号通路和ERK/MAPK信号通路的调控作用。方法 通过完全弗氏佐剂建立慢性炎性疼痛大鼠（CFA）模型。实验分为4组：对照组（NS组）、模型组（CFA组）、模型组+电针组（CFA+EA组）和模型组+假电针组（CFA+Sham EA组），每组6只大鼠。模型建立8天后进行EA治疗，每天1次，每次30 min。用Up-down法评价机械痛阈值，用丙酮刺激大鼠致炎足底观察冷刺激诱发痛的反应评分，用ELISA检测血清和左后足组织中前列腺素E2（Urinary prostaglandin E2，PGE2）、白介素-6（Interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）和脑源性神经营养因子（Brain-derived neurotrophic factor，BDNF）的表达水平，用Western blot检测左后足组织中Wnt家族成员1蛋白（Wnt family member 1，Wnt-1）、β连环蛋白（catenin beta 1，β-catenin）和糖原合酶激酶-3（Glycogen synthase kinase-3 beta，GSK-3β）的表达水平以及cAMP反应元件结合蛋白（cAMP response element binding protein，CREB）和细胞外信号调节激酶（Extracellular signal-regulated kinase，ERK）蛋白的磷酸化水平。结果 与CFA模型组相比，治疗后第5天及第7天，EA显著提高了CFA大鼠的机械痛阈值（P < 0.05），并显著降低了CFA大鼠的冷刺激评分（P < 0.05）。此外，EA显著降低了CFA大鼠血清和左后足组织中PGE2、IL-6、TNF-α、IL-1β和BDNF的表达水平和左后足组织中Wnt-1和β-catenin的蛋白表达水平以及CREB和ERK蛋白的磷酸化水平（均P < 0.05），并显著升高了左后足组织中GSK-3β的蛋白表达水平（P < 0.05）。结论 EA显著改善了大鼠慢性炎性疼痛，其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路和ERK/MAPK信号通路有关。     

耳甲电针对抑郁模型大鼠海马Raf/ERK/RSK/CREB信号通路的影响

目的:观察耳甲电针对慢性不可预知性温和刺激(CUMS)诱导的抑郁大鼠海马细胞外信号调节激酶(ERK)信号转导通路的影响,探讨耳甲电针抗抑郁效应的机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、耳甲电针组、PD98059抑制剂(PD)组、二甲基亚砜(DMSO)组、PD+耳甲电针组,每组10只。采用孤养结合连续21 d CUMS方法制备抑郁大鼠模型。耳甲电针组、PD+耳甲电针组于耳甲区的"心"和"神门"耳穴给予连续28 d电针刺激,每天30 min;PD组、DMSO组、PD+耳甲电针组分别给予连续28 d侧脑室注射PD98059、DMSO、PD98059,每只5μL/d。记录造模前后、干预后各组大鼠糖水消耗量。采用Western blot法检测干预后各组大鼠海马Raf、p-Raf、ERK、p-ERK、RSK、CREB、p-CREB蛋白的相对表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠糖水消耗量及海马Raf、p-Raf、ERK、p-ERK、RSK、CREB、p-CREB均显著降低(P<0. 01)。与模型组比较,耳甲电针组大鼠糖水消耗量及海马Raf、p-Raf、ERK、p-ERK、RSK、CREB、pCREB均显著升高(P<0. 05,P<0. 01),PD+耳甲电针组p-Raf、ERK、CREB明显升高(P<0. 01,P<0. 05),PD组p-ERK明显下降(P<0. 05)。与耳甲电针组比较,PD+耳甲电针组p-ERK、RSK和pCREB明显下降(P<0. 05,P<0. 01)。结论:海马内Raf/ERK/RSK/CREB信号通路可能参与了耳甲电针的抗抑郁效应,且该效应在一定程度上可被ERK阻断剂所抑制。     

ERK信号通路与骨质疏松关系的临床应用进展

“骨质疏松”的概念最早是由欧洲病理学家Pommer于1885年提出。1941年,Albright明确提出骨质疏松症的概念。骨质疏松症（Osteoporosis,OP）是一种全身性的骨骼退化或废用退化性的代谢障碍性骨病,以骨量减少,骨小梁变细、断裂、数量减少,结构退化,骨皮质多孔、变薄为主要特征,并由此导致骨的脆性增高及骨折危险性增加,是骨科的常见病、多发病。主要分为三大类：第一类是原发性骨质疏松症,包括绝经后骨质疏松症（PMOP）和老年性骨质疏松症（SOP）;第二类是继发性骨质疏松症;第三类是特发性骨质疏松症。     

四逆散对心理应激肝郁证模型大鼠ERK1/2-CREB信号通路的影响

[目的]探讨四逆散对心理应激肝郁证模型大鼠应激相关激素、神经递质及海马和下丘脑部位细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK)1/2-c AMP反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响。[方法]采用慢性束缚制动结合孤养的方法制备心理应激肝郁证大鼠模型,根据大鼠一般状态、体质量增长情况、高架十字迷宫实验验证模型成功。将120只大鼠随机分为正常对照组、模型空白组、模型+四逆散组(四逆散组)、模型+艾司唑仑组(艾司唑仑组),各30只。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血浆及脑脊液促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)的含量,半定量PCR法检测大鼠海马和下丘脑部位丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2(MEK1/2)、ERK1/2、CREB、c-fos m RNA的表达,蛋白印迹(Western blot)法检测大鼠海马和下丘脑部位磷酸化(p-)MEK1/2、p-ERK1/2、p-CREB、c-fos蛋白的表达。[结果]与正常对照组比较,模型空白组大鼠血浆和脑脊液中CRH、ACTH、E、NE的含量明显增加(P0.05),5-HT的含量明显减少(P0.05),海马和下丘脑部位MEK1/2、ERK1/2、CREB m RNA及p-MEK1/2、p-ERK1/2、p-CREB蛋白的表达明显降低(P0.05)。与模型空白组比较,四逆散和艾司唑仑均可降低血浆和脑脊液中CRH、ACTH、E、NE的水平(P0.05),升高5-HT的水平(P0.05),上调海马和下丘脑部位MEK1/2、ERK1/2、CREB m RNA及p-MEK1/2、p-ERK1/2、p-CREB蛋白的表达(P0.05)。各组之间大鼠海马和下丘脑部位c-fos m RNA和蛋白质的表达差异无统计学意义(P0.05)。[结论]四逆散能降低心理应激肝郁证模型大鼠血浆和脑脊液CRH、ACTH、E、NE的水平,增加5-HT的含量,提高应激反应能力,其机制可能与上调ERK1/2-CREB信号通路活动有关。     

基于ERK/MAPK信号通路探讨青藤碱对SW480结肠癌细胞活性抑制作用的研究

目的:探讨青藤碱对SW480结肠癌细胞活性抑制作用及对细胞外调节蛋白激酶(extracellu-lar regulated protein kinase,ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响.方法:选用SW480人结肠癌细胞株,设对照组...     

加味左金丸对大肠癌裸鼠ERK/MAPK信号通路的干预作用

目的:探讨加味左金丸通过MAPK信号通路对人大肠癌裸鼠移植瘤的影响。方法:建立人大肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,采用皮下注射HT29大肠癌细胞株制作大肠癌裸鼠模型。45只实验裸鼠随机分为3组:生理盐水组、加味左金丸高剂量组、加味左金丸低剂量组;观察不同组别对裸鼠致瘤的影响,动态观察各组裸鼠肿瘤体积变化,绘制肿瘤生长曲线。采用免疫印记法(Western blot)检测移植瘤ERK/MAPK活性及RT-PcT法检测组织ERK/MAPK mRNA的表达。结果:移植瘤接种成功率100%。裸鼠成瘤潜伏期一般3~5天,最长不超过7天。成瘤初表现为皮下黄白色结节,成瘤早期癌体基本成椭圆形,表面光滑,2周后逐渐增大为紫蓝色结节,边界清,略可活动,触之质中,逐渐不规则,表面凹凸不平,呈结节状。瘤体表面可见皮下有较多血管进入。裸鼠接种2周内,生理盐水组瘤体生长较快,加味左金丸各剂量组生长较慢。特别在后期,生理盐水组裸鼠显得尤为消瘦,拥挤少动,饮食方面各组差异不明显。当肿瘤直径达1cm以后,生长速度较慢,荷瘤鼠渐呈消瘦、精神萎靡、消瘦及恶病质衰竭状态发展。剖视肿瘤,大部分呈类圆形,个别形态不规则,色灰白,质硬。尸检未见腹腔脏器转移以及心、肝、脾、肺、肾、脑等重要脏器的损伤。加味左金丸各剂量组裸鼠皮下肿瘤组织生长较生理盐水组明显减慢(P<0.05)。加味左金丸各剂量组组间比较,差异无显著性意义(P>0.05)。加味左金丸各剂量组肿瘤组织ERK/MAPK相对活性明显较低(P<0.05)。加味左金丸各剂量组组间比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:加味左金丸抑制人大肠癌裸鼠移植瘤的增殖,延缓肿瘤的生长,其机制之一可能是与抑制MAPK信号通路相关的ERK/MAPK的表达有关。     

参术胶囊对脾虚胃癌小鼠ERK信号通路中AP-1和IL-2的影响

目的:研究参术胶囊对脾虚胃癌小鼠细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路中转录激活蛋白-1(AP-1)和白细胞介素-2(IL-2)的影响,以探讨参术胶囊阻断脾虚胃癌发生的机制.方法:随机取17只SPF小鼠作为空白组正常喂养,其余小鼠均首日给予山西白醋15 mL·kg-1·d-1灌胃,次日给予10 mL·kg-1·d-1灌胃,连续9d,第10天给予N-亚硝基二乙胺(DENA)按2.8 mg· kg-1·d-1灌胃,连续110 d,建立脾虚胃癌小鼠模型.将模型动物随机分为模型组、胃复春片718 mg·kg-1·d-1剂量组、参术胶囊440,220,110 mg·kg-1 ·d-1剂量组,试验组从111 d起灌胃给药,连续30 d.实验结束后,观察各组小鼠一般情况的变化;HE染色观察参术胶囊是否阻断脾虚胃癌的发生;用免疫组化法研究参术胶囊对诱导脾虚胃癌模型ERK1/2,AP-1,IL-2等指标的影响.结果:参术胶囊作用脾虚胃癌小鼠模型30 d后,能改善诱发型脾虚胃癌小鼠模型一般状态,其病理表现较模型组明显减轻,免疫组化结果显示胃复春片组和参术胶囊440,220 mg·kg-1 ·d-1剂量组均能明显增强模型动物ERK1/2,AP-1,IL-2的表达(P ＜0.05,P ＜0.01),参术胶囊110 mg·kg-1·d-1剂量组能明显增强模型动物ERK1/2的表达(P＜0.01),而对AP-1,IL-2的表达无明显改善.结论:参术胶囊可通过ERK信号通路阻断脾虚胃癌发生.