PCR检测肺结核病人外周血中结核分枝杆菌

为了解ＰＣＲ检测外周血中结核分枝杆菌ＤＮＡ对肺结核诊断的价值，采用ＰＣＲ检测了１９０例可疑肺结核病人外周血中结核分枝杆菌ＤＮＡ，并用涂片镜检和培养法检测了这些病人痰中结核分枝杆菌。结果肺结核病人外周血ＰＣＲ阳性率（４４％）明显低于培养法（８０．０％），与涂片法相当（４６．８％）；非肺结核病人外周血ＰＣＲ阳性率为１６．２％（５／３）。ＰＣＲ检测外周血结核分枝杆菌ＤＮＡ诊断肺结核的应用价值有限，对急性     

肺结核患者外周血中结核杆菌DNA检测的意义

用ＰＣＲ技术对肺强核患者外周血１０８例和痰９６例中结核杆菌ＤＮＡ进行检测，结果患者外周血和痰中结核杆菌ＤＮＡ阳性率分别为７７．７８％和５７．２９％；其中５２例患者外周血和痰标本配对同时检测总阳性率达９２．３％，提示外周血结核杆菌ＤＮＡ检测可提高肺结核诊断敏感性和阳性检出率，可作为肺结核诊断有用的指标。     

PCR在肺结核诊断中的应用

采用ＰＣＲ技术对８９例临床诊断为肺结核病患者和７５例肺部感染患者的痰液标本作了检测，结果结核杆菌ＤＮＡ阳性率分别为９１．０２％和３．３３％，二组相比差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１），６例患者重复试验仍为阳性；并对８例肺结核患者进行动态观察，７例经抗痨治疗１～３个月后ＰＣＲ仍为阳性。认为ＰＣＲ技术是快速、敏感、特异诊断结核病的方法。     

PCR对结核性胸水诊断价值的探讨

采用ＰＣＲ技术检测６７例胸水标本中的结核杆菌ＤＮＡ，并与细菌学检查（细菌培养）进行对比观察，结果表明：用ＰＣＲ方法检测结核性胸水中结核杆菌ＤＮＡ阳性的检测率达５２．２４％（３５／６７）；胸水细菌培养出结核杆菌者１３．４６％（７／５２），两者相比具有高度显著性（ｐ＜０．０１）。对３例大量的结核性胸水患者进行动态观察，经抗痨治疗２～３周后复查胸水ＰＣＲ仍为阳性。认为ＰＣＲ是敏感、快速、特异性的方法，对结核性胸水诊断和治疗具有实用价值。     

聚合酶链反应检测泌尿系结核患者尿中结核杆菌

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对３４例泌尿系结核病人的２４小时尿液标本进行结核杆菌染色体中３３６－ｂｐ重复序列ＤＮＡ片段的扩增检测，阳性率为９４．１％。ＰＣＲ检测２４小时尿样中结核杆菌比尿沉淀物涂片法找抗酸杆菌（阳性率５６％）及结核杆菌快速培养法Ｂａｃｔｅｃ培养结核杆菌（阳性率７０．６％）更敏感。我们还用ＰＣＲ、涂片法、Ｂａｃｔｅｃ培养法检测了１０例非泌尿系结核者中结核杆菌，阳性结果分别为０、０、３     

用聚合酶链反应快速检测痰液中结核杆菌

本研究以结核杆菌染色体中重复出现的长度为１２３个碱基对（ｂｐ）的ＤＮＡ片段作为聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增的模板，合成一对寡核苷酸引物。痰液标本先经三羟甲基氨基甲烷（Ｔｒｉｓ），乙二胺四乙酸二钠（ＥＤＴＡ－２Ｎａ）和三硝基甲苯（Ｔｒｉｔｏｎｘ－１００）加热、震荡处理，裂解结核杆菌，再作ＰＣＲ扩增和琼脂糖凝胶电泳。同时，与痰液直接涂片、抗酸染色镜检抗酸染色阳性杆菌作比较。用该ＰＣＲ检测的检出率为９１．４％（３２／３５），而涂片抗酸染色的检出率仅为３４．３％（１２／３５）。两者相比有非常显著性差异（ｘ２＝２４．４７６，Ｐ＜０．００１）。由于改进了ＰＣＲ前痰液标本的处理方法，使整个ＰＣＲ检测过程所需时间缩短至９ｈ。我们认为该ＰＣＲ检测结核杆菌是特异、敏感和快速的，可在临床实验室应用。     

PCR检测乙肝病人肝组织和血中HBVDNA

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合地高辛素标记的乙肝病毒ＤＮＡ探针（ＨＢＶＤＮＡ－Ｄｉｇ）杂交技术检测了４９份乙型肝炎患者的肝组织标本和４６份血清标本中的ＨＢＶＤＮＡ。结果表明：ＰＣＲ检出乙肝病人肝组织和血清中ＨＢＶＤＮＡ阳性率比斑点杂交高（Ｐ＜０．０５）。在２１例同时检测了肝组织和血清中ＨＢＶＤＮＡ的病人中，肝组织ＨＢＶＤＮＡ阳性率为５７．１％（１２／２１）；血清阳性率为６１．３％（１３／２１）；两者总阳性率为８０．９％（１７／２１），说明用ＰＣＲ同时检测肝组织和血中ＨＢＶＤＮＡ，可明显提高ＨＢＶＤＮＡ的检出率。     

聚合酶链反应对肺结核的诊断价值

我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，检测临床诊断肺结核菌ＤＮＡ，同时检痰涂片及痰培养结核菌。结果ＰＣＲ的阳性率为７４．３０％，痰涂片阳性率为２．０８％，痰培养的阳性率为７．７０％。经统计学处理，前者均高于二者，Ｐ均＜０．００１。说明ＰＣＲ技术可快速高效检测肺结核病人结核菌的ＤＮＡ。     

聚合酶链反应检测痰液TB—DNA的临床意义

利用聚合酶链反应，对１２５例呼吸疾病患者进行痰液中结核杆菌ＤＮＡ（ＴＢ－ＤＮＡ）片段的检测。结果显示：ＰＣＲ方法对活动性肺结核的诊断敏感性为８６．６７％，特异性为９４．９２％。陈旧性肺结核２例阳性。有６例患者痰ＴＢ－ＤＮＡ阳性，胸片未发现结核病灶。认为，ＰＣＲ方法为肺结核诊断提供了一项灵敏特异的诊断手段，而且在呼吸系统常见病的鉴别诊断上亦具有重要价值。     

聚合酶链反应检测痰液TB－DNA的临床意义

利用聚合酶链反应，对１２５例呼吸疾病患者进行痰液中结核杆菌ＤＮＡ（ＴＢ－ＤＮＡ）片段的检测。结果显示：ＰＣＲ方法对活动性肺结核的诊断敏感性为８６．６７％，特异性为９４．９２％。陈旧性肺结核２例阳性。有６例患者痰ＴＢ－ＤＮＡ阳性，胸片未发现结核病灶。认为，ＰＣＲ方法为肺结核诊断提供了一项灵敏特异的诊断手段，而且在呼吸系统常见病的鉴别诊断上亦具有重要价值。     

聚合酶链反应在732份临床标本检测中的应用

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测７３２份痰、血清、尿、分泌物、胸腹水、脑脊液等临床标本中之结核杆菌、乙型肝炎病毒和淋球菌的ＤＮＡ。结果表明，活动性肺结核病人痰标本阳性率最高，达７４．２３％；乙型肝炎病毒阳性率为３２，１４～６９．２３％，淋球菌阳性率为４４．１２％，内一例病人分泌物涂片阴性而ＰＣＲ阳性。本技术具有灵敏、特异、简便、快速和不需培养等优点，适合于临床应用。     

SRID和PCR法诊断结核病的比较研究

以多聚酶链反应技术（ＰＣＲ）和单向免疫扩散法（ＳＲＩＤ）对１８９例肺内结核病和１１２例肺外结核病患者进行结核杆菌ＤＮＡ检测和活动性结核标记物（ＡＴＭ）检测，结果表明：ＰＣＲ法和ＳＲＩＤ法在诊断结核病方面，二者均具有较高敏感性，阳性率分别为８８．９％和９０．５％．，而假阳性率ＰＣＲ法明显高于ＳＲＩＤ法。提示：检测ＡＴＭ诊断结核病，具有较大实用性。     

用聚合酶链反应技术诊断结核病

用聚合酶链反应技术对结核杆菌特异性重复序列ＩＳ６１１０部分基因１２３ｂＰ的片段进行扩增。该法检测人型结核杆菌灵敏度可达到１０ｆｇＤＮＡ，对１４９份结核患者临床标本检测结果显示ＰＣＲ总阳性率（６９．１％）明显高于直接涂片荧光镜检（１５．４％）与细菌培养（１０．１％）的阳性率（Ｐ＜０．０１）。研究表明ＰＣＲ是一种特异、敏感、快速诊断结核病的好方法，值得推广。     

聚合酶链反应技术检测临床标本中军团病杆菌

探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测临床标本中军团病杆菌（ＬＤＢ）对军团菌病的诊断价值。用ＰＣＲ技术对３１例ＬＤＢ培养和（或）血清学阳性、临床诊断为军团菌病患者急性期的临床标本，军团菌巨噬细胞感染增效基因（ｍｉｐ ｇｅｎｅ）６３０ｂｐ片段进行ＤＮＡ扩增，并与军团菌培养和血清血诊断（间接荧光抗体检查法）比较。结果：ＰＣＲ技术诊断军团菌病的阳性率为９０．３％９２８／３１），比培养的阳性率（６２．６％，１     

聚合酶链反应在结核病诊断中的应用

目的：探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）对结核病的诊断价值。方法：应用ＰＣＲ技术检测４７份结核病患者的各种临床标本，并与传统细菌学检测结果比较。结果：ＰＣＲ检测阳性率为５７．４５％（２７／４７），明显高于传统细菌学检测者（１７．０２％，８／４７）（Ｐ〈０．００５）。其中，ＰＣＲ检测胸膜结核性胸水与脑膜结核性脑脊液的阳性率均显著高于传统学检测者（Ｐ〈０．０５）。ＰＣＲ检测的假阳性率为５．１３％（４／７８），     

聚合酶链反应在肺结核诊断中的应用

目的：为探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）在肺结核诊断中的应用价值。方法：收集６７例肺结核患者的７９份晨痰标本同时进行ＰＣＲ检测及直接涂片抗酸染色镜检。结果：未经治疗的６７份晨痰标本，ＰＣＲ和直接涂片的阳性率分别为４６．３％、１１．９％（Ｐ＜０．０１）；直接涂片阴性的５９份标本ＰＣＲ阳性率４５．８％；接受治疗２月后的１２份标本ＰＣＲ阳性率５８．３％。结论：ＰＣＲ检测快速、灵敏，适宜于菌阴肺结核的早期诊断，但不宜仅以ＰＣＲ结果作为评价化疗效果的依据     

聚合酶链反应对肺结核的诊断价值

对７０例肺结核和２０例其它肺部疾病患者行痰及血标本ＰＣＲ检测、痰培养和涂片镜检结核菌。结果表明肺结核组痰ＰＣＲ阳性率为６４．３％，血ＰＣＲ阳性率为１１．４％，培养阳性率为３０．０％，涂片阳性率为２４．３％。其它肺部疾病ＰＣＲ阳性率为１０％，血ＰＣＲ为０，涂片阳性率为０，培养阳性率为０，表明痰ＰＣＲ特异性好，敏感性高，且快速，与临床符合率较高，不失为结核病的诊断和鉴别诊断的一种可靠的方法。     

快速提取临床标本中结核杆菌DNA方法的研究

介绍了二种快速、简便从临床结核性痰标本及体腔液标本中提取ＤＮＡ的方法，４０例结核性标本ＰＣＲ扩增结果：加热碱裂解法阳性率为６７．５％（２７／４０）；溶菌酶法阳性率是６０％（２４／４０）。二种方法经统计学处理，ＰＣＲ阳性率之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。这些方法中，我们省去了传统的酚抽提及蛋白酶Ｋ的作用步骤，使提取ＤＮＡ能在１小时内完成，适用于临床推广。     

应用PCR快速诊断小儿结核性脑膜炎的研究

作者报道特异性寡核苷酸引物引导聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测脑脊液中结核杆菌ＤＮＡ。所用引物来自于编码结核杆菌的６５ＫＤａ蛋白质抗原基因，产生特异的３８３ｂｐ片段。对１０倍连续稀释的人型结核杆菌ＤＮＡ进行ＰＣＲ，可检测出１ｐｇ结核杆菌ＤＮＡ，相当于１０～１００个细菌。应用ＰＣＲ检测４２例结脑脑脊液，阳性率为５７．１４％，直接涂片镜检和细胞培养阳性率分别为７．１４％和１４．２８％；４６例非结脑脑脊液中，３种检测结果均阴性。研究结果表明，ＰＣＲ检测脑脊液中结核杆菌ＤＮＡ有较高的敏感性和特异性，它快速、简便，有望成为一种临床常规检测结核杆菌方法。     

PCR扩增杂交试验检测HCV-RNA

目的：评价ＰＣＲ扩增杂交试验（ＰＣＲ－Ｈｙｂ）在ＨＣＶ－ＲＮＡ检测中的应用。方法：对２８例丙型肝炎患者和５例非丙型肝炎患者采用ＰＣＲ扩增杂交（ＰＣＲ－Ｈｙｂ）试验、套式ＲＴ－ＰＣＲ及ｂＤＮＡ信号扩增试验检测ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果：三种方法的阳性率分别为７１．３４％（２０／２８）、７８．５７％（２２／２８）、１００％（２７／２７）。ＰＣＲ－Ｈｙｂ与套式ＲＴ－ＰＣＴ的阳性符合率为９３．９３％（３１／３３），与ｂＤＮＡ结果呈现较好的相关性（ｒ＝０．８０８３）。结论：ＰＣＲ－Ｈｙｂ具有较好的特异性和敏感性，并在抗病毒治疗时的动态观察有一定价值。