放射辐照对异体神经移植组织学改变的影响

目的　探索放射辐照对异体神经移植组织学改变的影响。方法　将 18只SD大白鼠随机均分为三组 :自体对照组、异体对照组、辐照处理组。应用放射辐照方法处理异体神经后进行移植。术后 12周移植神经和胫前肌HE染色 ,移植神经S - 10 0蛋白及波形蛋白免疫组化和甲苯胺蓝染色 ,观察其组织学变化和计数单位面积内阳性轴突数和再生的有髓神经纤维数量。结果　放射辐照处理后的移植神经 ,纤维组织增生和炎性细胞浸润较少 ,胫前肌生长良好 ,再生有髓神经纤维增多 (与异体对照组比较 ,P <0 .0 5 ) ,单位面积内的阳性轴突数明显增多 (P <0 .0 5 )。结论　放射辐照处理可降低异体神经的抗原性     

放射辐照对异体神经移植组织学改变的影响

目的探索放射辐照对异体神经移植组织学改变的影响.方法将18只SD大白鼠随机均分为三组:自体对照组、异体对照组、辐照处理组.应用放射辐照方法处理异体神经后进行移植.术后12周移植神经和胫前肌HE染色,移植神经S-100蛋白及波形蛋白免疫组化和甲苯胺蓝染色,观察其组织学变化和计数单位面积内阳性轴突数和再生的有髓神经纤维数量.结果放射辐照处理后的移植神经,纤维组织增生和炎性细胞浸润较少,胫前肌生长良好,再生有髓神经纤维增多(与异体对照组比较,P＜0.05),单位面积内的阳性轴突数明显增多(P＜0.05).结论放射辐照处理可降低异体神经的抗原性.     

冷冻异体神经移植应用转化生长因子β1质粒的研究

目的探讨对经反复冻融处理的冷藏异体神经移植,局部使用转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)质粒的效果. 方法健康成年不同窝Wistar大鼠40只随机分为两组,每组20只,将坐骨神经在梨状肌孔下5 mm处切除2.0 cm,神经缺损用预制反复冻融于-196℃冷冻的异体神经2.0 cm移植修复.实验组在局部肌肉及神经两断端注射TGF-β1质粒,对照组注射等量生理盐水.分别于6周和12周对每组10只大鼠取材,切片、染色并进行轴索计数和统计学分析. 结果 6周时实验组轴索间基本无水肿,再生神经数量接近正常;对照组神经移植段轴索间有轻度水肿,再生神经较少.12周时实验组整个神经移植段基本被再生轴突充满,有髓纤维排列整齐,轴突和髓鞘发育良好,再生轴突数为98.6±4.8/μm2;对照组神经纤维排列整齐,轴突和髓鞘发育较实验组差,轴突数为75.8± 5.1/μm2,差异有统计学意义(P<0.01). 结论反复冻融冷藏保存的异体神经其抗原性降低,具有修复神经缺损的可能性.局部使用TGF-β1质粒可发挥免疫抑制作用,降低宿主的免疫排斥反应.     

游离股薄肌移植在臂丛损伤治疗中的显微组织学及定量研究

目的 观察股薄肌移植在臂丛损伤治疗中显微组织学变化及神经纤维数量变化.方法 新鲜尸体下肢标本6具(成年男性),显微镜下分离观察股薄肌肌支神经,标记方位后在不同平面取材,4％甲醛溶液固定后冰冻切片,行改良Kamovsky-Roots法AchE组织化学染色,观察神经组织染色结果及不同断面上的神经束分布情况;石蜡包埋切片,行Loyez髓鞘染色法染色,应用图像分析系统对组织切片进行定量分析:测算各神经断面有髓神经纤维数目、神经束截面积和神经干截面积,计算神经束和结缔组织所占比例并采用配对样本t检验.结果 低倍镜下股薄肌肌支神经束大多数神经纤维呈现酶活性反应,有少量稀疏的块状酶染区.高倍镜下神经纤维形态清晰可见,轴突染色,髓鞘及周围结缔组织不染色.应用Loyez髓鞘染色法显示断面有髓神经纤维,通过图像分析系统,能够测算神经分支及各断面的神经纤维数目和结缔组织面积等指标.股薄肌神经有髓神经纤维数为(1958±375)根.前、后支有髓神经纤维数,前、后支截面积差异均有统计学意义,P＜ 0.05,后支的神经纤维数和截面积大于前支.股薄肌神经干上各个平面之间结缔组织面积差异均有统计学意义(P＜0.05),结缔组织所占比例向远端逐渐增加,而神经束所占比例的变化趋势和结缔组织相反.结论 应用AchE组织化学染色方法,股薄肌神经运动束的特征清晰可辨,结合显微解剖结果,能够明确股薄肌神经束的走行及分布情况.应用Loyez髓鞘染色法通过定量分析可明确神经纤维数,有助于选择合适的供体神经,保证两吻合神经之间达到相互匹配.     

静脉体基底膜许旺细胞和NGF复合移植桥接神经缺损的实验研究

目的观察静脉体、基底膜、许旺细胞和神经生长因子复合移植桥接神经缺损的作用。方法采用健康白兔40只，分为4组，每组10条坐骨神经。A组为静脉体、基底膜、许旺细胞和神经生长因子复合移植组，B组为自体静脉组， C组为人羊膜基底膜组，D组为自体神经移植组。均修复坐骨神经1.5 cm缺损，术后3 个月观察肢体运动，肌电图动作电位波幅、潜伏期和传导速度，并常规HE染色、免疫组化SP 法染色显示髓磷脂碱性蛋白（MBP）及Cajal吡啶银染色，镜下观察移植体段神经束面积、有髓神经纤维密度、直径、轴突直径等，做统计学处理。结果静脉体、基底膜、许旺细胞和神经生长因子复合移植组的上述指标与自体神经移植组比较，差异无显著性(P＞0.05)，与静脉和人羊膜基底膜组比较，差异有显著性(P＜0.05)。结论（1 ）静脉体、基底膜、许旺细胞和神经生长因子复合移植起到了自体神经移植桥接神经缺损的作用；（2）移植体内有较粗大成熟的有髓神经纤维轴突再生为有效神经再生，再生有髓神经纤维直径和轴突直径与功能恢复密切相关。     

静脉体基底膜许旺细胞和NGF合移植桥接神经缺损的实验研究

目的 观察静脉体、基底膜、许旺细胞和神经生长因子复合移植桥接神经缺损的作用。方法 采用健康白兔40只，分为4组，每组10条坐骨神经。A组为静脉体、基底膜、许旺细胞和神经生长因子复合移植组，B组为自体静脉组，C组为人羊膜基底膜组，D组为自体神经移植组。均修复坐骨神经1.5cm缺损，术后3个月观察肢体运动，肌电图动作电位波幅、潜伏期和传导速度，工常规HE染色、免疫组化SP法梁色显示髓磷脂碱性蛋白（MBP）及Cajal吡啶银染色，镜下观察移植体段神经束面积、有髓神经纤维密度、直径、轴突直径等，做统计学处理。结果 静脉体、基底膜、许旺细胞和这在子复合移植组的上述指标与自体神经移植组比较，差异无显著性（P＞0.05），与静脉和人羊膜基底膜组比较，差异有显著性（P＜0.05）。结论 （1）静脉体、基底膜、许旺细胞和神经生长因子复合移植起到了自体神经移植桥接神经缺损的作用；（2）移植体内有较粗大成熟的有髓神经纤维轴突再生为有效神经再生，再生有髓神经纤维直径和轴突直径与功能恢复密切相关。     

胎兔周围神经同种异体移植的实验研究

目的：设计同种异体神经移植的实验模型，探讨其临床应用的可能性。方法：选妊娠２８天的青紫蓝兔为供体，４８只大耳白兔为受体。取供体胎兔的坐骨神经，经超低温冷冻与液氮处理，复温后桥接于受体１侧正中神经缺损段，为实验组。另１侧取自体神经移植，为对照组。术后２周、３个月进行免疫学与神经电生理检测；电镜观察和形态定量学分析。结果：术后两组均无急性排异反应。神经传导速度，再生神经单位面积髓鞘数，平均灰度值及单位面积髓鞘密度值等，两组差异均无显著意义（Ｐ＞０．０５）。结论：胎兔神经能够代替自体神经移植。     

神经端侧缝合与带血供的自体神经游离移植修复神经缺损的比较研究

目的通过神经端侧缝合与带血供的自体神经游离移植的对比观察，分析神经端侧缝合的修复效果。方法选用SD大鼠20只，每只大鼠随机选择一侧下肢行神经端侧缝合，另一侧下肢建立带血运的神经游离移植模型。术后分笼饲养，观察肢体瘫痪及感觉恢复情况。术后6个月取缝合处以远腓总神经段标本切半薄切片，分别做甲胺蓝、变色酸2R-亮绿髓鞘染色和HE染色，测量神经横切面轴突数目、密度、直径等。超薄切片做透射电镜观察，测髓鞘厚度和有髓神经纤维面积。结果所有大鼠伤口一期愈合，足部无溃疡形成，外观红润饱满。于术后3个月左右胫前肌肌力恢复，趾展反射出现。光镜检查见两种手术方式均有有髓神经纤维生长，再生纤维排列整齐密集，呈线形平行排列。电镜观察见髓鞘形态正常。两种术式轴突数目、密度、直径、髓鞘厚度差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论神经端侧缝合后有有髓神经纤维生长，修复效果与带血供的自体神经游离移植无显著性差异。     

嗅神经髓鞘细胞移植促进大鼠横断脊髓轴突再生的研究

目的;观察嗅神经髓鞘细胞（OECs)对脊髓轴突再生的促进作用。方法：将分离,纯化与体外培养2周的SD大鼠OECs,移植于12只成年SD大鼠第10胸椎横断模型的脊髓两断端;8只对照动物注入DMEM／F12培养基,移植后2周和8周进行神经嗜银染色与髓磷脂碱性蛋白（MBP）组织化学和神经生长因子受体（NGFR）免疫组织化学研究。结果：OECs移植组2周后脊髓两端在形态学上呈现初步愈合现象,组织学观察显示,移植OECs与损伤脊髓组织整合良好,再生轴突长入断端组织,8周时再生轴安全检查明显增多,OECs与再生轴突均呈MBP和NGFR阳性表达。对照组两断端液化坏死,未见再生轴突。结论：OECs移植可保护损伤的脊髓并促进宿主脊髓轴突再生。     

慢传输型便秘结肠神经丝蛋白和S—100蛋白的表达及意义

目的：探索结肠慢传输型便秘的发病机制。方法：采用免疫组织化学方法研究３３例慢性传输型便秘的病人（ＳＴＣ组）和２５例非便秘性结肠（对照组）升、横、降及乙状结肠肌间神经丛内神经丝蛋白和Ｓ－１００蛋白的表达。并利用图像分析系统作定量分析。结果：ＳＴＣ组结肠ＨＥ染色显示肌间神经丛未见明显异常,免疫组织化学染色示,对照组各段肠壁肌间神经丛内神经丝蛋白和Ｓ－１００蛋白的含量较恒定（Ｐ〉０．０５）。ＳＴＣ组结肠各段与对照比较。神经丝蛋白的含量无明显减少（Ｐ〉０．０５）,但出现堆积聚集现象,平均光密度明显高于对照组（Ｐ〈０．０１）;Ｓ－１００蛋白的含量及平均光密度明显高于对照组（Ｐ〈０．０１）。且随着病程的延长而增加,二者呈直线相关（Ｐ〈０．０２）。结论：ＳＴＣ结肠肌间神经丛的病理改变是全结肠性改变。神经丝蛋白的堆积聚集和神经     

应用胚胎脊髓前角细胞移植修复大鼠神经损伤的实验研究

目的　观察鼠胚胎脊髓前角细胞移植入胫神经远断端后的变化及作用。方法　将 2 4只SD大鼠随机分为移植组和对照组 ,每组 12只。切断大鼠右侧胫神经形成失神经腓肠肌实验模型。分离并制备孕 14～ 18d大鼠胚胎脊髓前角运动神经元 ,植入已切断的胫神经远断端。对照组在相同部位注射等量的培养液。术后 3个月 ,对移植细胞进行组织学观察、Nissl染色和辣根过氧化物酶 (horseradishperoxidase ;HRP)逆行示踪检测。行胫神经再生纤维计数 ,并检测腓肠肌电生理变化、肌湿重和肌动蛋白表达。结果　植入细胞能在胫神经远端存活 ,呈现Nissl阳性染色并被HRP逆行示踪所标记。移植组胫神经的再生率、腓肠肌肌湿重和肌动蛋白含量均明显高与对照组 (P <0 .0 5 )。电刺激移植组胫神经可记录到腓肠肌的诱发动作电位 ,能引起肌肉收缩和踝关节运动。结论　同种异体胚胎脊髓前角细胞移植到外周神经内可使靶肌肉获得神经支配并延缓其失神经萎缩的变化。     

远端神经变性对神经再生放大规律的影响

目的 探讨应用正常供体神经修复预变性受体神经时,再生神经纤维放大的效果.方法 将雄性SD大鼠12只,随机分为变性组、对照组,所有动物均实行手术.变性组应用部分正常腓总神经修复变性8周胫神经远端;对照组应用部分正常腓总神经修复即刻损伤后胫神经远端.术后3个月进行神经电生理测量、肌力测量、组织学观察、神经锇酸染色及有髓神经纤维计数,并计算两组神经再生放大率.结果 变性组和对照组神经传导速度分别为(16.992±3.737)m/s和(23.092±2.788)m/s;肌肉强直收缩力恢复率为(39.642±5.865)%和(71.098±6.778)%;再生有髓神经纤维数分别为1718.2±282.0和3340.0±506.5;神经再生放大率1.581±0.329和3.098± 0.642;以上指标变性组均低于对照组(P＜0.05).结论 应用正常神经修复8周变性神经远端时,神经纤维再生放大率降低,说明损伤远端神经较长时间变性,接受再生神经纤维长入的能力降低.     

优化法去细胞大鼠神经同种异体移植修复坐骨神经缺损

[目的]以优化法去细胞大鼠神经移植,修复同种异体坐骨神经缺损,观察术后动物的免疫排斥、早期功能恢复及神经再生情况。[方法]以优化去细胞方法处理新鲜取材的成年SD大鼠坐骨神经,移植修复同种异体1.0cm坐骨神经缺损,以自体神经和新鲜异体神经移植为对照,术后1个月行坐骨神经功能指数评价、神经电生理和组织学检查,观察动物在功能恢复、免疫排斥及神经再生方面的情况。[结果]自体神经和去细胞异体神经移植组动物的坐骨神经功能指数无显著差异(P>0.05),大体观察均可见神经连续性良好。电生理检测表明2组动物移植神经均已恢复电传导能力,在传导速度(CV)上无显著差异(P>0.05),但均未达到正常神经水平(P<0.05)。组织学观察则显示2组再生神经纤维均已长入移植段远端。S-100免疫组化显示两者在雪旺氏细胞数、形态和排列等方面无明显差异。2组在CD8 T细胞和巨噬细胞免疫组化染色阳性面积百分比上差异无统计学意义(P>0.05)。计算移植神经中段轴突密度后表明两者无显著差异(P>0.05),但都比正常神经小(P<0.05),比新鲜异体神经移植组大(P<0.05)。[结论]优化去细胞神经移植组与自体神经移植组在免疫排斥、功能恢复及神经再生方面无显著差异。优化法去细胞神经在移植修复同种异体神经缺损时,可以达到免疫耐受,其早期功能恢复和神经再生情况良好,在修复周围神经缺损时可以作为自体神经移植的一种替代疗法。     

神经细胞粘附分子在胆管癌神经浸润转移中的作用

目的 探讨神经细胞粘附分子（ＮＣＡＭ）在胆管癌神经浸润中的作用。方法 ７８例胆管癌标切切片ＨＥ染色,观察记数小血管、小淋巴管、神经纤维浸润数。用抗人ＮＣＡＭ单抗行链霉亲和素－过氧化物酶（Ｓ－Ｐ）法染色,观察肿瘤细胞的阳性情况。结果 肿瘤细胞神经浸润阳性与小血管、小淋巴管的浸润呈正相关（Ｐ〈０．０１）;肿瘤细胞ＮＣＡＭ表面阳性（５１例）与神经浸润阳性（６８例）呈正相关（Ｐ〈０．０１）;肿瘤的恶性程度     

周围神经端侧缝合与端端缝合疗效比较的实验研究

目的比较周围神经损伤后端侧缝合与端端缝合方法疗效的优劣。方法ＳＤ大鼠１２只,按手术先后随机分成Ａ,Ｂ两个时间组。左侧腓总神经切断后作端端缝合。右侧腓总神经切断后,远断端与近断端上方０．５ｃｍ束外膜开窗处作自身端侧缝合。分别于术后１、３个月时作肌电图后取材,测肌湿重及作组织学检查。结果Ａ、Ｂ两组,端侧缝合与端端缝合比较,肌电图中诱发电位潜伏期延长、波幅降低。胫前肌肌湿重减轻。肌纤维截面积、有髓神经纤维数均减少。经配对ｔ检验,Ｐ值均＜０．０５。结论周围神经断伤作端侧缝合后,其神经再生质量不及端端缝合优良。     

犬化学去细胞神经同种异体移植的神经再生研究

目的 观察犬去细胞异体神经移植后近期神经再生的情况。谅15只家犬分成实验组（去细胞神经移植组，6只犬），对照组I（自体神经移植组，6只犬），对照组Ⅱ（新鲜异体神经移植组，3只犬），制成犬坐骨神经缺损5.0cm的模型，以上述3种神经移植物桥接修复。术后6个月行神经再生的组织学观察。结果 实验组移植段内有大量的新生神经纤维，新生血管及雪旺细胞；远端胫神经内出现大量的有髓神经纤维；靶肌肉运动终板的数量，形态及分布均良好。实验组和对照组I非常相似。结论 化学去细胞神经作为同种异体神经移植物，在修复术的粗大和长段神经缺损时不会被宿主排斥和吸收，其神经再生与自体神经移植无明显差别。     

灵长类去细胞神经的萃取制备及异体移植后早期神经再生观察

目的发展新的化学处理方法，清除灵长类周围神经中的细胞和髓鞘，降低其抗原性，萃取粗大和长段的去细胞神经移植物，并观察其同种异体移植的早期神经再生。方法以Triton X-100和脱氧胆酸钠溶液化学处理猴长段正中神经和坐骨神经。萃取的去细胞神经行普通组织学染色、免疫组化染色及透射电镜检查，观察其组织结构。以去细胞神经同种异体移植修复猴正中神经3．0cm和胫神经5、0cm缺损，术后3周和8周，通过大体观察、HE染色及免疫组化染色观察早期神经再生一结果细胞和髓鞘已被彻底清除，神经基底膜和雪旺细胞基底板层保留完好，去细胞神经成为空的神经基质管。移植术后8周轴突再生已通过远端吻合口，移植段再血管化及雪旺细胞增殖良好。结论该化学处理可萃取灵长类粗大和长段的去细胞神经，作为同种神经移植物不会被排斥吸收。     

端侧吻合与神经移植修复周围神经缺损疗效的形态学比较

目的：比较神经端侧吻合与神经移植修复神经缺损的疗效。方法：Wistar大白鼠20只,分两组,每组10只。右侧手术,切除腓总神经8mm。端侧吻合组近端反转结扎,远端与胫神经外膜开窗处行端侧吻合。神经移植组切取腓肠神经10mm,移植于腓总神经缺损处。两组动物左侧作正常对照。术后3个月,行双侧腓总神经、胫前肌组织学检查、胫前肌肌湿重测定及运动终板检查。结果：两组再生神经纤维数目、肌湿重、肌纤维截面积、运动产板的面积及着色均无显著性差异。结论：神经端侧吻合与神经移植修复神经缺损在形态学方面具有同等形态学疗效。     

大鼠周围神经移植修复马尾神经损伤的早期形态学观察

目的：探讨坐骨神经移植修复马尾神经损伤的可行性,观察马尾神经再生情况。方法：将30只雌性Wistar大鼠分为三组,实验组：将20只大鼠马尾在L2水平行半侧切除,将对侧坐骨神经移植到马尾切除侧,近端接马民行断端,移植的坐骨神经远端与马尾切除侧坐骨神经吻合,分别于术后4、6、8周在光镜及电镜下观察马尾再生情况。实验对照组：5只大鼠,仅切除部分马尾。正常对照组：5只大鼠,不做处理。结果：实验对照组坐骨神经的轴突及髓鞘均崩解,无再生轴突形成。实验组术后4周HE及固蓝染色偶见髓鞘及轴突形成,雪旺细胞数目少,有世噬细胞吞噬现象;术后6周较4周再生髓鞘及神经轴突数目增多,雪旺细胞大量增生,巨噬细胞吞噬现象减少;术后8周高倍镜下可见再生的典型形式,即胶质基质中的退变纤维中有大量簇状细小的有髓神经纤维,电镜下可见含较多细的有髓和无髓神经纤维,内含较多线粒体等管状结构,雪旺细胞核大而明显,胞浆丰富,粗面内质网及高尔基体、线粒体增加明显。结论：周围神经移植修复马尾神经是可能的,马尾神经损伤后有再生的可能性。     

人羊膜上皮细胞对大鼠坐骨神经再生影响的实验研究

目的 通过实验研究了解人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,HAECs)对大鼠坐骨神经再生的促进作用.方法 取60只SD大鼠随机分为两组,羊膜细胞组和对照组,各组再分为2周和4周组,每组15只.制作大鼠周围神经损伤再生室模型,HAECs组局部应用培养的HAECs,对照组局部使用等量的生理盐水.术后分别于2周、4周检测神经传导功能和HE染色观察神经纤维形态学变化.结果 术后2周两组的神经电生理及组织学检测比较差异无统计学意义;4周HAECs组的大鼠坐骨神经传导功能明显恢复,HE染色显示术后坐骨神经手术部位出现大量炎性肉芽组织,呈现纤维性修复,吻合口以远HAECs组神经纤维形态结构较对照组完整,神经纤维与髓鞘直径均较对照组大.结论 HAECs移植可加速大鼠坐骨神经损伤后神经传导功能恢复,有助于有髓神经纤维损伤后的轴突与髓鞘的再生修复.