姜黄素对环孢素A诱导激活的大鼠牙龈成纤维细胞TGF-β1/Smad3通路的抑制作用

目的：体外实验研究姜黄素（curcumin,Cur）对环孢素A（cyclosporine A,CsA）作用大鼠牙龈成纤维细胞TGF-β1/Smad3通路的影响,为进一步探讨Cur抑制CsA所致药物性牙龈增生的发生机制提供理论依据。方法：使用CCK-8法观察0、5、10、20、30 μmol/L Cur对大鼠牙龈成纤维细胞增殖的影响, 20 μmol/L Cur+200 ng/mL CsA共同作用对大鼠牙龈成纤维细胞增殖的影响。实时荧光定量PCR检测20 μmol/L Cur+200 ng/mL CsA共同作用下,牙龈成纤维细胞中转化生长因子TGF-β1、Smad3、平滑肌肌动蛋白α-SMA和I型胶原蛋白COL-I的mRNA表达变化;蛋白免疫印迹实验检测TGF-β1、Smad3、p-Smad3、α-SMA和COL-I的蛋白表达变化。细胞划痕实验观察20 μmol/L Cur+200 ng/mL CsA 对牙龈成纤维细胞迁移能力的影响。采用SPSS 23.0 软件包对数据进行统计学分析。结果：大鼠牙龈成纤维细胞在20 μmol/L Cur+200 ng/mL CsA共同作用下,细胞增殖和迁移能力明显降低;20 μmol/L Cur显著下调了牙龈成纤维细胞中TGF-β1、α-SMA 和COL-I的mRNA 表达,蛋白免疫印迹实验提示,TGF-β1、p-Smad3、α-SMA 和COL-I的表达同样显著下调。结论：Cur可能通过抑制CsA激活的牙龈成纤维细胞TGF-β1/Smad3 信号通路,从而降低牙龈成纤维细胞增殖、迁移、平滑肌肌动蛋白和胶原分泌,改善牙龈增生。     

miR-31-5p对牙髓干细胞HIF-1α/BNIP3信号通路及成骨相关因子表达的影响

目的: 探讨微小RNA-31-5p（miR-31-5p）对牙髓干细胞（DPSCs）低氧诱导因子1α（HIF-1α）/Bcl-2/腺病毒E1B 19-kDa相互作用蛋白3（BNIP3）信号通路及成骨相关因子表达的影响。方法: 体外培养人DPSCs,分为对照组（不转染）、mimic NC组（转染negative control-miR-31-5p）、miR-31-5p mimic组（转染hsa-miR-31-5p mimic）、siRNA NC组（转染nonsense siRNA）和miR-31-5p siRNA组（转染miR-31-5p siRNA）。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各组DPSCs细胞中miR-31-5p、HIF-1α、BNIP3、碱性磷酸酶（ALP）、Runt相关转录子2（Runx2）mRNA的表达情况,MTT法检测各组DPSCs细胞增殖情况,ALP活性测定试剂盒检测各组DPSCs细胞ALP活性,蛋白印迹（WB）法检测各组DPSCs细胞中HIF-1α、BNIP3、Runx2蛋白的表达情况。采用SPSS 24.0软件包对数据进行统计学分析。结果: 与对照组、mimic NC组相比,miR-31-5p mimic组DPSCs细胞A值、ALP mRNA表达水平及活性、Runx2 mRNA及蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,ALP染色明显减弱,miR-31-5p mRNA、HIF-1α、BNIP3 mRNA及HIF-1α、BNIP3、Beclin1蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。与对照组、siRNA NC组相比,miR-31-5p siRNA组DPSCs细胞A值、ALP mRNA表达水平及活性、Runx2 mRNA及蛋白水平显著升高（P<0.05）,ALP染色明显增强,miR-31-5p mRNA、HIF-1α、BNIP3 mRNA及HIF-1α、BNIP3、Beclin1蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。结论: miR-31-5p可以激活HIF-1α/BNIP3信号通路,抑制DPSCs细胞的成骨相关因子表达。     

炎症微环境下芦丁对牙周膜干细胞成骨分化能力的影响

目的 研究芦丁（rutin）对炎症微环境下牙周膜干细胞成骨分化能力的影响。方法 采用有限稀释法分离纯化获得牙周膜干细胞,采用流式细胞术鉴定牙周膜干细胞。以脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）刺激牙周膜干细胞,建立体外炎症模型。实验分为4组,第1组使用α-MEM培养基培养牙周膜干细胞,第2组使用含有脂多糖的α-MEM培养基培养牙周膜干细胞,第3组在含有脂多糖的α-MEM培养基加入芦丁培养牙周膜干细胞,第4组使用含有芦丁的α-MEM培养基培养牙周膜干细胞。通过碱性磷酸酶染色、碱性磷酸酶活性测试、茜素红染色、RT-PCR以及蛋白免疫印迹等方法检测成骨分化能力的改变。采用SPSS 17.0软件包对数据进行统计分析。结果 CCK-8和碱性磷酸酶活性测试结果显示,10 μmol/L芦丁对炎症状态下牙周干细胞增殖和成骨分化作用最明显。碱性磷酸酶染色和茜素红染色结果显示,10 μmol/L芦丁可以改善炎症微环境下牙周膜干细胞的成骨分化能力。RT-PCR、蛋白免疫印迹结果显示,芦丁可以增强炎症状态下COL1、ALP、RUNX2等成骨基因和成骨蛋白的表达。结论 芦丁可以增强炎症微环境下牙周膜干细胞的成骨分化能力。     

低强度牵张应力对异丙肾上腺素诱导下牙周膜成纤维细胞炎症反应的影响

目的: 探讨低强度牵张力对异丙肾上腺素（isoproterenol,ISO）诱导下人牙周膜成纤维细胞炎症反应的影响及其分子机制。方法: 体外培养人牙周膜成纤维细胞（periodontal ligaments cells,PDLCs）,给予一定浓度(0.01、0.1、1 μmol/L)ISO刺激24 h,设置空白对照组,同时施加不同强度（5%、10%、15%形变量）的牵张力,利用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测细胞内IL-1β、IL-6 mRNA的表达。设置空白対照组、ISO刺激组（0.1μmol/L）、低强度牵张力组（5%形变量）和ISO+低强度牵张力组,利用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测内质网应激相关p-PERK、PERK、p-eIF2α、eIF2α、ATF4蛋白表达量的变化。应用细胞转染技术敲低PDLCs中PERK基因的表达,RT-qPCR检测低表达PERK的牙周膜成纤维细胞在ISO及5%形变量牵张力作用下IL-1β及IL-6 mRNA的表达。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果: ISO诱导可显著上调牙周膜成纤维细胞中IL-1β及IL-6 mRNA的表达（P<0.05）;与对照组相比,5%形变量牵张力抑制ISO诱导下PDLCs中IL-1β和IL-6 mRNA的表达,差异有统计学意义（P<0.05）;Western印迹结果显示,5%形变量牵张力可抑制ISO诱导引起的PERK、eIF2α磷酸化及ATF4的表达（P<0.05）。与阴性对照组相比,ISO诱导下PERK沉默的PDLCs中IL-1β及IL-6 mRNA表达显著降低（P<0.05）。结论: 5%形变量牵张力可能通过内质网应激PERK通路抑制ISO诱导下牙周膜成纤维细胞的炎症反应。     

TNF-α对人脱落乳牙牙髓干细胞促破骨细胞形成能力的影响

目的: 探讨肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor -α,TNF-α）对人脱落乳牙牙髓干细胞（stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED）促破骨细胞形成能力的影响。方法: 通过酶消化法体外分离、培养处于生理性根吸收时期的自然脱落乳牙牙髓干细胞;建立SHED与破骨前体细胞外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）的间接共培养模型,在破骨诱导培养液中加入0、5、10、50、100 ng/mL不同浓度的TNF-α,通过实时定量RT-PCR和Western 免疫印迹检测破骨相关基因及核转录因子κB（nuclear factor-κB,NF-κB）信号通路相关基因的表达。采用SPSS 19.0软件包对数据进行统计学分析。结果: 在10 ng/mL的TNF-α刺激下,PBMCs中破骨相关蛋白CTSK和 TRAP 的表达水平均显著增高。Western免疫印迹和实时定量RT-PCR检测结果显示,SHED胞质内 p-IκBα 和胞核内 p65 蛋白、基因的表达水平在10 ng/mL的TNF-α刺激下显著高于无TNF-α刺激组。结论: 炎症细胞因子TNF-α通过NF-κB信号通路对SHED促破骨细胞形成能力具有调控作用。     

人牙髓干细胞条件培养基通过AMPK/PGC-1α途径改善氯化钴诱导的颏舌肌成肌细胞低氧损伤

目的： 研究氯化钴 (CoCl₂) 模拟的低氧对颏舌肌成肌细胞活性和氧化应激的影响,探讨人牙髓干细胞 （human dental pulp stem cells,hDPSCs）条件培养基 (conditioned medium,CM)保护作用的机制与AMPK/PGC-1α通路的关系。方法： 分离、培养及鉴定hDPSCs,通过超滤浓缩法提取条件培养基;分离、培养小鼠颏舌肌成肌细胞,分为对照组、CM组、CoCl₂组、CoCl₂+CM组。采用CCK-8法检测颏舌肌成肌细胞的活性,分别使用DCFH-DA和MitoSOX Red评估细胞内和线粒体活性氧 (reactive oxygen species,ROS) 水平,实时定量PCR分析NRF-1、NRF-2线粒体相关基因的表达,Western 印迹法检测PGC-1α、p-AMPK、总AMPK蛋白表达。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果： 颏舌肌成肌细胞经过200 μmol/L CoCl₂处理24 h后增殖显著下降（P<0.05）,细胞内和线粒体内ROS含量显著上升（P<0.05）;与CoCl₂组相比,加入hDPSCs-CM后,细胞活性显著增加（P<0.05）,胞内和线粒体内ROS含量显著降低 (P<0.05);hDPSCs-CM显著上调颏舌肌成肌细胞中pAMPK和PGC-1α蛋白的表达水平以及PGC-1α下游的线粒体效应物NRF-1、NRF-2的mRNA表达水平 (P<0.05)。结论： 人牙髓干细胞条件培养基能减轻CoCl₂诱导的颏舌肌成肌细胞低氧损伤,其机制可能与AMPK/PGC-1α通路的调节有关。     

牡荆素对脂多糖诱导牙髓干细胞表达炎症因子的影响

目的：探讨牡荆素（vitexin,VTX）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的人牙髓干细胞（human dental stem pulp cells,hDPSCs）表达炎症因子的影响,并初步探讨其相关作用机制。方法：分离、培养hDPSCs,以CCK-8法检测VTX对hDPSCs增殖的影响,检测VTX毒性浓度范围。铺种hDPSCs,分为4组,空白组以不含LPS和VTX的无血清DMEM,LPS组仅加入含LPS终浓度为2 μg/mL的无血清DMEM培养,VTX处理组1(V1组)加入2 μg/mL LPS+25 μmol/L VTX,VTX处理组2(V2组)加入2 μg/mL LPS + 50 μmol/L VTX。培养48 h,实时荧光定量PCR检测各组细胞中IL-1β、IL-6及IL-8基因转录,蛋白质免疫印迹检测hDPSCs内MPAK信号通路及COX-2等蛋白的变化。采用SPSS 16.0软件包对数据进行统计学分析。结果：VTX在200 μmol/L范围内时细胞活力不受影响(P>0.05);VTX抑制LPS刺激hDPSCs转录IL-1β、IL-6及IL-8,抑制效果与VTX的浓度呈正相关;VTX可显著抑制LPS激活p38及ERK信号通路。结论：VTX可能通过抑制p38及ERK信号通路的激活,降低LPS诱导的hDPSCs转录IL-1β、IL-6及IL-8。     

外源性ATP对牙龈成纤维细胞NLRP3炎症小体活化的影响

目的: 观察外源性三磷酸腺苷（ATP）对牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)和热灭活牙龈卟啉单胞菌(HP.gingivalis)感染的人牙龈成纤维细胞NLRP3 炎症小体（inflammasome）的活化以及下游因子IL-1β分泌的影响。方法: 组织块法体外培养人牙龈成纤维细胞（hGFs）获取原代细胞,经5 mmol/L ATP预处理,用100 MOI P.gingivalis、100 MOI HP.gingivalis体外刺激hGFs,实时定量PCR检测NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β的基因表达;Western免疫印迹技术检测细胞内NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白的表达;ELISA法检测白细胞介素1β（IL-1β）的分泌。采用Graphpad prism 6软件包对数据进行t检验或单因素方差分析。结果: 与对照组相比,P.gingivalis 下调NLRP3 、ASC mRNA,上调IL-1β基因表达,下调NLRP3 、IL-1β胞内蛋白水平。HP.gingivalis 诱导NLRP3 、IL-1β、ASC基因和胞内蛋白的表达,P.gingivalis或者 HP.gingivalis单独刺激对Caspase-1 mRNA水平及IL-1β分泌均无影响。ATP/P.gingivalis或ATP/HP.gingivalis 共刺激均明显上调NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β基因及胞内蛋白水平,增加上清液中IL-1β的分泌水平。结论: 外源性ATP可调控牙周主要致病菌P.gingivalis感染的人牙龈成纤维细胞 NLRP3炎症小体的激活,介导炎症因子IL-1β的成熟与分泌。     

巨噬细胞在β-TCP支架修复牙槽突裂中成骨作用的探讨

目的： 评价使用3D打印β磷酸三钙（β-TCP）支架复合骨髓干细胞（bone marrow stem cell, BMSC）修复牙槽突裂的成骨效果以及巨噬细胞在成骨中的作用。方法： 将16只大鼠随机分为2组,将第1组8只大鼠双侧上颌第一磨牙拔除,形成4 mm×4 mm×3 mm的箱状骨缺损。8周后,一侧植入3D打印β-TCP复合干细胞支架,另一侧植入同样载有干细胞的空白支架。将第2组8只大鼠以相同方式造裂,两侧同时放置3D打印β-TCP复合干细胞支架,一侧注射氯膦酸盐脂质体清除巨噬细胞,另一侧注射对照脂质体。术后8周进行显微CT扫描和组织学分析,检测成骨效果。采用 SAS 8.0 软件包对数据进行统计学处理。结果： β-TCP支架移植侧BV/TV为(41.38±3.33)%,空白支架放置侧为(30.42±2.97)%,两者之间差异显著（P<0.05）。去除巨噬细胞后,BV/TV下降至(18.71±2.19)%,对照脂质体注射侧为(39.81±2.68)%,β-TCP支架放置侧和对照脂质体注射侧结果无统计学差异。结论： 3D打印β-TCP支架复合骨髓干细胞有较好的成骨效果,巨噬细胞在β-TCP介导成骨过程中起到重要作用,去除巨噬细胞阻碍新骨形成。     

SDF-1α/CXCR4信号轴介导柚皮素对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的: 探讨柚皮素对骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells,BMSCs）成骨分化的影响,SDF-1α/CXCR4信号轴是否参与介导柚皮素促进BMSCs成骨分化。方法: 分离、培养及鉴定大鼠BMSCs,CCK8法检测不同浓度柚皮素对BMSCs增殖的影响,检测碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性;RT-qPCR法检测各组ALP、骨钙素（osteocalcin,OCN）、趋化因子受体4（CXCL receptor 4,CXCR4）和基质细胞衍生因子1α（stromal cell derived factor-1,SDF-1α）的表达,ELISA法检测各组CXCR4和SDF-1α蛋白的表达。采用SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果: 细胞鉴定结果表明,培养细胞为高纯度的BMSCs。第1、3天,柚皮素对BMSCs增殖无显著影响（P>0.05）;第5天时,50 μg/mL柚皮素可促进BMSCs增殖;第7天时,不同浓度柚皮素均促进BMSCs增殖（P<0.05）;同时,ALP活性随时间推移逐渐增强。RT-qPCR结果表明,柚皮素组和成骨诱导液组中相关基因表达均较培养基组明显增加,而AMD3100组中各基因表达均受到显著抑制（P<0.05）。ELISA检测结果显示,各组CXCR4和SDF-1α蛋白表达随诱导时间增加均逐渐上调,且两者均在100 μg/mL柚皮素组表达最高。结论: 柚皮素可促进BMSCs增殖和成骨向分化,SDF-1α/CXCR4信号轴参与柚皮素对BMSCs的成骨分化,主要在BMSCs成骨分化早期阶段。     

Adipose Tissue–derived Microvascular Fragments as Vascularization Units for Dental Pulp Regeneration

IntroductionThe transplantation of dental pulp stem cells (DPSCs) has emerged as a novel strategy for the regeneration of lost dental pulp after pulpitis and trauma. Dental pulp regeneration of the young permanent tooth with a wide tooth apical foramen has achieved significant progress in the clinical trials. However, because of the narrow apical foramen, dental pulp regeneration in adult teeth using stem cells remains difficult in the clinic. Finding out how to promote vascular reconstitution is essential for the survival of stem cells and the regeneration of dental pulp after transplantation into the adult tooth.MethodsAdipose tissue–derived microvascular fragments (ad-MVFs) were isolated from human adipose tissues. The apoptosis and senescence of DPSCs cultured in conditioned media were evaluated to explore the effects of ad-MVFs on DPSCs. DPSCs combined with ad-MVFs were inserted into the human tooth root segments and implanted subcutaneously into immunodeficient mice. Regenerated pulplike tissues were analyzed by hematoxylin and eosin and immunohistochemistry. The vessels in regenerated tissues were analyzed by Micro-CT and immunofluorescence.ResultsThe isolated ad-MVFs contained endothelial cells and pericytes. ad-MVFs effectively prevented the apoptosis and senescence of the transplanted DPSCs both in vivo and in vitro. Combined with DPSCs, ad-MVFs obviously facilitated the formation of vascular networks in the transplants. DPSCs combined with ad-MVFs formed dental pulp–like tissues with abundant cells and matrix after 4 weeks of implantation. The supplementation of ad-MVFs led to more odontoblastlike cells and increased the formation of mineralized substance around the root canal.ConclusionsCotransplantation with ad-MVFs promotes the angiogenesis and revascularization of transplanted DPSC aggregates, leading to robust regeneration of dental pulp.     

牙髓干细胞分化过程中L型钙离子通道羧基末端的表达

目的:探讨牙髓干细胞(DPSCs)分化过程中L型钙离子通道羧基末端的表达。方法:利用酶消化法体外分离、培养大鼠牙髓干细胞;吉姆萨染色法检测大鼠牙髓干细胞的克隆形成能力;神经诱导体系下诱导牙髓干细胞向神经样细胞分化,免疫荧光染色检测细胞分化后胶质纤维酸蛋白(glial fibrillary acidic pro-tein,GFAP)的表达和细胞分化前后L型钙离子通道Cav 1.2及羧基末端的表达。结果:牙髓干细胞的克隆形成能力为每1 000个细胞形成2～17个克隆;免疫荧光染色检测诱导后细胞GFAP表达阳性;免疫荧光染色检测显示:牙髓干细胞分化前L型钙离子通道Cav 1.2羧基末端表达于细胞膜上,细胞分化后羧基末端同时表达于细胞膜上和细胞核中。结论:L型钙离子通道Cav 1.2羧基末端在牙髓干细胞分化过程中发生核转位,羧基末端可能在牙髓干细胞的分化过程中发挥着一定的作用。     

Cytotoxic effect of silorane and methacrylate based composites on the human dental pulp stem cells and fibroblasts

Objectives: The aim of this study was to compare the cytotoxic effect of a methacrylate-based and a silorane-based composite on the human dental pulp stem cells (DPSCs) versus human dental pulp fibroblasts (DPFs). Study Design: Samples of the Filtek Z250 and P90 were polymerized and immersed in the culture medium to obtain extracts after incubation for one, seven and 14 days. Magnetic cell sorting based on the CD146 expression was performed to purify DPSCs and DPFs. After incubation of both cells with the extracts, cytotoxicity was determined using the MTT test. Results: For the extracts of first and seventh day, both composites showed significantly lower cytotoxicity on DPSCs than DPFs (p=0.003). In addition, there was a significant difference in the time-group interaction of both materials indicating different cytotoxic behaviours (p=0.014). In contrast to Z250, exposure to the 14th day extract of P90 resulted in higher cell viability compared to that of day seven. Conclusions: DPSCs are less susceptible to the cytotoxic effect of the composites than DPFs. Compared to Z250, the cytotoxic effect of silorane-based composite decreases as the time passes on. This difference should be considered, particularly in deep cavities, in order to preserve the regenerative capacity of the pulp. Key words:Composite resins, Dental pulp, Mesenchymal Stromal Cells, Silorane, Toxicology.     

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??Objective    To investigate effects of dental papillae cells on the proliferation of dental pulp stem cells??DPSCs?? and its mechanism. Methods    DPSCs and dental papillae cells were cultured??the co-cultured systems of DPSCs and dental papillae cells were established. The intracellular mineralization nodes were observed. The cell cycle of DPSCs was detected by flow cytometry. Finally??when the inhibitor of Notch??PHI??was administrated??the expression of Notch1??Jagged1 mRNA and protein was examined. Results    The obvious mineralization nodules were observed in DPSCs after 14 d of co-culture. Flow cytometry results showed that stratified co-culture promoted the proliferation of DPSCs. RT-PCR and western blot results showed that the expression of Notch1??Jagged1 mRNA and protein in the co-culture group was significantly increased compared with control group. Conclusion    Stratified co-culture of DPSCs and dental papillae cells might promote the mineralization and proliferation by activating Notch signal pathway.     

小鼠牙髓干细胞同种异体移植后体内免疫反应初探

目的:初步探究小鼠牙髓干细胞同种异体移植后的全身免疫反应。方法:牙髓干细胞分离获得自C57BL/6 小鼠牙髓组织,培养至第3 代,与纳米羟基磷灰石(n-HA)复合培养形成复合物,扫描电镜观察其生长黏附情况。40只4周龄的C57BL/6 小鼠随机分成两组。实验组将复合物移植入上背部皮下,对照组将纳米羟基磷灰石植入上背部皮下,术后均使用外科方法严密缝合创口。两组动物术后均观察4周、6周处死,分离脾脏,制成脾淋巴细胞悬液,流式细胞仪测定CD4⁺、CD8⁺的值。结果:牙髓干细胞在体外与纳米羟基磷灰石结合良好;免疫组化染色实验组4周、6周均可见牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)阳性表达;实验组与对照组相比,术后4周、6周CD4⁺/CD8⁺值均无明显差异。结论:牙髓干细胞同种异体移植后,尚不能够引起机体的免疫排斥反应,其在体内仍具有低免疫原性,有望成为组织工程同种异体种子细胞来源。     

人牙髓干细胞的体外培养和鉴定

目的　研究第三恒磨牙来源的人牙髓干细胞的表型和生物学性状。方法　从成人健康阻生牙中获取牙髓,酶消化法分离获得牙髓干细胞,计算细胞克隆形成率(CFU-F);免疫组化、RT-PCR法检测细胞的表面分子表达; 流式细胞仪测定细胞周期;体外分化诱导实验检测细胞的多向分化能力。结果　分离获得的牙髓干细胞在体外具有一定的克隆形成能力,诱导条件下部分牙髓干细胞可向脂肪、肌细胞和成牙本质细胞方向分化,符合干细胞的特征。结论　成功的从人第三恒磨牙牙髓中分离得到牙髓干细胞。     

碱性成纤维细胞生长因子对牙髓干细胞矿化能力影响的研究

目的:探讨在不同培养条件下,碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factorb,bFGF)对牙髓干细胞矿化能力的影响。方法:酶消化法获得原代培养的牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DP-SCs),有限稀释法进行克隆培养。取3代DPSCs,以不同的培养条件将其分为5个大组,用含bFGF(5 ng/mL)的培养液和矿化液为实验组,不含bFGF的培养液和矿化液为对照组,以不同培养条件培养DPSC后,用茜素红定量法对其矿化能力进行检测,分析不同培养条件对DPSC矿化能力的影响。结果:含bFGF的培养液预培养DPSCs1周后其矿化能力增强(P<0.05),2周后其矿化能力减弱(P<0.05);含bFGF的矿化液培养DPSCs其矿化能力减弱(P<0.05),bFGF对DPSCs的影响在细胞传代后依然存在。结论:在不同培养条件下,bFGF对牙髓干细胞矿化能力的影响不同,这种影响与预培养的时间相关,预培养1周其矿化能力增强,预培养2周其矿化能力减弱。同时,bFGF对DPSCs的影响在细胞传代后依然存在。     

成体干细胞在组织工程化牙本质牙髓复合体中的应用研究与展望

牙髓干细胞(dental pucp stem cells，DPSCs)是一种成体干细胞。有关成体十细胞的研究进展，尤其是骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells，BMSSCs)的研究，为牙髓干细胞的研究提供了可以借鉴的思路和方法。DPSCs也有相对特异的识别途径和特点，其中重要的特征之一是一定条件下能形成牙本质牙髓复合体。这将为其应用于组织工程中重建牙本质牙髓复合体，展示了巨大的优越性和可行性，也为其在牙髓生理、病理、牙髓病的生物治疗方面的研究提供了重要的应用价值。     

牙髓干细胞的研究

牙髓干细胞是存在于牙髓组织中的一种成体干细胞，具有高度增殖、自我更新的能力和多向分化的潜能。牙髓干细胞的研究对牙组织工程和牙齿的再生将产生重要的意义。本文就牙髓干细胞的研究现状作一综述，并对其应用前景以及目前存在的问题进行讨论。     

Dental stem cells: Progress and perspectives

Dental pulp stem cells (DPSCs) are thought to contribute to reparative dentin formation, and that they may correspond to heterogenous populations of precursor cells or represent distinct differentiation stages along the odontoblastic lineage. DPSCs share many similarities with mesenchymal stem cells of the bone marrow (BMSCs). It appears that the distribution of tissue stem cells is not random and, within the dental pulp, there are potentially several distinct niches of stem/progenitor cells. In addition to DPSCs, other dental stem cell populations have been isolated. As for DPSCs, further studies are still needed to evaluate their potential of differentiation and their regenerative activity. Up today, (1) the formal demonstration that pulpal resident stem cells are actually the reparative dentin-forming cells recruited in response to injury is still lacking; and (2) the origin, localization and precise identity of odontogenic stem cells remain largely unknown. Dental clonal cell lines may represent valuable tool to answer some fontamental questions concerning the dental stem cell biology. Altogether, the presence of dental cell populations displaying stem cell properties has opened new paths for considering regenerative therapies. This might be a prerequisite to design alternative strategies for capping and endodontic treatment, using stem cells.