术前诱导化疗对口腔鳞癌细胞凋亡和增殖的影响

细胞过度增殖是恶性肿瘤的重要特征之一,长期以来,抗癌药物的研究多集中在抑制肿瘤细胞增殖活性方面.近年发现,细胞凋亡(apoptosis, APO)与肿瘤的发生、发展、治疗及预后关系密切,APO在肿瘤化疗中的作用成为研究热点[1,2].本文比较24例口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)患者经VM(vincristine methotrexate)方案化疗前后APO和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的变化,以探讨VM方案的抗癌机理.     

放射对口腔鳞癌细胞DNA损伤和糖酵解的影响

目的:探究放射诱导下口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)DNA损伤特点,及其对细胞糖酵解的影响。方法:4Gy的X-ray照射OSCC细胞(HSC3和CAL27)后,Western Blot和细胞免疫荧光检测DNA损伤标志γH2AX蛋白表达;CCK8法检测细胞增殖能力;RT-PCR检测若干糖酵解相关酶m R NA水平。结果:放射诱导OSCC细胞γH 2AX蛋白表达在0.5h后迅速上调,24h-48h恢复至正常水平,60h后再次上调;OSCC细胞增殖能力受到时间依赖性的抑制(P<0.05);糖酵解相关酶GLUT1、GLUT3、HK2、PK-M2和LDH A基因水平上调(P<0.05)。结论:放射诱导OSCC细胞发生DNA损伤,并促进糖酵解。     

顺铂化疗对口腔颌面部鳞癌细胞基因表达谱的影响

目的 探讨口腔颌面部鳞癌对顺铂的应答规律，以阐明肿瘤耐药的作用机制，指导临床化疗。方法 收集(8例)4对临床标本，根据其是否接受过顺铂化疗，分为2组，采用Affymetrix HG—U95Av2寡核苷酸芯片对其基因表达谱进行聚类分析。结果 应用Genespring软件同时对标本和基因进行聚类，发现根据标本是否接受过顺铂化疗及化疗效果可正确聚类，而且利用基因聚类的结果，筛选出关系最密切的50条基因，其表达情况能够正确预测标本是否接受过顺铂化疗。结论 顺铂化疗可改变一组基因在口腔鳞癌的表达，可以通过该组基因的表达谱对标本进行正确聚类．而且这种改变可能与口腔鳞癌顺铂化疗效果相关。     

抑制蛋白激酶C对口腔鳞癌细胞迁移和侵袭的影响

目的:利用舌癌细胞系HN4,探讨蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)、P120-连环蛋白(P120-catenin,P120ctn)和E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)在口腔鳞癌中的相互关系及其在肿瘤细胞侵袭和转移中的作用机制.方法:采用质粒pGFP-V-RS-P120ctn shRNA转染HN4,使HN4中P120ctn的表达显著降低,再使用星孢菌素(staurosporine,STS)抑制PKC的表达,进行PKC、P120ctn和E-cad mRNA和蛋白水平的检测;通过Transwell细胞侵袭及细胞迁移试验等方法,检测PKC被抑制前、后肿瘤细胞迁移和侵袭能力的变化.采用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析.结果:当PKC被STS抑制时,HN4/shP120ctn细胞中P120ctn的表达显著升高,E-cad的表达也随之升高,肿瘤细胞的迁移和侵袭能力显著降低(P均＜0.05).结论:PKC可能参与了P120ctn和E-cad表达的调节,与细胞黏附的调控有关,进而在HN4细胞的迁移和侵袭过程中发挥作用.     

口腔鳞癌细胞系KB和Tca8113中的SP细胞含量分析

目的探讨两种口腔鳞状细胞癌细胞系KB和Tca8113中的侧群细胞的含量,寻找口腔鳞癌肿瘤干细胞存在的依据。方法采用有限稀释法对口腔鳞癌细胞系KB和Tca8113细胞株经Hoechst 33342/碘化丙啶（propidium iodide,PI）双染色后,采用流式细胞仪测定,分析两细胞株中侧群细胞的含量。结果口腔鳞癌细胞系KB和Tca8113中具有不同的表型,即侧群细胞和非侧群细胞。在体外培养中,KB和Tca8113细胞株中侧群细胞含量分别为0.6%和2.3%。经维拉帕米阻断后,侧群细胞含量均明显降低,分别降为0和0.1%。结论 KB和Tca8113细胞株中均存在侧群细胞,但含量较少。     

趋化因子SDF-1及其受体CXCR4对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨SDF-1/CXCR4生物轴对口腔鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响.方法 采用MTT法检测细胞的增殖能力.通过趋化实验观察细胞的侵袭迁移能力.结果 口腔鳞状细胞癌细胞在SDF-1作用下增殖反应明显增强,CXCR4抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖(P＜0.05).趋化实验显示SDF-1可诱导口腔鳞状细胞癌细胞发生明显迁移,经50μg/ml CXCR4抗体孵育后,SDF-1介导Tca8113细胞的这种侵袭能力明显减弱(P＜0.05).结论 CXCR 4/SDF-1受体配体系统可介导口腔鳞状细胞癌细胞的增殖和迁移,在癌细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用.干扰SDF-1/CXCR4的相互作用有可能成为治疗口腔鳞状细胞癌的新方法.     

莱菔硫烷对RhoC敲低的口腔鳞癌细胞的调控作用

目的 观察莱菔硫烷（sulforaphane,SFN）对RhoC稳定敲低的口腔鳞癌细胞系CAL27 RhoC/shRNA的影响。方法 选取口腔鳞癌细胞系CAL27 RhoC/shRNA进行培养,用不同浓度的SFN处理对数期CAL27RhoC/shRNA细胞,通过RT-PCR和western blot检测SFN对细胞中Nrf2 RNA和蛋白水平的影响。分别通过MTT实验、克隆形成实验和侵袭实验检测SFN对口腔鳞癌细胞增殖能力、克隆形成能力和侵袭能力的影响;PHOD染色检测SFN对口腔鳞癌细胞F-actin聚合能力的影响。结果 应用SFN能有效抑制口腔鳞癌细胞CAL27 RhoC/shRNA的增殖能力、克隆形成能力、侵袭能力和F-actin蛋白聚合能力。结论 SFN可减弱RhoC敲低的口腔鳞癌细胞的恶性能力。     

全反式维甲酸和三氧化二砷对人口腔鳞癌细胞系KB细胞周期的影响

目的研究全反式维甲酸（all-trans retinoi cacid,ATRA）和三氧化二砷（arsenic trioxide,As2O3）诱导分化对人口腔未分化鳞癌细胞系KB细胞周期的影响及意义。方法采用流式细胞技术观察人口腔未分化鳞癌细胞系KB细胞经不同浓度ATRA和As2O3诱导分化后96h时的细胞周期的变化。结果ATRA作用于KB细胞后,加药组与对照组相比,被阻断在G1期的细胞比率轻度升高,S期比率下降,抑制率随浓度增高无明显升高的趋势。As2O3三个不同浓度作用KB细胞96h时,没有明显改变各细胞周期所占的比例。抑制率随作用浓度的增加而升高。结论ATRA和低浓度As2O3对人口腔未分化鳞癌细胞系KB细胞具有诱导分化作用,ATRA诱导KB细胞分化可能与G1、G0期阻滞有关。     

转化生长因子β1对口腔鳞癌细胞系尿激酶纤溶酶原激活剂及其抑制剂活性的影响

目的：探讨TGF－β1作用于口腔鳞癌侵袭转移的关系。方法：采用发色底物反应法测量不同浓度TGF－β1作用于口腔磷癌TSCCa细胞系及颈淋巴转移癌GNM细胞系u-PA和PAI－1的活性。结果：不同浓度的TGF－β1作用于TSCCa12h后,u－PA和PAI－1活性与对照组相比,无明显差异（P＞0．05）;而不同浓度的TGF－β1作用于GNM细胞12h后,u-PA和PAI－1活性与对照组相比,有显著性差异（P＜0．05－0．01）,u－PA和PAI－1活性与TGF－β1有剂量依赖关系。结论：TGF－β1可能与口腔鳞癌侵袭转移有关。     

AMD3100对口腔鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响

目的探讨CXCR4拮抗剂AMD3100对口腔鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响。方法采用MTT法检测细胞的增殖能力。通过趋化实验观察CXCR4特异性拮抗剂AMD3100在口腔鳞状细胞癌细胞的侵袭迁移中的作用。结果 1)口腔鳞状细胞癌细胞在SDF-1作用下增殖反应明显增强,AMD3100可有效抑制肿瘤细胞的增殖。2)趋化实验显示SDF-1可诱导口腔鳞状细胞癌细胞发生明显迁移,AMD3100能阻断CXCR4受体,从而抑制这种趋化和侵袭转移作用。结论 AMD3100能阻断CXCR 4/SDF-1的相互作用,其可能成为治疗口腔鳞状细胞癌的新方法。     

Garcinol对人口腔鳞癌细胞的抑制作用研究

目的 观察Garcinol对人口腔鳞癌细胞系SCC15增殖、细胞周期、凋亡和克隆形成能力的作用.方法 培养人口腔鳞癌细胞系SCC15,采用不同浓度的Garcinol处理细胞后,通过MTT法检测对细胞增殖的影响,PI单染色法流式细胞仪检测对细胞周期的影响,Annexin V-FITC/PI双染色法流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响,克隆形成实验检测对细胞克隆形成能力的影响.结果 Garcinol能显著抑制SCC15细胞增殖(P＜0.01),并呈浓度和时间依赖性.Garcinol能抑制SCC15细胞周期由G1期向S期转变(P＜0.01),并呈浓度依赖性.Garcinol还能够诱导SCC15细胞凋亡(P＜0.01),并呈浓度依赖性.同时,Garcinol能抑制SCC15细胞的克隆形成能力(P＜0.01),并呈浓度依赖性.结论 Garcinol作为一种化学预防制剂,对人口腔鳞癌细胞SCC15具有显著的抑制作用,其机制主要包括抑制SCC15细胞增殖、细胞周期和克隆形成能力,并诱导细胞凋亡.     

丹参素在体外条件下对口腔鳞癌细胞 CAL-27抑制作用的研究

[摘要] 目的 探讨丹参素在体外条件下对口腔鳞癌细胞CAL-27的增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法 丹参素处理CAL-27细胞,MTT法检测丹参素对CAL-27细胞活性的影响。划痕实验检测丹参素对CAL-27细胞的迁移能力的作用。Transwell实验检测其对细胞的侵袭能力的作用。结果 MTT显示,在丹参素浓度为40 μg/mL、60 μg/mL和80 μg/mL时,丹参素对CAL-27细胞增殖的抑制可呈剂量和时间依赖性。划痕实验中,24h组与对照组相比,具有显著差异性（P<0.01）。Transwell侵袭实验结果表明,丹参素可降低CAL-27细胞的侵袭能力。结论 在体外条件下,丹参素在一定浓度范围内可抑制CAL-27细胞的增殖,降低CAL-27细胞的迁移及侵袭能力。     

KLF4对口腔鳞癌细胞增殖的抑制作用

目的 探讨KLF4对人口腔鳞癌细胞CAL27的增殖抑制作用.方法 构建KLF4慢病毒表达载体,并转染人口腔鳞癌细胞系CAL27,转染不含KLF4开放读码框的慢病毒载体LV105作为对照.采用RT-PCR、免疫细胞化学法对KLF4表达进行鉴定.MTT实验、流式细胞术检测KLF4对口腔鳞癌细胞系CAL27的增殖抑制作用.结果 RT-PCR、免疫细胞化学实验均表明实验组细胞KLF4的表达明显高于对照组(P＜0.01).MTT实验结果表明与对照组CAL27/LV105组相比,CAL27/KLF4能够抑制细胞的增殖能力(P＜0.01).CAL27/KLF4主要通过使细胞周期中的G2/M期阻滞来抑制CAL27细胞的增殖(P＜0.01).结论 KLF4转染能够抑制口腔鳞癌细胞系CAL27的增殖能力,可能在口腔鳞状细胞癌中作为抑癌基因发挥作用.     

山竹醇对人口腔鳞癌细胞糖酵解代谢通路的影响

目的 观察山竹醇(Garcinol)对人口腔鳞癌细胞系CAL27增殖和克隆形成能力的影响,以及对CAL27细胞糖酵解代谢的影响. 方法 培养人口腔鳞癌细胞系CAL27,不同浓度的Garcinol处理CAL27细胞, MTT法检测其对细胞增殖能力的影响.克隆形成实验检测对细胞克隆形成能力的影响.RT-PCR检测Garcinol对细胞内糖酵解通路关键酶表达的影响,以及对糖酵解通路的重要基因表达的影响.并检测细胞上清液中葡萄糖、乳酸含量的变化来评估Garcinol对CAL27细胞内糖酵解水平的影响.通过酶活性实验检测细胞内糖酵解关键酶(HK、PK、LDH)的酶活性变化. 结果 Garcinol能显著抑制CAL27细胞的增殖,呈浓度和时间依赖性(P<0.01);能明显抑制CAL27细胞的克隆形成能力(P<0.01).同时,Garcinol能促进糖酵解关键酶己糖激酶(HK),丙酮酸激酶(PK),乳酸脱氢酶(LDH)的基因表达,增强糖酵解关键酶(HK、PK、LDH)的酶活性(P<0.05).Garcinol也能增加AKT和mTOR的基因表达水平(P<0.05).Garcinol还能促进CAL27细胞的葡萄糖吸收和乳酸分泌.结论 Garcinol能够抑制人口腔鳞癌细胞系CAL27的增殖和克隆形成能力,同时也增加了细胞内的糖酵解水平.     

Hypercalcemia in patients of oral squamous cell carcinoma

Purpose  

This study was performed to measure the total and ionic serum calcium levels and incidence of hypercalcemia in patients with Oral Squamous Cell Carcinoma (OSCC) and its clinical significance and relevance.     

鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)在口腔鳞癌患者血清中表达的临床意义

用化学发光法检测36例口腔鳞癌、11例口腔颌面部其他恶性肿瘤、45例口腔颌面部良性肿瘤患者以及70例正常人血清中鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)水平。鳞癌组SCC-Ag水平明显高于良性肿瘤组(P<0.01)、正常组(P<0.01)以及其他恶性肿瘤组(P<0.05)。SCC-Ag可作为口腔鳞癌患者辅助诊断指标。     

DNA histochemical analysis in oral squamous cell carcinoma

BACKGROUND: Recent years have witnessed an increasing emphasis on the role of nuclear DNA and its application in experimental pathological diagnosis to predict prognosis and management of certain neoplasm. AIMS: to establish objective criteria for the degree of differentiation and histochemical quantitative of nuclear DNA of oral squamous cell carcinoma (OSCC) using microspectrophotometric analysis. MATERIAL AND METHODS: The study was conducted on histologic materials from patient with OSCC. Two histological grading systems were used; Broder's and invasive front grading system were recorded. Microspectrophotometry was applied on Feulgen-stained sections to determine the quality of tumour nuclear DNA content in two different histological grading systems of OSCC. RESULTS: Nuclear DNA content increased significantly with decreasing tissue differentiation as well with increasing tumour size. CONCLUSION: The grading system and DNA content provides more objective and accurate criteria which relate the morphologic finding to biologic activity and growth patterns of oral cancer as compared to histologic differentiation alone.     

外周血单个核细胞对口腔鳞癌细胞生长的影响

目的:研究活化人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)在体外影响口腔鳞癌细胞生长及凋亡的机制.方法:用酶联免疫吸附试验(ELISA)、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法以及流式细胞仪(FCM)检测植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)刺激前、后人PBMC分泌细胞因子变化及其对口腔鳞癌细胞生长与凋亡的影响.采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析.结果:以PHA刺激人PBMC为实验组分泌的细胞因子显著高于对照组(P＜0.01);实验组能够诱导颗粒酶B及穿孔素mRNA的表达;实验组抑制口腔肿瘤细胞生长及诱导口腔鳞癌细胞凋亡也显著增加(P＜0.05).结论:PHA激活的人PBMC在体外能够显著抑制口腔鳞癌细胞生长及诱导口腔鳞癌细胞凋亡.     

口腔鳞癌端粒酶活性的检测及临床意义

目的　探讨端粒酶活性和口腔鳞癌发生、发展的关系。方法　采用TRAP -PCR -ELISA法对 32例口腔鳞癌标本、1 5例癌旁组织和 1 0例正常口腔粘膜组织进行端粒酶活性检测和分析。结果　口腔鳞癌组织中端粒酶活性值显著高于癌旁组织和正常组织 (P <0 .0 5)。端粒酶在口腔鳞癌标本中阳性检出率 71 .87% ,显著高于癌旁组织和正常组织 (P <0 .0 1 ) ,且和鳞癌的病理分级及有无颈淋巴结转移密切相关。结论　端粒酶活性和口腔鳞癌的发生、发展有密切关系     

P-糖蛋白在口腔癌中的表达研究

目的　探讨口腔癌细胞P -糖蛋白表达的程度及其与化疗疗效的关系。方法　以JSB - 1为Ⅰ抗采用免疫组化方法对 2 8例口腔癌患者的化疗前后共 56例标本进行研究。结果　在 2 8例化疗前标本中 ,1 3例表达P -gp阳性 ,占46 .4% ,而化疗后有 1 7例表达阳性 ,占 60 .7% ,无统计意义。根据化疗效果分组 ,有效组 1 1例中只有 4例P -gp表达阳性 ,而无效组 1 7例中则有 1 0例表达P -gp阳性 ,前者占36 .4% ,后者占 58.8% ,二者之间无显著性差异。结论　P - gp在口腔癌中的表达较高 ,且化疗后表达较化疗前高 ,提示了部分口腔癌患者化疗效果不佳可能与之有关