结肠癌组织microRNA-135a表达增高的临床意义与预后分析

目的 miRNA-135a作为miRNA-135家族的重要组成成员,其与多种肿瘤发生发展密切相关.但关于miRNA-135a的表达异常对结肠癌的临床意义及预后判断的研究较少.本研究旨在明确结肠癌组织miRNA-135a相对表达量与结肠癌患者临床病理因素的相关性及对患者生存预后的影响.方法 收集2009-01-01-2009-12-31在哈尔滨医科大学附属第四医院行手术切除的结肠癌组织样本及距离肿瘤边缘5cm处癌旁黏膜组织样本共47对.在47对结肠癌样本中应用逆转录实时定量聚合酶链反应,检测miRNA-135a相对表达量,进一步分析其表达变化与结肠癌临床病理特征的相关性.并运用Kaplan-Meier生存曲线进行预后分析.结果 miRNA-135a在结肠癌组织中表达较癌旁组织显著升高,P=0.03.miRNA-135a表达量变化与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、肿瘤分化程度、浸润深度及远处转移均无关,P值均＞0.05.但在淋巴结转移组miRNA-135a表达明显升高,均值为0.49±0.25,而无淋巴结转移组为0.35±0.17,两组比较差异有统计学意义,P=0.03.在临床Ⅲ/Ⅳ期的患者中miRNA-135a表达较Ⅰ/Ⅱ期的患者显著升高,两组比较差异有统计学意义,P=0.04.Logistic二项回归分析显示,miRNA-135a高表达组增加了结肠癌患者淋巴结转移的风险,P=0.03.miRNA-135a高表达同时可增加结肠癌疾病进展(TNM分期)的风险,P=0.04.生存分析表明,21例miRNA-135a高表达组的中位生存期为(41±9.73)个月,26例miRNA-135a低表达组的中位生存期为(58±6.16)个月,两组比较差异有统计学意义,P=0.021.结论 miRNA-135a表达量增高与结肠癌疾病进展及不良预后正相关.miRNA-135a有望成为判断结肠癌预后的潜在靶点.     

nm23基因在结肠癌中表达及其临床意义

目的:阐明nm23基因产物在结肠癌中表达意义及其与淋巴结转移、预后的关系。方法:用免疫组化方法研究53例结肠癌中nm23基因产物表达。结果:53例结肠癌病例中nm23基因表达阴性29例占54.7%,阳性24例占36.3%。29例阴性表达病例中,发生淋巴结转移23例占79.3%,5年生存率为31.0%(9/29)。低表达的37例均属于C2、D期。低分化腺癌和黏液腺癌占36例。提示nm23基因的低表达与结肠癌的组织学分型、局部淋巴结转移、临床分期及预后有关系。而与肿瘤的大小、部位无关。结论:检测结肠癌组织中nm23基因产物表达可预测肿瘤的转移、复发及预后。     

错配修复蛋白在左、右半结肠癌组织中的表达差异及其临床意义

目的:探讨错配修复（mismatch repair,MMR）蛋白在左半结肠癌（left colon cancer,LCC）和右半结肠癌（right colon cancer,RCC）组织中的表达及其临床意义。方法:收集2014年01月至2017年12月间在我院接受手术治疗的368例结肠癌患者的临床病理资料，根据肿瘤原发部位分为LCC组与RCC组，分析MMR蛋白在LCC、RCC组织中的表达是否存在显著差异，同时探讨LCC、RCC的临床病理特征，并分析MMR蛋白对LCC、RCC预后的指导意义。结果:368例结肠癌组织中dMMR为25.8%。单因素分析结果显示，在不同肿瘤部位MMR蛋白的表达有显著性差异（P＜0.05），RCC组中dMMR为17.4%，明显高于LCC组的8.4%；另外LCC、RCC在肿瘤直径、分化程度、组织学类型上存在统计学差异（均P＜0.05）。进一步Logistic多因素分析发现:肿瘤直径≥5 cm（OR=1.762,95%CI:1.144～2.713，P=0.010）、dMMR（OR=2.672,95%CI:1.617～4.417，P=0.000）均为RCC的独立相关因素。Kaplan-Meier生存分析显示，dMMR组患者的OS显著高于pMMR组患者（P=0.035）；经肿瘤部位分层分析发现，RCC组中dMMR患者的OS显著高于pMMR患者（P=0.004），但在LCC组中dMMR患者与pMMR患者的OS无显著性差异（P=0.951）。结论:RCC中dMMR发生率明显高于LCC，且仅在RCC中提示着较好的预后作用，而在LCC中无预后指示作用。     

miR-451在结肠癌中的作用

微小RNA-451（ miR-451）作为具有基因调控功能的分子,在结肠癌的发生、发展过程中起着重要的调控作用,有望成为肿瘤分子靶向治疗的新靶点。同时,miR-451还与结肠癌患者的临床分期、有无转移及预后密切相关,有望成为结肠癌患者早期诊断的分子标志物。     

KRT23在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:研究胃癌组织中角蛋白23（KRT23）的表达情况及其临床意义。方法:收集4例新鲜的胃癌组织及其对应的癌旁组织,85例胃癌蜡块和与其匹配的癌旁组织,通过Western blot检测KRT23蛋白表达水平。并应用免疫组化方法检测85例胃癌组织和与其配对的癌旁组织蜡块中KRT23蛋白的表达情况,分析KRT23蛋白表达与胃癌患者临床病理特征之间的关系。采用Cox比例风险模型及Kaplan-Meier生存分析预后相关性。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中KRT23蛋白表达水平明显升高（P＜0.001）。KRT23蛋白表达水平与TNM分期（P=0.009）、淋巴结转移（P＜0.001）有关。Kaplan-Meier生存分析提示:与KRT23阴性表达相比,KRT23阳性表达患者的总生存时间显著缩短（P＜0.05）。Cox回归分析提示:KRT23阳性表达（P=0.047）、淋巴结转移（P=0.01）、TNM分期高（P=0.024）是影响胃癌患者预后的独立危险因素。结论:KRT23在胃癌患者组织中高表达,可能在胃癌发病和进展过程中发挥重要作用,为胃癌诊断、治疗和预后评估提供了新的思路和靶点。     

结肠癌中miR-106a的表达与临床特征和预后相关性

目的：探讨结肠癌组织中miR-106 a表达与患者临床资料的关系及其作为结肠癌预后标志物的意义。方法回顾性收集105例初诊为结肠癌的患者的临床资料和组织切片,采用qRT-PCR检测癌组织和癌旁组织中miR-106 a的表达水平,分析miR-106 a的表达与临床资料及预后的关系。结果miR-106a在癌组织的表达高于癌旁组织（1．142 vs．0．685）（P＜0．001）;miR-106a与患者的临床分期和淋巴结转移相关;miR-106 a的表达越高,预后越差;结肠癌患者miR-106 a高表达组较低表达组死亡风险增加3．390（95％CI：1．028～11．178）倍。结论 miR-106a的异常表达与结肠癌密切相关,可能是潜在的临床治疗靶点,并可成为结肠癌潜在的预后因子。     

HDAC1和CDK1在结肠癌组织中的表达及其临床意义

目的:研究组蛋白去乙酰化酶1（histone deacetylase 1,HDAC1）和细胞周期蛋白依赖性激酶1（cyclin-dependent kinase 1,CDK1）在结肠癌组织中的表达水平及其与患者临床病理特征及预后的关系。方法:收集2012年2月至2013年6月在本院普外科进行手术切除的51例结肠癌患者的肿瘤组织和癌旁非肿瘤组织,采用qRT-PCR法检测组织中HDAC1和CDK1 mRNA相对表达量,采用免疫组织化学染色法检测HDAC1和CDK1蛋白阳性表达率,分析肿瘤组织中HDAC1和CDK1表达的相关性及其与患者肿瘤直径、淋巴结转移等临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier生存函数分析HDAC1和CDK1不同表达情况与患者5年总生存率的关系。结果:肿瘤组织中HDAC1和CDK1 mRNA表达水平和蛋白阳性表达率均高于癌旁非肿瘤组织（P＜0.05）;肿瘤组织中HDAC1表达水平与CDK1表达水平呈显著正相关（P=0.012）;肿瘤组织中HDAC1表达与患者肿瘤直径和组织分化程度有关（P＜0.05）,CDK1与肿瘤直径、TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关（P＜0.05）;HDAC1、CDK1阳性表达患者5年总生存率均低于其相应阴性表达患者（P＜0.05）,HDAC1和CDK1共阳性表达患者5年总生存率低于HDAC1和（或）CDK1阴性患者（P＜0.05）。结论:HDAC1和CDK1在结肠癌组织中高表达,与患者不良预后有关且两者呈正相关,推测两者在促进结肠癌进展中可能存在协同作用。     

甲状腺癌组织中miR-93-5p、BRMS1L的表达水平及其临床意义

目的 探讨微小RNA-93-5p(miR-93-5p)与乳腺癌转移抑制基因1相似基因(BRMS1L)在甲状腺癌组织内的表达与临床意义。方法 选取68例甲状腺癌患者，术中采集甲状腺癌组织与癌旁正常组织，以逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)与免疫组织化学法分别测定miR-93-5p与BRMS1L表达水平；分析miR-93-5p、BRMS1L表达与患者性别、年龄、体重指数(BMI)、TNM分期、淋巴结转移、分化程度等病理特征之间的关系。另外，随访3年，以Kaplan-Meier法分析miR-93-5p、BRMS1L表达与患者预后的关系。结果 癌组织miR-93-5p相对表达量高于癌旁组织，BRMS1L阳性表达率低于癌旁组织，有统计学差异(P<0.05)。miR-93-5p、BRMS1L表达与患者的性别、BMI无关(P>0.05),与患者的年龄、TNM分期、淋巴结转移、分化程度有关(P<0.05)。Kaplan-Meier结果显示：随访3年内，miR-93-5p高表达患者[47.62%(20/42)]与BRMS1L阴性表达患者[51.11%(23/45)]的3年生存率低于...     

结肠癌患者循环miR-630的表达及其临床意义

目的:探讨结肠癌患者外周血中microRNA-630(miR-630)的表达,进一步分析其表达对评估结肠癌进展及预后的价值。方法:使用实时荧光定量PCR（Real time PCR）检测55例结肠癌及21例正常对照者外周血中miR-630的表达,采用统计学方法分析miR-630在结肠癌外周血中的表达及其与肿瘤进展和预后的关系。结果:分析Real time PCR检测结果发现,结肠癌患者外周血中miR-630的表达显著高于正常对照（P<0.05）,外周血中miR-630表达与结肠癌的侵袭、转移和分期显著相关（P<0.05）,单因素和多因素生存分析发现外周血中miR-630的表达上调与结肠癌预后不良显著相关（P<0.05）。结论:结肠癌患者循环miR-630表达显著上调,与结肠癌侵袭和转移密切相关,并可作为结肠癌的独立预后标记分子。     

HPV阳性宫颈癌组织中miR-34b的表达水平及其临床意义

目的:探讨miR-34b在HPV阳性宫颈癌组织中的表达水平及其对患者的临床意义。方法:收集65例HPV阳性宫颈癌组织标本和35例正常宫颈组织标本,采用Real-time PCR法测定miR-34b的相对表达水平,分析其与患者临床病理特征的关系以及对患者诊断、预后的价值。结果:miR-34b在HPV阳性宫颈癌组织中的相对表达量明显低于正常宫颈组织,差异具有统计学意义（t=9.549,P＜0.05）;在HPV阳性宫颈癌患者中,miR-34b的相对表达量与患者的年龄、病理类型、肿瘤分级均无明显关系（P＞0.05）,与患者的肿瘤大小、FIGO分期、淋巴结是否转移显著相关,差异具有统计学意义（χ2=4.996、5.925、5.824,P＜0.05）;进行ROC曲线分析,发现miR-34b区分HPV阳性宫颈癌细胞与正常宫颈细胞的AUC为0.871（95%CI:0.773~0.970,P=0.000）,灵敏度为90.24%,特异度为79.17%;对HPV阳性宫颈癌患者随访3年,发现miR-34b高表达患者的OS、DFS均显著高于低表达患者,差异具有统计学意义（χ2=5.856、5.919,P＜0.05）。结论:miR-34b在HPV阳性宫颈癌组织中呈低表达,可能为HPV阳性宫颈癌筛查、诊断和治疗提供帮助,具体情况还有待进一步研究。     

miR-520a调控RAB22A表达并抑制结肠癌细胞的增殖和侵袭

目的:探讨miR-520a对结肠癌生物学行为的影响及其对RAB22A表达的调控。方法:应用分子生物学技术构建miR-520a的表达质粒（miR-520a）及抑制剂（anti-miR-520a）,应用MTT和Transwell探讨miR-520a对结肠癌细胞株增殖和侵袭的影响。实时荧光定量PCR和蛋白印迹检测转染miR-520a对RAB22A的mRNA和蛋白表达水平的影响,构建RAB22A的野生型及突变型3'-UTR报告基因,报告基因分析miR-520a对RAB22A的调控。结果:miR-520a可以显著抑制结肠癌细胞的增殖和侵袭。蛋白印迹显示miR-520a可以显著抑制RAB22A的蛋白表达水平,而对mRNA表达无显著影响。报告基因分析显示miR-520a能够下调RAB22A的野生型3'-UTR报告基因的荧光表达,而对突变型报告基因的荧光表达影响不大。结论:miR-520a可能通过转录后调控癌基因RAB22A的表达抑制结肠癌细胞的增殖和侵袭,在结肠癌中发挥抑癌基因功能。     

结肠癌患者血清中miR-30a、miR-106b的表达及其临床意义

目的:探讨结肠癌患者血清miR-30a、miR-106b的表达及其在结肠癌进展及预测患者预后中的价值。方法:选取2012年06月至2013年02月本院收治的接受结肠癌手术治疗的患者80例为研究对象,20例同期健康人群作为对照组。逆转录 PCR法检测外周血血清中 miR-30a、miR-106b的表达水平,分析患者血清miR-30a、miR-106b表达与结肠癌临床病理及预后的关系。Spearman分析miR-30a、miR-106b表达的相关性。采用多因素logistic回归模型对结肠癌患者的预后影响因素进行分析,采用Kaplan-Meier生存分析miR-30a低表达组、miR-30a高表达组,miR-106b低表达组、miR-106b高表达组患者中位生存时间。结果:结肠癌患者血清miR-30a表达水平（1.03±0.02）低于正常人群（5.15±0.06）,差异具有统计学意义（t=16.38,P=0.01）;结肠癌患者血清miR-106b表达水平（2.62±0.35）高于正常人群（1.15±0.06）,差异具有统计学意义（t=10.17,P=0.03）。miR-30a、miR-106b表达与患者的组织分化类型、浆膜侵犯、淋巴结转移、远处转移、TNM分期有显著相关性(P＜0.05)。多因素logistic回归模型对结肠癌患者预后影响因素进行分析,TNM分期（Ⅲ+Ⅳ）、miR-106b高表达及miR-30a低表达是结肠癌患者预后不良的危险因素。miR-30a低表达组患者总体生存时间（55.3±4.1）个月低于miR-30a高表达组（76.4±2.4）个月（P=0.000）;miR-106b低表达组患者的总体生存时间（75.1±7.3）个月高于miR-106b高表达组（51.8±3.1）个月（P=0.000）。结论:miR-30a在结肠癌患者血清中低表达,miR-106b在结肠癌患者血清中高表达,二者的表达与肿瘤的进展、预后不良有关。     

miR-21的功能分析及其在结肠癌中的临床意义

目的:分析miR-21的功能及其在结肠癌中的临床意义。方法:采用miRWalk在线工具预测和筛选miR-21的靶基因,并使用DAVID分析靶基因的功能和信号通路;检测结肠癌患者和健康对照人群血清以及癌组织和癌旁组织标本的miR-21的表达水平;使用TCGA数据库中结肠癌的数据,分析miR-21表达水平与临床病理参数的关系以及与患者预后的关系。结果:共筛选出429个miR-21的靶基因,靶基因功能分析提示这些基因主要参与了正性调节代谢过程、蛋白结合等。结肠癌患者血清miR-21表达水平显著高于健康对照人群,差异有统计学意义（P<0.05）。TCGA数据显示,结肠癌组织中的miR-21表达水平与肿瘤的临床分期、肿瘤侵袭程度、淋巴结转移分期、远处转移分期无显著差异（P>0.05）。生存分析显示组织中高表达miR-21的患者其生存时间较低表达者短（P<0.05）。结论:miR-21调控多个肿瘤发生相关的基因,在结肠癌发生过程中具有重要的调控作用。结肠癌患者miR-21表达水平显著高于健康人群,且miR-21高表达的患者预后差。     

上皮性卵巢癌血清miR-1294及miR-4443的表达及其与预后的关系

目的:探讨上皮性卵巢癌（epithelial ovarian cancer,EOC）患者血清miR-1294及miR-4443的表达水平及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法:选取我院2015年1月至2017年12月收治的106例EOC患者作为EOC组,另选取90例卵巢良性肿瘤患者作为良性组和60例正常健康女性作为对照组,检测血清miR-1294及miR-4443表达水平。以miR-1294及miR-4443的最佳截断值为标准将EOC患者分为高miR-1294组（n=33）、低miR-1294组（n=73）和高miR-4443组（n=36）、低miR-4443组（n=70）。EOC患者预后不良的危险因素应用单因素及多因素COX回归模型进行分析。结果:血清miR-1294表达水平（0.48±0.13 vs 1.16±0.57、1.21±0.62）在EOC组明显低于良性组和对照组（P均<0.001）。血清miR-4443表达水平（0.71±0.18 vs 1.36±0.64、1.45±0.70）在EOC组明显低于良性组和对照组（P均<0.001）。miR-1294和miR-4443高表达组的EOC患者临床分期、分化程度、淋巴结转移及腹膜转移与miR-1294和miR-4443低表达组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。Kaplan-Meier分析显示,EOC患者生存期短与miR-1294及miR-4443低表达有关（P<0.001）。多因素分析显示,EOC患者预后不良的独立危险因素为淋巴结转移［HR（95%CI）=1.885（1.206～4.118）］、腹膜转移［HR（95%CI）=3.106（2.315～6.226）］、miR-1294＜0.73［HR（95%CI）=2.614（1.865～5.512）］及miR-4443＜1.04［HR（95%CI）=1.975（1.508～4.903）］。结论:miR-1294及miR-4443的低表达与EOC患者生存期短有关,是EOC患者预后预测的生物标志物。