沉默lncRNA TUG1对肾透明细胞癌细胞增殖、凋亡及迁移的影响

目的:探究沉默lncRNA TUG1对肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)细胞增殖、凋亡及迁移的影响。方法:选用37例ccRCC组织及癌旁组织样本,通过提取样本总RNA并行逆转录及转染,利用qRT-PCR检测lncRNA TUG1在ccRCC组织、细胞系及癌旁组织中的表达,并通过CCK-8法、流式细胞检测法及划痕实验检测沉默lncRNA TUG1对ccRCC细胞A704、A498增殖、凋亡及迁移的影响,采用统计软件进行数据处理,探究lncRNA TUG1在ccRCC中的表达及临床意义。结果:qRT-PCR检测lncRNA TUG1表达情况,结果显示:lncRNA TUG1在ccRCC组织中的表达显著高于癌旁组织,在肾细胞癌细胞系A704和A498中的表达明显高于正常细胞系HK2,差异有统计学意义（P＜0.05）;CCK-8检测细胞增殖情况,结果显示:A704和A498细胞经转染干扰后细胞增殖活性较对照组显著降低（P＜0.05）,沉默lncRNA TUG1可抑制细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡情况,结果显示:A704和A498细胞凋亡比例较空白对照组明显增多（P＜0.05）,沉默lncRNA TUG1可促进细胞凋亡;划痕实验检测细胞迁移能力,结果显示:A704和A498细胞迁移能力较空白对照组降低（P＜0.05）,沉默lncRNA TUG1可抑制细胞迁移。结论:沉默lncRNA TUG1可诱导ccRCC细胞凋亡,抑制其增殖、迁移,可作为临床研究的新靶点。     

沉默EMMPRIN对肾透明细胞癌增殖的影响

目的:探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）在肾透明细胞癌增殖中的作用。方法:利用免疫组化、实时定量PCR(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)等方法检测肾癌组织与肾透明细胞癌细胞株中EMMPRIN的表达情况。通过小分子干扰核糖核酸（siRNA）EMMPRIN在786-O细胞中的表达,研究EMMPRIN下调后对786-O肾癌细胞株生物学功能的影响。结果:EMMPRIN在肾癌组织中高表达,肾癌细胞系中EMMPRIN的表达高于正常的肾小管上皮细胞。通过小干扰RNA来敲除EMMPRIN的表达,并影响肾透明细胞癌的增殖。结论:EMMPRIN在肾肿瘤组织和肾癌细胞株中皆呈现出过表达的状态。下调其表达可以降低肾细胞癌的增殖水平,表明EMMPRIN的高表达可能是肾细胞癌患者预后较差的指标,可被视为肾癌治疗的潜在靶点。     

姜黄素诱导激活FOXO3a促进肾透明细胞癌细胞的增殖抑制和细胞凋亡

目的:研究姜黄素(curcumin)对人肾透明细胞癌（clear-cell renal cell carcinoma,ccRCC）细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,及叉头框蛋白O3a（Forkhead box protein O3a,FOXO3a）在姜黄素抗肿瘤效应中发挥的关键作用。方法:MTT法用于检测姜黄素对ccRCC细胞活力的抑制作用;Annexin V/PI双染实验检测姜黄素对ccRCC细胞的诱导凋亡作用;免疫印迹法（Western blot,WB）检测姜黄素对FOXO3a、p-FOXO3a及下游BIM表达的影响,和凋亡蛋白caspase 3的激活情况。实时荧光定量PCR技术（real-time quantitative PCR,RT-qPCR）检测FOXO3a转录水平。小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）技术用于沉默ccRCC细胞系中FOXO3a的表达。结果:通过对6种ccRCC细胞系（ACHN、786-O、769-P、A-498、Caki-1及Caki-2）FOXO3a蛋白基础表达水平进行检测,选取FOXO3a表达较高的786-O细胞系为研究对象。0~160 μmol/L姜黄素处理786-O细胞24 h和48 h后,呈时间和浓度依赖性对细胞活力具有显著抑制作用;786-O细胞在0~80 μmol/L姜黄素处理24 h后,明显促进细胞凋亡水平,且伴随着凋亡相关蛋白caspase 3的激活。786-O细胞中,姜黄素抑制p-FOXO3a,促进FOXO3a活化,并上调下游BCL-2家族促凋亡蛋白BIM表达水平。在siRNA沉默FOXO3a蛋白表达后,姜黄素对786-O细胞的生长抑制和诱导凋亡作用被抑制。结论:姜黄素通过诱导激活FOXO3a,在ccRCC细胞上发挥生长抑制和诱导凋亡的抗肿瘤作用。     

下调SLC6A3对肾透明细胞癌细胞SNU-349增殖、迁移的影响

背景与目的:溶质载体家族6成员3(solute carrier family 6 member 3,SLC6A3)在肾透明细胞癌患者中呈高表达,但SLC6A3对肾透明细胞癌细胞转移的影响及分子机制尚不明确.探讨SLC6A3对肾透明细胞癌细胞增殖、迁移的影响及潜在的分子机制.方法:采用免疫组织化学法检测2017年1月—2...     

肾透明细胞癌组织中RSK4的表达及临床意义

目的:检测核糖体S6蛋白激酶4（RSK4）在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）中的表达,探讨其高表达与预后及对肾癌细胞系增殖的影响。方法:采用免疫组织化学EnVision法检测48例ccRCC标本及20例肾盂积水标本中RSK4蛋白的表达,用统计学方法分析RSK4的表达与患者临床病理特征及预后的关系;建立过表达RSK4的肾癌细胞系,检测RSK4过表达对肾癌细胞周期及增殖的影响。结果:48例ccRCC肿瘤组织标本中,RSK4的阳性率为75%（36/48）;在20例肾盂积水患者中,RSK4的阳性率为25%（5/20）,二者具有统计学差异（P＜0.05）;经统计学分析,RSK4的表达与ccRCC患者的年龄、性别之间未见明确相关性（P＞0.05）,但与肾透明细胞癌的WHO/ISUP分级显著相关（P=0.019）;单因素及多因素生存分析发现,RSK4的表达及WHO/ISUP分级与患者预后相关（P＜0.05）;过表达RSK4的肾癌细胞系增殖能力显著增强,对细胞周期也有明显的影响（P＜0.05）。结论:RSK4在ccRCC中的表达显著升高,与预后相关;RSK4过表达对肾癌细胞系的周期、增殖均有显著影响,提示RSK4在肾透明细胞癌中高表达,可能通过促进细胞增殖导致预后不良,而其具体作用机制尚有待进一步研究。     

BP1基因对肾透明细胞癌细胞株RLC-310增殖、克隆形成及迁移能力的影响

目的:研究BP1基因对肾透明细胞癌细胞株RLC-310细胞增殖、克隆形成能力及迁移能力的影响。方法:将前期构建的质粒pEGFP-N1-BP1转染入RLC-310细胞系,用Real-time PCR和Western blot检测BP1 mRNA与蛋白的表达情况;通过MTT、平板克隆实验及Transwell实验检测pEGFP-N1-BP1对RLC-310细胞的作用。结果:转染了pEGFP-N1-BP1的RLC-310细胞中BP1基因/蛋白的表达明显上调;转染组较空白对照组细胞增殖能力明显增加(P＜0.05),克隆能力及迁移能力增强(P＜0.05)。结论:BP1基因能够增强RLC-310细胞的增殖、克隆形成能力及迁移能力。     

苦参碱诱导人肝癌细胞分化、凋亡时对 G1细胞周期调节因子的调控

目的：观察苦参碱诱导人肝癌细胞分化、凋亡时,G1细胞周期调节因子的变化,探讨苦参碱对肿瘤细胞增殖的调控。方法：0、0．3、0．8、1．5g/L苦参碱作用HepG2细胞3天,免疫组化检测p53,Rb,p21,p27,p16,cyclinD1蛋白表达：原位杂交检测p53,cyclin D1mRNA的表达。真彩色图像分析对基因表达强弱进行定量。结果用Microsoft-Excel软件统计处理。结果：用药后细胞周期负调控因子p53,Rb,p21,p27,p16表达增强;正调控因子cyclinD1表达减弱。结论：苦参碱诱导人肝癌细胞HepG2分化、凋亡的机制可能与苦参碱上调了G1细胞周期负调节因子的表达,下调了G1期正调节因子cyclinD1表达有关。     

CXCR4的表达与肾透明细胞癌侵袭性的研究

目的：研究趋化性细胞因子受体 CXCR4在肾透明细胞癌中的表达及意义。方法：免疫组织化学方法对72例肾透明细胞癌和17例癌旁组织中 CXCR4的表达进行染色,图像分析软件进行光密度值（OD）测定。结果：CXCR4在肾透明细胞癌及癌旁组织中的光密度值分别为80133．4±28204．3和42605±24414．4,二者有显著差异（P ＜0．01）。CXCR4在肾透明细胞癌病理分级低分级组和高分级组中的光密度值分别为70937．86±25461．6和94583．54±26174．28,二者差异显著（P ＜0．01）。结论：CXCR4在肾透明细胞癌中的表达反应了癌细胞的恶性程度。     

沉默信息调节因子1在肿瘤发生发展中的作用

沉默信息调节因子1（SIRT1）是一种依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的组蛋白脱乙酰酶,参与肿瘤的发生发展过程。研究表明,SIRT1在胃癌、乳腺癌、前列腺癌等多种实体肿瘤中呈高表达,可促进肿瘤发生发展;同时发现,SIRT1在其他肿瘤如胶质母细胞瘤、膀胱癌、卵巢癌等中SIRT1表达降低,起抑癌基因的作用。因此,SIRT1的具体作用机制仍未阐明,尚存争议。     

CIAPIN1 inhibits the growth and proliferation of clear cell renal cell carcinoma

Our previous studies indicated a direct correlation with loss of CIAPIN1 and carcinogenesis of tumor in human gastric cancer. Here we presented that the expression of CIAPIN1 was absent or significantly decreased in 102 cases of clear cell renal cell carcinoma (CCRCC) tissues (P < 0.05). Up-regulating CIAPIN1 by adenoviral vectors exhibited significant inhibition of CCRCC-derived cell growth in vitro and in vivo with G1 cell cycle arrest. Simultaneously, CIAPIN1-induced growth suppression was found partially to regulate various proteins, including inhibition of cyclinD1, cyclinE, cdk2, cdk4, p-Rb and VEGF, but up-regulation of p27^Kip1 and Rb.     

MYC pathway is activated in clear cell renal cell carcinoma and essential for proliferation of clear cell renal cell carcinoma cells

Clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) is the major and aggressive subtype of RCC. Previously, we identified 383 differentially expressed genes by analyzing full-length cDNA libraries of ccRCC and normal kidney tissues. In this study, we applied functional network analysis to the differentially expressed genes for identifying deregulated molecular pathways in ccRCC, and the results indicated that MYC showed a prominent role in the highest scoring network. The upregulation of MYC expression was validated in ccRCC tissues and cell lines. Furthermore, Knockdown of MYC expression by MYC-specific siRNA significantly inhibited the abilities of uncontrolled proliferation, anchorage-independent growth and arrested cell cycle in the G0/G1 phase in ccRCC cells. Moreover, we found that 37 differentially expressed genes were shown to be MYC-target genes, and the upregulation of the MYC-target genes BCL2, CCND1, PCNA, PGK1, and VEGFA were demonstrated. The expression of these MYC-target genes was significantly correlated with the expression of MYC in ccRCC tissues, and knockdown of MYC also suppressed the expression of these MYC-target genes in ccRCC cells. The recruitment of MYC to the promoter regions of BCL2, CCND1, PCNA, PGK1, and VEGFA was shown by Chromatin immunoprecipitation assay. These results suggest that MYC pathway is activated and plays an essential role in the proliferation of ccRCC cells.     

Effects of p53 overexpression on neoplastic cell proliferation and apoptosis in thymic carcinoma

Wild-type p53 protein could regulate cell proliferation and apoptosis. Loss of its function aught play acrucial role in tumourigenesis of some malig nancies.l']The inactivation of p53 protein could be resulting fromp53 gene mutation or binding with other cellular or viralproteins, such as mdm-2 or ZEBRA encoded byEPstein-Bars virus.12] Thyndc carcinoma is a rare thyndcepithelial malignancy. Does p53 protein overexpressiondevelop in thyndc carcinomas? If so, what role does p53overexpression…     

Phospho-4e-BP1 and eIF4E overexpression synergistically drives disease progression in clinically confined clear cell renal cell carcinoma

Clear cell renal cell carcinoma (ccRCC), the most aggressive and lethal form of renal cell carcinoma accounts for over 90% of metastasis that occur following curative surgery for clinically confined disease. High relapse rates have prompted the evaluation of targeted therapies for the prevention or delay of metastatic disease in high-risk patients, with biomarkers offering significant potential to guide and improve patient management in this setting. In this current study we examined the value of the 4E-BP1/eIF4E axis for prognostic significance and risk stratification in patients with clinically confined ccRCC. This axis is a critical convergence point for many signalling pathways that are targeted by current therapies for the treatment of advanced RCC. Immunohistochemistry for phosphorylated 4E-BP1 (p4E-BP1) and total eIF4E was performed on tissue microarrays containing tumour cores from 135 patients with localised ccRCC. For both biomarkers 39% of all evaluable cores stained positive, with a strong correlation observed between the presence of p4E-BP1 and the overexpression of eIF4E within the same tumour (P = 0.005). Further, the combined expression of p4E-BP1 and eIF4E was associated with significantly worse disease-free survival of 2.9 vs 5.7 yrs compared to patients whose tumours expressed only one, or neither, of the biomarkers (P < 0.001). Cox-regression analysis confirmed the ability of the p4EBP1/eIF4E signature to independently identify high-risk patients with a Hazard Ratio of 4.2 (CI = 2.1-8.6; P < 0.001), compared to 3.3 for tumour grade 3 and 4, and 2.3 for tumour stage 3 and 4. These data show the powerful prognostic value of the p4E-BP1/eIF4E signature for potential management of patients with clinically confined ccRCC, and in addition provides insights into the possible key synergistic determinants of disease progression and treatment response.     

TMEM45A在肾透明细胞癌中的表达及作用机制研究

目的 探讨TMEM45A(Transmembrane protein 45A,TMEM45A)在肾透明细胞癌(Clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中的表达及作用。方法 利用R语言提取Oncomine数据库中TMEM45A相关研究的数据;利用GEPIA数据库在线分析TMEM45A表达水平与肾透明细胞癌分期及生存时间的关系;实时定量PCR和Western blot检测TMEM45A在肾透明细胞癌组织及肾癌细胞系中的表达;应用针对TMEM45A的siRNA转染Caki-1细胞后,实时定量PCR和Western blot验证TMEM45A表达降低,CCK8分析抑制TMEM45A表达后对细胞增殖的影响,实时定量PCR和Western blot分析低表达TMEM45A抑制细胞增殖的作用机制。结果 Oncomine数据库中共收集了384项TMEM45A相关的研究,35项有统计学差异,其中25项表达升高、10项表达降低。有4项研究与ccRCC相关,共有115例样本。分析发现,ccRCC中TMEM45A表达显著升高(P＜0.05);同时发现高表达的TMEM45A与ccRCC高分期及预后不良密切相关(P＜0.05)。与正常的肾脏组织相比,TMEM45A mRNA在肾透明细胞癌组织中表达明显升高(P＜0.05)。人肾癌Caki-1和786-0细胞中TMEM45A mRNA和蛋白表达高于正常肾小管上皮HK-2细胞。TMEM45A siRNA转染Caki-1细胞48 h、72 h后,细胞的增殖能力显著下降(P＜0.001)。同时发现抑制TMEM45A后,PCNA和Cyclin D1蛋白和mRNA表达明显下降(P＜0.05)。结论 TMEM45A在ccRCC中表达升高且与ccRCC分期、预后相关,可能通过调控PCNA和Cyclin D1参与肾癌细胞的增殖。     

肾透明细胞癌组织SMO表达与肾癌细胞增殖和凋亡的相关性

目的 Hedgehog信号通路参与了肿瘤的发生发展,本研究探讨该通路关键信号分子Smoothened(SMO)在肾透明细胞癌中的表达及对肾癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 选取2012-01-01-2013-06-30青岛大学附属医院泌尿外科,行手术治疗的80例肾透明细胞癌患者的临床及病理资料,采用免疫组织化学方法检测SMO在肾透明细胞癌组织中的表达并分析其与临床病理特征间的关系.采用小干扰RNA下调SMO在人肾癌细胞786-O中的表达,分别应用CCK-8法、流式细胞术及蛋白质印迹法检测下调SMO表达对细胞增殖、凋亡及Gli1和Gli2表达的影响.结果 SMO在73例(91.25％)肾透明细胞癌组织中有表达,其在高级别肾癌中表达(80.49％)较低级别(56.41％)显著升高,x2 =5.39,P=0.02.RT-PCR 检测结果显示,SMO在人肾癌细胞系786-O中表达量为0.704±0.059;蛋白质印迹结果显示,SMO在786-O中表达量为0.651±0.074.在786-O细胞中应用小干扰RNA沉默SMO表达后,实验组细胞相较于对照组其活力百分比在48、72和96 h分别为92.7％、80.9％和79.9％,3个时间点差异有统计学意义(P=0.003),细胞凋亡显著增加,t=-29.2,P＜0.001;与空白对照组和阴性对照组相比,其下游分子Gli1和Gli2蛋白表达明显减少(Gli1:3.2 vs 2.9 vs1;Gli2:2.5 vs 2.1vs 1).结论 SMO可能通过调控细胞增殖和凋亡,以及调节Gli蛋白表达参与了肾癌的发生发展.     

沉默信息调节因子1在膀胱尿路上皮细胞癌中的表达与意义

目的:检测沉默信息调节因子1(SIRT1)在膀胱尿路上皮癌(BUC)中的表达,并探讨其与临床病理指标的相关性。方法:选取经临床病理诊断的BUC标本72例,其中低级别尿路上皮癌42例,高级别尿路上皮癌30例;阴性对照组为正常膀胱组织19例(膀胱镜检术或膀胱切开取石术中随机取活检时取得)。应用免疫组化方法(二步法)检测SIRT1分别在低级别与高级别BUC中的表达与分布,分析其与肿瘤的分期和病理分级的关系。结果:SIRT1在正常膀胱组织和膀胱癌组织中均有表达,正常膀胱组织中阳性表达率为31.58%(6/19),而在BUC组中,阳性表达率为77.78%(56/72),明显高于正常膀胱组织(P<0.05);并且随着肿瘤分期和癌理分级的升高SIRT1蛋白的表达增加,其中低级别膀胱癌阳性表达率为69.05%(29/42),高级别膀胱癌阳性表达率为90.00%(27/30),两者间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:SIRT1在BUC中高表达,可能与BUC的发生、病理分级和临床分期有关,并有可能作为判断BUC侵袭力、监测复发的肿瘤标志物。阻断SIRT1表达有望成为膀胱癌靶向治疗的新靶点。     

透明细胞乳头状肾细胞癌7例报告并文献复习

背景与目的：透明细胞乳头状肾细胞癌是最近发现的一种少见的肾脏上皮源性恶性肿瘤,其生物学行为惰性,预后较好,该研究旨在分析透明细胞乳头状肾细胞癌的临床及病理学特点,与其他亚型鉴别,以免过度治疗。方法：收集7例透明细胞乳头状肾细胞癌病例,应用组织病理学、免疫组织化学法并结合相关文献分析其镜下及临床特点。结果：7例患者肿块均位于肾内,切面灰红或灰黄色,实性或囊实性,镜下肿瘤组织呈腺管状、微囊状或乳头状结构,肿瘤以一种结构为主或多种结构混合存在。细胞质透明,细胞核圆形或卵圆形,世界卫生组织（World Health Organization,WHO）/国际泌尿病理协会（International Society of Urological Pathology,ISUP）细胞核分级为1或2级。免疫表型：7例均表达CK7、CK8、vimentin、PAX-8、CA9和CK34βE12,Ki-67增殖指数为5%~10%,7例均不表达CD117、TFE3和CD10。对本组7例患者随访2个月至4年,均无复发及转移。结论：透明细胞乳头状肾细胞癌是一种少见的低度恶性肿瘤,形态学上与多种具有透明细胞和（或）乳头状细胞的肾癌有重叠,需要借助免疫组织化学进行鉴别。     

DNA甲基转移酶3B4过表达与肾透明细胞癌的关系

  目的  探究DNA甲基转移酶（DNA methyltransferase,DNMT）在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）发生发展中的机制。  方法  收集2012年1月至12月15例内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院术前均未结予放化疗并行肾癌根治术患者的组织标本,均经病理证实为ccRCC。应用实时定量PCR、蛋白印迹、联合亚硫酸氢钠限制酶分析法和甲基化特异PCR等方法检测ccRCC组织中DNMT的mRNA表达,及ccRCC组织中整体甲基化（global methylation）水平和抑癌基因RASSF1A甲基化和表达水平。  结果  ccRCC组织中DNMT3B4的mRNA表达增加,同时其蛋白含量也相应增加。ccRCC患者癌组织中DNA重复序列Alu的甲基化水平0.106±0.04较癌旁组织中0.115±0.03低,差异具有统计学意义（P < 0.05）。而肿瘤抑制基因RASSF1A启动子区域发生高甲基化,其mRNA和蛋白的表达均降低。  结论  DNMT3B4基因过表达可能与染色体不稳定以及RASSF1A基因低表达有关,在ccRCC的发生发展中可能扮演着重要的角色。      

细胞骨架相关蛋白4在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨细胞骨架相关蛋白4(cytoskeleton-associated protein 4,CKAP4)在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中的表达及其临床意义。方法 收集237例ccRCC患者的癌组织和癌旁组织,采用免疫组化法检测CKAP4蛋白的表达水平,采用χ²检验比较不同CKAP4蛋白表达水平患者的临床病理特征,Kaplan-Meier法和Log-rank检验分析不同CKAP4表达水平患者总生存期(overall survival,OS)和无进展生存期(progression-free survival,PFS)的差异,Cox比例风险回归分析影响ccRCC患者术后OS和PFS的因素。结果 ccRCC组织中CKAP4蛋白的高表达率显著高于癌旁组织(54.0%vs 23.6%,χ²=46.050,P<0.001)。Fuhrman分级高、肿瘤浸润深、有淋巴结转移、远处转移以及TNM分期高的ccRCC患者癌组织中CKAP4蛋白高表达(均P<0.05)。CKAP4蛋白高表达...