非编码RNA在喉鳞状细胞癌中的研究进展

非编码RNA是一类不编码蛋白质的RNA, 包括微小RNA(microRNA, miRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)和环状RNA(circular RNA, circRNA)等。非编码RNA不仅在生物调节过程中扮演着重要角色, 在包括肿瘤在内的多种疾病的发生机制中也起到了不可或缺的作用, 其在喉癌的诊断、预后评估及治疗中同样具有重要的临床价值。喉鳞状细胞癌是喉癌中最常见的病理学类型, 近年来发病率有明显增高的趋势, 已严重危害人类健康及生存质量。本文总结了近年国内外研究, 对miRNA、lncRNA和circRNA在喉癌发生发展的作用机制进行综述。      

喉鳞状细胞癌的转录组数据分析及生物标志物筛选

目的 通过数据挖掘分析长链非编码RNA(lncRNA)、微小RNA(miRNA)和信使RNA(mRNA)在喉鳞状细胞癌中的相互作用机制.方法 从肿瘤基因图谱(TCGA)中获取喉鳞状细胞癌的lncRNA、miRNA、mRNA表达谱数据及相关临床数据,从TCGA和GEO数据库中获取喉鳞状细胞癌的DNA甲基化数据.进行蛋白相...     

喉鳞癌中p-STAT3和Skp2的表达及其相关性研究

目的:检测喉鳞癌中信号转导和转录激活因子3的活化和Skp2 蛋白的表达,探讨其临床意义及相关性.方法:采用免疫组织化学法检测p-STAT3和Skp2蛋白在56例喉鳞状细胞癌和30例喉全(或近全)切除者癌旁(＞2.0 cm)正常黏膜中的表达,应用Metamorph/DP10/BX41显微图象分析系统测定阳性表达的平均光密度值,并进行统计分析.结果:与癌旁正常黏膜组相比较,p-STAT3和Skp2蛋白在喉鳞癌组织中过表达(P＜0.01);p-STAT3和Skp2蛋白过表达与喉鳞癌的分化程度、临床分期、颈淋巴结转移有关(P＜0.05或P＜0.01);在喉鳞癌组织中p-STAT3蛋白和Skp2蛋白的表达呈正相关关系,相关系数r=0.8041(P＜0.01).结论:p-STAT3和Skp2蛋白过表达与喉鳞癌的发生、发展和转移等生物学行为有关,两者的表达呈正相关.     

Gankyrin蛋白在喉鳞癌中表达的实验研究

目的研究Gankyrin蛋白在喉鳞癌组织及喉鳞癌Hep-2细胞系中的表达。方法免疫组织化学方法检测24例喉鳞癌组织、相应癌旁组织及10例正常组织,免疫细胞化学法检测Hep-2细胞系中Gankyrin蛋白的表达与分布,并计算阳性细胞率,进行统计分析。结果喉鳞癌组织及Hep-2细胞系中,Gankyrin蛋白主要表达于细胞核。喉鳞癌组织中Gankyrin蛋白表达阳性细胞率(58.5%)明显高于相应癌旁组织(11.4%)及正常组织(18.1%),且差异有统计学意义(均P0.01)。结论喉鳞癌组织及喉鳞癌Hep-2细胞系中均有Gankyrin蛋白的表达,可为Gankyrin在喉鳞癌中表达的后续相关研究提供理论依据。     

喉鳞癌全喉与喉部分切除术的远期疗效分析

目的　回顾分析声门上型及声门型喉鳞癌患者经全喉及喉部分切除治疗后的远期效果 ,提出今后治疗措施。方法　 42 3例喉癌患者中 ,声门上型 32 7例 ,声门型 96例。 2 43例全喉切除患者中 ,声门上型喉癌 2 10例 ,声门型 33例。喉部分切除的 180例中 ,声门上型 117例 ,声门型 6 3例。依照直接法计算出声门上型和声门型喉癌的全喉切除与喉部分切除的 1,3,5年生存率 ,以及各期病例的 3,5年生存率。结果　 32 7例声门上型喉癌术后 5年生存率为 72 9% ,全喉与喉部分切除的 5年生存率分别为 70 1%和 77 4% (P >0 0 5 )。 96例声门型喉癌术后 5年生存率为 86 0 % ,其中全喉与喉部分切除后的 5年生存率分别为 72 2 %和 92 3% (P <0 0 5 )。结论　喉癌治疗仍以手术为主 ,声门上型喉癌的喉部分切除与全喉切除远期疗效大致相等 ,而声门型喉癌的喉部分切除远期疗效明显高于全喉切除。在适应证选择合适的基础上 ,应大力倡导开展有利于患者生存质量的喉部分切除手术。     

环状RNA与肿瘤研究进展

目的 环状RNA(circular RNAs,circRNAs)是一种不同于线性RNA的新型RNA,其广泛存在于各种生物细胞中.本研究总结了环状RNA的生物起源、作用机制以及其在肿瘤发生发展中的作用.方法 应用中国知网和PubMed中英文数据库,以“circRNAs和肿瘤”等为关键词,检索2014-2016年的相关文献.纳入标准:(1) circRNAs的生物学合成;(2)circRNAs的作用机制;(3) circRNAs在肿瘤发生发展中的作用.根据纳入标准,符合分析的文献35篇.结果 circRNA是一类新型非编码RNA,共价闭合环路所形成的环状结构是它的特征.这类具有组织特异性的转录本主要来自宿主基因的外显子或内含子序列.尽管已提出circRNAs多种生物起源模式,但是对circRNAs的了解还只是冰山一角.circRNAs的表达与多种痰病有关,并且可能作为该疾病新型诊断或预后预测的生物标志物.circRNAs可以调节与肿瘤相关的miRNAs的表达,这种circRNA-miR-NA-mRNA轴可以调控与癌症相关通路,既可促进也可以桔抗肿瘤的发生发展.结论 深入研究环状RNA在肿瘤的发生发展中所起的作用,有望在肿瘤的诊断和靶向治疗以及顸后判断方面提供新的思路.     

喉咽鳞癌不同治疗方案对喉功能保留及预后的影响

目的：回顾性分析初治的97例喉咽鳞癌患者应用不同治疗方法后的生存率、喉功能保留率和复发与转移情况等,探索更合理的处理方法。方法：采用SPSS10．0统计软件Kaplan—Meier法和PearsonY。检验／Fisher’s确切概率比较单纯放疗组30例,新辅助化疗＋放疗组17例,单纯手术组11例,手术＋术后放疗组33例,姑息化疗组6例的治疗效果。结果：97倒喉咽鳞癌总的3、5年累计生存率分别为46．43％和31．88％,中位生存时间是28个月。单纯放疗组、新辅助化疗＋放疗组、单纯手术组、手术＋术后放疗组5年生存率分则是18．33％、23．53％、36．36％和53．65％,5年复发率分别是70．00％、52．94％、36．36％和27．27％。接受原发灶手术共41例,喉功能部分或全部保留的手术患者与全喉切除术不保留喉功能的患者的5年生存率分别是57．14％、39．16％,P=0．3574;两组的5年局部复发率分剐是21．05％、13．64％,差异均无统计学意义,P=0．4140。结论：喉咽鳞癌患者接受单纯放疗或新辅助化疗＋放疗生存率较低,单纯手术治疗也不能明显提高生存率,手术＋放疗的治疗模式可使患者生存率有明显提高,部分喉咽鳞癌肿瘤局限,可考虑行保留喉功能的喉部分切除术,并不增加复发的风险。     

S100A8基因在喉鳞癌发生中作用机制的研究

目的:研究S100A8与喉癌发生的关系,揭示炎症在喉癌发生中的作用.方法:应用RT-PCR、West-ern Blot、免疫组化检测S100A8表达,RNAi方法检测其功能、Transwell检测细胞侵袭力,TUNEL和流式细胞仪检测细胞凋亡,MTT检测细胞生长活性.结果:36例喉鳞癌组织中17例出现S100A8 mRNA表达上调(47.2%),而7例喉部良性肿瘤中2例出现表达上调(28.5%).13例病人喉鳞癌组织中7例S100A8蛋白表达增高.免疫组化分析喉鳞癌组织S100A8蛋白阳性率为54.3%.在高分化喉鳞癌组织为71.4%,而分化程度差的喉癌组织中阳性率为12.8%(P=0.023).RNAi抑制S100A8基因使Hep2细胞凋亡率增高近9倍,使Hep2细胞侵袭力下降,影响Bel-2基因表达,但对Hep2细胞的IKKα表达无明显影响.结论:S100A8与喉鳞癌发生相关并参与喉鳞癌分化,S100A8基因具有抑制喉癌细胞凋亡,促进Hep2细胞侵袭的作用.S100A8基因可能部分通过NF-κB通路参与喉癌发生、发展,在此通路中S100A8基因位于p65下游.     

S100A8基因在喉鳞癌发生中作用机制的研究

目的：研究S100A8与喉癌发生的关系,揭示炎症在喉癌发生中的作用.方法：应用RT-PCR、West-ern Blot、免疫组化检测S100A8表达,RNAi方法检测其功能、Transwell检测细胞侵袭力,TUNEL和流式细胞仪检测细胞凋亡,MTT检测细胞生长活性.结果：36例喉鳞癌组织中17例出现S100A8 mRNA表达上调（47.2%）,而7例喉部良性肿瘤中2例出现表达上调（28.5%）.13例病人喉鳞癌组织中7例S100A8蛋白表达增高.免疫组化分析喉鳞癌组织S100A8蛋白阳性率为54.3%.在高分化喉鳞癌组织为71.4%,而分化程度差的喉癌组织中阳性率为12.8%（P=0.023）.RNAi抑制S100A8基因使Hep2细胞凋亡率增高近9倍,使Hep2细胞侵袭力下降,影响Bel-2基因表达,但对Hep2细胞的IKKα表达无明显影响.结论：S100A8与喉鳞癌发生相关并参与喉鳞癌分化,S100A8基因具有抑制喉癌细胞凋亡,促进Hep2细胞侵袭的作用.S100A8基因可能部分通过NF-κB通路参与喉癌发生、发展,在此通路中S100A8基因位于p65下游.     

喉鳞癌组织KAI1和COX-2表达及相关性研究

目的:了解KAI1和COX-2在喉鳞癌组织中表达的情况,探讨两者在喉鳞癌组织中表达的意义及相关性,以及在喉鳞状细胞癌发生、发展及浸润转移过程中的作用.方法:应用免疫组织化学(SP)法分别检测45例喉鳞状细胞癌的咽喉黏膜组织和10名正常体检者咽喉黏膜组织中KAI1和COX-2的表达水平,分析两者的表达水平及强度与相关临床指标之间的关系,并分析这两个基因之间在喉鳞状细胞癌中表达的相关性.结果:KAI1基因在喉鳞癌细胞中的表达低于在正常咽喉黏膜组织中的表达,x2 =4.11,P=0.043;在喉癌组织中表达的阳性率与年龄、性别、分化程度、临床分期及是否有淋巴结转移均无关(P值均＞0.05),但其阳性表达强度与临床分期及是否有淋巴结转移有显著相关性,P值均＜0.05.COX-2基因在喉鳞癌组织中高表达,在正常咽喉黏膜组织中低表达,差异有统计学意义,x2=15.36,P=0.000,在喉鳞癌组织中表达的阳性率与性别、年龄及分化程度无关(P值均＞0.05),而与临床分期及是否有淋巴结转移有显著相关性,P值均＜0.05.KAI1和COX-2在喉鳞癌组织中的表达呈负相关,r=-0.30,P=0.045.结论:KAI1和COX-2在喉鳞癌的发生、发展过程中具有一定抑制和促进作用,可作为今后预测肿瘤细胞转移潜能的指标.     

MTA-2蛋白在喉鳞癌中的表达及其临床意义

目的：研究转移相关蛋白2（metastasis—associated protein2,MTA-2）在喉鳞癌中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化检测了90例喉癌标本（其中40例为具有配对的淋巴结转移标本）中MTA-2的表达及其与患者临床病理因素之间的关系。另选30例新鲜喉鳞癌及癌旁正常喉组织用于MTA-2的mRNA和蛋白检测。结果：正常喉组织相比,MTA-2的mRNA和蛋白在喉鳞癌组织中表达显著增高,且MTA-2的阳性表达与喉鳞癌的低分化、高TNM分期及淋巴结转移密切相关（P〈0．05）。结论：MTA-2的阳性表达与喉鳞癌患者的不良预后显著相关,并可能是喉鳞癌新的标志物及基因治疗靶点。     

喉鳞状细胞癌中p63基因蛋白表达及其意义

目的：探讨p63基因蛋白表达与喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinomas,LSCC）的发生、发展的关系和生物学意义。方法：应用免疫组织化学方法,检测30例LSCC、10例不典型增生和10例正常喉黏膜组织中p63基因蛋白的表达水平。结果：全部30例LSCC和10例不典型增生组织中p63染色均为阳性。LSCC分化程度越低,阳性细胞数越高、细胞的表达强度越高。正常喉黏膜组织中仅基底层及上基层细胞阳性。p63表达与LSCC分级和淋巴结转移相关（P〈0.05）。结论：p63可能参与了调控LSCC的发生、发展过程,其高表达预示LSCC预后不良。     

癌蛋白iASPP在喉鳞癌中的表达及临床意义

目的:从蛋白及mRNA水平检测iASPP在喉鳞癌组织中的表达,并研究其表达与喉鳞癌患者临床病理特征及预后的关系。方法:采用免疫组化方法检测99例喉鳞癌和15例癌旁黏膜组织中癌蛋白iASPP的表达,统计分析iASPP的表达与喉鳞癌患者临床病理特征和预后的关系;采用荧光定量RT-PCR检测13例配对喉鳞癌及癌旁组织中iASPP mRNA的表达情况。结果:癌蛋白iASPP在喉鳞癌细胞的胞浆及胞核中均有表达,且iASPP蛋白及mRNA在喉鳞癌组织和癌旁黏膜组织中的表达有显著性差异(P＜0.01)。胞浆iASPP蛋白和胞核iASPP蛋白的表达与喉鳞癌患者的T分期(P=0.001,P=0.021)、临床分期(P=0.001,P=0.010)、淋巴结转移(P=0.001,P=0.003)和复发(P＜0.001,P=0.001)具有显著的相关性。Kaplan-Meier生存分析结果表明,胞浆iASPP蛋白高表达组和低表达组、胞核iASPP蛋白高表达组和低表达组的5年无病生存率和5年总生存率间具有显著性差异(P均<0.01)。进一步用多因素Cox比例风险回归模型分析显示,胞浆iASPP表达水平是喉鳞癌患者预后的独立影响因素(P＜0.01)。结论:癌蛋白iASPP在喉鳞癌组织中的表达显著上调,且与喉鳞癌患者的T分期、临床分期、淋巴结转移和复发密切相关。iASPP可能在喉鳞癌的发生发展中起着重要作用,并有望成为预测和评估喉鳞癌患者预后的重要分子标志物和潜在的治疗靶点。     

喉鳞癌患者凝血功能状态及其临床意义

目的：探讨喉鳞癌患者凝血状态的改变及其与肿瘤临床分期、转移的关系。方法：选取113例喉鳞癌患者（试验组）与65例喉良性疾病患者（对照组）为研究对象,分析血浆凝血酶原时间（胛）、活化部分凝血活酶时间（hgrr）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（Fib）在两组问的差异及其与喉鳞癌临床分期、转移的关系。结果：喉鳞癌患者血浆APTT比对照组显著缩短（P〈0．05）,其中转移组比未转移组显著缩短（P〈0．05）;喉鳞癌患者血浆Fib高于对照组（P〈0．05）,其中转移组明显高于未转移组（P〈0．05）,Ⅲ＋Ⅳ期组明显高于I＋Ⅱ期组（P〈0．05）;PT及TT在各组间无显著差异（P〉0．05）。结论：喉鳞癌患者血液呈高凝状态,检测血浆APTT及Fib有助于喉鳞癌患者的临床诊治和预后评估。     

喉鳞癌患者凝血功能状态及其临床意义

目的:探讨喉鳞癌患者凝血状态的改变及其与肿瘤临床分期、转移的关系.方法:选取113例喉鳞癌患者(试验组)与65例喉良性疾病患者(对照组)为研究对象,分析血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fib)在两组间的差异及其与喉鳞癌临床分期、转移的关系.结果:喉鳞癌患者血浆APTT比对照组显著缩短(P＜0.05),其中转移组比未转移组显著缩短(P＜0.05);喉鳞癌患者血浆Fib高于对照组(P＜0.05),其中转移组明显高于未转移组(P＜0.05),Ⅲ+Ⅳ期组明显高于Ⅰ+Ⅱ期组(P＜0.05);PT及TT在各组间无显著差异(P＞0.05).结论:喉鳞癌患者血液呈高凝状态,检测血浆APTT及Fib有助于喉鳞癌患者的临床诊治和预后评估.     

Survivin在喉鳞癌组织中的表达及其与预后的关系

背景与目的：近年来的研究发现,新凋亡抑制基因Survivin表达于多种人类肿瘤,但不表达于正常组织,而其在喉鳞状细胞癌中的表达及意义尚不清楚。本研究旨在了解抗凋亡基因Survivin在喉癌中的表达情况,并分析其作为预测喉癌预后指标的可能性。方法：用免疫组化法检测我科1995～1998年7l例喉鳞癌标本中Survivin的表达情况,随访至2003年7月,分析Survivin的表达与喉癌患者年龄、性别、肿瘤分期、临床分型、病理类型、淋巴结转移、远处转移等的关系及其与预后的关系。结果：Survivin在喉鳞癌标本中的阳性率为50．7％(36／71)。在有淋巴结转移的喉癌中阳性率为81、8%(9／11),高于无淋巴结转移者(45．0％,27／60),差异具有显著性(P=0.025)：单因素分析显示肿瘤分期、临床分型及Survivin表达与喉鳞癌的预后有关(P值分别为0．0001、0．009及0.0008);多因素分析显示,排除肿瘤分期及临床分型对喉癌预后的影响后,Survivin表达阳性者中位生存时间(63．5个月)与Survivin表达阴性者(84．0个月)的差异有显著性(P=0．006)。结论：Survivin在部分喉癌组织中有表达,其表达与淋巴结转移有关,并与喉癌的预后相关。     

RNAi抑制NF—κB通路相关基因对喉鳞癌凋亡及转移的影响

目的：用RNA干涉方法探讨NF—κB通路参与喉癌发生、发展的可能机制。方法：RT—PCR、West—ern Blot检测喉鳞癌组织中NF—κB通路中相关基因表达，RNA干涉方法抑制p65，p50表达，流式细胞仪，TUNEL方法检测细胞凋亡，Transwell检测细胞侵袭力。结果：36例喉鳞癌组织中21例p65 mRNA表达上调（58．33％）高于癌旁组织（P=0，012），13例出现p50 mRNA表达上调（36.11％），但与癌旁组织比较无显著差异（P=0．602）。喉鳞癌组织的p65蛋白表达明显较癌旁组织增强（P=0．044），而p50蛋白表达无显著差异。特异siRNA转染Hep2细胞明显抑制p50，p65基因表达，该作用可持续10天。RNAi抑制p65基因表达使Hep2细胞凋亡率增加，在转染后第7天最高达29．89％，与对照组比较升高超过10倍（P=0．020）；同时使Hep2细胞侵袭力明显下降（P=0．003），而干涉p50基因对细胞凋亡及细胞侵袭性影响不明显。结论：RNAi抑制p65表达诱导Hep2细胞凋亡、抑制细胞侵袭力，提示抑制p65表达与常规治疗结合可能成为改善喉癌预后的选择。     

喉鳞状细胞癌组织miRNA表达的初步研究

目的:探讨喉鳞状细胞癌组织miRNA表达.方法:对我院6例手术并经病理确诊的喉鳞状细胞癌患者,及6例良性病变惠者,提取喉部组织,应用miRNA基因芯片检测两组之间不同miRNA水平的表达情况.结果:与对照组相比,喉鳞状细胞癌组织中表达升高的有,miR-200b、miR-21、let-7i、let-7c、miR-93、miR19a、miR-106b和miR19b-2;下调的有,miR-543、miR-520h、miR-582-3p、miR-1305和miR-203.未见或鲜见报道的有miR-1305、miR-203、miR19a和miR19b-2.结论:喉鳞状细胞癌中存在miRNA的表达失调,为进一步的功能学研究和扩大实验提供了线索.     

喉鳞癌中P-STAT3和Skp2的表达及其相关性研究

目的：检测喉鳞癌中信号转导和转录激活因子3的活化和skp2蛋白的表达,探讨其临床意义及相关性。方法：采用免疫组织化学法检测P—STAT3和skp2蛋白在56例喉鳞状细胞癌和30例喉全（或近全）切除者癌旁（〉2．0cm）正常黏膜中的表达,应用Metamorph／DPIO／BX41显微图象分析系统测定阳性表达的平均光密度值,并进行统计分析。结果：与癌旁正常黏膜组相比较,P—STAT3和Skp2蛋白在喉鳞癌组织中过表达（P〈0．01）;P—STAT3和skp2蛋白过表达与喉鳞癌的分化程度、临床分期、颈淋巴结转移有关（P〈0．05或P〈0．01）;在喉鳞癌组织中P—STAT3蛋白和skp2蛋白的表达呈正相关关系,相关系数r=0．8041（P〈0．01）。结论：P—STAT3和Skp2蛋白过表达与喉鳞癌的发生、发展和转移等生物学行为有关,两者的表达呈正相关。     

miR-769对食管鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移能力及紫杉醇耐药性的影响

目的:探讨hsa-miR-769（miR-769）在食管鳞癌组织中的表达及其对癌细胞增殖、侵袭和迁移能力及紫杉醇耐药性的影响。方法:通过生物信息学技术挖掘,我们对肿瘤相关的hsa-miR-769（miR-769）的表达进行了深入研究,进而进行临床样本的验证,并通过细胞生物学和分子生物学研究对其作用机制进行了进一步探索。结果:公共数据库的挖掘结果显示miR-769在食管癌组织中表达异常升高,且在临床样本中我们观察到了相同的升高异常,通过细胞实验和分子生物学实验,我们发现miR-769调控肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力,同时引起肿瘤细胞的上皮间质转化过程发生改变,后续的研究中,我们成功构建了紫杉醇耐药的食管鳞癌细胞系,并发现miR-769在食管鳞癌对于紫杉醇的获得性耐药中起到了重要作用。结论:miR-769影响食管鳞癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力及对紫杉醇的耐药性,本研究旨在探索食管鳞癌发生发展的机制,并为食管鳞癌靶向治疗提供了新的潜在靶点。