用德尔菲法确定5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗口腔潜在恶性疾患专家共识的临床问题及结局指标

目的确定需要纳入5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinic acid,ALA)光动力疗法治疗口腔潜在恶性疾患专家共识的临床问题与结局指标。方法在查阅相关文献的基础上,通过会议形成了临床问题与结局指标初稿,应用德尔菲法进行专家咨询,收集专家意见,并计算投票结果的平均值、标准差确定指标的重要程度,计算积极系数、变异系数、协调系数等进行质量控制。结果第一轮德尔菲法根据参考文献及专家讨论共纳入8个临床问题(光动力照射剂量主要参考要素、具体参数、光源选择、疗效的评价标准、不良反应的预防方案、给药浓度、对角化增厚的病损是否需要预处理和给药方式)的12个结局指标(主要参考要素包括光子积分通量、功率密度、照光时间和光斑直径;具体参数为光子积分通量为100 J/cm²,功率密度为100~600 mW/cm²、光源选择(630±5)nm波长的二极管激光器;以病损大小变化作为评价标准;以局部麻醉为主,辅以低温及间歇性激光照射的方法作为治疗前的镇痛方案;对角化增厚的病损需要预处理;ALA的给药浓度定为20%)。第二轮共89位专家填写问卷,对6个临床问题(光动力照射剂量主要参考要素、具体参数、光源选择、疗效的评价标准、给药浓度和给药方式)的9个结局指标(主要参考要素包括光子积分通量、功率密度、照光时间;具体参数为光子积分通量为100 J/cm²,功率密度为100~600 mW/cm²;光源选择(630±5)nm波长的二极管激光器;以病损大小变化作为评价标准;光敏剂ALA给药浓度定为20%),均给予非常重要的评定,其余3个予重要的评定,一致性较好。结论本研究通过德尔菲法确定ALA光动力疗法治疗口腔潜在恶性疾患的照射剂量、给药方式及浓度、疗效的评价标准、不良反应的预防及预处理方案,专家意见具有较好的一致性,达成共识。     

吲哚菁绿介导的光动力疗法对具核梭杆菌生物膜体外抗菌作用

目的 探讨新型光敏剂吲哚菁绿(indocyanine green,ICG)介导的光动力疗法在体外对具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,F.nucleatum)生物膜的抗菌作用。方法 CCK-8检测光敏剂ICG的毒性,将F.nucleatum以10⁸CFU/mL与浓度分别为0、10、20、30、40μg/mL的光敏剂ICG在厌氧(80%N₂、10%H₂和10%CO₂)条件下混合均匀,用强度为0.1 W/cm²的808 nm近红外光照射3 min,以进行抗菌光动力治疗,共培养2 d,形成成熟的生物膜。通过菌落形成单位计数(CFU)比较不同浓度ICG对F.nucleatum生物膜的抑菌效果;采用结晶紫定量法和MTT细菌增殖实验检测ICG对F.nucleatum生物膜形成量及生物膜代谢活性的影响;采用硫酸-苯酚法测定ICG对F.nucleatum生物膜胞外多糖形成的作用;利用激光共聚焦显微镜观察生物膜形成情况及细菌活死数量的变化。结果 随着ICG浓度的增加,菌落...     

附着状态对口腔白色念珠菌ALS基因mRNA的影响

目的　比较生物膜和游离状态下,白色念珠菌ALS基因在mRNA水平上的表达差异。方法　一步法 RT-PCR观察白色念珠菌临床分离株和标准菌株,在游离状态和生物膜状态下ALS1和ALS4的mRNA的丰度差异。 结果　白色念珠菌临床分离株在生物膜状态下,ALS1和ALS4的mRNA丰度明显强于游离状态,而标准株在游离状 态和生物膜状态下,ALS1和ALS4的mRNA丰度没有显著性差异。结论　生物膜状态下的白色念珠菌,ALS基因在 转录水平的表达有增强,提示该基因在生物膜形成发展中可能有一定的作用,但其增强的程度在菌株之间可能有 较大的差别。     

白鲜碱对白色念珠菌体外抑制作用初探

目的：检测白鲜碱对白色念珠菌的抑制作用,及其对白色念珠菌细胞周期的影响。方法：采用白色念珠菌标准菌株（ATCC76615）为研究对象,用经典方法测定白鲜碱对白色念珠菌的最小抑菌浓度（MIC）,抑制生物膜50%（SMIC50）的药物浓度,流式细胞仪分析白鲜碱对白色念珠菌细胞周期的影响。结果：白鲜碱对白色念珠菌的MIC为312.5μg/mL,对生物膜的SMIC50为1250μg/mL,白鲜碱能使白色念珠菌生长停滞。结论：白鲜碱具有抑制白色念珠菌生长的能力。     

鱼腥草素钠对白色念珠菌磷脂酶体外作用的研究

目的：验证鱼腥草素钠体外对白色念珠菌生物膜的抑菌效果,并初步研究其抑菌作用是否为通过影响或干扰毒力因子磷脂酶的表达而实现的。方法：建立白色念珠菌生物膜的体外模型,MTT法计算鱼腥草素钠对白色念珠菌生物膜的抑菌率,然后用RT-PCR方法检测白色念珠菌毒力因子PLB1、PLB2和PLC1受鱼腥草素钠作用后的表达水平的变化。结果：鱼腥草素钠对白色念珠菌生物膜的抑制作用随药物浓度增加而增加。RT-PCR结果表明,毒力因子PLB1、PLB2的表达水平随着药物浓度的梯度增加而降低,在浓度为240mg/L时mRNA的表达水平受到完全抑制,而药物浓度变化对PLC1的表达影响较小。结论：鱼腥草素钠体外对白色念珠菌生物膜有一定的抑制作用,并对本实验所选毒力因子PLB1、PLB2的表达过程明显产生了抑制作用。     

胞外DNA在根管白色念珠菌生物膜中作用的研究

目的 动态观察根管内白色念珠菌生物膜形成过程,通过DNaseⅠ对生物膜形成的影响,研究胞外DNA在根管内白色念珠菌生物膜形成过程中的作用.方法 在2.0cm2载玻片上形成白色念珠菌生物膜,并在生物膜形成至不同时间用DNaseⅠ处理,AO/EB染色,极光共聚焦显微镜观察生物膜的形态变化,并用XTT减低法定量分析DNaseⅠ作用前后生物膜内细胞的生长活性.结果 DNaseⅠ对根管内白色念珠菌生物膜形成有抑制作用.结论 胞外DNA在根管内白色念珠菌生物膜形成过程中有着重要的作用.     

苦参碱对白色念珠菌生物膜的体外抑制作用

目的:建立白色念珠菌生物膜体外模型,观察中药有效成分苦参碱对生物膜活性及超微结构的影响。方法:以白色念珠菌国际标准菌株ATCC76615为研究对象,采用96孔微量培养皿,甲基四氮盐(XTT)减低的方法,评价苦参碱对不同阶段白色念珠菌生物膜的体外生长动力学影响;应用激光共聚焦显微镜和死菌/活菌荧光染色方法观察苦参碱对白色念珠菌生物膜超微结构的影响。结果:苦参碱对不同生长阶段(早、中、成熟期)的白色念珠菌生物膜均有抑制作用,随着生物膜成熟度的增加,耐药性增强;激光共聚焦扫描显微镜死菌/活菌荧光染色观察发现,苦参碱可影响白色念珠菌生物膜中细胞的形态及代谢状态。结论:苦参碱对体外白色念珠菌生物膜具有抑制作用。     

基于PADTM Plus的光活化消毒技术杀灭白色念珠菌的体外实验研究

目的 研究基于PAD^TM Plus的光活化消毒技术(photo-activated disinfection,PAD)体外杀灭白色念珠菌的效果。方法 选取白色念珠菌标准株SC5314配制菌悬液。光活化消毒仪输出功率为750 mW，光敏剂为甲苯胺蓝(Toluidine Blue O, TBO)溶液，有效浓度0.75 mg/mL，光源为波长635 nm的LED红光。实验分为空白对照组(P-L-)、单纯光敏剂孵育60 s组(P+T1+L-)、单纯光敏剂孵育120 s组(P+T2+L-)、单纯光照组(P-L+)、PAD孵育60 s组(P+T1+L+)、PAD孵育120 s组(P+T2+L+)，光照时间均为60s。根据不同分组的处理方法对白色念珠菌悬液进行处理后接种于ChROMagar培养基，并于37℃环境下培养48 h，菌落计数以每毫升菌落形成单位(CFU/mL)表示。采用统计学方法分析结果。结果 P-L-组、P+T1+L-组、P+T2+L-组与P-L+组的对比其菌落对数的差异均无统计学意义(P>0.05)，而P+T1+L+组和P+T2+L+组与P-L-组的对比差异...     

血链球菌细菌素对白色念珠菌生物膜抑制作用的研究

目的:提取血链球菌标准株ATCC10556的有效抗菌物质细菌素,进一步研究血链球菌细菌素对白色念珠菌生物膜的作用机理.方法:通过超声破碎、盐析、sephadex G-25过柱脱盐、透析、浓缩的方法分离血链球菌细菌素,使之作用于白色念珠菌生物膜,并在2 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h观察白色念珠菌生物...     

二氢卟酚纳米光敏剂对CAL-27细胞的光动力杀伤效应

目的:研究新合成的超支化聚醚酯-二氢卟酚e6纳米光敏剂[hyperbranched poly(ether-ester)-Chlorin e6 nano-photosensitizer,HPEE-ce6]的体外光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对人舌癌CAL-27细胞(human oral tonguecancer CAL-27 cells)的杀伤作用。方法:合成HPEE-ce6后,通过激光共聚焦显微镜观察CAL-27细胞对HPEE-ce6的内摄作用。以游离二氢卟酚e6(Chlorin e6,ce6)为对照组,CAL-27细胞经激光PDT处理(630 nm连续激光照射,功率密度100 mW/cm2、能量密度12 J/cm2、光照600 s),继续孵育细胞24h后,应用MTT法检测HPEE-ce6对CAL-27细胞的光动力杀伤效率。采用SAS 6.12软件包对数据进行统计学处理。结果:HPEE和ce6共价结合,生成直径为50 nm左右的纳米粒子,HPEE-ce6以胞吞方式进入细胞,主要分布于细胞质内。MTT比色法表明,HPEE-ce6对CAL-27细胞的PDT杀伤作用显著强于ce6(P<0.05)。结论:HPEE-ce6对CAL-27细胞具有良好的光动力杀伤作用,且PDT杀伤效率高于ce6。     

重症婴幼儿龋患者口腔念珠菌与菌群的关系

目的:探讨重症婴幼儿龋患儿口腔念珠菌与菌群的关系.方法:选择2018年3月-2019年6月北京大学深圳医院治疗的重症婴幼儿龋患儿42例作为实验组,另选择来院进行口腔检查的无龋儿童40例作为对照组.分别采集各组患儿唾液、菌斑标本,进行微生物培养,将实验组组内分为白色念珠菌阴性、阳性患儿.通过高通量lllumina测序平台...     

中药-壳聚糖混合物对白念菌的抑菌效果及作为义齿稳固剂的可行性

目的 观察加入不同中药后的水溶性壳聚糖对白念菌的抑菌效果及其作为义齿稳固剂的黏结抗张强度。方法采用水煎法将6种中药提纯并烘干,配制成不同浓度,分别与壳聚糖混合,筛选最有效抑制白念菌的混合物及其最小抑菌浓度（MIC）;测定此种混合物的黏结抗张强度值,并与Protefix义齿稳固剂进行比较。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果6种中药-壳聚糖混合物中,以七叶一枝花-壳聚糖混合物抗菌效果最佳,其MIC为1.563 mg/mL;七叶一枝花的黏结抗张强度值在0 h及浸入人工唾液后12 h大于protefix义齿稳固剂,其平均值及最大值大于Protefix义齿稳固剂（P<0.05）。结论七叶一枝花-壳聚糖混合物具有良好的抑制白念菌效果及黏结抗张强度。     

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱用于口腔念珠菌菌株鉴定的准确性研究

目的： 探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS）用于口腔念珠菌菌株鉴定的准确性。方法： 本研究分为2部分,第一部分采集170例口腔念珠菌病患者唾液,使用沙保弱琼脂培养基培养48 h,MALDI-TOF MS进行菌种鉴定,以PCR检测结果为金标准,评价MALDI-TOF MS诊断的灵敏度、特异度等诊断学指标。第二部分采集42例口腔念珠菌病患者含漱液,使用液体培养基培养, MALDI-TOF MS鉴定,评价诊断准确性。采用SPSS 18.0软件包对数据进行统计学分析。结果： 纳入212例患者,分离临床菌株230株。PCR检测结果显示,白色念珠菌为最常见的口腔念珠菌（65.65%,151/230）,其次为光滑念珠菌（11.74%,27/230）。第一部分中,MALDI-TOF MS诊断白色念珠菌的灵敏度为93.33%,特异度为92.73%;诊断非白色念珠菌的灵敏度为83.64%,特异度为89.17%;对所有念珠菌菌株的诊断准确率为90.29%。第二部分结果显示,沙保弱液体培养基培养24 h,MALDI-TOF MS诊断准确率最高（78.42%）。结论： 白色念珠菌是口腔念珠菌病最常见的致病菌。MALDI-TOF MS可用于沙保弱固体培养基培养的口腔念珠菌菌种的快速鉴定,诊断准确性高于液体培养基。     

Effect of exposure intensity and post-cure temperature storage on hardness of contemporary photo-activated composites

Objectives: The effect of variation in post-exposure storage temperature (18 vs. 37°C) and light intensity (200 vs. 500 mW/cm²) on micro-hardness of seven light-activated resin composite materials, cured with a Prismetics Mk II (Dentsply) light activation unit, were studied.

Methods: Hardness values at the upper and lower surfaces of 2 mm thick disc shaped specimens of seven light-cured resin composite materials (Herculite XRV and Prodigy/Kerr, Z100 and Silux Plus/3M, TPH/Dentsply, Pertac-Hybrid/Espe, and Charisma/Kulzer), which had been stored dry, were determined 24 h after irradiation with a Prismetics Mk II (Dentsply) light activation unit.

Results: Hardness values varied with product, surface, storage temperature, and curing light intensity. In no case did the hardness at the lower surface equal that of the upper surface, and the combination of 500 mW/cm² intensity and 37°C storage produced the best hardness results at the lower surface.

Conclusions: Material composition had a significant influence on surface hardness. Only one of the seven products (TPH) produced a mean hardness values at the lower surface >80% of the maximum mean upper surface hardness obtained for the corresponding product at 500 mW/cm² intensity/37°C storage temperature when subjected to all four test regimes. Despite optimum post-cure storage conditions, 200 mW/cm² intensity curing for 40 s will not produce acceptable hardness at the lower surface of 2 mm increments of the majority of products tested.     

纯中药口腔含漱液对皮肤黏膜的刺激性及杀菌作用

目的 观察纯中药口腔含漱液对皮肤、黏膜的刺激反应及对口腔常见细菌的杀菌效果。方法 分别用自制纯中药含漱液和生理盐水对14只5个月龄家兔滴左、右眼7 d;并涂抹10只7个月龄豚鼠左、右侧臀部、腹部、背部（涂药前脱毛）,左右对照,分别于涂抹后第3、7天各处死5只,制作病理切片。分别将金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、白念菌、铜绿假单胞菌、乙型链球菌制取的菌悬液加入含不同浓度纯中药含漱液或复方硼砂含漱液（朵贝尔 液）的营养液中,观察细菌的生长情况。分别将黏性放线菌、消化链球菌、核梭杆菌制取的菌液加入等2倍稀释的复方硼砂溶液和纯中药含漱液中,观察有无细菌生长。采用 SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果 家兔右眼结膜与对照组相比,无明显充血、发红等变化;豚鼠右侧臀部、腹部、背部皮肤与对照组相比,无明显红肿、皮炎等变化。纯中药含漱液对上述需氧菌和厌氧菌的杀菌效果均显著高于对照组。结论 纯中药含漱液对皮肤、黏膜无刺激反应,对口腔常见细菌有杀菌效果。     

2种手术入路上颌窦底提升同期种植失败原因和并发症分析

目的:探讨经侧壁或牙槽嵴入路上颌窦底提升术对种植体生存率的影响,分析失败原因和并发症.方法:采用回顾性队列研究,分析2000-2015年在合肥市口腔医院口腔颌面外科就诊、由同一名医师完成上颌窦底提升同期种植的患者.主要预测变量是经侧壁入路上颌窦底提升术和经牙槽嵴入路上颌窦底提升术,混杂变量是性别、年龄、吸烟史、糖尿病史...     

根管治疗慢性根尖周炎5年预后及影响因素分析

目的:探讨慢性根尖周炎经根管治疗后的牙生存率、拔除原因、根尖愈合率及预后影响因素.方法:回顾性队列研究纳入由同一名医师完成根管治疗的102例根尖周炎患者.主要预测变量为根管治疗难度系数(difficulty assessment of root canal therapy,DARCT),即根据牙根长度、牙根弯曲度、根管...     

Effect of CO2 laser on pulpal temperature and surface morphology: an in vitro study.

Objectives: The objective of this study was to evaluate the potential effects on underlying dental hard tissues of a high pulse rate carbon dioxide (CO₂) laser that was designed for soft tissue surgery.

Methods: Eighteen extracted human teeth were sectioned longitudinally, cleaned, and varnished, leaving nine exposed windows on each: six on the coronal surface (enamel) and three on the root surface (cementum, dentin). The CO₂ irradiation conditions used were: wave length 10.6 μm; 1.2–2.6 J/cm² fluence per pulse; repetition rate 120–1000 Hz; 100–200 ms pulse duration; and cumulative fluences ranging from 14 to 2200 J/cm². Each window was irradiated with a 0.3 mm beam diameter at one of nine power settings for 0.1, 0.5, or 1.0 s. The pulp chamber temperature was measured with a microthermocouple. The irradiated teeth were evaluated by Polarized Light Microscopy (PLM) and Scanning Electron Microscopy (SEM).

Results: The pulp chamber temperature rise ranged from 0.5 to 19° C depending on the location of the window and distance to pulp chamber. SEM revealed crystal fusion in both enamel and dentin at all cumulative fluences. At cumulative fluences of 40 J/cm², 200 pulses/second and higher, measurable tissue loss was observed with PLM both in dentin and enamel.

Conclusions: These results indicate there are threshold conditions above which pulsed CO₂ laser light used for soft tissue surgery may cause detrimental changes to underlying oral hard tissue and to the pulp.     

变形链球菌luxS基因突变对口腔混合细菌生物膜的影响

目的 研究致龋菌变形链球菌luxS基因在口腔细菌混合培养形成牙菌斑生物膜中的作用。方法 将变形链球菌野生株(UA159)及其2种luxS基因突变株（luxS基因高表达株和luxS基因缺陷株）分别与口腔细菌嗜酸乳杆菌（ATCC4356）按照1∶1比例接种于牛心脑浸液培养基,体外混合培养不同时间,包括生物膜形成过程中的初期（4 h）、中期（14 h）、晚期（24 h）,通过MTT法检测混合菌在生物膜形成的量。通过激光共聚焦显微镜观察混合细菌24 h形成的生物膜结构,实时定量PCR检测变形链球菌相关基因（ftf, smu630, brpA, gbpB, gtfB, vicR, comDE和relA）的表达。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果 变形链球菌野生株及其2种luxS基因突变株与嗜酸乳杆菌混合培养14 h后,生物膜的量分别为0.481±0.024、0.591±0.023和0.279±0.019;24 h后,混合细菌形成生物膜的量趋势与该时间点一致,变形链球菌高表达株高于野生株,而缺陷株明显降低;但4 h后形成的生物膜组间无显著差异。激光共聚焦显微镜结果表明,高表达株和野生株的集聚程度更高,形成生物膜的结构更加紧密;而缺陷株生物膜菌间结构比较稀疏。以变形链球菌野生株和嗜酸乳杆菌混合形成的生物膜中相关基因的表达为标准,高表达株相关基因的表达均增加,缺陷株表达均降低,且各组间存在显著差异（P<0.05）。结论 变形链球菌luxS基因影响与具核梭杆菌混合培养形成的牙菌斑生物膜,为进一步研究该基因在生物膜中的作用及其调控机制提供了依据。     

Effects of low intensity laser irradiation phototherapy on dental pulp constructs

AIM: To investigate low intensity laser irradiation phototherapy (LILIP) on the proliferation, mineralization and degradation of dental pulp constructs. METHODS: Stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED) were grown to confluence and seeded on collagen scaffolds to create dental pulp constructs. LILIP was delivered to the dental pulp constructs using an 830 nm GaAIAs laser at an output power of 20 mW. The LILIP energy density was 0.4, 0.8, 1.2, and 2.4 J/cm². After 8 d, the cell proliferation and degradation within the dental pulp constructs were measured using histologic criteria. After 28 d, the effect of LILIP on SHED mineralization was assessed by von Kossa staining. RESULTS: SHED proliferation within the dental pulp constructs varied after exposure to the 0.4, 0.8, 1.2, and 2.4 J/cm² LILIP energy densities (P < 0.05). The maximum proliferation of SHED in nutrient deficient media was 218% after exposure to a 1.2 J/cm² LILIP energy density. SHED grown in nutrient deficient media after exposure to a 0.4, 0.8, and 1.2 J/cm² LILIP energy density, proliferated by 167-218% compared to the untreated (non-LILIP) control group (P < 0.05). SHED exposed to a 0.4, 0.8, and 1.2 J/cm² LILIP energy density, and grown in optimal nutritional conditions and proliferated by 147%-164% compared to the untreated (non-LILIP) control group (P < 0.05). The exposure of SHED to the highest LILIP energy density (2.4 J/cm²) caused a reduction of the cell proliferation of up to 73% of the untreated (non-LILIP) control (P < 0.05). The amount of mineral produced by SHED increased over time up to 28 d (P < 0.05). The 0.8 and 1.2 J/cm² LILIP energy densities were the most effective at stimulating the increased the mineralization of the SHED from 150%-700% compared to untreated (non-LILIP) control over 28 d (P < 0.05). The degradation of dental pulp constructs was affected by LILIP (P < 0.05). The dental pulp constructs grown in optimal nutritional conditions exposed to a 0.8 J/cm² or 1.2 J/cm² LILIP energy density had 13% to 16% more degradation than the untreated (non-LILIP) control groups (P < 0.05). The other LILIP energy densities caused a 1% degradation of dental pulp constructs in optimal nutritional conditions (P > 0.05). CONCLUSION: LILIP can enhance or reduce SHED proliferation, degradation and mineralization within dental pulp constructs. LILIP could promote the healing and regeneration of dental tissues.