1-甲基-2-巯基-5-(3-吡啶基)-咪唑(KC-6141)在试管内的免疫抑制作用

近来报导咪唑类的niridazole,甲硝哒唑,以及甲氮咪唑胺,可能有免疫抑制剂的作用。苯并咪唑类的miconazole在试管内可抑制PHA和PWM诱发的淋巴母细胞转化试验,本文报导另一种咪唑,1-甲基-2-巯     

稳定表达α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体GluA1亚基单克隆细胞株的构建

目的 构建稳定表达α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸（AMPA）受体GluA1亚基的细胞株。 方法 PCR扩增GluA1目的基因,并将其装载至慢病毒表达载体PLV.0-绿色荧光蛋白（GFP）,采用4质粒系统转染HEK293T细胞包装慢病毒。嘌呤霉素抗性筛选细胞,挑选单克隆细胞株用Real-time PCR、Western blotting、免疫荧光和全细胞膜片钳鉴定GluA1的表达与功能。 结果 菌落PCR鉴定扩增产物与GluA1分子量（2724 bp）一致,经测序插入慢病毒载体序列与GluA1序列一致;慢病毒感染并抗性筛选的HEK293T细胞经Real-time PCR、Western blotting和免疫荧光实验证明,GluA1在过表达GluA1组的HEK293T细胞正确表达,空载体组不表达。单克隆挑选的稳定细胞株免疫荧光染色显示,各细胞膜表面GluA1蛋白表达相对一致。单克隆细胞在电压钳模式下,细胞外液加10 mmol/L谷氨酸诱导,空载体组检测不到电信号,而过表达GluA1组可记录5~40 pA电信号。 结论 成功构建了稳定表达AMPA受体GluA1亚基的HEK293T细胞株。     

1-甲基-6,7-二羟基-1,2,3,4-四氢异喹啉的神经生物学功能研究进展

1-甲基-6,7-二羟基-1,2,3,4-四氢异喹啉(Sal)是一种儿茶酚异喹啉类物质,主要存在于哺乳动物脑内并执行多种生理功能。通过机体代谢,Sal可转变成为内源性神经毒素参与帕金森病(PD)的发生,由此引发学者的广泛关注。近年的研究显示,Sal还参与酒精成瘾的形成以及影响神经内分泌系统相关激素的释放,是潜在的多巴胺能神经元调节因子。本文从以上几方面展开探讨Sal的神经生物学功能,为深入研究其具体作用机制提供理论支持。     

支气管哮喘-性格-遗传

本文通过100个支气管哮喘家族的遗传学调查及性格测试，观察列具有遗传性家族史的支气管哮喘病员组中A型性格病员数明显多于无遗传性家族史的支气管哮喘病员，前者占总数86％，后者占总数2％，且具有遗传性家族史的支气管哮喘病员组。时间匆忙、紧迫感(TH) 争强好胜、怀戒心(CH)”、“时间匆忙、紧迫感”、“争强好胜、怀戒心”的测试值分别高于无遗传性家族史的点气管哮喘病员。前者TH为15．8、CH为14．3、TH CH为30．1，后者TH为11.7。CH为9．4、TH CH为21．1,本文又通过支气管哮喘的遗传和性格行为的遗传特性论述认为支气管哮喘的遗传过程中行为性格的参与是不可忽视的重要因素，但还须进一步进行研究来阐明支气管哮喘-性格-遗传三者的关系。     

4-溴-5-（4-甲氧苯基）-3-（甲氨基）-呋喃酮对聚氯乙烯上细菌生物膜的影响

目的观察4-溴-5-（4-甲氧苯基）-3-（甲氨基）-呋喃酮对聚氯乙烯表面表皮葡萄球菌形成的影响。方法用4-溴-5-（4-甲氧苯基）-3-（甲氨基）-呋喃酮覆盖在聚氯乙烯表面，通过体外生物膜形成实验，观察4-溴-5-（4-甲氧苯基）-3-（甲氨基）-呋喃酮对表皮葡萄球菌生物膜形成的影响。结果经4-溴-5-（4-甲氧苯基）-3-（甲氨基）-呋喃酮处理过的聚氯乙烯表面表皮葡萄球菌生物膜厚度和菌落数量少于对照组（P〈O．05）。结论4-溴-5-（4-甲氧苯基）-3-（甲氨基）-呋喃酮抑制聚氯乙烯上表皮葡萄球菌生物膜的形成。     

3-氯-4-二氯甲基-5-羟基-2（5氢）-呋喃酮对小鼠ras、wt-p53基因表达的影响

目的研究3-氯-4-二氯甲基-5-羟基-2（5氢）-呋喃酮（3-chloro-4-dichloromethyl-5-hydroxy-2（5H）-furanone,MX）对小鼠多组织的ras与野生型p53基因（wt-p53）表达的影响,从基因水平探讨MX致癌的机制。方法昆明种雄性成年小鼠,每天按21mgMX/kg的剂量经腹腔注射染毒,连续6d,生理盐水作溶剂对照。末次染毒24h后处死。运用原位杂交技术检测MX对小鼠肝、肾和小肠组织的ras基因与wt-p53基因表达的影响。结果MX染毒组小鼠的肝、肾和小肠的ras-mRNA表达水平（0.165±0.007,0.155±0.011,0.196±0.035）明显高于溶剂对照组（0.147±0.007,0.136±0.004,0.132±0.026）,且差异有统计学意义（P〈0.05）。wt-p53-mRNA表达水平在MX染毒组略为降低,但与溶剂对照组相比没有统计学意义。结论MX可诱导小鼠肝、肾和小肠组织中ras基因转录活性增强,但未能诱导野生型p53基因的异常表达。     

2-[(4-甲基-反-丙烯酸酯)苯基]-4,5-二-(4-N,N-甲基异丙基-氨基苯基)-1(H)-咪唑克服肿瘤多药耐药性作用及其机制

目的 :研究一种新化合物 2 [(4 甲基 反 丙烯酸酯 ) ] 4,5 二 (4 N ,N 甲基异丙基 氨基苯基 ) 1 (H) 咪唑 (FG0 2 0 3 2 6)对人乳腺癌细胞阿霉素耐药株 (MCF 7/adr)多药耐药性 (Multidrugresistance ,MDR)的逆转作用及其机制。方法 :采用MTT法检测药物细胞毒性作用 ,荧光分光光度计法检测该化合物对MCF 7/adr细胞及MCF 7细胞内ADM积累的影响。结果 :MCF F/adr较其相应敏感株对ADM耐药 99倍FG0 2 0 3 2 6对MCF 7/adr细胞及MCF 7细胞的IC50均大于 5 0 μm ,在≤ 1 0 μM浓度时对上述细胞无细胞毒作用 ,细胞存活大于…     

多巴胺-β-羟化酶与高血压

原发性高血压的病因和发病机理至今尚未完全阐明,交感神经系统在发病中可能参与促发和维持血压升高的作用。在儿茶酚胺(CA)生物合成中,多巴胺-β-羟化酶(DBH)促使多巴胺β位上羟化而形成去甲肾上腺素(见图1)。它在肾上腺素能交感神经系统的神经传递中起重要作用。DBH存在于肾上腺髓质嗜铬颗粒和交感神经末梢的贮存囊泡内。交     

胱硫醚-β-合成酶和胱硫醚-β-裂解酶在颈动脉体中的分布

本研究探讨胱硫醚-β-合成酶(CBS)和胱硫醚-β-裂解酶(CSE)在颈动脉体中的分布.应用组织化学技术检测CBS和CSE在颈动脉体中的表达分布并进一步用激光共聚焦对该酶在细胞中的分布进行定位研究.结果表明小鼠颈动脉体Ⅰ型上皮细胞表达CBS和CSE免疫活性,主要分布在胞浆的近细胞膜部位.结论为颈动脉体中氧感受器细胞表达CBS和CSE,提示内源性H2S可能影响颈动脉体化学感受器功能.     

11-羰基-β-乙酰乳香酸（AKBA）调节基质金属蛋白酶-1,-2,-9的活性(英文)

目的：降低创面的高MMPs活性是治疗慢性皮肤溃疡的新途径。本研究主要观察11-羰基-β-乙酰乳香酸（AKBA,中药乳香的一种活性成分）对MMP-1、MMP-2和MMP-9活性的调节作用。方法： 人间质胶原酶（MMP-1）或者明胶酶A（MMP-2）被醋酸氨基苯汞（p-aminophenylmercuric acetate, APMA)激活后,与不同浓度的AKBA共同孵育1h,通过底物裂解法观察其活性的改变。MMP-9在中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophils,PMNs)中含量丰富,因此以大鼠腹腔PMN作为MMP-9的来源。PMN裂解产物与不同浓度的AKBA共同孵育1 h,通过明胶酶谱法观察其中MMP-9活性的改变。我们建立了3个细胞模型：由TNF-α活化的人皮肤成纤维细胞模型;PMA活化的THP-1细胞模型和成纤维细胞-THP-1共培养细胞模型。AKBA与这3个细胞模型共同孵育24 h后,用ELISA法检测细胞上清中MMP-1、MMP-2和MMP-9的含量,用明胶酶谱法检测细胞上清中 MMP-2、MMP-9的活性。结果： AKBA在0.1-0.8 mmol/L浓度范围内对MMP-1、MMP-2的活性有抑制作用,IC50分别为0.18 mmol/L和0.27 mmol/L;在0.05-0.85mmol/L浓度范围内对MMP-9活性表现出不同程度的抑制作用（P<0.01）,其抑制作用呈浓度依赖性。AKBA促进成纤维细胞分泌MMP-2,但是,对THP-1细胞分泌MMP-9表现出抑制作用。在共培养细胞模型中,AKBA对MMP-1、MMP-2和MMP-9的分泌均表现出抑制作用。结论： AKBA作为乳香的一种活性成分,它对MMPs活性的直接抑制作用和对MMPs分泌的抑制作用可能是中药乳香治疗慢性皮肤溃疡的机制之一。     

(Z)-1-溴-2-(对氯苯基)-1,2-双(对甲氧苯基)—乙烯晶体结构测定

题目化合物(C_(22)H_(18)O_2Cl Br)经X-光衍射研究,确定了它的分子结构。晶体属单斜晶系,空间群P21/n,晶胞参数a=19.502,b=9.118,c=11.233;结构由MuLTAN-80(P·MAIN等1980)确定。从E—图上确定了溴原子位置。以溴原子为起始相角计算加权Fourier,在Fourier图上定出了全部26个非氢原子坐标·原子坐     

(E)-苯乙基-3-(3,5-二羟基-4-异丙基苯基)丙烯酸酯的抗炎作用及抗炎初步机制研究

目的研究(E)-苯乙基-3-(3,5-二羟基-4-异丙基苯基)丙烯酸酯(THCA354)化合物的抗炎作用及抗炎初步机制。方法通过二甲苯和佛波酯诱导的小鼠耳肿胀模型来评价THCA354的抗炎作用;进一步通过佛波酯诱导的小鼠耳肿胀模型来评价该化合物对小鼠耳组织中髓过氧化酶(MPO)的活性和IL-1β、IL-6、TNF-α炎症细胞因子的抑制作用。结果与模型组相比,局部涂抹THCA354化合物的小鼠耳朵厚度,淋巴细胞的浸润,耳组织中髓过氧化物酶活性和IL-1β、IL-6、TNF-α炎症细胞因子的表达均显著降低。结论 THCA354化合物可能通过抑制中性粒细胞的活化和IL-1β、IL-6、TNF-α炎症细胞因子的释放从而有效地缓解小鼠耳组织炎症水肿和淋巴细胞的浸润,发挥抗炎作用。     

新型N1-取代-1,8-萘啶-3-甲酰胺类ASBT抑制剂的设计、合成及活性研究

目的设计、合成新型N1-取代-7-N,N-二甲氨基-4-氧代-1,4-二氢-1,8-萘啶-3-N-(3,5-二氟苯基)甲酰胺类化合物,测定其对顶端钠依赖性胆酸转运体(ASBT)的抑制活性,考察N1位取代基对化合物活性的影响。方法以2,6-二氯烟酰乙酸乙酯为起始原料,经缩合、亲和取代、环合、水解等9步反应制备目标化合物,其结构均经质谱和核磁氢谱分析确证。以S-1647为阳性对照,利用放射性结合试验(RBA)法测定目标化合物的ASBT抑制活性。结果合成了N1-取代-7-N,N-二甲氨基-4-氧代-1,4-二氢-1,8-萘啶-3-N-(3,5-二氟苯基)甲酰胺类化合物48个,活性结果表明目标化合物均具有较好的ASBT抑制活性,其中7个化合物10b_2、10c_3、10c_6、10d_2、10d_3、10d_6和10d_7在10μmol/L浓度下对ASBT的抑制率均大于90%,抑制活性明显高于阳性对照物S-1647(76.1%)。结论目标化合物中N1位连接链的长度对活性有较大的影响,当烷基链为5～7个碳原子时化合物的ASBT抑制活性较好,其中烷基链的碳原子数为7的化合物10d的ASBT抑制活性最好;连接链末端为季铵盐取代的化合物ASBT抑制活性明显优于叔胺取代的化合物。     

1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶对食蟹猴嗅球多巴胺能神经元的影响

目的 建立食蟹猴1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)帕金森病系统性模型,探讨嗅球中多巴胺（DA）及多巴胺/cAMP调节磷蛋白（DARPP32）的表达情况。
方法 3只成年健康食蟹猴,静脉注射MPTP,建立帕金森病系统性模型,取出嗅球,切片,免疫组织化学染色DA和DARPP32,摄片并观察DA和DARPP32在食蟹猴嗅球中的分布及表达情况,采用Image Pro-Plus软件,半定量分析模型组和正常组之间DA和DARPP32的表达差异。 结果 食蟹猴嗅球中DA和DARPP32神经元集中分布于突触小球层,DA神经纤维分布于突触小球层,而DARPP32神经纤维分布于嗅球各层,以突触小球层（GL）和外网状层（EPL）最为密集。MPTP损伤后,与正常对照组比较,DA和DARPP32神经元及神经纤维均减少,以DA神经元及神经纤维减少明显。 结论 食蟹猴嗅球中DA神经元和神经纤维分布于突触小球层。食蟹猴MPTP帕金森病系统性模型的嗅球DA能神经元和纤维明显减少,可能与帕金森病嗅觉障碍有关。     

(E)-苯乙基-3-(3,5-二羟基-4-异丙基苯基)丙烯酸酯对小鼠皮炎湿疹的治疗作用初步研究

目的研究(E)-苯乙基-3-(3,5-二羟基-4-异丙基苯基)丙烯酸酯(THCA354)凝胶剂对小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的治疗作用及机制。方法通过对小鼠耳廓涂抹2,4-二硝基氟苯(DNFB)诱导建立ACD模型,测定给予DNFB刺激后24 h的耳肿胀厚度和对小鼠耳组织进行病理组织形态学分析来共同评价THCA354凝胶剂的抗过敏作用效果;采用ELISA法和RT-PCR定量检测小鼠耳组织中炎症细胞因子含量及m RNA表达水平,初步阐明其作用机制。结果与阴性对照组相比,局部涂抹THCA354的小鼠耳肿胀程度、淋巴细胞浸润程度、耳组织匀浆中促炎细胞因子含量和m RNA表达水平均显著降低,抗炎细胞因子的含量和m RNA表达水平均显著升高。结论 THCA354可能是通过改变炎症细胞因子的分泌和m RNA表达水平,调节T细胞亚群的平衡从而发挥抗过敏作用。     

14-3-3蛋白的研究进展

14-3-3是一个在真核生物中广泛表达的酸性蛋白家族,主要以同源/异源二聚体形式存在,通过磷酸化丝/苏氨酸作用与靶蛋白或靶蛋白的2个结构域结合。7种不同亚型的高度保守的14-3-3蛋白与人类细胞中多种不同的信号通路有密切的关系。14-3-3通过调节靶蛋白间的相互作用在信号转导途径中发挥调控作用。     

橄榄-桥脑-小脑萎缩一家系

先证者(Ⅲs)男，49岁，因走路不稳、构音不清12年就诊。患者于37岁开始不明原因走路不稳、经常摔跤，并说话变慢，言语不清；症状缓慢加重，渐发展双上肢动作不灵活，双手拿东西动作缓慢、发抖，同时渐感四肢无力；近3年来，双眼视物成双，右眼视力减退；近两年来，喝水发呛，有时伴有吞咽困难。查体：神情合作，言语缓慢欠清；双瞳孔等大，光反射存在，双眼不能外展，内收可，双眼外展时有水平眼震，伴有复视，     

14-3-3蛋白与凋亡

14 3 3蛋白是分布十分广泛的真核生物蛋白家族 ,在体内发挥着诸多的生物学功能。 14 3 3蛋白能够在多个通路和环节与一些调节因子相互作用 ,抑制凋亡的发生 ;14 3 3蛋白主要是通过以下几种作用方式参与凋亡的调节 :控制靶蛋白 (如Bad ,Bax ,Fkhrl 1)的亚细胞定位 ,作为接头蛋白 (如A2 0与c Raf 1)促进蛋白质 蛋白质相互作用以及调节关键酶 (如ASK1)的活性 ,但具体作用机制有待进一步研究     

信号蛋白质14-3-3研究进展

14 - 3- 3信号蛋白质家族是一组高度保守 ,分布十分广泛的多功能真核生物蛋白质 ,具有 7个亚型 ,与各种信号肽分子包括激酶、磷酸酶、膜转移受体等结合 ,参与细胞内信号传导包括有丝分裂信号转导、细胞周期调节、细胞凋亡等 ,并对朊蛋白病有重要诊断价值