miR-21通过靶向PDCD4调控三阴性乳腺癌细胞的迁移和侵袭

目的： 研究miR-21在三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达，以及其是否通过调控PDCD4影响MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭。方法： 采用实时定量PCR（qPCR）法检测MDA-MB-231细胞和正常乳腺细胞MCF-10A中miR-21和PDCD4 mRNA的表达。将MDA-MB-231细胞随机分为5组：空白对照组，转染miR-21模拟物组，模拟物对照组，转染miR-21抑制物组和抑制物对照组。采用Western blot法检测MDA-MB-231细胞PDCD4蛋白的表达；采用荧光素酶报告基因试剂盒检测转染不同载体后荧光强度的变化来判断miR-21的靶标；采用Transwell实验检测各组细胞的迁移和侵袭数目。结果： miR-21和PDCD4 mRNA在MDAMB-231细胞中的表达水平分别明显高于和低于MCF-10A细胞（P均 < 0.01）。过表达或抑制miR-21可调节PDCD4的表达水平。荧光素酶报告基因试剂盒检测结果显示miR-21可直接靶向调控PDCD4的表达。Transwell实验结果表明过表达miR-21表达能增强MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力。结论： 在MDA-MB-231细胞中，miR-21通过靶向调控PDCD4表达影响细胞的迁移和侵袭。miR-21可能成为抑制三阴性乳腺癌迁移和侵袭的靶点。     

miR-21通过靶向PDCD4调控三阴性乳腺癌细胞的迁移和侵袭

目的： 研究miR-21在三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达,以及其是否通过调控PDCD4影响MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭。方法： 采用实时定量PCR（qPCR）法检测MDA-MB-231细胞和正常乳腺细胞MCF-10A中miR-21和PDCD4 mRNA的表达。将MDA-MB-231细胞随机分为5组：空白对照组,转染miR-21模拟物组,模拟物对照组,转染miR-21抑制物组和抑制物对照组。采用Western blot法检测MDA-MB-231细胞PDCD4蛋白的表达;采用荧光素酶报告基因试剂盒检测转染不同载体后荧光强度的变化来判断miR-21的靶标;采用Transwell实验检测各组细胞的迁移和侵袭数目。结果： miR-21和PDCD4 mRNA在MDAMB-231细胞中的表达水平分别明显高于和低于MCF-10A细胞（P均 < 0.01）。过表达或抑制miR-21可调节PDCD4的表达水平。荧光素酶报告基因试剂盒检测结果显示miR-21可直接靶向调控PDCD4的表达。Transwell实验结果表明过表达miR-21表达能增强MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力。结论： 在MDA-MB-231细胞中,miR-21通过靶向调控PDCD4表达影响细胞的迁移和侵袭。miR-21可能成为抑制三阴性乳腺癌迁移和侵袭的靶点。     

miR-21靶向PDCD4对舌鳞癌细胞上皮间质转化及侵袭能力的影响

目的:探究微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)靶向程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)对舌鳞癌细胞(tonguel squamous cell carcinoma, TSCC)上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)及侵袭能力的影响。方法:qRT-PCR实验检测人口腔上皮细胞(human oral epithelial cell, HOEC)与舌鳞癌细胞系CAL-27中miR-21和PDCD4的表达水平。将miR-21 inhibitor阴性对照(NC inhibitor)、miR-21抑制剂(miR-21 inhibitor)转染至CAL-27细胞中,qRT-PCR实验检测miR-21的表达水平;采用CCK-8实验检测细胞增殖情况;采用划痕实验和Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力;采用免疫印迹法(Western blot)和qRT-PCR实验评估PDCD4、EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙...     

下调miR-21表达抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖和侵袭

背景与目的：miR-21在人类多种肿瘤中异常高表达。本研究探讨干扰miR-21表达对鼻咽癌CNE2细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法：使用脂质体将miR-21 inhibitor转染CNE2细胞,以无关序列(NC inhibitor)作为阴性对照。采用qRT-PCR技术验证miR-21 inhibitor转染的CNE2细胞中miR-21的表达水平;通过MTS法、细胞划痕、Transwell侵袭实验观察下调miR-21表达对CNE2细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果：转染miR-21 inhibitor的CNE2细胞中miR-21的表达明显下调,并且呈浓度依赖性。表明转染miR-21 inhibitor能有效抑制CNE2细胞中miR-21的表达。转染miR-21 inhibitor的CNE2细胞与对照细胞相比,增殖速度明显减慢,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞划痕实验显示,下调miR-21表达抑制CNE2细胞迁移(P<0.05)。Transwell侵袭实验结果显示,下调miR-21表达抑制CNE2细胞侵袭(P<0.05)。结论：miR-21能促进鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭,其可能在鼻咽癌的发生、发展中发挥重要作用。     

miR-21、PDCD4表达对Ⅱ期食管鳞癌术后患者生存期的影响

摘 要：［目的］ 探讨微小RNA 21（microRNA-21,miR-21）和细胞程序性死亡蛋白（programmed cell death protein 4,PDCD4）在Ⅱ期食管鳞癌术后患者癌组织中表达,分析其与临床病理特征的关系及对预后的影响。［方法］ 收集胸中段Ⅱ期食管癌术后患者标本97例,将样本组织脱蜡提取总RNA;应用实时免疫荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）法检测所有标本癌组织、癌旁组织miR-21的表达情况;免疫组化法检测测癌组织和癌旁组织PDCD4蛋白表达水平。 ［结果］ miR-21在Ⅱ期食管鳞癌术后患者癌组织中的表达较癌旁组织升高（t=12.06,P＜0.01）,PDCD4在癌组织中的表达较癌旁组织降低（t=8.36,P＜0.01）。miR-21和PDCD4在癌组织中的表达呈负相关（r=-0.41,P＜0.01）,在癌旁组织中的表达呈正相关（r=0.51,P＜0.01）。癌组织中miR-21的表达与食管鳞癌的浸润深度、淋巴结转移、内镜下病变长度呈正相关（r=0.23,P=0.02;r=0.22,P=0.03;r=0.38,P＜0.01）、与分化程度呈负相关（r=-0.60,P＜0.01）,PDCD4蛋白的表达与食管鳞癌的浸润深度、淋巴结转移、内镜下病变长度负相关（r=-0.21,P=0.04;r=-0.24,P=0.01;r=-0.37,P＜0.01）、与分化程度呈正相关（r=0.53,P＜0.01）,二者与年龄、性别、位置不相关（P＞0.05）。COX回归模型发现Ⅱ期食管鳞癌患者肿瘤浸润深度、淋巴结转移、分化程度、内镜下病变长度、miR-21表达、PDCD4表达均为影响患者PFS的因素（?字2=10.36,P=0.01;?字2=7.89,P＜0.01;?字2=6.48,P=0.02;?字2=5.32,P=0.03;?字2=9.56,P=0.01;?字2=5.40,P=0.02）。miR-21对于术后3年PFS、OS预测曲线下面积分别为73.5%、81.0%（P<0.01）;PDCD4对于术后3年PFS、OS预测曲线下面积分别为77.3%、73.2%（P<0.01）。miR-21、PDCD4高、低表达组PFS差异有统计学意义（?字2=19.6,P＜0.01;?字2=11.45,P＜0.01）,OS差异也有统计学意义（?字2=27.84,P＜0.01;?字2=21.35,P＜0.01）。［结论］Ⅱ期食管鳞癌术后患者癌组织与癌旁正常组织中miR-21、PDCD4蛋白表达存在明显差异。高表达miR-21提示预后较差,而高表达PDCD4提示预后较好。     

miR-543在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌细胞侵袭与转移的影响

目的:研究微小RNA-543（microRNA-543,miR-543）在宫颈癌组织中的表达,以及miR-543对宫颈癌细胞转移及侵袭的影响。方法:应用荧光实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)方法检测正常宫颈组织及宫颈癌组织中miR-543的表达水平。沉默宫颈癌细胞中miR-543的表达后,应用划痕实验检测miR-543对宫颈癌细胞迁移距离的影响,应用Transwell实验检测miR-543对宫颈癌细胞转移和侵袭的影响。结果:miR-543在宫颈癌组织中的表达显著高于正常宫颈组织。沉默宫颈癌细胞中miR-543的表达,宫颈癌细胞的迁移距离显著缩短、细胞转移及侵袭能力受到明显抑制。结论:miR-543在宫颈癌组织中表达升高,并可促进宫颈癌细胞转移与侵袭。     

miR-375 靶向调控YAP表达对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响

[摘要] 目的：探讨miR-375 靶向调控Yes 相关蛋白（Yes-associated protein, YAP）的表达对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法：收集2015 年1 月至2016 年12 月河南中医药大学第二附属医院普外二科行手术切除的70 例肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）患者的癌组织及对应的癌旁组织标本,以及肝癌细胞系SMMC-7721、Hb611、HepG2 和BEL-7405,用qPCR 法检测HCC癌组织和肝癌细胞中miR-375 的表达水平。双荧光素酶报告基因检测miR-375 与YAP的相互作用;分析miR-375 和HCC患者的临床病理特征之间的关系,MTT法检测miR-375 对肝癌细胞增殖能力的影响,Transwell 小室法检测抑制miR-375 表达后HCC细胞侵袭能力的变化;Western blotting 检测HepG2 细胞中YAP的表达。建立裸鼠肝癌皮下移植瘤模型,观察抑制miR-375表达后移植瘤体积和质量的变化,免疫组化法和Western blotting 检测裸鼠移植瘤中YAP的表达情况。结果：HCC组织中miR-375 和YAP表达水平明显高于癌旁组织（均P<0.05）,肝癌HepG2 细胞中miR-375 的表达水平最高（P<0.05）。miR-375 能与YAP的3’UTR特异性结合,调控YAP的表达活性。抑制miR-375 的表达后,HepG2 细胞增殖、侵袭的能力显著减弱（均P<0.05）,裸鼠移植瘤体积和质量都明显减小（均P<0.05）,移植瘤组织细胞中YAP的表达水平相应下调（P<0.05）。结论：miR-375 在肝癌的发生发展过程中起重要作用,可以通过靶向调控YAP的表达影响肝癌细胞的恶性生物学行为。     

MiR-21下调SPRY2表达对多发性骨髓瘤细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制研究

目的:探讨miR-21下调SPRY2基因表达在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)发生发展以及转移过程中的作用。方法:构建miR-21表达载体LV-anti-miR-21及脂质体转染法筛选稳定沉默SPRY2的MM细胞系。应用实时定量PCR和Western blot检测miR-21表达和SPRY2蛋白表达水平。四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)检测细胞增殖能力;流式细胞仪分析细胞周期;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果:实时定量PCR及Western blot检测结果表明:转染U266细胞后,U266/LV-anti-miR-21慢病毒MOI 20组和MOI 40组miR-21表达量较U266/un组差异明显下降(P<0.05);转染miR-21 mimics组的U266细胞SPRY2的蛋白表达量较无转染组(untreated)和阴性对照组(siRNA)明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.01)。与无转染组、阴性对照组相比:MTT法显示转染组48、72、96h细胞的生长速度明显减慢,增殖率明显下降(P<0.01);流式细胞术表明miR-21 mimics转染U266细胞48、72h后,细胞凋亡率分别为U266组[(24.7±1.97)%、(38.6±1.56)%]、siRNA组[(27.3±1.72)%、(37.3±1.59)%]和U266/miR-21组[(12.7±1.27)%、(22.1±1.63)%],与两对照组比较,U266/miR-21组细胞凋亡率明显降低,G0/G1期细胞明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。划痕实验显示转染组24、48h细胞迁移的能力明显减弱(P<0.05);Transwell实验证实转染组48、72h细胞穿过聚磷酸酯膜的U266细胞数明显减少,细胞穿膜能力明显降低(P<0.05)。结论:MiR-21下调SPRY2基因表达能够在体外条件下促进MM细胞的增殖和侵袭作用,揭示其在MM的发生、发展及转移过程中的作用及可能的机制,为确立新分子靶向治疗提供可靠的研究依据。     

miR-198靶向MAPK1调控宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡和侵袭

目的 探究miR-198对宫颈癌细胞增殖、凋亡和侵袭的作用及其机制。方法 用miR-198 mimic转染HeLa细胞,qRT-PCR检测miR-198和丝裂原活化蛋白激酶1 （Mitogen-activated protein kinase1, MAPK1）的mRNA水平;荧光素酶实验检测miR-198和MAPK1的靶向关系;用pcDNA3.0-MAPK1（pc-MAPK1）和miR-198 mimic转染细胞,CCK-8检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell法检测细胞侵袭能力,Western blot检测蛋白的表达。结果 miR-198 mimic转染细胞后,miR-198表达水平明显升高,MAPK1 mRNA表达水平明显降低;荧光素酶报告实验表明miR-198序列上存在MAPK1结合位点;miR-198过表达能显著降低宫颈癌细胞增殖倍数、诱导细胞凋亡,同时还能明显降低HeLa细胞侵袭能力;此外,miR-198 mimic能显著抑制MAPK1下游基因核糖体S6激酶2（Ribosomal S6 kinase 2, RSK2）、c-Myc和c-fos的蛋白表达;pc-MAPK1能明显减弱miR-198 mimic对HeLa细胞增殖、凋亡、侵袭及对MAPK1下游蛋白表达的调控作用。结论 miR-198过表达能通过靶向MAPK1抑制宫颈癌细胞的增殖和侵袭能力并诱导细胞凋亡。     

TLR4信号通过对miR-21的表达调控影响乳腺癌4T1细胞的凋亡和增殖

目的：探讨TLR4信号对乳腺癌4T1细胞株中miR-21表达的影响及调控机制,研究miR-21对乳腺癌细胞凋亡和增殖的影响。方法：体外培养乳腺癌细胞株4T1,以TLR4配体LPS刺激6、12、18、24 h,实时荧光定量PCR检测4T1细胞中miR-21的表达变化。Western blotting 检测TLR4信号活化后4T1细胞中NF-κBp65的表达和磷酸化情况;应用NF-κB抑制剂PDTC预处理30 min,实时荧光定量PCR检测4T1细胞中miR-21的变化。转染miR-21抑制剂和阴性对照后, Annexin-V/PI双标法检测4T1细胞凋亡情况,MTT法检测4T1细胞增殖情况。结果：LPS刺激致TLR4信号活化能够时间依赖性地上调miR-21的表达(18 h时: 207±0.33 vs 1; t=5.61, P=0.03),TLR4信号能够时间依赖性地上调NF-κB的活化,NF-κB抑制剂PDTC能明显抑制TLR4信号诱导的4T1细胞的miR-21上调(0.70±0.10 vs 2.14±0.32; t=-7.357,P=0.002)。与阴性对照组相比,miR-21抑制剂组4T1细胞的凋亡率明显增高\[(24.2±2.4)% vs (14.8±5.1)%; t=2.891, P=0.044\],4T1细胞的增殖能力明显降低(042±0.02 vs 0.55±0.01;t=-8.528, P=0.001)。结论：TLR4信号通路的活化能够上调乳腺癌4T1细胞中miR-21的表达,其机制与NF-κB的活化有关;靶向抑制miR-21能有效促进4T1细胞的凋亡、抑制4T1细胞增殖。     

Aldose reductase inhibition suppresses colon cancer cell viability by modulating microRNA-21 mediated programmed cell death 4 (PDCD4) expression

Inhibition of polyol pathway enzyme aldose reductase (AR) has been shown to prevent colon cancer cells growth in culture and in nude mice xenografts. However, the role of AR in the mediation of growth factor-induced colon cancer cells growth is not well understood. In this study, we have investigated how AR inhibition prevents tumour growth via regulation of microRNA (miR)-21-mediated programmed cell death 4 (PDCD4) expression in colon cancer cells in in vitro and in vivo. Treatment of colon cancer cells (HT29, SW480 and Caco-2) with epidermal growth factor (EGF) caused increased expression of miR-21 and inhibition of AR prevented it. Further, AR inhibition also increased PDCD4, a putative target of miR-21 in human colon cancer cells. Inhibition of AR also prevented EGF-induced phosphorylation of PDCD4. Treatment of HT29 cells with AR inhibitor, fidarestat, prevented the EGF-induced phosphorylation of mammalian target of rapamycin (mTOR), regulatory associated protein of mTOR (Raptor), eukaryotic initiation factor 4E (eIF4E), p70 S6 kinase (S6K) and eukaryotic initiation factor 4E (eIF4E)-binding protein 1 (4E-BP1) and increased the phosphorylation of 5’ adenosine monophosphate-activated protein kinase (AMPK). Similarly, in nude mice xenograft tissues, PDCD4 and 4E-BP1 levels were significantly higher in AR inhibitor-treated mice compared to controls. Collectively, these results indicate that AR inhibition prevents growth factor-induced colon cancer growth by down-regulating miR-21 expression and increasing PDCD4 levels through the reactive oxygen species (ROS)/AMPK/mTOR/AP1/4E-BP1 pathway.     

miR-520a调控RAB22A表达并抑制结肠癌细胞的增殖和侵袭

目的:探讨miR-520a对结肠癌生物学行为的影响及其对RAB22A表达的调控。方法:应用分子生物学技术构建miR-520a的表达质粒（miR-520a）及抑制剂（anti-miR-520a）,应用MTT和Transwell探讨miR-520a对结肠癌细胞株增殖和侵袭的影响。实时荧光定量PCR和蛋白印迹检测转染miR-520a对RAB22A的mRNA和蛋白表达水平的影响,构建RAB22A的野生型及突变型3'-UTR报告基因,报告基因分析miR-520a对RAB22A的调控。结果:miR-520a可以显著抑制结肠癌细胞的增殖和侵袭。蛋白印迹显示miR-520a可以显著抑制RAB22A的蛋白表达水平,而对mRNA表达无显著影响。报告基因分析显示miR-520a能够下调RAB22A的野生型3'-UTR报告基因的荧光表达,而对突变型报告基因的荧光表达影响不大。结论:miR-520a可能通过转录后调控癌基因RAB22A的表达抑制结肠癌细胞的增殖和侵袭,在结肠癌中发挥抑癌基因功能。     

miR-21通过靶基因ZNF326调控乳腺癌细胞侵袭、迁移的分子机制研究

目的:探讨微小RNA-21（miR-21）靶向锌指蛋白326(ZNF326)对乳腺癌细胞侵袭、迁移的影响及其分子机制。方法:采用qRT-PCR与Western blot法检测乳腺癌细胞株HCC70、MDA-MB-231、BT549、MDA-MB-468与正常细胞株HBL-100中miR-21与ZNF326的表达。以miR-21表达量最高的乳腺癌HCC70细胞为研究对象,分为NC组、anti-miR-con组、anti-miR-21组、pcDNA-control组、pcDNA-ZNF326组;共转染分组为anti-miR-21+si-con组、anti-miR-21+si-ZNF326组。MTT法检测细胞增殖能力,Transwell迁移及侵袭实验检测细胞迁移及侵袭能力。双荧光素酶报告基因系统验证miR-21与ZNF326的靶向调控关系。Western blot法检测CDK1、MMP-2蛋白的表达。结果:与正常细胞株HBL-100相比,乳腺癌细胞株HCC70、MDA-MB-231、BT549、MDA-MB-468中miR-21高表达,ZNF326 mRNA及蛋白表达水平均显著下降;分别与anti-miR-con组、pcDNA-control组比较,anti-miR-21组与pcDNA-ZNF326组HCC70细胞增殖能力显著下降,细胞迁移及侵袭能力明显降低,CDK1、MMP-2的表达水平明显降低;双荧光素酶实验结果表明miR-21能靶向结合ZNF326的3' UTR并调控其表达;与anti-miR-21+si-con组相比,anti-miR-21+si-ZNF326组HCC70细胞增殖、迁移及侵袭能力均明显增强,促进CDK1、MMP-2表达。结论:miR-21可靶向抑制ZNF326基因的表达,进而促进乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭。     

miR-21靶向PDCD4调控非小细胞肺癌A549细胞的增殖与迁移

目的:探讨miR-21靶向程序性细胞死亡因子4(programmed cell death factor4,PDCD4)对非小细胞肺癌(non-smallcell lung cancer,NSCLC)A549细胞增殖和迁移的影响及其作用机制.方法:采用脂质体转染技术分别将miR-21 mimics、miR-21inhi...     

miR-126通过靶向调控Crk基因抑制非小细胞肺癌细胞增殖及侵袭

目的:探究miR-126通过靶向调控Crk基因来调控非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖及侵袭.方法:应用实时定量PCR检测NSCLC组织及其癌旁肺组织中miR-126和Crk mRNA的表达.应用荧光素酶报告基因系统验证Crk是miR-126的靶基因.在NSCLC细胞转染miR-126 mimics或特异沉默Crk的s...     

Long noncoding RNA MEG3 is downregulated in cervical cancer and affects cell proliferation and apoptosis by regulating miR-21

Recent research has found that long noncoding RNAs (lncRNAs) were involved in various human cancers. However, the role of these lncRNAs in cervical cancer remains unexplored. Therefore, we aimed to investigate the biological function of maternally expressed gene 3 (MEG3), a cancer-related lncRNA, and its underlying mechanism in cervical cancer. In this study, MEG3 expression of 108 patients’ cervical cancer tissues and adjacent normal tissues was detected by quantitative real-time PCR analysis (qRT-PCR), and the functional effect of MEG3 was determined in vitro assays. We observed that MEG3 was downregulated in cervical cancer tissues, compared to the adjacent normal tissues, and was negatively related with FIGO stages, tumor size, lymphatic metastasis, HR-HPV infection and the expression of homo sapiens microRNA-21 (miR-21). Furthermore, we focused on the function and molecular mechanism of MEG3, finding that overexpression of MEG3 reduced the level of miR-21-5p expression, causing inhibition of proliferation and increased apoptosis in cervical cancer cells. In summary, our findings indicate that MEG3 function as a tumor suppressor by regulating miR-21-5p, resulting in the inhibition of tumor growth in cervical cancer. As a result, this study improves our understanding of the function of MEG3 in cervical cancer and will help to provide new potential target sites for cervical cancer treatment.     

miR-124在宫颈癌中的表达及对宫颈癌细胞增殖、迁移的影响

目的:探讨miR-124在宫颈癌中的表达,及其对宫颈癌细胞增殖、迁移的影响。方法:收集宫颈癌组织和癌旁组织各13例,qRT-PCR法检测miR-124的表达,免疫组化检测STAT3的表达。生物信息学技术预测miR-124的靶基因,双荧光素酶报告基因、qRT-PCR、Western blot实验验证。每种宫颈细胞随机分为三组,一组转染miR-124 mimics,一组不转染,一组转染miR-124 inhibitor。CCK-8实验检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果:miR-124在宫颈癌组织和细胞系中表达均降低(P均＜0.05),STAT3在宫颈癌组织中的表达明显增高(P<0.05)。STAT3是miR-124的直接靶基因,miR-124可靶向调节STAT3的mRNA和蛋白表达水平(P均＜0.05)。在Hela及Siha细胞中,miR-124 mimics转染组细胞增殖及迁移能力均降低(P均＜0.05),miR-124 inhibitor转染组细胞增殖及迁移能力均增加（P均＜0.05)。结论:miR-124在宫颈癌中低表达,可能通过靶向调节STAT3表达抑制宫颈癌细胞的增殖及迁移能力。