microRNA在骨关节炎中对关节软骨的调控作用

广泛查阅近年来国内外相关microRNA(miRNA)调控关节软骨细胞的文献,并进行总结分析,综述miRNA在骨关节炎中对关节软骨的调控作用。不同miRNA参与骨关节炎的不同水平阶段,作用于关节软骨细胞、软骨细胞外基质,或是干预软骨细胞自噬、影响软骨衰老、参与软骨形成,从而影响骨关节炎的发生发展。通过对骨关节炎中相关miRNA对关节软骨的机制研究,可为治疗或延缓骨关节炎提供新方法。     

中药诱导干细胞软骨分化的实验研究进展

关节软骨退变和其继发的骨质增生是骨关节炎（Osteoarthritis,OA）的核心病理改变。在机械性和生物性因素作用下,关节软骨细胞、细胞外基质以及软骨下骨正常合成和降解偶联失衡,关节软骨纤维化、溃疡、缺失,软骨下骨的硬化,骨赘形成和软骨下囊变,形成关节炎。膝关节是关节软骨退变最常见部位,致残率高。中医药在治疗骨关节病方面,有丰富的经验,临床疗效也较好。很多学者对中药诱导干细胞软骨分化,治疗骨关节炎的作用机理做了深入研究。本文就相关实验研究情况做一综述。     

骨关节炎关节软骨退变机制的研究进展

近年来研究表明,关节软骨退变在骨关节炎的发病中起着重要作用。软骨退变是多因素综合作用的结果 ,如关节所处的力学环境、自身激素代谢的水平、软骨细胞的凋亡、相关细胞因子及基质金属蛋白酶的作用等。阐明这些因素在关节软骨退变中的机制,将有利于提高对骨关节炎的认识,从而为临床治疗骨关节炎提供新的理论依据。     

中药保护关节软骨的作用机制研究进展

通过文献整理,从组织形态学、细胞因子、软骨细胞凋亡等多方面概述了近些年来中药在保护关节软骨方面的作用机制及研究进展,中药治疗骨关节炎主要通过减轻损伤、延缓退变及促进软骨分化和修复起作用,其机制包括:1)抑制软骨细胞炎性因子的表达及产生;2)抑制关节软骨基质金属蛋白酶表达;3)促进生长因子表达;4)促进胶原蛋白形成;5)促进关节软骨细胞增殖;6)抑制关节软骨细胞凋亡等方面。     

骨关节炎关节软骨中软骨细胞线粒体DNA缺失突变的分析

目的：分析骨关节炎病人关节软骨组织中软骨细胞线粒体DNA序列变化,探讨骨关节炎发病的潜在病理机制。方法：应用gap—PCR扩增方法检测10例骨关节炎病人和3例正常关节软骨中软骨细胞线粒体DNA的4977bp缺失突变。采用2轮PCR扩增,第1轮PCR反应以骨关节炎病人的关节软骨中软骨细胞线粒体DNA为模板;第2轮PCR扩增反应以第1轮PCR扩增反应的产物为模板,再次进行扩增。结果：第1轮PCR反应结果显示,mtDNA524bp扩增产物呈阴性,而533bp扩增产物均呈阳性;第2轮PCR扩增反应结果显示,10例骨关节炎病人病例标本中有2例出现524bp区带,而533bp扩增产物均呈阳性。两次扩增,正常关节软骨中软骨细胞和外周血对照524bp扩增产物全部为阴性。结论：骨关节炎病人关节软骨组织中软骨细胞线粒体DNA有8470～13447nt之间4977bp大片段缺失,提示骨关节炎的发病与关节软骨中软骨细胞线粒体DNA的突变关系密切。     

雌激素与女性骨关节炎

骨关节炎 (ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ ,ＯＡ)又称退行性关节病、退变性关节炎、骨关节病或增生性关节炎 ,以关节软骨发生弥漫性龟裂、纤维化和脱失及因骨组织增生性变化为特征的一组临床征候群 ,是中老年人群中最常见的关节疾病。病理基础为软骨细胞和软骨基质的退行性改变 ,最终导致关节软骨结构破坏和功能障碍。临床表现包括疼痛、关节僵直、活动受限、活动时弹响、关节渗液及关节畸形等。它是导致老年人关节功能障碍的首位原因 ,严重影响老年人的生活质量。ＯＡ发病为多因素综合作用的结果 ,如性别、年龄、肥胖、关节损伤、遗传因素…     

骨关节炎软骨细胞caveolin-1表达增高机制的探讨

目的 了解骨关节炎患者关节软骨内caveolin-1的表达情况,以及软骨降解因子自细胞介素(IL)-1β是否促进软骨细胞表达caveolin-1.方法 对8例骨关节炎患者膝关节软骨内caveolin-1基因表达的定量分析采用实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),caveolin-1蛋白的表达采用免疫组化分析.选用12周龄的雄性SD大鼠20只,通过切断膝前交叉韧带和内侧副韧带制备骨关节炎模型,术后动态观察关节软骨的病理学变化和caveolin-1的表达情况.离体培养的骨关节炎软骨细胞内caveolin-1基因表达量分别采用RT-PCR和实时RT-PCR分析,caveolin-1蛋白表达量采用Western印迹分析.结果 与关节软骨轻微损害部位相比,8例骨关节炎患者中有6例患者的关节软骨严重损害部位内caveolin-1 mRNA表达增高约2倍,另外2例无明显差异.免疫组化分析显示,上述6例患者关节软骨严重损害部位内caveolin-1蛋白的表达也增高.随着术后时间延长,大鼠骨关节炎关节的软骨逐渐出现损害,且caveolin-1的表达也持续增高.IL-1β(10 ng/ml)可以上调培养的骨关节炎软骨细胞内caveolin-1基因和蛋白表达,并可持续至少48 h.结论 骨关节炎软骨损害程度与caveolin-1的表达水平具有相关性,IL-1β可以刺激软骨细胞表达caveolin-1.提示IL-1β可能通过诱导caveolin-1表达而促进骨关节炎进展.     

大鼠实验性骨关节炎模型的建立及病理特征

目的 通过前交叉韧带切断建立大鼠骨关节炎模型并观察其病理特征,为骨关节炎的研究提供经济有效的动物模型.方法 体重200～250 g的3月龄Wistar大鼠雌雄各20只,随机选取30只作为实验对象,每只随机选取一侧膝关节作手术侧.苯巴比妥钠麻醉后常规备皮消毒膝关节,取髌旁内侧切口显露膝关节髌骨后,将髌骨向外侧脱位,尽量屈曲膝关节显露前交义韧带,在直视下切断前交叉韧带,将髌骨复位,闭合关节腔,对侧不手术作为空白对照组,大鼠不作任何固定措施,分笼饲养.另10只作为假手术对照.术后3 d每天每只大鼠肌肉注射青霉素20万单位预防感染.分别于术后2、4及8周,随机处死10只大鼠,对软骨退变情况行大体观察及光镜观察.结果 实验组2周时,关节软骨失去正常光泽,软骨面不规则;4周时,10例中有4例出现关节积液,并可见滑膜增生,软骨面粗糙糜烂,色泽灰暗;8周时,10例中有8例出现关节积液和滑膜增生,软骨面不规则,出现溃疡甚至软骨缺损,软骨下骨质裸露.光镜下改变:2周后,可见软骨表面原纤维形成,表层软骨细胞肿胀变圆,扁平的软骨细胞减少,软骨细胞簇集,基质番红花红O-固绿染色开始出现减退.4周后,软骨表面原纤维形成明显,表层及中层细胞收缩,细胞数量弥漫性增多,出现大量簇集细胞团,潮线紊乱,基质番红花红O-固绿染色明显减退.滑膜出现增生.8周后病变进一步加重,大部分软骨的表层细胞消失,软骨表面出现溃烂缺损,软骨细胞数量减少,可见坏死崩解细胞,潮线紊乱甚至消失,番红花红O-固绿染色重度减退甚至消失.滑膜亦见明显增生肥厚,出现单核淋巴细胞浸润.结论 前交叉韧带切断能诱发大鼠骨关节炎的发生,其病理改变随时间增加而加重.     

前交叉韧带损伤后炎症因子致膝关节创伤后骨关节炎的研究进展

]膝关节创伤后骨关节炎是一种常见的膝关节软骨退变性疾病,前交叉韧带损伤是其常见的发病原因之一。前交叉韧带损伤可通过刺激炎症因子生成,诱导细胞凋亡,破坏软骨细胞外基质,降解基质中的Ⅱ型胶原蛋白和蛋白多糖,减少膝关节软骨细胞数量,最后导致膝关节创伤后骨关节炎发生。因此,深入了解前交叉韧带损伤后炎症因子在膝关节创伤后骨关节炎发生发展中的具体作用机制,可为临床膝关节创伤后骨关节炎的诊断和治疗提供指导。     

骨关节炎软骨细胞凋亡率的实验研究

目的检测和分析髋关节骨关节炎中软骨损伤轻重部位的软骨细胞凋亡率。方法关节软骨组织切片分别进行HE染色，番红O-固绿染色，Mankin评分评价软骨损伤程度，TUNEL方法检测软骨细胞凋亡率。结果关节软骨损伤重的部位的Mankin评分值及软骨细胞凋亡率均高于软骨损伤轻的部位。结论软骨细胞凋亡率与骨关节炎软骨损伤程度相一致，说明细胞凋亡可能是骨关节炎软骨损伤的机制之一。     

ULTRASTRUCTURAL INVESTIGATION OF EXPERIMENTALOSTEOARTHRITISA TRANSMISSION ELECTRON MICROSCOPIC STUDY

The anterior crucial ligament and medial collateral Iigament of the left knee joint in 32 New Zea- 1and rabbits were sectioned. The resulting joint in stability led to osteoarthritis of the knee joint. Trans mission electron microscopic study revealed that dur- ing the course of development of osteoarthritis there were changes in the part of both the articular car tilage matrix and the cells. The matrical changes comprised those in size and orientation of the col lagen fibrils and in proteoglycans. The cellular changes involved proliferation, degeneration and those in configuration of the cells. AlI these changes varied with different localities of the articular cartilage and with the time of articular instability.     

退行性膝骨关节炎的影像学对比分析

目的探讨X线、B超、CT检查方法在退行性膝骨关节炎检查应用中的价值对比。方法以41例膝骨关节炎住院患者为研究对象,观察其X线、B超和CT检查的图像,分别对比骨质增生、骨质疏松、滑膜增厚、半月板变性、韧带病变、关节间隙狭窄、关节软骨、关节积液和髌下脂肪垫等的变化在不同检查方法中的显示情况。结果 X线平片对膝关节间隙改变26例、骨赘生成30例和胫骨髁间棘增生37例显示最好;B超对于关节积液24例、滑膜改变38例、髌下脂肪垫的改变34例、关节软骨变性15例、半月板变性16例较敏感;CT检查对关节面下假囊肿35例、关节骨质疏松21例、关节积液22例显示良好。结论综合各种影像检查技术的优势,恰当地选择最简便的检查方法。     

缺血再灌注后股骨头骺关节软骨的形态学观察

目的对发育期髋关节缺血再灌注后股骨头骺关节软骨的形态学变化进行观察。方法80只4周龄sD大鼠随机分为缺血再灌注组及对照组，开腹暴露腹主动脉并关闭3h，制作髋关节缺血-再灌注模型，于术后不同时点取股骨头骺关节软骨进行透射电镜观察。结果缺血再灌注组术后光镜观察到关节软骨的退行性改变，透射电镜观察到膜性细胞器的损害及软骨基质成分的变化，表现为结构模糊、线粒体肿胀、内质网扩张、核蛋白体及糖原颗粒减少，软骨基质胶原纤维增粗、间质颗粒减少、钙盐沉积增多。结论发育期髋关节缺血再灌注后股骨头骺关节软骨的损害表现为一定程度的退行性改变，缺血再灌注后超微结构的损害是关节软骨退行性改变的基础，抑制再灌注损伤可能有利于防止发育期关节软骨的退行性改变。     

降钙素对兔膝骨性关节炎关节软骨细胞凋亡及NO含量的影响

目的:探讨降钙素对兔膝骨性关节炎关节软骨细胞凋亡及NO含量的影响。方法:将36只健康大耳白兔随机分为空白对照组(A组)、模型组(B组)和CT治疗组(C组),B、C两组采用改良Hulth法复制膝骨性关节炎模型,A组除切开皮肤和关节腔外,不做其他处理,从术后第6周开始C组每天皮下注射CT 5u/kg,A、B组给与等量生理盐水皮下注射,连续注射20d后处死动物。观察降钙素对兔膝骨性关节炎关节软骨病理形态、关节软骨细胞凋亡情况及NO含量的影响。结果:与A组相比较,B组JP和Mankin’s评分明显升高,关节软骨损伤明显加重,血清及关节液NO含量和软骨细胞凋亡百分数均明显升高;与B组比较,C组JP评分和Mankin’s评分明显降低,软骨损伤明显减轻,血清及关节液NO含量和软骨细胞凋亡百分数均明显降低。结论:CT可能通过降低NO含量而减轻KOA的软骨损伤,对KOA起治疗作用。     

关节腔注射三氧对兔膝骨性关节炎病理改变的影响

目的通过建立兔膝骨性关节炎的模型,了解膝关节腔注射三氧对骨性关节炎软骨病理改变的影响。方法成年新西兰兔40只随机分为5组,每组8只,即正常对照组（A组）,模型对照组（B组）,20μg／ml三氧治疗组（c组）,40μg／ml三氧治疗组（D组）,60μg／ml三氧治疗组（E组）。采用Videman法对B、c、D、E组家兔进行兔膝骨关节炎模型复制。造模6周后将空气1ml注入B组家兔左膝关节腔内作为对照,将20、40、60μg／ml浓度的三氧1ml分别注入C、D、E组兔左膝关节腔内,每3d1次,治疗2次后,处死动物,观察兔膝关节软骨形态学变化及进行病理积分统计。结果B组肉眼外观及病理显示关节软骨有明显破坏,病理积分较A组明显升高（P〈0．01）,C、D两组病理改变较B组显示关节软骨有所修复,病理积分较B组降低（P〈0．05）,E组与B组比较病理改变无明显变化,病理积分的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论20、40μg／ml浓度的三氧关节腔注射可促进早期兔膝骨性关节炎关节软骨的修复,有利于减轻及阻止骨性关节炎的发展;而60μg／ml浓度三氧关节腔内注射对已损伤的软骨无修复作用。     

2479例膝关节镜手术患者关节软骨损伤的流行病学分布特征

目的调查分析膝关节软骨损伤的临床流行病学特征。方法收集2005年10月至2009年12月本中心2 479例膝关节镜手术患者视频及病历资料,分析不同程度关节软骨损伤的病例构成比、性别比、平均年龄与分布、发生部位与数量及常见与高发疾病的分布。结果关节软骨损伤者占55.1%,与无软骨损伤者比较,性别构成差异无统计学意义(P>0.05),年龄(41.31±15.88)岁,30~59岁为高发年龄段;右膝多于左膝(P<0.05),好发部位为股骨滑车、胫骨外侧平台、髌骨;其常见疾病为半月板损伤、交叉韧带损伤、原发性OA,高发疾病为关节结核、类风湿性关节炎、关节僵直和粘连、髌骨轨迹异常。关节软骨损伤病例中Ⅰ~Ⅳ级者分别占27.45%、29.94%、14.71%、27.89%,各级别损伤者的性别比、平均年龄与分布、损伤部位与数量均存在统计学差异(P<0.05)。结论膝关节软骨损伤十分常见,患者年龄分布范围大,中青年为主要人群,性别构成比相近。不同程度、不同疾病关节软骨损伤病例性别构成比不同,不同程度软骨损伤病例年龄分布特征不同。     

正常关节和骨关节炎软骨细胞凋亡和超微结构的研究

目的 探讨正常关节和骨关节炎（OA）软骨细胞凋亡和超微结构的变化,以及正常关节和OA关节软骨细胞体外培养的凋亡来分析骨关节炎可能的发病机制。方法 胡氏造模法制作新西兰大白兔OA模型,3周后切取关节软骨,末端原位标记染色法分析正常关节软骨,骨关节炎软骨的细胞凋亡。分离关节软骨细胞体外培养,然后通过钙黄绿素和双FITC-AI双染色,分析软骨细胞的活力和凋亡情况,同时切取关节软骨细胞行透射电镜分析软骨细胞中一些超微结构的变化。结果 发现OA组软骨中凋亡细胞（14.32±3.17）比正常组（4.54±1.17）明显增多,两组间比较差异有统计学意义（t''=15.85,P<0.05）;而体外培养的软骨细胞中,OA组分离的软骨细胞存在大量凋亡细胞（83.63±20.11）和正常组（91.45±4.70）比较,差异有统计学意义（t''=2.07,P<0.05）。OA组部分软骨细胞的活力明显增强,OA组为79.45±3.60,正常组为75.60±5.33（t=3.28,P<0.01）。在超微结构的研究中,发现大量软骨细胞内的超微结构,有明显的变化,特别是线粒体在正常组为7.3±2.3,而OA为3.4±1.7,明显减少,比较差异有统计学意义。OA组染色质边缘化,空泡化和分布异常也非常明显。结论 在OA模型中,存在软骨细胞大量凋亡现象,通过超微结构现象分析凋亡细胞增多同时存在染色质的减少和分布异常,以及一些细胞小体的减少,可能和软骨细胞能量过度代谢和线粒体的减少等有密切的关系。     

骨性关节炎相关滑膜炎症研究进展

骨性关节炎 (osteoarthritis, OA) 是影响滑膜关节 (膝, 髋, 手指远端, 脊柱关节) 的常见慢性退行性疾病, 病变常常影响整个关节组织, 以关节软骨的降解、关节边缘骨赘形成和滑膜病变为特征。以往的研究和治疗重点大多在关节软骨病变, 而越来越多的研究显示滑膜的炎性病变在骨性关节炎整个病程中起重要作用, 滑膜炎症以及与滑膜相关的致炎因子诱导的关节软骨的降解和破坏, 促进了骨性关节炎的发展。滑膜病变在骨性关节炎的发生发展中扮演了重要角色, 因此, 滑膜炎症可以作为骨性关节炎治疗的一个关键靶点。     

Subchondral thickness does not vary with cartilage degeneration on the metatarsal

Osteoarthritis is a disease of synovial joints that involves articular cartilage breakdown with accompanying bone changes, including subchondral sclerosis and osteophytosis. However, conflicting data have been reported concerning the cause-and-effect relationship, if any, between these changes. The authors studied the subchondral plate (subchondral bone plus calcified cartilage) in relation to the degree of articular cartilage degeneration on the distal articular surface of the first metatarsal, a region prone to osteoarthritis. No correlation was found between subchondral plate thickness or porosity and the degree of cartilage degeneration in the study sample of 96 metatarsals. Owing to the suggestion that initiation of cartilage fibrillation may be a result of steep stiffness gradients in the subchondral bone, the ratios of subchondral plate thickness in adjacent regions of the metatarsal head were examined in detail, but no correlation was found with subchondral degeneration. Thus increases in subchondral bone thickness are not associated with increases in cartilage degeneration on the first metatarsal, which may imply that subchondral bone changes do not cause osteoarthritis in this joint.     

瘦素对骨关节炎大鼠关节软骨转移生长因子β表达的影响

目的观察瘦素在外周对骨关节炎模型大鼠关节软骨中转移生长因子β表达的影响。方法将60只7周龄雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、骨关节炎对照组(模型组)、骨关节炎实验组(观察组),每组20只,观察组大鼠膝关节中注射100μg瘦素后,取胫骨平台,用反转录-聚合酶链式反应法及免疫组织化学法检测胫骨平台关节软骨中瘦素及转移生长因子β(TGF-β)的变化。结果观察组大鼠胫骨平台关节软骨瘦素、TGF-βmRNA水平与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05),模型组、观察组大鼠胫骨平台关节软骨瘦素、TGF-βmRNA水平均较对照组增高(P<0.05)。模型组和观察组大鼠胫骨平台关节软骨瘦素、TGF-β免疫组织化学灰度均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而模型组与观察组大鼠比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论瘦素在外周对关节具有保护作用,在骨关节炎的病理生理过程中起重要作用。