鳖甲煎丸对H22荷瘤小鼠肿瘤血管抑制作用的研究

目的:研究鳖甲煎丸对H22荷瘤小鼠肿瘤血管的抑制作用。方法:建立H22荷瘤小鼠动物模型,随机分成四组:鳖甲煎丸高剂量组、鳖甲煎丸低剂量组、阴性对照组、环磷酰胺组。连续用药15 d。第15天处死小鼠,固定瘤块,HE染色,光镜观察并计算各组荷瘤小鼠肿瘤的微血管计数(MDC);用免疫组织化学方法检测各组荷瘤小鼠肿瘤组织的血管内皮生长因子(VEGF)及其表达强度。结果:鳖甲煎丸对H22荷瘤小鼠肿瘤组织的MDC及VEGF有显著抑制作用。结论:鳖甲煎丸抑瘤作用机制之一可能是通过抑制肿瘤组织的血管生成实现的。     

鳖甲煎丸对荷瘤小鼠抑瘤作用及其对胸腺、脾指数影响的实验研究

目的：研究鳖甲煎丸对荷瘤小鼠抑瘤作用及其对胸腺指数、脾指数的影响。方法：分设鳖甲煎丸高、低剂量组,分别对H22荷瘤小鼠连续15d灌胃给药后,测其抑瘤率及胸腺指数、脾指数,并与环磷酰胺组比较。结果：鳖甲煎丸高剂量组抑瘤率达到31．8％,治疗后瘤重明显低于阴性对照组,体重、胸腺指数、脾指数情况明显优于环磷酰胺组。结论：鳖甲煎丸不仅可抑制肿瘤生长,还对胸腺、脾脏有保护作用,在抗肿瘤方面具有广阔的前景。     

鳖甲煎丸对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及对VEGF表达的影响

经方鳖甲煎丸为医圣张仲景所创,原用于治疗“瘕瘕”、“疟母”病证。由于该方具有寒热并用、攻补兼施、行气化瘀、软坚散结之功,目前广泛应用于肝癌、胃癌及卵巢囊肿等疾病。但因该方用药味数多,许多药物临床罕用,且制剂独特,所以对该方的研究仅限于临床病案报道,缺乏现代科学依据,势必妨碍其进一步推广运用。     

鳖甲煎丸化裁对肝癌22荷瘤小鼠抗肿瘤作用的实验研究

目的：研究鳖甲煎丸化裁对肝癌22荷瘤小鼠动物模型肿瘤抑瘤率、T淋巴细胞亚群的影响。方法：建立肝癌22荷瘤小鼠动物模型，随机分为5组，鳖甲煎丸化裁高剂量组、鳖甲煎丸化裁中剂量组、鳖甲煎丸化裁低剂量组、生理盐水组、正常组。通过测定荷瘤小鼠的瘤重、抑瘤率观察鳖甲煎丸化裁对肿瘤生长的影响；通过对荷瘤小鼠血液中T淋巴细胞亚群的变化来观察鳖甲煎丸化裁对其机体的免疫调节效应；通过对本实验各种指标的观察和研究来讨论鳖甲煎丸化裁高、中、低3个剂量在治疗肝癌22荷瘤小鼠动物模型肿瘤作用中的差异及优劣程度。结果：鳖甲煎丸化裁能使肝癌22荷瘤小鼠的瘤重减小，抑制肿瘤的生长，高、中、低组的平均抑瘤率分别为56．66％、48．11％、40．88％；鳖甲煎丸化裁高、中、低剂量组荷瘤小鼠血液内的CD4百分率、CD4／CD8比值均高于生理盐水组（P〈0．05），尤其中剂量组效果尤为突出；另外，鳖甲煎丸化裁中剂量组对荷瘤小鼠肿瘤包膜完整性控制最好。鳖甲煎丸化裁中剂量是对肝癌抑制及治疗作用的具体、有效、安全的优先剂量。结论：鳖甲煎丸化裁能明显抑制肝癌22荷瘤小鼠肿瘤的生长，其作用机制可能是增强荷瘤小鼠的体液免疫功能和细胞免疫功能。     

鳖甲煎丸对肝癌荷瘤小鼠细胞免疫功能的干预作用

目的:观察鳖甲煎丸对肝癌荷瘤小鼠肿瘤细胞免疫功能的影响。方法:将50只小鼠分成实验组和正常组,对实验组小鼠进行肝癌荷瘤小鼠造模后,分为模型组和鳖甲煎丸高、中、低剂量组,连续灌胃给药15d。流式细胞仪对荷瘤小鼠外周血中CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞和CD4+T/CD8+T进行测定;采用ELISA法检测荷瘤小鼠外周血中白细胞介素-2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的水平。结果:鳖甲煎丸可使荷瘤小鼠外周血中CD4+T淋巴细胞显著增加(P0.01),CD8+T淋巴细胞亚群的比例显著下降(P0.01),CD4+T/CD8+T升高显著(P0.01);同时,鳖甲煎丸还可以提高肝癌荷瘤小鼠血清IFN-γ水平(P0.01)和血清IL-2水平(P0.01)。结论:鳖甲煎丸抑制肝癌生长的作用可能是通过提高肝癌荷瘤小鼠外周血中CD4+T细胞亚群的比例和降低CD8+T细胞亚群的比例,来纠正CD4+T/CD8+T的失衡,改变Th1/Th2漂移现象,维持Th1功能亚群的优势来实现的。     

鳖甲煎丸对免疫性肝纤维化大鼠肝组织HGF表达的影响

目的:观察鳖甲煎丸对免疫性肝纤维化模型大鼠肝组织肝细胞生长因子(HGF)表达的影响,分析鳖甲煎丸抗肝纤维化的治疗作用并探讨其作用机制.方法:雄性Wistar大鼠90只,随机分为6组:正常对照组、模型组、秋水仙碱预防组、秋水仙碱治疗组、鳖甲煎预防组、鳖甲煎治疗组,采用猪血清诱导免疫损伤性肝纤维化模型.各组于10周后随机取8只大鼠断头处死,取血清,检测血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C);取肝组织,免疫组化染色,用图像分析法检测HGF.结果:各预防组、治疗组血清HA,LN,PCⅢ,Ⅳ-C含量均明显降低(P＜0.01或P＜0.05),但以鳖甲煎预防组、治疗组降低最为明显;各预防组、治疗组大鼠肝脏组织HGF均有表达(P＜0.01或P＜0.05),鳖甲煎预防组、治疗组比秋水仙碱组的表达更为明显.结论:鳖甲煎丸能够抑制肝脏纤维化病理改变,增加HGF的表达,具有明显的抗肝纤维化作用.     

鳖甲煎丸对肝癌荷瘤小鼠肿瘤组织生长及转移的影响

目的:观察中药鳖甲煎丸对肝癌荷瘤小鼠肿瘤组织生长及转移的影响.方法:小鼠肝癌荷瘤小鼠分为模型组、环磷酰胺组(0.02 g·kg-1)和鳖甲煎丸高、中、低剂量组(3.699,1.233,0.411 g·kg-1),连续ig15 d后断颈椎处死小鼠,钝性分离肿瘤组织,多聚甲醛固定,应用免疫组化法检测血管内皮细胞生长因子( VEGF)及其受体Flt-1的表达.采用MIAS医学图像分析系统计算VEGF,Flt-1平均阳性面积百分率及计算每100个肿瘤细胞中的阳性细胞数.结果:VEGF阳性面积鳖甲煎高、中、低剂量为(2.28±0.53)％,(2.76±0.56)％,(3.26±0.46)％,模型组为(6.20±0.78)％,VEGF阳性细胞数鳖甲煎高、中、低剂量为(29.12±1.53),(30.95±1.02),(32.64±2.08)个,Flt-1阳性面积鳖甲煎高、中、低剂量为(1.35±0.78)％,(1.96±0.36)％,(2.78±0.73)％,模型组为(5.20±0.48)％,Flt-1阳性细胞数鳖甲煎高、中、低为(19.45±1.03),(21.85±1.82),(22.78 ±1.18)个,模型组为(27.38±1.23)个,鳖甲煎丸高、中、低剂量组VEGF,Flt-1染色强度较模型组明显下降(P＜0.01).结论:鳖甲煎丸可能通过抑制肿瘤组织中VEGF的高表达及下调其受体Flt-1的表达抑制肝癌的侵袭和转移.     

鳖甲煎丸治疗肝癌体会

原发性肝癌是原发于肝细胞或者肝内胆管上皮细胞的恶性肿瘤,是我国最常见的恶性肿瘤之一。全世界每年新发病的肝癌约45%发生在我国大陆地区,每年约有12万人死于肝癌,占全世界恶性肿瘤死亡率的第3位。由于肝癌起病隐匿,恶性程度高,发展变化快,患者就诊时往往已进入中晚期,失去了最佳手术时机。有     

鳖甲煎丸抗肿瘤血管生成的实验研究

鳖甲煎丸出自东汉医家张仲景所著<金匮要略>,是破瘀化痰,扶正消症之剂.据报道鳖甲煎丸在治疗肝癌、食道癌、白血病、子宫肌瘤等方面有较好的疗效.分析鳖甲煎丸的药物组成,以破血、化瘀、散结之品为多.     

VEGF与PCNA在翼状胬肉中的表达

目的探讨VEGF与PCNA在翼状胬肉中的表达。方法应用免疫组化法检测30例翼状胬肉组织和30例正常结膜中VEGF与PCNA的表达。结果 30例翼状胬肉中VEGF和PCNA的阳性表达IHS分别为4.70±1.74,6.23±1.43;30例正常结膜中VEGF和PCNA的阳性表达IHS分别为1.90±0.71,2.13±0.82。VEGF、PCNA阳性表达在翼状胬肉与正常结膜两组间差异有统计学意义(P0.01)。结论 VEGF、PCNA在翼状胬肉中的高表达,提示翼状胬肉组织血管活性、增殖活性增强。     

鳖甲煎丸对HUVEC增殖及HepG2中VEGF表达的影响

目的:通过研究鳖甲煎丸对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vascular endothelial cell,HUVEC)增殖及肝癌细胞系HepG2中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,探讨其抗肝细胞癌血管生成的机制。方法:将24只6周龄Wistar大鼠随机分为3组(8只/组),分别以临床剂量20,10倍的鳖甲煎丸水溶液及生理盐水ig 3d,3 d后采血,离心,获取血清。用含有不同浓度HepG2培养上清的条件培养基培养HUVEC,48 h后用MTT比色法检测HUVEC的增殖情况并确定条件培养基的最适浓度。用该浓度的条件培养基培养HUVEC,分别于48,72 h后采用MTT比色法检测药物血清对HUVEC增殖的影响。用含药血清培养HepG2,48 h后采用ELISA方法检测培养液上清中VEGF的浓度,采用qRT-PCR法检测VEGF mRNA的表达情况。结果:鳖甲煎丸高、中剂量组10%药物血清能够显著抑制HUVEC的增殖,这种抑制作用具有浓度和时间依赖性。鳖甲煎丸高、中剂量10%药物血清组中VEGF浓度与VEGF mRNA表达水平均明显下降,并且下降程度与药物浓度有关。结论:鳖甲煎丸能够抑制HUVEC的快速增殖并且显著地降低HepG2中VEGF的表达水平。研究表明鳖甲煎丸在抗肝细胞癌血管生成方面具有一定作用。     

槐米提取物对小鼠Lewis肺癌移植瘤细胞周期和PCNA表达的影响

目的研究槐米提取物对小鼠 Lewis肺癌移植瘤细胞周期和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,探讨槐米提取物对肺癌细胞增殖的抑制作用及其机制.方法建立 Lewis肺癌的小鼠模型,以不同剂量的槐米提取物在移植前后连续灌胃,顺铂治疗采取腹腔注射给药方式.给药结束后,测定各组小鼠瘤重,计算抑瘤率;用流式细胞仪分析细胞周期分布;用免疫组化方法测定 PCNA表达水平.结果与模型对照组比较,槐米提取物高剂量组、中剂量组能显著性抑制小鼠 Lewis肺癌移植瘤生长,槐米提取物中剂量 顺铂治疗组的作用更加显著.小鼠 Lewis肺癌移植瘤的 G0/G1期细胞比例明显增加,S期细胞比例明显减少;PCNA指数明显降低.结论槐米提取物对小鼠 Lewis肺癌移植瘤生长有明显的抑制作用,其机制可能与槐米提取物对肿瘤细胞周期和 PCNA表达水平的调控有关.槐米提取物与顺铂联合使用,对肿瘤抑制作用明显增强.     

养正消积胶囊对胃癌组织PCNA, p53蛋白,VEGF表达的影响

目的:探讨养正消积胶囊对胃癌组织增殖细胞核抗原(PCNA),p53蛋白,血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:治疗组运用养正消积胶囊联合化疗,对照组单纯化疗,用药6个月,治疗前后均以免疫组化S-P法进行PCNA,p53蛋白,VEGF的检测。结果:两组PCNA,p53,VEGF的表达均明显降低(P<0.01),治疗后治疗组PCNA,p53,VEGF分别为(33.16±12.6)%,(41.35±11.4)%,(42.16±13.61)%,对照组PCNA,p53,VEGF分别为(63.20±15.3)%,(59.15±11.9)%,(63.19±12.47)%,两组相比有统计学差异(P<0.01),治疗组改善优于对照组。结论:养正消积胶囊能明显抑制PCNA,p53蛋白,VEGF表达,进一步阻止逆转胃黏膜上皮的恶性表型,起到抗癌作用。     

VEGF、PCNA、P21、P53在翼状胬肉中的表达

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）、增殖细胞核抗原（PCNA）、P21蛋白和P53蛋白在翼状胬肉中表达的。方法免疫组化法检测50例进行期翼状胬肉标本（翼状胬肉组）和50例正常结膜标本（正常对照组）中VEGF、PCNA、P21蛋白、P53蛋白的染色强度及染色阳性率,以免疫组化评分（IHS）表示免疫组化表达的强弱。对结果进行比较及统计学分析。结果VEGFIHS数值：翼状胬肉组4．71±1．74,正常对照组1．91±0．71（P=0．001）。PCNAIHS数值：翼状胬肉组6．24±1．32,正常对照组2．11±0．83（P=0．001）。P53蛋白IHS数值：翼状胬肉组5．21±1．02,正常对照组2．01±0．63（P=0．001）。P21蛋白IHS数值：翼状胬肉组2．14＋0．72,正常对照组6．01±1．11（P=0．001）。结论VEGF、PCNA、P21蛋白和P53蛋白均在翼状胬肉中有异常表达,VEGF、PCNA和P53蛋白为高表达,P21为低表达。     

蜈蚣败毒饮对小鼠阴道上皮增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响

目的:研究蜈蚣败毒饮对银屑病模型小鼠的影响,探讨蜈蚣败毒饮治疗寻常型银屑病的机理,为临床治疗银屑病提供实验依据。方法:采用雌化小鼠阴道上皮作为模型,复方青黛丸为阳性对照组,设生理盐水组、正常对照组、蜈蚣败毒饮低、中、高剂量组和复方青黛丸组,观察蜈蚣败毒饮对小鼠阴道上皮增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。结果:蜈蚣败毒饮高剂量组表达最弱,生理盐水组表达最强,中药各组表达强度依次是:高剂量中剂量低剂量。正常组未见增强,PCNA阳性细胞低表达。结论:中药蜈蚣败毒饮能显著抑制小鼠阴道上皮增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,抑制作用呈一定的量-效依赖关系。     

扶正消癌Ⅰ号方对小鼠肠癌肝转移血管内皮生长因子的表达的影响

目的:观察自拟扶正消癌Ⅰ号方对balbc小鼠移植瘤血管内皮生长因子(VEGF)表达的作用,探讨该方对多种肿瘤的作用机制。方法:采用balbc小鼠,脾下注射法建立鼠大肠癌细胞株肝转移的动物模型,随机分为4组,每组12只:1)阴性对照生理盐水组;2)氟尿嘧啶组;3)扶正消癌I号方中药组;4)扶正消癌I号中药+氟尿嘧啶组。观察生活质量,抑瘤率,免疫组化方法检测VEGF蛋白表达的情况。结果:扶正消癌Ⅰ号方+氟尿嘧啶组、消癌Ⅰ方组小鼠的生活质量较其他2组好,阴性对照组瘤体最大,瘤体中药组其次,联合用药组体积最小,氟尿嘧啶组、中药组及联合用药组均能下调VEGF蛋白的表达。结论:扶正消癌Ⅰ号方对鼠大肠癌细胞株肝转移小鼠抑制新生血管的作用机制可能是通过下调VEGF的表达,抑制肿瘤微血管生成,可能是该方抗肿瘤的机制之一。     

桑桂通痹剂对胶原诱导关节炎小鼠病理形态学及血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶3的影响

目的观察桑桂通痹剂对胶原诱导关节炎（CIA）模型小鼠踝关节血管翳数目、关节炎指数及血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶3（MMP-3）的影响,探讨其作用靶点。方法将50只DBA／1J小鼠随机分为正常纽、模型组、桑桂通痹剂组、甲氨蝶呤组、雷公藤多甙片组,除正常组之外,其余各组使用II型胶原诱导小鼠造成CIA模型,桑桂通痹剂组、甲氨蝶呤组、雷公藤多甙片于造模后开始给药,共计28d。按评分法评价关节炎指数,病理观察小鼠踝关节血管翳数目,免疫组化法检测VEGF、MMP-3蛋白表达。结果桑桂通痹剂组可降低模型小鼠的关节炎指数;减少由滑膜细胞和毛细血管增生所形成的血管翳数目,VEGF、MMP-3表达也有所降低。结论桑桂通痹荆可能是通过抑制VEGF、MMP-3表达,减少模型小鼠的关节炎指数和血管翳数目,从而起到治疗作用。     

温下肠腑方对Lewis肺癌PCNA、p16、CyclinD1蛋白表达的影响

目的 观察温下肠腑方对Lewis肺癌移植瘤的抑制作用及对PCNA、p16、cyclinD1表达的影响.方法 :C57BL/6小鼠皮下接种Lewis肺癌,随机分为4组,即模型组,化疗组,温下方组和综合治疗组,化疗组和综合治疗组DDP 0.1 mg腹腔注射3 d,温下方组和综合治疗组中药灌胃10 d.计算抑瘤率,免疫荧光组织化学方法,激光共聚焦显微镜观察PCNA、p16、cyclinD1的表达.结果 温下方组抑瘤率为34.5%,平均瘤重低于模型组(P＜0.05);温下方组、综合治疗组和化疗组PCNA、cyclinD1表达明显低于模型组(P＜0.05),其余各组无显著差异.结论 温阳除滞法为主的温下肠腑方有一定的抑制肺癌生长的作用,且与顺铂有协同作用,温下肠腑方可能通过对PCNA、cyclinD1的抑制,从而抑制肿瘤生长.     

微波热凝联合慢咽合剂治疗慢性肥厚性咽炎疗效观察及对咽部病损组织PCNA表达的影响

目的:观察微波热凝联合慢咽合剂治疗慢性肥厚性咽炎的临床疗效及对咽部病损组织增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法:将70例慢性肥厚性咽炎患者,随机分为2组各35例。微波热凝加慢咽合剂组(简称治疗组),采用微渡热凝治疗后,加服自拟的慢咽合剂治疗;单纯微波热凝组(简称对照组),仅采用微波热凝治疗。观察2组临床疗效及症状改善情况;2组分别在治疗前及治疗结束后2周作PCNA测定。结果:2组临床疗效比较,治疗组明显优于对照组(P<0.05);治疗组在消除咽异物感及咽部淋巴滤泡增生方面明显优于对照组(P<0.05);2组治疗后PCNA表达阳性率均明显低于治疗前,差异有非常显著性意义(P<0.01),治疗组治疗后PCNA表达亦明显低于对照组,差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:微波热凝联合慢咽合剂治疗慢性肥厚性咽炎可抑制咽部病损组织的细胞增殖特性,从而降低咽部病损组织的PCNA表达,临床疗效显著。