喉鳞状细胞癌中BAG-1和 p53基因的表达及其临床意义

目的：研究BAG-1和p53基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达,探讨BAG-1在喉鳞状细胞癌发生、发展中的作用及与p53的关系。方法：运用免疫组织化学SP技术,检测40例喉鳞状细胞癌组织,27例喉癌旁正常组织及20例声带息肉组织中BAG-1与p53的表达。结果：BAG-1在喉癌中表达阳性率为72．5％,较喉癌旁组织（18．5％）、声带息肉组织（20．0％）高（P〈0．05）,其表达与预后呈负相关（P〈0．05）;p53在喉癌中表达阳性率为65．0％,而在喉癌旁组织和声带息肉组织中均无表达,与在喉癌组织中的表达相比差异有统计学意义（P〈0．05）;其表达与病理分化程度、颈淋巴结转移及预后呈负相关（P〈0．05）;在喉癌组织中BAG-1与p53表达之间未见显著性相关（P〉0．05）。结论：BAG-1和p53基因的过度表达与喉鳞状细胞癌的发生、发展存在一定的关系。BAG-1可作为早期诊断喉癌的一种生物标记,尤其是细胞核BAG-1定位可作为一种不良预后的预测因子;p53表达与喉癌颈淋巴结转移有关,可单独作为喉癌的预后指标。     

p57^KiP2和Cyclin A在喉癌中的表达及其临床意义

目的研究细胞周期素依赖性激酶抑制因子p57^KiP2和细胞周期素A（CyclinA）在喉癌组织中的表达及其临床意义。方法40例喉癌、20例声带不典型增生、20例正常喉组织切缘标本,免疫组化S-P法检测p57^KiP2和CyclinA的表达活性,比较分析其临床意义。结果在喉癌组织中,p57^KiP2阳性表达率42.5%,显著低于癌旁正常喉黏膜与不典型增生喉黏膜（P〈0.05）,并与喉癌组织的分化程度和淋巴结转移特性相关（P〈0.05）;CyclinA阳性表达率55.0%,明显高于癌旁正常喉黏膜与不典型增生喉黏膜（P〈0.05）,并与喉癌组织的分化程度和淋巴结转移特性相关（P〈0.05）。p57^KiP2与CyclinA的表达活性呈负相关（P〈0.01）。结论p57^KiP2的低表达及CyclinA高表达在喉癌的发生、发展过程中可能发挥重要作用,其表达水平与喉癌的分化程度、淋巴结转移与否及预后密切相关,是判断喉癌恶性程度与淋巴结转移特性的重要参考指标。     

喉癌中血管生成素-2和基质金属蛋白酶-7的表达及临床意义

目的：研究喉癌组织中血管生成素-2（Ang-2）和基质金属蛋白酶-7（MMP-7）的表达情况及临床意义。方法：应用免疫组织化学SP法检测65例喉癌及34例癌旁喉黏膜组织中Ang-2和MMP-7的表达,分析Ang-2和MMP-7表达与喉癌浸润、转移和预后的关系。结果：喉癌组织中Ang-2和MMP-7表达的阳性率均明显高于癌旁喉黏膜组织（均P〈0．05）,且Ang-2表达与肿瘤T分期及临床分期相关（均P〈0．05）,MMP-7表达与肿瘤T分期、淋巴结转移以及临床分期相关（均P〈0．05）,而二者表达与患者年龄、病程、吸烟、饮酒、病理分化程度及临床分型无关（均P〉0．05）。喉癌组织中Ang-2和MMP-7表达存在正相关性（P〈0．05）。Kaplan—Meier生存分析显示Ang2表达与患者总生存率有密切关系（P〈0．05）,而与无瘤生存率未见明显关系（P〉0．05）;MMP-7表达与总生存率及无瘤生存率均未见明显关系（P〉0．05）。Cox回归分析显示Ang-2和MMP-7阳性表达为喉癌独立的预后因素。结论：喉癌组织中存在Ang-2和MMP-7的高表达,两者可作为临床上判断喉癌生物学行为、评估预后的客观指标。     

喉癌及癌前病变中细胞周期调控基因甲基化的研究

目的探讨细胞周期调控基因P14,P15及P16在喉癌发生发展中的作用。方法选取20例喉癌癌前病变（包括喉角化8例、白斑4例和成人复发性喉乳头状瘤8例）、30例喉鳞状细胞癌（声门型）及10例癌旁组织。采用甲基特异性聚合酶链反应（methylationspecific PCR,MSP）检测P14,P15及P16基因启动子区过甲基化。结果P14,P15及P16基因启动子过甲基化发生率在癌前病变中分别为10％（2／20）、15％（3／20）、20％（4／20）;在喉癌中分别为30．0％（9／30）、40．0％（12／30）、36．7％（11／30）;在癌旁组织中未检测到过甲基化事件。结论细胞周期调控基因p14,p15及p16启动子区过甲基化发生于喉癌早期病变中,可作为喉癌前病变及早期喉癌筛查的指标之一。     

喉癌组织中热休克蛋白家族的表达及意义

目的 :探讨热休克蛋白 (heatshock proteins,Hsps)家族在喉癌组织中的表达及临床意义。方法 :采用免疫组化 ABC法检测 Hsp70、Hsp90、Hsp2 7蛋白及 PCNA在喉癌组织中的表达情况。结果 :分化差的喉癌组织中三种 Hsps表达水平明显增高 (P <0 .0 1) ;三种 Hsps的表达与 PCNA L.I.呈正相关 (P <0 .0 1) ,提示 Hsps的高表达可能是喉癌细胞高度增殖的结果 ;有淋巴结转移的喉癌组织中 ,Hsp70、Hsp2 7表达水平高于无淋巴结转移的癌组织 (P <0 .0 5 )。结论 :Hsps在喉癌的演变中可能具有重要作用 ;三种 Hsps均可以作为诊断喉癌的参考指标 ;Hsp70、Hsp2 7可以作为判断喉癌预后的参考指标之一     

斯钙素2在喉鳞状细胞癌中的表达及预后的相关性研究

目的:本研究通过检测喉癌和癌旁正常组织中斯钙素2(STC2)的表达水平,探讨其与喉癌临床病理相关因素及预后之间的关系。方法:回顾性分析2005-01-2009-03期间收治的81例喉癌病例,癌旁正常标本30例作为对照组。采用免疫组织化学的方法检测喉癌组织和癌旁正常组织中STC2的表达。结果:1STC2在喉癌组中的表达显著高于对照组,2组差异有统计学意义(P<0.05);2喉癌中STC2的表达与肿瘤淋巴结转移、临床分期、T分期、病理分级、肿瘤的部位相关,组间差异有统计学意义P<0.05),而与性别、年龄无明显相关,差异无统计学意义(P>0.05);3在肿瘤表达STC2分组生存分析中,STC2表达阳性的喉癌患者比表达阴性的患者预后差(P<0.05);4喉癌的临床分期作为喉癌预后的预测因子之一(P<0.05),而STC2表达水平不能作为喉癌预后的独立预测因子(P>0.05)。结论:STC2表达水平与喉癌患者累积生存时间呈负相关。     

细胞周期调控因子与喉癌癌变的相关性研究

目的 :探讨喉癌癌变过程中 Cyclin E、p2 1WAF1 /CIP1和 p5 3表达的临床病理学意义。方法 :用免疫组化检测 2 0例喉正常粘膜、40例喉不典型增生病变和 6 0例喉癌组织中 Cyclin E、p2 1WAF 1 /CIP1和 p5 3的表达。结果 :1Cyclin E阳性表达率在正常组、不典型增生组和喉癌组分别为 5 .0 % (1/ 2 0 )、2 0 .0 % (8/ 40 )、45 .0 % (2 7/ 6 0 ) ,喉癌组与正常组比较 ,其差异有极显著性意义 (P<0 .0 1) ;p2 1WAF1 /CIP1阳性表达率分别为 95 .0 % (19/ 2 0 )、75 .0 % (30 /40 )和 6 3.3% (38/ 6 0 ) ,喉癌组与正常组比较 ,其差异亦有显著性意义 (P<0 .0 5 ) ;p5 3阳性表达率分别为 0 (0 /2 0 )、30 .0 % (12 / 40 )和 6 1.7% (37/ 6 0 ) ,喉癌组与正常组比较 ,其差异有极显著性意义 (P <0 .0 1)。 2 p2 1WAF 1 /CIP1在高、中、低分化的喉癌中阳性表达率逐渐降低 ,其差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。 3 Cyclin E和 p5 3阳性表达显著相关 ,p2 1WAF 1 /CIP1与 p5 3阳性表达无相关性。结论 :1Cyclin E和 p5 3异常表达是喉癌发生中早期分子事件。 2p2 1WAF 1 /CIP1 表达与喉癌细胞分化程度有关。 3细胞周期因子相互调控机制在喉癌发展中起重要作用。     

单核细胞趋化蛋白-3在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:明确单核细胞趋化蛋白-3(MCP-3)在喉鳞状细胞癌及癌旁正常组织的表达及分布,并探讨其在喉癌发病机制中的作用及临床意义.方法:采用RT-PCR,Western blot及免疫组织化学技术检测MCP-3在喉癌组织和癌旁正常组织中的表达和分布.结果:RT-PCR检测表明,MCP-3 mRNA在喉癌及喉正常组织内均有表达,MCP-3在喉癌组织中的表达较癌旁正常组织表达明显增多(P＜0.05),并且在喉癌组织Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期表达差异有统计学意义(P＜0.05);蛋白免疫印迹检测发现,喉癌组织和癌旁正常组织内均有MCP-3表达,MCP-3的表达位置在相对分子质量11 000;喉癌组织中MCP-3的表达明显较癌旁正常组织的表达增多(P＜0.01),并且在喉癌组织Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期表达之间差异有统计学意义(P＜0.05);免疫组织化学染色发现:MCP-3阳性表达为黄色,主要分布在肿瘤细胞细胞质内,在喉正常的腺上皮组织中也可检测到阳性表达.结论:MCP-3可能与喉癌的发病机制有关,可能与肿瘤相关巨噬细胞的趋化和激活有关,肿瘤内的炎性微环境对肿瘤的发生、发展起重要作用.     

EMS1蛋白在喉癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨EMS1在喉癌组织中的表达及与各临床病理因素的关系。方法：采用流式细胞术检测40例喉癌组织和40例相应癌旁组织中EMS1的表达,并以20例非喉癌患者喉部正常黏膜组织作对照。结果：喉癌组织中EMS1蛋白的表达量及阳性表达率均明显高于癌旁组织及正常喉黏膜组织（P〈0．05）,癌旁组织及正常喉黏膜组织间的EMS1表达差异无统计学意义（P〉0．05）。EMS1蛋白的表达与喉癌组织中的淋巴结转移、临床分期、分化程度差异有统计学意义（P〈0．05）;与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：EMS1蛋白的高表达可促进喉癌的发生、发展,其蛋白检测可作为判断喉癌分化、浸润、转移、分期的重要指标。     

细胞周期蛋白G2在喉癌中的表达

目的探讨细胞周期蛋白G2(Cyclin G2)的表达与喉鳞状细胞癌的关系。方法收集2000年1月～2000年12月共81例喉鳞状细胞癌患者的临床资料和石蜡块,用免疫组化方法检测肿瘤组织、喉癌旁黏膜Cyclin G2表达:并分析Cyclin G2的表达与喉癌患者年龄、性别、临床分期、肿瘤分化程度以及预后等的关系。统计学分析采用SPSS12.0软件。结果Cyclin G2在喉癌中阳性表达率为67.9%,并随分化程度的降低而降低,有、无淋巴结转移者阳性率分别为38.4%和73.5%,差异均具有显著性(P>0.05)。结论Cyclin G2表达强度与喉癌的恶性程度及发展趋势明显负相关,可作为预测喉癌预后的生物学指标之一。     

Jab1和p27kip1基因在喉鳞状细胞癌组织和喉癌Hep-2细胞中的表达及意义

目的:探讨Jab1和p27kip1基因在喉鳞状细胞癌组织和喉癌Hep-2细胞中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学方法检测50例喉鳞状细胞癌组织和10例癌旁正常组织中Jab1和p27kip1的表达。采用人工合成Jab1siRNAⅡ用脂质体2000包裹后转染Hep-2细胞,用RT-PCR方法分析转染后喉癌细胞中Jab1和p27kip1基因的表达情况。结果:Jab1和p27kip1蛋白的阳性表达定位为细胞核中,Jab1在人喉鳞状细胞癌组织中高表达,正常喉黏膜中不表达或弱表达;p27kip1在人喉癌组织中弱表达,正常喉黏膜中强表达;两者呈负相关。Jab1siRNAⅡ可降低Jab1mRNA表达,并且随着时间的延长,Jab1mRNAⅡ在Hep-2细胞中的表达逐渐减弱,而p27kip1 mRNA的表达则无明显变化。结论:Jab1在人喉鳞状细胞癌组织中表达增强,正常喉黏膜中不表达或弱表达;p27kip1则正好相反。两者在喉癌中的表达呈负相关。Jab1siRNAⅡ可以特异性降低Jab1mRNA在喉癌Hep-2细胞中的表达,为进一步研究Jab1基因在喉癌中的作用奠定了基础。     

p27、p53和Bcl－2蛋白在喉癌和切缘组织中的表达

目的研究p27、p53和Bcl-2在喉鳞状细胞癌和切缘中的表达及其临床意义。方法用Evision免疫组化两步法检测39例喉鳞状细胞癌和相对应的14例喉癌切缘组织中p27、p53和Bcl-2蛋白的表达情况。结果①39例喉癌组织中p27、p53和Bcl-2的阳性表达率分别为48.7%(19/39)、51.3%(20/39)和7.7%(3/39),且p27、p53和Bcl-2与喉鳞状细胞癌患者的年龄、病理分级、临床分期和预后无明显的相关性;②14例喉癌切缘组织中p27、p53和Bcl-2的阳性表达率分别为57.1%(8/14)、14.3%(2/14)和28.6%(4/14),且切缘中p27、p53和Bcl-2蛋白的表达与喉鳞状细胞癌患者的年龄、病理分级、临床分期无明显的相关性。切缘中p27蛋白的表达与预后相关,而切缘中p53和Bcl-2蛋白的表达与预后无关;③p53蛋白在14例喉癌和喉癌切缘组织中的表达有统计学意义(P=0.001)。Bcl-2蛋白在14例喉癌和切缘组织中的表达有统计学意义(P=0.031);④在喉鳞状细胞癌中p27、p53蛋白的表达无相关性。结论①p27、p53和Bcl-2与喉癌患者的年龄、淋巴结转移、分期等无明显的相关性;②p27在切缘中的表达与预后有一定相关性;③p53、Bcl-2蛋白在喉鳞状细胞癌组织和喉癌切缘中的表达有统计学意义;④在部分喉癌切缘中见p53蛋白表达可能与喉癌术后复发有一定的相关性。Bcl-2可能在分子水平提示正常细胞向喉癌细胞的恶性转化。     

From laryngeal epithelial precursor lesions to squamous carcinoma of the larynx: the role of cell cycle proteins and β-catenin

Novel markers to accurately predict the risk of malignant transformation in laryngeal epithelial precursor lesions (EPL) are needed. We tried to identify some molecular alterations occurring in laryngeal tumorigenesis. In this study, 60 paraffin-embedded EPL and 17 metachronous invasive carcinomas were immunostained for markers associated with proliferation (Ki67), cell cycle control (p53, p21, p16, p27, cyclin D1), and cell adhesion and invasion (laminin and β-catenin). Aberrant expression of p16 and p53 and positivity at cytoplasm for β-catenin and cyclin D1 were detected significantly in EPL with progression to invasive laryngeal carcinoma. All cases with basal and suprabasal reactivity of p53 showed β-catenin overexpression. We found that β-catenin protein expression increased significantly with the grade of dysplasia. This is one of the studies with the largest number of laryngeal EPL and invasive carcinoma studied sequentially. Our data confirm the role of some cell cycle regulatory proteins in the development of laryngeal carcinoma. Cytoplasmic retention of β-catenin in EPL seems to be related with more aggressive biological behavior. Combined increased p53 and cytoplasmic β-catenin protein expression could be biologically important in laryngeal tumorigenesis. Further research is required to clarify the involvement of β-catenin in the mechanism associated with malignant transformation in laryngeal tissues.     

p53 and cyclin D1 as prognostic factors in squamous cell carcinoma of the larynx

OBJECTIVES/HYPOTHESIS: Proteins p53 and cyclin D1 play a crucial role in cell cycle control. Protein p53 mutations are one of the most common genetic alterations in human cancer, and cyclin D1 gene amplification has been found to be associated with poor prognosis in different types of tumors. Functional alterations of these proteins may play an important role both in the carcinogenesis of squamous carcinomas of the head and neck and in the clinical evolution of these tumors. The objective of the present study was to evaluate whether the presence of p53 and/or cyclin D1 proteins (detected by immunohistochemical analysis) could serve as relevant variables for the assessment of the prognosis of laryngeal squamous cell carcinoma. STUDY DESIGN: Retrospective multicentric study. METHODS: Paraffin-embedded biopsy specimens from 62 human epidermoid laryngeal carcinomas were randomly selected. The expression of p53 and cyclin D1 was examined by means of immunohistochemical analysis with a view to evaluating whether there is a correlation between the aberrant expression of these proteins and disease prognosis. RESULTS: In the sample, the presence of immunohistochemically detectable p53 is associated with shorter survival and disease-free intervals, as shown in Kaplan-Meier survival curve analysis. Indeed, multivariate statistical analysis revealed that the accumulation of p53 is an independent prognostic factor, which is associated with shorter survival. This association was not evident in the case of cyclin D1. CONCLUSION: A more precise prognosis of patients with laryngeal epidermoid carcinomas could be achieved by taking into account the presence of p53 (as assayed by immunohistochemical analysis) in biopsy tissue     

喉癌病变过程中细胞周期调控因子的流式检测及意义

目的：探讨细胞周期调控基因cyclin E、cyclin D1、p21、p16在喉癌发生、发展中的作用。方法：选取23例声带息肉、69例喉癌前病变、33例喉癌石蜡包埋组织为研究对象,切片脱蜡后制备成细胞悬液,采用流式细胞术检测cyclin E、cyclin D1、p21、p16基因的荧光表达情况。结果：在声带息肉、喉癌前病变、喉癌组织中,cyclin E的阳性表达率分别为13.04%、20.29%和42.42%;cyclin D1的阳性表达率分别为26.09%、43.48%和93.94%;p16的阳性表达率分别为61.90%、40.98%和14.28%;p21的阳性表达率分别为47.62%、23.81%和26.23%。提示cyclin D1、cyclin E的阳性率表达形成声带息肉→喉癌前病变→喉癌组织阳性强度逐渐增强的梯度现象,而p21、p16的阳性表达强度则呈逐渐减弱的现象。结论：①细胞周期调控因子的异常表达是喉癌发生的分子事件;②正性调控因子cyclin D1、cyclin E高表达,负性调控因子p16、p21低表达,即多个与细胞周期相关的正负调控因子失衡在喉癌的发生中可能起着重要作用。     

Expression of cell cycle regulators in squamous cell carcinoma of maxillary sinus and their significance]

OBJECTIVE: To investigate the clinicopathlogical significance of cyclinE, cyclinD1, P21WAF1/CIP1 and P27KIP1 expression in squamous cell carcinoma of maxillary sinus. METHODS: The expression of cyclinE, cyclinD1, P21WAF1/CIP1 and P27KIP1 was examined by the method of immunohistochemistry in inflammatory mucosa of maxillary sinus(10), inverting papilloma of maxillary sinus(20) and squamous cell carcinoma of maxillary sinus (50). RESULTS: (1) In inflammatory mucosa, inverting papilloma and squamous cell carcinoma, the positive immunostaining rates of cyclinD1 protein were 10.0%, 25.0%, 48.0% respectively (P < 0.05); cyclinE protein was 20.0%, 35.0%, 58.0% respectively (P < 0.05); P21WAF1/CIP1 protein was 80.0%, 65.0%, 40.0% respectively (P < 0.05) and P27KIP1 protein was 70.0%, 75.0%, 40.0% respectively (P < 0.05). (2) There was no significance between the clinical type, T stage and clinical stage of carcinoma of maxillary sinus and the expression of cyclinD1, cyclinE, P21WAF1/CIP1 and P27KIP1 (P > 0.05). (3) P21WAF1/CIP1 positive expression in highly, moderately and poorly differtiated carcinomas were 73.2% (11/15), 58.9% (11/19), 25.0% (4/16) respectively (P < 0.05). CONCLUSION: (1) With the development of the lesion, the positive immunostaining rate of cyclinE and cyclinD1 protein increases, while the rate of P21WAF1/CIP1 and P27KIP1 protein decreases. (2) P21WAF1/CIP1 expression is associated with tumour cell differentiation. (3) The mutual mechenism of cell cycle regulators plays an important role in the squamous cell carcinoma of maxillary sinus. The quantity and the frequency of four kinds of gene expression increase with the progression of maxillary sinus carcinogenesis.     

Studies of the cell cycle regulatory proteins P16, cyclin D1 and retinoblastoma protein in laryngeal carcinoma tissue

Defects in the system controlling the cell cycle can lead to an increased proliferation of cancer cells. The aim of this study was to analyse the immunohistochemical expression of chosen cell cycle proteins (P16, cyclin D1 and retinoblastoma protein) and their connection with the clinical course of the disease in laryngeal squamous cell cancer (LSCC). Cancer tissue sections obtained from 58 patients after total laryngectomy served to determine the level of the proteins' expression using immunohistochemical staining and commercial antibodies. A decreased level of P16 expression in 47 per cent, of retinoblastoma protein in 12 per cent and strong cyclin D1 expression in 48 per cent of cases was revealed. Our results show significant correlation between decreased P16 expression and increased tumour dedifferentiation. Overexpression of cyclin D1 was statistically more common in locally advanced tumours (T(3) -T(4)). Low expression of retinoblastoma protein was significantly correlated with both positive P16 immunostaining and with strong cyclin D1 expression. Our study confirms that dysfunction of cell cycle regulation is a common event and may play a significant role in the development of squamous cell carcinoma of the larynx.     

喉癌组织中热休克蛋白和人乳头状瘤病毒的相关性

目的 探讨喉鳞状细胞癌（简称喉癌）组织中热休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70）和人乳头状瘤病毒1 6E7（human papiloma-virus 1 6E7,HPV16E7）蛋白的表达及其在喉癌发生和发展过程中的相互关系.方法 用免疫组织化学方法检测78例喉癌、24例声带息肉和10例癌周喉组织标本中HSP70和HPV16E7蛋白的表达.结果 在喉癌组织、声带息肉和癌周喉组织中HSP70的阳性表达率分别为69.2%,8.3%和0%,HPV16E7蛋白的阳性表达率分别为43.6%,4.2%和0%,HSP70和HPV16E7蛋白的阳性表达在喉癌组织与声带息肉、癌周喉组织之间均有显著性差异（P＜0.05）;HPV16E7阳性的喉癌组织中HSP70的阳性表达率为85.3%,HPV16E7阴性的喉癌组织中HSP70的阳性表达率为56.8%,二者之间有显著性差异（P＜0.05）.结论 HPV16E7可以诱导喉癌组织中HSP70的高表达,二者在喉癌的发生和发展过程中发挥重要作用;检测HSP70和HPV16E7蛋白的表达可用于喉癌恶性程度的评定.     

喉鳞状细胞癌手术切缘分子水平亚健康与预后关系研究

目的：从分子水平判定喉鳞状细胞癌（LSCC）切除范围的彻底性及与预后的关系。方法：用免疫组织化学方法检测23例LSCC患者手术切缘组织中癌基因EGFR和抑癌基因p53、p27以及与凋亡有关的Bcl-2蛋白的表达情况，并通过随访观察其与肿瘤复发的关系。结果：23例LSCC患者中20例手术切缘组织细胞病理检测为阴性，其中p53阳性3例（15％），p27阳性11例（55％），Bcl-2阳性7例（35％），EGFR阳性3例（15％）。有4例肿瘤局部复发，其p27均为阴性；2例Bcl-2阳性；p53和EGFR均为阴性。结论：用免疫组织化学方法检测LSCC手术切缘EGFR、p53、p27、Bcl-2水平来判断手术范围是可行的，其中p27蛋白表达较为重要，但应同时检测多种基因。