紫杉醇提高胃癌MGC803细胞对TRAIL的敏感性

目的:研究紫杉醇对TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的影响,探讨死亡受体5(DR5)在TRAIL诱导细胞凋亡中的作用。方法:采用MTT法测定细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,western blot检测蛋白表达。结果:在MGC803细胞中,100ng/ml的TRAIL导致轻度的增殖抑制和细胞凋亡,TRAIL(100ng/ml)联合紫杉醇(3.41g/ml)引起明显的增殖抑制和细胞凋亡(P<0.05)。TRAIL单药没有改变死亡受体5(DR5)的表达,而3.41g/ml紫杉醇作用MGC803细胞后明显上调了DR5的表达。结论:紫杉醇通过上调DR5的表达增强TRAIL诱导的胃癌MGC803细胞凋亡。     

干扰素-α通过上调DR5和抑制Akt的活性增加胃癌细胞对TRAIL的敏感性

目的：观察IFN-α对TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的影响,并对死亡受体DR5和PI3K/Akt通路在此过程中的作用机制进行探讨。方法：MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞仪PI染色检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测蛋白的表达。结果：IFN-α预处理可协同TRAIL抑制胃癌MGC803细胞增殖。单独用IFN-α或TRAIL处理MGC803细胞,仅有少量的细胞发生凋亡,IFN-α和TRAIL联合用药细胞凋亡明显增加（P〈0.01）。IFN-α能上调DR5的表达,抑制Akt的磷酸化。结论：IFN-α能增强TRAIL诱导的胃癌细胞凋亡,其机制可能与其上调DR5的表达和抑制Akt的活性有关。     

紫杉醇提高胃癌MGC803细胞对TRAIL的敏感性

目的：研究紫杉醇对TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的影响,探讨死亡受体5（DR5）在TRAIL诱导细胞凋亡中的作用。方法：采用MTT法测定细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,western blot检测蛋白表达。结果：在MGC803细胞中,100ng/ml的TRAIL导致轻度的增殖抑制和细胞凋亡,TRAIL（100ng/ml）联合紫杉醇（3.41g/ml）引起明显的增殖抑制和细胞凋亡（P〈0.05）。TRAIL单药没有改变死亡受体5（DR5）的表达,而3.41g/ml紫杉醇作用MGC803细胞后明显上调了DR5的表达。结论：紫杉醇通过上调DR5的表达增强TRAIL诱导的胃癌MGC803细胞凋亡。     

表阿霉素提高胃癌BGC823细胞对TRAIL的敏感性

目的：研究表阿霉素对TRAIL诱导胃癌细胞BGC823细胞凋亡的影响,探讨脂筏和死亡受体4（DR4）在TRAIL诱导细胞凋亡中的作用。方法：采用MTT法测定细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫荧光显微技术检测脂筏和DR4在细胞膜的分布。结果：（0.1-50）μg/ml表阿霉素处理BGC823细胞24h,抑制细胞增殖50%的药物浓度（IC50）为（4.61±0.62）μg/ml。在BGC823细胞中,100ng/ml的TRAIL导致轻度的增殖抑制和细胞凋亡,TRAIL（100ng/ml）联合表阿霉素（4.61μg/ml）引起明显的增殖抑制和细胞凋亡（P〈0.05）。与对照组相比,100ng/ml的TRAIL作用BGC823细胞24 h,没有引起明显的脂筏聚集或DR4聚集。表阿霉素（4.61μg/ml）明显促进脂筏聚集和DR4聚集,同时观察到DR4和脂筏的共定位。表阿霉素和TRAIL联合作用24 h,同样观察到DR4定位在聚集的脂筏内。结论：表阿霉素通过促进DR4在脂筏聚集增强TRAIL诱导的胃癌BGC823细胞凋亡。     

HIF-1α反义寡核苷酸增强胃癌细胞对顺铂的敏感性

目的研究缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor1α,HIF-1α)反义寡核苷酸(antisense ol-igodexynucleotide,ASODN)对人胃癌细胞凋亡及化疗药物敏感性的影响。方法人工合成HIF-1αASODN经阳离子脂质体包裹后瞬时转染人胃癌SGC-7901细胞系。采用RT-PCR和免疫细胞化学检测转染后HIF-1α基因表达情况,MTT法观察化疗药物敏感性的变化,AO/EB染色及TUNEL检测SGC-7901细胞转染后顺铂诱导的凋亡。结果经HIF-1αASODN处理的SGC-7901细胞HIF-1α基因表达明显下调,HIF-1αASODN处理的SGC-7901细胞加顺铂作用后与对照组比较,细胞凋亡率明显增加,化疗药物敏感性增强。结论阳离子脂质体转染HIF-1αASODN具有促进化疗药物诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡及增强化疗药物敏感性作用。     

干扰素-α联合姜黄素对B-NHL淋巴瘤Raji细胞的增生抑制作用

目的研究干扰素-α联合姜黄素对B-NHL淋巴瘤Raji细胞的诱导凋亡作用及其作用机制。方法以不同浓度干扰素-α(500、1000、2000／L),不同浓度的姜黄素6．25、12．5、25μmol／L)和IC502000U／L的干扰素-α联合不同浓度姜黄素作用于体外培养的Raji细胞,观察细胞生长状态变化。MTT法检测细胞生长的抑制率,应用流式细胞仪法观察细胞凋亡,Western blot法检测24h,姜黄素IC5025μmol／L联合2000U／L的干扰素-α作用于caspase6、caspase8、caspase9的蛋白表达。结果干扰素-α与姜黄素联合应用可显著抑制Raji细胞的生长．诱导细胞发生凋亡,两者具有协同效应。凋亡蛋白caspase6、 caspase8、caspase9表达显著增高,其作用呈现出明显的量-效与时-效关系。结论干扰素-α与姜黄素联合应用对B-NHL淋巴瘤Raji细胞具有明显的增生抑制作用,促进凋亡蛋白的表达及诱导细胞凋亡,可能是其重要作用机制之一。     

干扰素-α联合姜黄素对B-NHL淋巴瘤Raji细胞的增生抑制作用

背景与目的：姜黄素（curcumin）是中药姜黄的主要成分，其选择性的抑制肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡。干扰素-α是目前用于临床治疗最重要的细胞因子之一。本研究旨在探讨干扰素-α联合姜黄素对B-NHL淋巴瘤Raji细胞的诱导凋亡作用及其作用机制。方法：以浓度2000u／L干扰素-α分别与6．25、12．5、25μmol／L浓度的姜黄素作用于体外培养的Raji细胞，观察细胞生长状态变化。MTT法检测细胞生长的抑制率，应用流式细胞仪法观察细胞凋亡，Western blot法检测24h，姜黄素（IC50 25μmol／L）以及联合干扰素-α（2000u／L）对caspase6、caspase8、caspase9蛋白的影响。结果：干扰素-α与姜黄素联合应用可显著抑制Raji细胞的生长，诱导细胞发生凋亡，两者具有协同效应。凋亡蛋白caspase6、caspase8、caspase9表达显著增高，其作用呈现出明显的量效与时效关系。结论：干扰素-α与姜黄素联合应用对B-NHL淋巴瘤Raji细胞具有明显的增生抑制作用；促进凋亡蛋白的表达及诱导细胞凋亡，可能是其重要作用机制之一。     

干扰素-γ增强肝癌细胞对CTL杀伤敏感性的研究

目的:探讨干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)能否增强肝癌细胞对树突状细胞(dendritic cell, DC)诱导细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte, CTL)杀伤的敏感性,以及该作用与肿瘤细胞HLA I类分子的关系.方法:RT-PCR法检测IFN-γ刺激前后肝癌细胞β2-微球蛋白(β2-microgloblin,β2-m)的mR-NA水平变化,流式细胞术检测肝癌细胞HLAI类分子HLA-A2的表达;应用脐血来源的致敏DC诱导CTL细胞毒试验,观察IFN-γ在增强肝癌细胞对特异性CTL杀伤作用敏感性中的作用.结果:IFN-γ可刺激肝癌细胞上调β2-m mRNA水平及细胞表面HLA-A2表达,IFN-γ作用48h后肝癌细胞β2-m mRNA相对光密度值(1.104±0.209)与0h组(0.674±0.135)比较显著增加,t=-2.992,P=0.040.在72和96h仍保持较高水平,其HLA-A2表达增加的幅度与β2-m一致;致敏的脐血来源DC能够在体外诱导CTL特异性地杀伤肝癌细胞,经IFN-γ刺激的肝癌细胞对特异性效应细胞杀伤作用的敏感性显著增强.结论:IFN-γ可使肝癌细胞对DC诱导的CTL杀伤效应的敏感性增加,可能与其上调肝癌细胞β2-m mRNA水平进而增加HLA I类分子的表达有关.     

干扰素α-2a对人鼻咽癌细胞株CNE-I放射敏感性的影响

目的探讨干扰素α2a对人鼻咽癌细胞株CNEI放射敏感性及其细胞周期的影响。方法用不同浓度的干扰素α2a处理CNEI细胞后用6MVX线照射,计算细胞存活率。流式细胞仪分析CNEI细胞周期动力学改变。结果0.5×106、1.0×106、1.5×106IU/L干扰素α2a干预CNEI细胞后细胞存活分数分别为0.62、0.43、0.20,放射增敏比为1.16、1.57、1.93;1×106IU/L干扰素α2a干预CNEI细胞24h后,与对照组比较细胞增殖周期G1和G2+M细胞数增多,S期细胞数减少(P<0.01)。结论干扰素α2a能抑制人鼻咽癌细胞株CNEI的生长,并具有放射增敏效应,放射增敏机制可能与其调节CNEI细胞增殖周期有关。     

干扰素α对Raji细胞的生长抑制作用及其作用机制

目的：探讨干扰素α对白血病Raji细胞的生长抑制作用及其作用机制。方法：以不同浓度的干扰素α作用于体外培养的Raji细胞，MTT法检测细胞生长抑制率，应用流式细胞仪及hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡，FRAP-PCR-ELISA法检测细胞凋亡前后的端粒酶活性。结果：干扰素α可显著的降低Raji细胞端粒酶活性，抑制细胞的生长及诱导细胞发生凋亡。并呈现出明显的量-效与时-效关系。结论：干扰素α能抑制Raji细胞的生长并诱导细胞发生调亡，降低细胞端粒酶活性可能是其重要作用机制之一。     

肺腺癌细胞DR4基因启动子甲基化与TRAIL敏感性的相关性研究

目的 探讨DR4基因启动子甲基化水平与肺腺癌细胞株对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）敏感性之间的相关性。方法 选取未经5-氮杂-2'-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）处理和10 μmol/L 5-Aza-CdR处理3 d后的肺腺癌细胞A549、LTEP-α-2,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,倒置显微镜下观察细胞形态学改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率;采用RT-PCR法、免疫印迹法和甲基化特异性PCR（MSP）法分别检测肺腺癌细胞株（A549、LTEP-α-2）DR4基因mRNA、蛋白表达和启动子区甲基化状态。结果 肺腺癌细胞（A549、LTEP-α-2）对低浓度TRAIL高度耐受,提高TRAIL浓度（15.625、31.25、62.5、125、250、500 μg／ml）作用细胞24、48 h后,细胞生长受到不同程度抑制,且呈剂量和时间依赖性;经5-Aza-CdR处理后,TRAIL对肺腺癌细胞的增殖抑制作用均较处理前显著增强（P＜0.05）,倒置显微镜下细胞形态表现出变圆、皱缩甚至脱落等特征。应用5-Aza-CdR处理后,125 μg／ml TRAIL诱导肺腺癌细胞的凋亡率较处理前明显升高（P＜0.05）。A549、LTEP-α-2细胞存在DR4 mRNA及蛋白的低表达,其基因启动子处于甲基化状态;经5-Aza-CdR处理后,肺腺癌细胞中DR4 mRNA及蛋白的表达均显著升高（P＜0.05）,其基因启动子处于非甲基化状态。结论 5-Aza-CdR可以逆转DR4基因启动子甲基化状态,上调基因表达,增强TRAIL诱导肺腺癌细胞凋亡的能力,从而逆转TRAIL耐药。5-Aza-CdR联合TRAIL可能是治疗肺腺癌的一种新策略。     

IFN-α联合GM-CSF诱导胃癌患者外周血单个核细胞分化为树突状细胞

目的： 探索干扰素-α（interferon-α,IFN-α）联合粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, GM-CSF）体外诱导胃癌患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）向树突状细胞（dendritic cell,DC）分化的可能性。 方法： 10 例胃癌患者PBMC分别用GM-CSF 100 ng/ml联合IFN-α 500 IU/ml（命名为IFN-α DC） 或GM-CSF 100 ng/ml联合50 ng/ml IL-4（命名为IL-4 DC）体外培养,然后用CD40L、LPS诱导DC成熟。Giemsa染色法观察IFN-α DC和IL-4 DC的形态,流式细胞术分析IFN-α DC和IL-4 DC表面CD1a、CD80、CD83、CD86和HLA-DR的表达情况,同种异体混合淋巴细胞反应（mixed lymphocyte reaction,MLR）检测不同的成熟DC刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力。 结果： IFN-α DC和IL-4 DC均呈现典型DC形态。IFN-α DC和IL-4 DC分别在诱导第3天和第5天时,细胞表面CD1a、CD80、CD83、CD86和HLA-DR表达达到较高水平,成熟IFN-α DC表面CD83[（78.25±15.36）% vs （50.14±10.24）%,P<0.05]和CD86[（84.84±10.12）% vs （62.93±15.12）%,P<0.05]的表达均高于成熟IL-4 DC。成熟IFN-α DC刺激异体T淋巴细胞增殖能力强于未成熟IFN-α DC（P<005）。在DC与T细胞数量比为1∶40和1∶20时,成熟IFN-α DC刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力明显强于成熟IL-4 DC[（39.43±9.21）% vs （27.34±10.63）%,（60.31±7.86）% vs （48.63±6.25）%;均P<0.05]。 结论： 相比常用的IL-4联合GM-CSF诱导方法,IFN-α联合GM-CSF可以在更短时间内将胃癌患者PBMC诱导成具有更强刺激同种异体T淋巴细胞增殖能力的DC细胞,这可能与其表面CD83和CD86表达增高有关。     

α-干扰素在非小细胞肺癌化疗中短期使用效果的研究

选取经细胞学、病理学证实的72例NSCLC的病人,随机分为两组,相同的化疗方案,治疗组加用IFN-α,100万U,肌肉注射/次/日×20天.分别评定化疗疗效、骨髓的抑制程度、癌肿的生长情况、化疗问期.其结果分别进行统计学处理,具有统计学意义.结论是:在NSCLC的治疗中短期使用IFN-α可以使:1.近期疗效提高.2.骨髓抑制程度降低.3.癌肿的生长速度减慢.4.化疗的间期缩短.IFN-α在NSCLC化疗中短期使用是可行和有效的.     

干扰素-γ对肿瘤细胞TRAIL耐药的逆转

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)由于其诱导肿瘤细胞凋亡的高选择性和高效性,成为了肿瘤生物治疗的一大热点。但有些肿瘤细胞对TRAIL不敏感;将干扰素-γ(IFN-γ) 与TRAIL联合应用,能够显著增强肿瘤细胞对TRAIL的敏感性。现就肿瘤细胞对TRAIL耐药的原因、机制及IFN-γ对TRAIL的增敏作用等方面作一综述。     

TRAIL受体在人肝细胞癌中的表达及TRAIL诱导的肝癌细胞凋亡

目的 研究了RAIL受体在肝癌组织及肝癌细胞中的表达,探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体在肝癌细胞凋亡诱导中的作用。 方法 应用RT-PCR法和免疫组化方法检测肝癌组织及细胞系SK-Hepl中TRAIL受体的表达,并以TRAIL蛋白和γ-干扰素作用于SK-Hepl细胞,观察其对细胞的凋亡诱导作用。 结果 在肝癌组织及肝癌SK-Hepl细胞系中均可检测到TRAIL受体,其中,死亡受体DR4、DR5在肝癌、癌旁组织以及SK-Hepl肝癌细胞系中均呈高表达,而诱骗受体DcR1及DcR2呈低表达,明显低于正常组织。TRAIL对肝癌细胞有凋亡诱导作用,与干扰素的协同时,其作用明显增强。 结论 肝癌组织中存在着TRAIL受体的表达,TRAIL可诱导肝癌SK-Hepl细胞系凋亡,其作用与DR4、DR5的高表达有关。     

α-干扰素与慢性髓性白血病来源的树突状细胞

 各种临床观察肯定了α-干扰素（IFN-α）治疗慢性髓性白血病的疗效,其可明显延长白血病的慢性期及患者生存时间。树突状细胞（DC）作为功能最强的专职抗原递呈细胞,能有效递呈白血病抗原,逆转机体对白血病抗原的耐受,启动特异抗白血病的T细胞应答。IFN-α用于诱导慢性髓性白血病来源的DC,已经取得一定成绩,用IFN-α诱导慢性髓性白血病细胞分化成为具有较强功能的"临床型"DC被寄予厚望。     

α-干扰素对骨巨细胞瘤细胞凋亡和bFGF及其受体表达的影响

目的:探讨α-干扰素对体外培养的骨巨细胞瘤细胞碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)及受体Bek表达与生物学行为的影响,为骨巨细胞瘤术后复发转移的防治探索新途径.方法:采用不同浓度的α-干扰素诱导体外培养的第三代骨巨细胞瘤细胞,观察α-干扰素对瘤细胞生物学行为的影响,流式细胞术与细胞-酶联免疫吸附法分析α-干扰素诱导48h后瘤细胞凋亡情况及Bek/bFGF表达的变化.结果:浓度为1 000IU/ml以上的α-干扰素作用10～12h左右,瘤细胞即出现退缩现象,生长明显受到抑制;至48h,瘤细胞数目明显减少,且出现大量细胞碎片.α-干扰素可诱导第三代骨巨细胞瘤细胞发生凋亡,其凋亡率随α-干扰素作用浓度增加而递增,呈明显的剂量依赖关系.α-干扰素可抑制第三代骨巨细胞瘤细胞bFGF和Bek的表达,其抑制强度也随α-干扰素作用浓度的增加而增加,呈明显的量效关系.当α-干扰素作用浓度达到1 000IU/ml以上时,其诱导凋亡与抑制Bek/bFGF表达的效应均发生显著性变化.结论:α-干扰素对体外培养的第三代骨巨细胞瘤细胞具有明确的抗肿瘤效应,可作为骨巨细胞瘤术后辅助治疗,以防治和减少其复发转移.     

TRAIL及其受体在乳腺癌组织中的表达及意义

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）及其受体（DR4、DR5、DcR1、DcR2）在乳腺癌组织的表达及意义。方法用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测60例乳腺癌及对应的正常乳腺组织中TRAIL及其受体的表达。结果乳腺癌组织中TRAIL、DcR1、DcR2表达均低于正常乳腺组织(P＜0.05),且TRAIL及其受体的表达与乳腺癌的分期、分级等无关(P＞0.05)。结论TRAIL及其受体在乳腺癌凋亡过程中起着重要的作用,TRAIL及其诱骗受体低表达同乳腺癌的发生关系密切。     

TRAIL及其受体在乳腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）及其受体（DR4、DR5、DcR1、DcR2）在乳腺癌组织的表达及意义。 方法 用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测60例乳腺癌及对应的正常乳腺组织中TRAIL及其受体的表达。 结果 乳腺癌组织中TRAIL、DcR1、DcR2表达均低于正常乳腺组织(P＜0.05),且TRAIL及其受体的表达与乳腺癌的分期、分级等无关(P＞0.05)。 结论 TRAIL及其受体在乳腺癌凋亡过程中起着重要的作用,TRAIL及其诱骗受体低表达同乳腺癌的发生关系密切。     

两种慢性髓系白血病细胞株对干扰素-α的敏感性

背景和目的：临床研究表明干扰素-α(interferon-alpha,IFN-α)是造血系统恶性肿瘤和淋巴瘤的有效治疗剂之一。然而,IFN-α仅可使约70％～80％的慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者获得血液学缓解。不同的CML患者对IFN-α反应性不同的机制尚未阐明。本研究旨在比较两种CML细胞株KA-1／A3、K562对IFN-α的不同敏感性。方法：(1)采用MTT、半固体集落形成和台盼蓝染色液体培养细胞检测,不同浓度IFN-α(100、500、1000、5000和10000u／ml)对KT-1／A3及K562细胞生长的影响;(2)IFN-α(1000u／ml)诱导KT-1／A3、K562细胞48h后,采用流式细胞分析(flow cytometry,FCM)、荧光染色和DNA片段检测细胞凋亡;(3)加入IFN-α(1000u／m1)培养KT-1／A3、K562细胞48h后采用相对定量RT-PCR分析细胞bcr／abl基因表达水平。结果：(1)IFN-α呈剂量依赖性(从100u／ml到10000u／ml)抑制KT-1／A3细胞生长;(2)IFN-α(1000u／m1)诱导48h后使KT-1／A3细胞凋亡率从3．3％升到11．8％,并使KT-1／A3细胞中bcr／abl嵌合基因的表达水平降至对照组的66．7％;(3)IFN-α对K562细胞的生长、凋亡及bcr／abl嵌合基因表达无明显调节效应。结论：不同类型的CML细胞对IFN-α的反应性不同。