NY-ESO-1蛋白在喉鳞状细胞癌中表达的意义

 目的　检测NY-ESO-1蛋白在喉鳞癌中的表达情况,探讨其作为喉癌免疫治疗靶标的实验依据及其与喉癌生物学行为的关系。方法　免疫组织化学PV-9000两步法检测69例喉鳞癌患者原发灶及其常规病理报告为阳性的121个颈淋巴结中NY-ESO-1的表达,同时采用Western blotting方法检测其在喉鳞癌标本的癌中心区、癌周0.5、1.0 cm及9例全喉切除术患者的喉正常黏膜组织（对照）中的表达。结果　69例喉鳞癌组织中,NY-ESO-1蛋白表达阳性率为43.48 %（30／69）,在癌中心区、癌周0.5、1.0 cm中的表达逐渐下降（P＜0.05）,NY-ESO-1在对照组喉正常黏膜组织中无表达。NY-ESO-1蛋白在不同T分级、病理分级和不同颈淋巴结转移喉癌中的表达率差异无统计学意义（P＞0.05）,颈转移淋巴结中NY-ESO-1的表达下调。结论　NY-ESO-1在喉鳞癌患者中特异性高表达,可能以某种方式参与了喉癌的发生、发展,是否能将其作为喉癌免疫治疗靶标有待深入研究。     

膜型-Ⅰ型基质金属蛋白酶mRNA在人喉鳞癌组织中的表达

目的：为研究人喉鳞状细胞癌在其浸润转移中的的生物学行为,探讨能导致肿瘤浸润转移的膜型-Ⅰ型基质金属蛋白酶mRNA在人喉鳞癌组织不同部位的定位及表达情况。方法：采用原位杂交方法对人喉鳞癌组织的原发灶50例、癌旁组织34例、淋巴结22例、正常粘膜20例进行膜型-Ⅰ型基质金属蛋白酶mR-NA的进行检测,图像分析做定量分析。结果：原发灶中MT1-MMP mRNA主要在肿瘤细胞的胞浆中呈强阳性表达,进展期肿瘤癌巢周边的基质细胞中呈弱阳性表达。在癌旁、转移淋巴结的肿瘤细胞胞浆中有阳性表达。原发灶中MT1-MMP mRNA表达与癌旁、正常粘膜组织均有显著差异（P=0.000）;与淋巴结之间存在显著差异（P=0.004）;正常粘膜与淋巴结之间也存在显著差异（P=0.000）;癌旁与淋巴结之间无显著差异（P=0.900）;癌旁与正常组织之间亦无显著差异（P=0.260）。结论：MT1-MMP mRNA在原发灶、癌旁（淋巴结）、正常组织中的表达呈递减趋势。提示其在喉癌浸润转移的生物学行为中有重要作用。     

喉鳞癌组织中Oct-4 mRNA的表达及意义

目的探讨Oct-4 mRNA在喉鳞癌组织中的表达及意义。方法采用RT-PCR和荧光定量PCR检测48例喉鳞癌及其癌旁正常喉黏膜组织中Oct-4 mRNA的表达。结果 RT-PCR显示Oct-4 mRNA在喉鳞癌组织中的阳性率为64.6%,荧光定量PCR显示喉鳞癌组织中Oct-4 mRNA的相对表达量为0.533±0.142,而癌旁正常喉黏膜组织未检测出Oct-4基因的表达（P〈0.01）。Oct-4 mRNA在喉鳞癌高分化组阳性率为33.3%,显著低于中、低分化组的69.0%（P〈0.05）;无淋巴结转移组阳性率为47.8%,显著低于有淋巴结转移组的80.0%（P〈0.05）;Ⅰ、Ⅱ期组阳性率为47.4%,低于Ⅲ、Ⅳ期组的75.9%（P〈0.05）。荧光定量PCR结果显示Oct-4基因的相对表达量随着喉鳞癌组织分化减低、淋巴结转移和高的临床分期而显著增加（P〈0.05）。结论 Oct-4基因的高表达可能参与了喉鳞癌的发生、发展,并对判断喉鳞癌患者的生物学行为有一定意义。     

食管鳞癌组织中RhoC和Kiss-1 mRNA的表达及意义*

目的:探讨食管鳞状上皮细胞癌组织、正常食管黏膜组织中RhoC mRNA和Kiss-1 mRNA 的表达及其与临床病理因素的关系。方法:收集河南省安阳市肿瘤医院手术切除食管癌标本62例及正常食管黏膜组织62例;应用原位杂交法检测每例食管组织中RhoC mRNA、Kiss-1 mRNA 的表达情况。采用SPSS13.0 软件行χ2检验及Spearman 相关分析进行相关统计。结果:RhoCmRNA 在正常食管黏膜、食管鳞癌组织的阳性表达率分别为21.0% 、80.6% ,组间比较差异有统计学意义（χ2=44.173,P<0.05）,在不同分化程度组、不同浸润深度组及有无淋巴结转移组的食管鳞癌组织中RhoC mRNA的阳性表达率差异均有统计学意义（χ2分别
为9.520、4.478、3.898,P 均<0.05）;食管鳞癌组织中Kiss-1 mRNA 的阳性表达显著低于正常食管黏膜Kiss-1 mRNA 的阳性表达,表达率分别为51.6% 95.2%（χ2=30.102,P<0.05）,有淋巴结转移组及无淋巴结转移组的食管鳞癌组织中Kiss-1 mRNA 的阳性表达率分别为30.0% 、61.9% ,二者相比差异有统计学意义（χ2=5.522,P<0.05）,在不同分化程度组、不同浸润深度组食管鳞癌组织的Kiss-1 mRNA 阳性表达率差异无统计学意义（χ2分别为0.758、1.241,P 均>0.05）;食管鳞癌组织中RhoC与Kiss-1 mRNA 的表达呈负相关关系（γ =-0.311,P<0.05）。 结论:RhoC mRNA高表达和Kiss-1 mRNA 表达的降低或缺失可能在食管鳞癌的发生、发展过程中起重要作用。联合检测二者可望作为判断食管鳞癌侵袭转移能力的一项客观指标。      

FOXC1蛋白在喉鳞状细胞癌中表达及临床意义

目的：探讨FOXC1蛋白在人喉鳞癌组织中的表达及其与淋巴结转移、分化程度等临床病理参数间的关系。方法：采用免疫组织化学法检测FOXC1蛋白在喉鳞癌（LSCC）及癌旁正常切缘组织中的表达,并结合临床病理学特征进行统计学分析。结果：FOXC1蛋白阳性表达定位于喉鳞癌细胞的胞核或胞浆,其在LSCC组及对照组中的阳性表达率分别为96.8%和27.1%（P〈0.05）,FOXC1浆表达与颈部淋巴结转移、分化程度及分型关系密切,而与性别、年龄、临床分期等无明显关系;FOXC1核表达与分型相关,与其它临床病理学参数间无明显相关。结论：FOXC1蛋白在喉鳞癌组织中阳性表达率明显高于癌旁正常切缘组织,它可能在喉鳞癌的侵袭、转移过程中发挥重要作用。FOXC1可能成为判定喉癌外科切缘及分子靶向治疗的新靶标。     

食管鳞癌中Survivin和Nm23-h1表达及其联合检测的临床意义

目的：探讨Survivin与Nm23-h1基因在食管鳞状细胞癌、癌旁组织、正常组织中的表达情况及其联合检测与淋巴结转移的关系。方法：采用免疫组化sP法观察78例食管鳞癌手术切除标本,30例食管鳞癌切除标本断端（距肿瘤〉5cm）和食管鳞癌切除标本断端（距肿瘤〈2cm）30例的石蜡标本切片中Survivin和Nm23-h1的表达情况,分析其与临床病理特征的关系。结果：Survivin在食管鳞癌组织,癌旁组织,正常组织的阳性表达率分别为70．51％,20．0％,6．67％,有显著性差异（P=0．001）。Nm23-h1在食管鳞癌组织,癌旁组织,正常组织的阳性表达率分别为60．26％,80．00％,96．67％,有显著性差异。（P=0．001）。Survivin表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关（P〈0．05）。Nm23-h1表达与患者的TNM分期、淋巴结转移相关（P〈0．05）。Survivin阳性率与淋巴结转移呈正相关（P=0．008）,nm23-h1阳性率与淋巴结转移呈负相关（P=0．001）。Survivin与nm23-h1呈低度负相关（P=0．001）,在促进肿瘤的进展和转移过程中起联合作用。结论：Survivin蛋白的抑制凋亡作用和nm23蛋白的抑制转移作用可能在食管鳞癌的发生、发展过程中起重要作用,联合检测是判断食管鳞癌患者淋巴结转移倾向及预后的重要指标。     

血管内皮生长因子及其受体在喉鳞癌中的表达

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）及其受体Fit-1及KDR在喉鳞癌生长、转移过程中的作用及机制。方法采用Western—blotting法和RT-PCR法检测20例喉鳞癌组织及18例癌旁组织中VEGF、Fit-1及KDR的蛋白和mRNA的表达水平。结果VEGF、Fit—1及KDR蛋白和mRNA在喉鳞癌组织中的表达分别为4．32±2．21、2．00±0．91,1．20±0．55、0．29±0．31,2．50±1．69、0．85±0．28,差异有统计学意义（均P〈0．01）;VEGF、Flt-1及KDR蛋白和mRNA在颈淋巴结转移组与非颈淋巴结转移组差异有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）;VEGF与KDR在喉鳞癌及癌旁组织中的表达水平之间呈正相关（P〈0．01）,而VEGF与Flt-1在喉鳞癌组织中的表达水平之间则无相关性（P〉0．05）。结论VEGF及其受体Flt-1、KDR参与了喉鳞癌新生血管增生过程,与喉鳞癌的生长、浸润和淋巴结转移密切相关,KDR是喉鳞癌组织中VEGF发挥作用的重要受体。     

Survivin、Bci-2和Bax在喉鳞状细胞癌中的表达

目的：探讨凋亡抑制基因survivin在喉鳞癌中的表达及其与Bcl-2、Bax基因表达的相关性。方法：应用免疫组织化学链酶卵白素-生物素复合体（strept avidin-biotin complex，SABC）方法检测45例喉鳞癌及10倒正常喉黏膜组织中survivin，Bel-2及Bax基因的表达。结果：喉鳞癌组织中，Survivin的表达率为80％，显著高于正常喉黏膜组织的表达率20％（P均〈0．05）。Survivin蛋白表达与喉鳞癌的TNM分期及淋巴结转移有关（P均〈0．05）。Survivin表达与Bcl-2蛋白表达呈正相关（P〈0．05），而与Bax蛋白表达呈负相关（P〈0．05）。结论：Survivin在喉鳞癌的发生发展中起重要作用，可能成为喉鳞癌基因治疗的新靶点；survivin基因可能与凋亡相关基因Bcl-2、Bax在喉鳞癌的发展中分别起协同和拮抗作用。     

Notch1及 PTEN 在食管癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨 Notch1、PTEN 在食管鳞癌组织中的表达及临床意义。方法：78例食管鳞癌组织标本为实验组,另取42例癌旁正常食管组织标本为对照组,采用 EliVisionTM 免疫组织化学法检测各组 Notch1和PTEN 的表达情况。Kaplan - Meier 法计算 Notch1蛋白阳性和阴性表达患者的生存差别。结果：食管鳞癌组织中 Notch1和 PTEN 表达于细胞浆和细胞核,二者表达水平明显低于癌旁正常食管黏膜组织（ P <0.05）。Notch1、PTEN 表达（为缺失表达）均与淋巴结转移、cTNM 分期有关（P <0.05）;Notch1和 PTEN 之间表达呈正相关（P <0.05）。所有患者3年总生存率为30.77%,Notch1蛋白阳性表达患者的3年生存率显著高于Notch1阴性表达者（P <0.05）。结论：Notch1和 PTEN 表达失调在食管鳞癌的发生、发展和淋巴结转移中有重要作用,提示二者有可能为评估食管鳞癌病变程度提供参考。     

喉鳞癌中P-STAT3和Skp2的表达及其相关性研究

目的：检测喉鳞癌中信号转导和转录激活因子3的活化和skp2蛋白的表达,探讨其临床意义及相关性。方法：采用免疫组织化学法检测P—STAT3和skp2蛋白在56例喉鳞状细胞癌和30例喉全（或近全）切除者癌旁（〉2．0cm）正常黏膜中的表达,应用Metamorph／DPIO／BX41显微图象分析系统测定阳性表达的平均光密度值,并进行统计分析。结果：与癌旁正常黏膜组相比较,P—STAT3和Skp2蛋白在喉鳞癌组织中过表达（P〈0．01）;P—STAT3和skp2蛋白过表达与喉鳞癌的分化程度、临床分期、颈淋巴结转移有关（P〈0．05或P〈0．01）;在喉鳞癌组织中P—STAT3蛋白和skp2蛋白的表达呈正相关关系,相关系数r=0．8041（P〈0．01）。结论：P—STAT3和Skp2蛋白过表达与喉鳞癌的发生、发展和转移等生物学行为有关,两者的表达呈正相关。     

中期因子在喉癌中的表达及其临床意义

目的 检测中期因子(Midkine,MK)在喉癌组织中的表达,探讨MK高表达与喉癌颈淋巴结转移及预后的关系。方法 应用免疫组化法检测喉癌组织中MK的表达水平及微血管密度(MVD)。结果 14例喉正常黏膜和14例乳头状瘤组织中未见MK蛋白染色或仅见微弱染色(-)(2例乳头状瘤),表达率为0;而在75例喉癌中35例弱阳性(+),21例强阳性(++),表达率为74.7%。肿瘤细胞的MK与生存时间有关(P=0.001),MK表达从阴性(-)到阳性(+、++)生存期较原来下降5.63倍,应用多因素分析结果表明淋巴结的有无与复发有关,有淋巴结转移的复发是无淋巴结转移的5.488倍。结论 MK在喉癌组织中的高表达与颈淋巴结转移密切相关,可以作为喉癌诊断、预后的判定指标。     

喉鳞状细胞癌中p63基因蛋白表达及其意义

目的：探讨p63基因蛋白表达与喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinomas,LSCC）的发生、发展的关系和生物学意义。方法：应用免疫组织化学方法,检测30例LSCC、10例不典型增生和10例正常喉黏膜组织中p63基因蛋白的表达水平。结果：全部30例LSCC和10例不典型增生组织中p63染色均为阳性。LSCC分化程度越低,阳性细胞数越高、细胞的表达强度越高。正常喉黏膜组织中仅基底层及上基层细胞阳性。p63表达与LSCC分级和淋巴结转移相关（P〈0.05）。结论：p63可能参与了调控LSCC的发生、发展过程,其高表达预示LSCC预后不良。     

喉癌组织中Klotho基因的表达及其临床意义

目的   探讨喉癌组织中Klotho基因的表达及其与临床病理特征的关系。方法   应用实时荧光定量PCR（QPCR）和Western blotting检测80例喉癌组织及癌旁正常组织中的Klotho mRNA及蛋白表达情况,并探讨两者表达与临床病理特征的关系。采用甲基化特异性PCR（MSP）法检测Klotho基因启动子DNA甲基化状况。结果   80例喉癌组织中的Klotho mRNA 相对表达量为0.2890±0.012,低于癌旁正常组织的0.7908±0.015,差异有统计学意义（P＜0.01）;Klotho蛋白相对表达量为0.2290±0.009,低于癌旁正常组织的0.5368±0.023,差异有统计学意义（P＜0.01）。Klotho mRNA及蛋白表达与肿瘤浸润深度及淋巴结转移有关（P＜0.05）,而与年龄、性别、肿瘤部位、分化程度无关（P＞0.05）。喉癌组织及癌旁正常组织中Klotho基因启动子区DNA甲基化率分别为53.8％ （43／80） 、26.2％ （21／80）,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论  Klotho基因在喉癌组织中表达下调,其表达可能受Klotho基因启动子区DNA甲基化水平的调控,且与浸润深度及淋巴结转移密切相关。     

胰岛素样生长因子-Ⅰ受体在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

 目的 探讨胰岛素样生长因子-I受体（IGF-ⅠR)在喉癌组织中的表达情况, 及其与临床分期、分型、病理分级及淋巴结转移等的关系。 方法 采用免疫组织化学SP法检测60例喉鳞状细胞癌组织、25例癌旁组织及10例正常喉部组织中IGF ⅠR的表达情况。 结果 IGF-ⅠR在喉癌组织中的阳性表达率较正常喉部组织及癌旁组织明显增高（P<0.05）。IGF-ⅠR 在TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、 颈淋巴结转移及高分化癌患者中的表达水平较Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移及中低分化癌患者表达增强(P<0.05)。 结论 IGF-ⅠR在喉癌组织中表达过度,可能参与了喉癌的发生、发展过程,检测IGF-ⅠR的表达对预测 LSCC患者的预后具 有重要意义。     

非小细胞肺癌中MTA1的表达及临床意义

目的：研究非小细胞肺癌中MTA1蛋白表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学法检测96例非小细胞肺癌组织MTA1蛋白表达情况,并探讨其与非小细胞肺癌临床病理因素的关系。结果：MTA1蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于癌旁正常肺组织（P〈0.05）,其表达与患者年龄、性别、病理组织学分型及肿瘤大小无明显相关性（P〉0.05）。MTA1的表达水平与淋巴结转移及TNM分期相关,在有淋巴结转移的病例中的表达（阳性率为75.6%）显著高于无淋巴结转移的病例（阳性率为54.5%）,在Ⅲ和Ⅳ期病例中的表达（阳性率为76.3%）显著高于Ⅰ和Ⅱ期（阳性率为55.2%）（P〈0.05）。结论：MTA1表达水平与患者的TNM分期密切相关,在非小细胞肺癌进展包括淋巴结转移的过程中起到重要作用,可能成为潜在的治疗靶点。     

喉鳞状细胞癌中COX-2和E-钙黏附素的表达及其意义

目的探讨环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）和E-钙黏附素（E-cadherin,E-cad）表达与喉鳞状细胞癌（LSCC）发生、发展的关系及其生物学意义。方法应用免疫组织化学方法,检测45例LSCC组织、12例喉不典型增生（AH）和10例正常喉黏膜（NLM）组织中COX-2和E-cad蛋白表达水平。结果 LSCC中COX-2表达阳性率高于喉不典型增生和正常喉黏膜组织（P〈0.05）,而E-cad表达阳性率低于喉不典型增生和正常喉黏膜组织（P〈0.05）。在LSCC组织中COX-2和E-cad表达阳性率分别为77.8%（35/45）和62.2%（28/45）。COX-2高表达和E-cad低表达与LSCC分级和淋巴结转移相关（P〈0.05）。LSCC中COX-2表达与E-cad表达呈负相关（P〈0.05）。结论 COX-2和E-cad表达水平可作为判断LSCC分级、淋巴结转移和预后的重要参考指标。     

FASCIN-1和MMP-1在喉鳞癌中的表达及其临床意义

目的：探讨Fascin-1和MMP-1在喉鳞状细胞癌（LSCC）和癌旁组织中的表达及意义。方法：免疫组化SP法检测50例喉鳞状细胞癌及其癌旁0.5cm、1.0cm、2.0cm组织中Fascin-1和MMP-1的表达情况,并分析两者的关系。结果：Fascin-1在喉鳞癌中的表达及癌旁0.5cm、1.0cm及2.0cm的黏膜中表达率依次降低,分别为80.0%、27.5%、22.5%、4.0%,除了癌旁0.5组与癌旁1.0组,癌旁1.0组与癌旁2.0组差别无统计学意义之外（P〉0.008）,其余各组间差别均有统计学意义（P〈0.008）。MMP-1在喉癌癌旁0.5cm、1.0cm及2.0cm的表达率依次降低,分别为85.0%、35.0%、17.5%、5.0%,除了癌旁0.5组与癌旁1.0组,癌旁1.0与癌旁2.0差别无统计学意义之外（P〉0.008）,其余各组间差别均有统计学意义（P〈0.008）。喉鳞癌中Fascin-1蛋白的表达与癌的外科切缘,临床分期,肿瘤分化程度及淋巴结转移相关,与性别和年龄无关。MMP-1蛋白表达同样与癌的外科切缘,临床分期,肿瘤的分化程度及淋巴结转移相关,与性别和年龄无关。二者的表达呈正相关（P〈0.001）。结论：Fascin-1和MMP-1在喉鳞癌侵袭和转移中发挥重要作用,二者联合检测可能成为预测喉鳞癌预后的生物学指标,并为以Fascin-1和MMP-1为靶点的癌症治疗提供了思路。     

VEGF-A、VEGF-C、VEGF-R3在喉癌中的表达及其与淋巴转移的关系

目的探讨喉癌组织中VEGF—A、VEGF-C、VEGF—R,的表达及其与颈部淋巴转移的关系,以期有助于喉癌生长和转移机制的进一步阐明。方法应用逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）技术,检测30例喉癌组织及15例癌旁正常组织中VEGF—A、VEGF—C、VEGF-R3 mRNA的表达情况;采用免疫组织化学方法检测50例喉癌组织和15例癌旁正常组织三者蛋白的表达情况,并对喉癌组织按年龄、T分期、病理分级、淋巴转移进行分组,分别用2种方法探讨三者与各临床病理参数及淋巴转移的关系。结果RT—PCR和免疫组化方法均显示：VEGF—A、VEGF—C、VEGF-R,在喉鳞癌组织中的阳性表达明显高于癌旁正常组织;在癌组织中,VEGF—A与患者年龄无关,但与T分期、病理分级有关,VEGF—C、VEGF—R,与患者年龄、T分期、病理分级均无关。同时还显示：VEGF—A、VEGF—C、VEGF—R,在淋巴转移组中的阳性表达明显高于未转移组,而且免疫组化方法将淋巴转移组分别与声门上型、贯声门型、声门型无淋巴转移组比较,差异亦有显著性。结论VEGF—A、VEGF—C、VEGF—R,的高表达与颈部淋巴转移密切相关,可能成为预测喉癌转移和预后的生物学指标。另外,三者在喉癌组织中表达增高,可能是喉癌发生发展的原因之一。