乳腺癌miRNA的研究进展

研究显示微小RNA(miRNA)与乳腺癌的发生发展过程关系密切.多种miRNA参与了乳腺癌的发病进展,并能评估预后,指导临床用药及探索其耐药机制.     

乳腺癌干细胞抵抗放射治疗及化疗的调控机制

据中国城市癌症报告统计,乳腺癌是中国城市女性发病率最高的癌症。尽管乳腺癌早期原位切除及放射治疗和化疗(简称放化疗)后,患者的5年和10年生存率较好,但依旧有小部分癌细胞逃逸、潜伏和扩散,导致乳腺癌复发和转移。未治愈乳腺癌中,约70%发生肺转移,60%发生骨转移和肝转移,15%发生脑转移。肿瘤干细胞是肿瘤组织中存在的少量具有干细胞特征的细胞亚群,有极强的再生肿瘤能力以及天然放化疗抵抗能力,被视作乳腺癌复发、转移的主要原因。靶向肿瘤干细胞的研究,为人类彻底攻克恶性肿瘤带来了希望。乳腺癌组织中具备乙醛脱氢酶(＋)、CD44^＋ CD24^－Lin^－等特征的细胞亚群已经被证实是乳腺肿瘤干细胞。笔者总结了乳腺肿瘤干细胞的鉴定、起源、特征、调控机制、放化疗不敏感的原因及临床靶向治疗的研究进展,供同行参考。     

乳腺癌多药耐药机制研究进展

近年来对乳腺癌的MDR机制研究不断深入．主要从基础和临床两方面对此予以综述。     

微小RNA在乳腺癌耐药中的研究

乳腺癌的多药耐药(MDR)是造成乳腺癌治疗失败的关键因素.微小RNA (miRNA)是一种内源性表达小分子单链RNA,通过与靶基因的信使RNA结合调控基因的转录后表达.miRNA参与乳腺癌耐药形成的多种机制,是治疗耐药乳腺癌的可行靶点.寻找新的miRNA并研究其在乳腺癌耐药中的作用已成为当今研究的热点.     

乳腺癌化疗耐药中肿瘤干细胞的作用及其机制

目的:了解肿瘤干细胞在乳腺癌化疗耐药中的作用及其相关机制的研究进展。方法:应用检索Pubmed及CNKI数据库检索系统,以肿瘤、干细胞、乳腺癌、化疗和耐药等为关键词,检索1999-01-2011-05的相关文献,纳入标准:肿瘤干细胞与乳腺癌化疗耐药。根据纳入标准分析42篇文献。结果:肿瘤干细胞是导致乳腺癌化疗耐药和治疗失败的主要细胞,其耐药的机制包括ATP结合盒转运子的过度表达、细胞解毒酶的过度活化、细胞存活和凋亡相关信号转导通路的异常激活、肿瘤壁龛对肿瘤干细胞的保护作用以及大部分肿瘤干细胞处于静止期。通过对这些耐药机制的干预,可以逆转肿瘤干细胞的耐药性。结论:肿瘤干细胞是导致乳腺癌化疗耐药的关键细胞,对其耐药机制的研究有助于展开针对肿瘤干细胞的靶向治疗,改善患者的预后。     

乳腺癌多药耐药机制研究进展

近年来对乳腺癌的MDR机制研究不断深入 ,主要从基础和临床两方面对此予以综述。     

胃癌差异表达miRNA及其相关基因的单核苷酸多态性与胃癌预后的相关性研究

目的：探讨胃癌差异表达微小RNA（miRNA）及其相关基因的单核苷酸多态性（SNPs）与胃癌预后的相关性，为进一步寻找胃癌预后的生物标志物提供线索。方法：应用SNP芯片联合生物信息学分析对福建省胃癌高发区仙游县96例胃腺癌患者与96例健康对照人群基因组中miRNA及其相关基因的SNPs位点进行筛检，应用飞行时间质谱生物芯片（Sequenom MassARRAY）在344例胃癌患者中对筛检出来的SNPs位点进行检测。开展现场流行病学调查，通过面对面的访谈及问卷调查取得患者的病情、治疗方法、患病后1年的生活饮食习惯，分析其预后情况。结果：共筛检出11个miRNA及其相关基因的SNPs位点，包括5个miRNA自身SNPs、5个miRNA靶序列SNPs以及1个miRNA生物合成通路基因相关SNPs。单因素分析显示miR-1297 rs9536676、MSH2 rs17502941位点的多态性与胃癌预后有关联性，其余的多态性位点均与胃癌预后无明显相关性。多因素分析显示是否手术、TNM分期、rs17502941 AA/AG基因型均是影响胃癌预后的独立危险因素。按年龄TNM分期联合分层得出，miR-1297 rs9536676、miRNA-519b rs10413288、miR-379 rs7143252、FAS基因rs1468063、EGFR基因rs10277413位点均与胃癌患者的生存分布有关联。联合作用分析结果显示患者同时携带rs9536676 AA/AG和rs17502941 GG、rs9536676 AA/AG和rs10413288 AA、rs17502941 GG和rs10413288 AA基因型可能会增加预后不良的风险（P < 0.05）。结论：胃癌差异表达miRNA及其相关基因的SNPs与胃癌病人预后密切相关，可能作为判断胃癌预后的生物标志物。     

胃癌差异表达miRNA及其相关基因的单核苷酸多态性与胃癌预后的相关性研究

目的：探讨胃癌差异表达微小RNA（miRNA）及其相关基因的单核苷酸多态性（SNPs）与胃癌预后的相关性,为进一步寻找胃癌预后的生物标志物提供线索。方法：应用SNP芯片联合生物信息学分析对福建省胃癌高发区仙游县96例胃腺癌患者与96例健康对照人群基因组中miRNA及其相关基因的SNPs位点进行筛检,应用飞行时间质谱生物芯片（Sequenom MassARRAY）在344例胃癌患者中对筛检出来的SNPs位点进行检测。开展现场流行病学调查,通过面对面的访谈及问卷调查取得患者的病情、治疗方法、患病后1年的生活饮食习惯,分析其预后情况。结果：共筛检出11个miRNA及其相关基因的SNPs位点,包括5个miRNA自身SNPs、5个miRNA靶序列SNPs以及1个miRNA生物合成通路基因相关SNPs。单因素分析显示miR-1297 rs9536676、MSH2 rs17502941位点的多态性与胃癌预后有关联性,其余的多态性位点均与胃癌预后无明显相关性。多因素分析显示是否手术、TNM分期、rs17502941 AA/AG基因型均是影响胃癌预后的独立危险因素。按年龄TNM分期联合分层得出,miR-1297 rs9536676、miRNA-519b rs10413288、miR-379 rs7143252、FAS基因rs1468063、EGFR基因rs10277413位点均与胃癌患者的生存分布有关联。联合作用分析结果显示患者同时携带rs9536676 AA/AG和rs17502941 GG、rs9536676 AA/AG和rs10413288 AA、rs17502941 GG和rs10413288 AA基因型可能会增加预后不良的风险（P < 0.05）。结论：胃癌差异表达miRNA及其相关基因的SNPs与胃癌病人预后密切相关,可能作为判断胃癌预后的生物标志物。     

微小RNA多态性与肿瘤易感性的研究进展

 微小RNA（microRNA,简称miRNA）是一类生物体内源性的非编码小RNA,在转录后水平对基因的表达进行负调控,导致mRNA的降解或翻译抑制,与肿瘤发生密切相关。miRNA序列的单核苷酸多态性（miRSNP）影响成熟体miRNA的表达水平以及对靶标mRNA的选择,miRSNP介导的表观遗传学改变与肿瘤的发生机制相关,并可能成为恶性肿瘤的分子标志,文章就最近研究的热点miRSNP与肿瘤易感性作一综述。     

微小RNA与卵巢癌铂类耐药的研究进展

微小RNA(micmRNA,miBNA)是广泛存在于生物体内的一类非编码的小RNA,miRNA是细胞增殖、死亡、应激抗性和脂肪代谢的关键调节因素,体外实验已经证实miRNA在卵巢癌耐药中起重要作用.卵巢癌铂类耐药的产生与发展是十分复杂的过程,研究结果显示,miRNA的表达对卵巢癌细胞株的铂类药物敏感性有着重要作用,能够...     

乳腺癌组织中多药耐药相关蛋白的表达及其临床意义

目的：探讨P-gp、LRP、GST-π和Topo-Ⅱ在乳腺癌组织中的表达及术前化疗对乳腺癌多药耐药的影响和临床意义.方法：采用免疫组织化学SP法,对18例术前曾用化疗和70例术前未用化疗的88例乳腺癌组织检测P-gp、LRP、GST-π和Topo-Ⅱ的表达.结果：88例乳腺癌中P-gp、LRP、GST-π和Topo-Ⅱ的阳性率分别为42.0%、53.4%、48.9%和40.9%.术前应用化疗的的患者癌组织P-gp、LRP和GST-π三者阳性表达率均较未用化疗的患者高,P-gp和LRP差异有统计学意义（P＜0.05）,而GST-π差异无统计学意义,P＞0.05.Topo-Ⅱ有化疗史的患者比无化疗史的患者低,但差异无统计学意义,P＞0.05.结论：P-gp、LRP、GST-π和Topo-Ⅱ的耐药机制各不相同,同时检测P-gp、LRP、GST-π和Topo-Ⅱ等多种导致多药耐药的因素,对乳腺癌化疗有重要的指导意义.     

雌激素受体基因ESR1多态性与乳腺癌易感性的关系

目的：研究雌激素受体α（ESR1）基因单核苷酸多态性（SNPs）与乳腺癌易感性的关系。方法：运用聚合酶链反应（PCR）和限制性片段长度多态性（RFLP）分析的方法检测193例中国汉族女性乳腺癌患者和71名正常女性对照者ESR1基因上rs11155816位点的基因型,以SPSS 11.0软件卡方检验处理数据。结果：rs11155816位点等位基因频率符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。rs11155816位点的等位基因及基因型与患者肿瘤位置及是否存在远处转移相关,差异有显著性（P〈0.05）;与年龄、大小、组织学类型、受体表达无关。rs11155816位点等位基因及基因型频率在乳腺癌人群与正常对照者间分布差异有显著性,乳腺癌人群中等位基因A频率高于正常人群（23.8%比15.5%,P〈0.05）。结论：rs11155816位点基因的多态性与乳腺癌患者的肿瘤位置和远处转移相关,等位基因A携带者乳腺癌发病风险较高。     

雌激素受体基因ESR1多态性与乳腺癌易感性的关系

目的:研究雌激素受体α(ESR1)基因单核苷酸多态性(SNPs)与乳腺癌易感性的关系。方法:运用聚合酶链反应(PCR)和限制性片段长度多态性(RFLP)分析的方法检测193例中国汉族女性乳腺癌患者和71名正常女性对照者ESR1基因上rs11155816位点的基因型,以SPSS 11.0软件卡方检验处理数据。结果:rs11155816位点等位基因频率符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。rs11155816位点的等位基因及基因型与患者肿瘤位置及是否存在远处转移相关,差异有显著性(P<0.05);与年龄、大小、组织学类型、受体表达无关。rs11155816位点等位基因及基因型频率在乳腺癌人群与正常对照者间分布差异有显著性,乳腺癌人群中等位基因A频率高于正常人群(23.8%比15.5%,P<0.05)。结论:rs11155816位点基因的多态性与乳腺癌患者的肿瘤位置和远处转移相关,等位基因A携带者乳腺癌发病风险较高。     

The mechanism underlying resistance to 5-fluorouracil and its reversal by the inhibition of thymidine phosphorylase in breast cancer cells

Fluoro-deoxyuridine monophosphate (FdUMP) is an active metabolite of 5-fluorouracil (5-FU) synthesized through two hypothesized pathways: The orotate phosphoribosyl transferase-ribonucleotide reductase (OPRT-RR) pathway and the thymidine phosphorylase-thymidine kinase (TP-TK) pathway. In the present study, the mechanism underlying 5-FU resistance was investigated, focusing on changes in 5-FU metabolism using MCF-7, 5-FU-resistant MCF-7/5-FUR, MDA-MB-231 and 5-FU-resistant MDA-MB-231/5-FUR breast cancer cells. The amount of FdUMP present following treatment with 5-FU was determined by the density of the upper band of thymidylate synthase detected by western blotting, and its changes were investigated. MCF-7/5-FUR cells exhibited 5-FU resistance (36.6-fold), and showed decreased OPRT (−69.3%) and TK (−42.6%) levels. MDA-MB-231/5-FUR cells also exhibited 5-FU resistance (15.8-fold), and showed decreased TP (−79.0%) and increased TK (+184%) levels. MCF-7/5-FUR and MDA-MB-231/5-FUR cells both showed decreased synthesis of FdUMP by 91 and 86%, respectively. In MCF-7 and MCF-7/5-FUR cells, the synthesis of FdUMP was decreased when 5-FU was combined with an RR inhibitor, indicating that FdUMP was synthesized through the OPRT-RR pathway. The synthesis of FdUMP was decreased when 5-FU was combined with a TP inhibitor in MDA-MB-231 cells and combined with an RR inhibitor in MDA-MB-231/5-FUR cells, indicating that the synthesis pathway of FdUMP was changed from the TP-TK pathway to the OPRT-RR pathway on acquiring resistance to 5-FU. Notably, the synthesis of FdUMP was increased and the resistance to 5-FU was reversed in MCF-7/5-FUR cells (half maximal inhibitory concentration (IC₅₀): 219.9 to 0.093 µM) and MDA-MB-231/5-FUR cells (IC₅₀: 157.3 to 31.0 µM) when 5-FU was combined with a TP inhibitor. In conclusion, the metabolism of 5-FU and the mechanism underlying the resistance to 5-FU differed among cell lines, and inhibition of TP reversed resistance to 5-FU, thus suggesting that the combination of 5-FU and a TP inhibitor may be considered a promising cancer therapy.     

MiR-34a对乳腺癌Mcf-7／ADR细胞株多柔比星敏感性影响研究

目的：探讨乳腺癌细胞株MCF7和耐药株MCF7／ADR中miR-34a的表达差异及miR-34a对于多柔比星化疗敏感性的影响。方法：采用实时定量PCR技术检测MCF-7细胞及MCF-7／ADR细胞中miR-34a的表达差异。采用转染技术,以脂质体为载体,在MCF_7／ADR细胞株中过表达miR-34a后,检测其对于多柔比星耐药活性的影响,同时采用实时定量PCR技术和蛋白质印迹法技术检测靶基因的表达变化。结果：MCF-7细胞株和耐药株MCF-7／ADR中miR-34a的相对表达量分别为1．01±0．03和0．76±0．04,在耐药细胞株中呈现下调表达,P=0．007。MTT结果显示,MCF7及其耐药株MCF-7／ADR细胞多柔比星半数抑制浓度Ic5。分剐为（0,22±0．02）和（18．7±0．09）ftmol／L。对耐药株MCF-7／ADR过表达miR34a后,MCF-7／ADR细胞对多柔比星的ICso降低为（10．7士0．11）mol／L,明显增强此细胞株对于多柔比星的耐药敏感性。实时定量PCR结果显示,与转染阴性对照RNA相比,于耐药株MCF7／ADR细胞中转染miR--34a后耐药相关靶基因Bcl-2和CCNDl的mRNA水平分别降低了0．46±0．02（P=0．002）和0．33±0．02（P=0．008）。蛋白质印迹结果显示,过表达miR-34a后,可明显下调靶基因Bcl-2和CCNDl的表达。结论：上调表达miR34a可以增加耐药细胞株MCF-7／ADR对于多柔比星的耐药敏感性。     

乳腺癌干细胞的治疗抵抗及其信号通路

乳腺癌干细胞是导致乳腺癌治疗失败的主要原因,其在乳腺癌进展及复发耐药过程中发挥重要作用,与乳腺癌的放化疗、内分泌治疗抵抗等密切相关.其转移潜能及治疗抵抗与上皮间质转化及Hedgehog、Wnt、白细胞介素-6/信号传导与转录激活因子3、转化生长因子-β等多种信号通路相关,而针对这些信号通路的部分靶向药物也正进行临床转化研究,有望为乳腺癌的临床治疗提供新的方法.     

微小RNA基因多态与乳腺癌易感性的关系

目的：探讨微小RNA（ miRNA）基因序列的单核苷酸多态（ SNP ）位点与乳腺癌患病风险之间的关系,以期分析可用于易感人群筛查的分子标志物。方法选取经病理证实的乳腺癌患者（病例组）384例,选取与病例组患者年龄匹配的正常健康对照（对照组）192例,均为汉族、女性,均经5年以上随诊证实无恶性肿瘤病史。根据美国国立生物技术信息中心和microRNA Base公共数据库信息,选择已知汉族人群中全部miRNA最小等位基因频率＞0．05的SNP位点,最终入选22条miRNA基因的23个位点。采用高通量的MassARRAY时间飞行质谱生物芯片系统分析候选位点的基因型。采用非条件Logistic回归模型评估候选位点与乳腺癌患病风险的关系。结果全组研究对象年龄21～81岁,中位年龄48岁。病例组患者的年龄分布、吸烟状态与对照组比较,差异均无统计学意义（均P＞0．05）。病例组和对照组伴有乳腺癌或卵巢癌家族史者所占比例分别为9．1％和1．6％,初潮年龄≤14岁所占比例分别为53．1％和37．5％,未绝经者所占比例分别为61．2％和50．0％,差异均有统计学意义（均P＜0．05）。病例组miRNA基因SNP位点各基因型的分布频率与对照组比较,差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论存在于miRNA基因序列的SNP与汉族、女性乳腺癌患病风险无明显相关性。     

miRNA与乳腺癌发生发展和多药耐药的研究现状

目的:总结近期国内外有关微小RNA(miRNA)在乳腺癌发生发展和多药耐药中作用的研究进展。方法:应用Pubmed和CNKI期刊全文数据库检索系统,以"miRNA、乳腺癌耐药和耐药相关蛋白"为关键词,检索2008-01-2011-03有关miRNA在乳腺癌发生发展和多药耐药中作用的文献。纳入标准:1)miR-NA在乳腺癌发生发展中的作用。2)miRNA通过调控耐药蛋白表达参与乳腺癌多药耐药。根据纳入标准分析33篇文献。结果:多种miRNA与乳腺癌的发生发展及侵袭转移和复发密切相关。其中,能够促进乳腺癌侵袭转移的miRNA少有报道,目前仅有miR-373和miR-21。多种miRNA能够抑制乳腺癌侵袭转移,如:miR-340、miR-1258、miR-520b、miR-206、miR-19、miR-34和miR-199a/b。此外,多种miRNA参与乳腺癌多药耐药的形成过程。其中,miR-519c、miR-328和miR-520h3种miRNA可调控乳腺癌耐药蛋白(BCRP)表达,miRNA-451可调控P糖蛋白(P-gp)表达,miR-326可调控多药耐药相关蛋白(MRP)表达从而参与乳腺癌多药耐药。结论:深入研究miRNA在乳腺癌发生及多药耐药中的作用将为乳腺癌的治疗提供新的有效靶点。