西咪替丁对胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的影响

目的:观察西咪替丁对人胃癌SGC-7901细胞增殖、细胞周期分布及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制.方法:培养人胃癌SGC-7901细胞,以不同浓度的西咪替丁处理后用MTT法检测SGC-7901细胞的增殖情况;流式细胞术检测癌细胞周期和凋亡;Hoechst33258染色后荧光显微镜观察药物作用后癌细胞的形态变化;透射电镜观察用药后细胞超微结构的改变;Western印记法检测Bcl-2和Bax蛋白表达.结果:以不同浓度的西咪替丁分别处理人胃癌SGC-7901细胞24h和48 h,结果发现,在0.5,1,2.5,5,10 mmol/L时对SGC-7901细胞的增殖具有显著的抑制作用,与对照组相比差异显著(24 h:0.705±0.018,0.560±0.038,0.408±0.029,0.276±0.042,0.205±0.031 vs 0.803±0.012,P<0.05;48 h:0.902±0.024,0.671±0.015,0.420±0.030,0.180±0.037,0.0117±0.021 vs 1.079±0.040,P<0.05),并呈时间和剂量依懒性,而在0.25 mmol/L以下浓度对SGC-7901细胞未见明显细胞毒作用;0.5-10 mmol/L西咪替丁作用后,可观察到典型的细胞凋亡形态学改变;流式细胞仪检测可见凋亡峰,G0/G1期细胞明显增多(60.83±2.27,67.21±1.18,75.15±4.01,81.88±3.10,86.99±1.43 vs 50.28±1.97,P<0.05);西咪替丁还可下调SGC-7901细胞中的Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达.结论:西咪替丁可改变细胞周期分布,并能通过下调Bcl-2、上调Bax蛋白表达,诱导SGC-7901细胞凋亡,从而抑制细胞增殖.     

节律基因Bmal1对胃癌细胞BGC-823增殖及凋亡的影响

目的 探讨节律基因Bmal1对胃癌细胞BGC-823增殖及凋亡的影响.方法 构建针对Bmal1序列的shRNA,用脂质体介导转染入胃癌细胞BGC-823,G418筛选稳定细胞株(转染组),同时设对照组(空白组).用克隆形成率检测细胞生长,用流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,RT-PCR及Western blot法检测相关基因及蛋白表达.结果 转染组克隆形成率低于对照组(P＜0.05).与对照组比较,转染组Bmal1总凋亡率升高(P＜0.05),其细胞周期再分布出现G1期缩短(P＜0.05),G2期延长(P＜0.05),同时发现Bcl-2 mRNA表达下调(P＜0.05),c-Myc mRNA表达上调(P＜0.05).结论 Bmal1可以抑制胃癌细胞BGC-823增殖,促进细胞凋亡,有可能成为诱导胃癌细胞凋亡的新靶点.     

白毛夏枯草水提取物对胃癌细胞增殖、凋亡的影响

目的 分析白毛夏枯草水提取物对胃癌BGC823细胞增殖、凋亡的影响。方法 分别采用0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mg/ml的白毛夏枯草水提取物处理BGC823细胞,未做处理的BGC823细胞作为对照组,采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞迁移、侵袭,Western印迹检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、凋亡蛋白B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、髓细胞白血病因子(Mcl)-1及剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶(Cleaved Caspase)-3蛋白水平。结果 随着白毛夏枯草水提取物浓度的增加,BGC823细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、Bax及Cleaved Caspase-3蛋白水平依次显著升高,BGC823细胞迁移数、侵袭数、MMP-2、MMP-9、Bcl-2、Mcl-1蛋白水平依次显著下降,均呈浓度依赖性(P<0.05)。结论 白毛夏枯草水提取物可抑制胃癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,促进胃癌细胞凋亡。     

热疗联合奥沙利铂对胃癌细胞增殖、凋亡的影响

<正>胃癌是常见的消化道恶性肿瘤,传统治疗方法是手术、放射和化学疗法,但单一疗法治疗效果不理想。本研究旨在证实热疗联合奥沙利铂对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及机制,为胃癌的治疗研究提供理论基础。1材料方法1.1细胞培养及分组人胃癌SGC-7901细胞株购自中国科学院细胞库。SGC-7901细胞株在含有10%FBS、100μg/ml链霉素和100 U/ml青霉素的     

骆驼蓬碱对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究

背景:骆驼蓬碱可通过下调环氧合酶-2(COX-2)表达抑制胃癌细胞增殖,但其分子机制尚未完全明确。目的:研究骆驼蓬碱对胃癌细胞增殖、凋亡的影响,探讨PTEN/Akt/MDM2信号通路在该过程中的作用。方法:以不同浓度(2、4、8、16、32μg/m L)骆驼蓬碱干预人胃腺癌细胞株SGC-7901和MKN-45 24 h、48 h和72 h,分别采用MTT法和Hoechst染色检测细胞增殖和凋亡情况;蛋白质印迹法检测PTEN、COX-2表达以及Akt、MDM2磷酸化水平。结果:骆驼蓬碱呈剂量和时间依赖性地抑制SGC-7901、MKN-45细胞增殖,并诱导其发生典型的凋亡形态学改变。骆驼蓬碱呈剂量依赖性地上调PTEN表达、抑制Akt、MDM2磷酸化以及COX-2表达。结论:骆驼蓬碱可能通过PTEN/Akt/MDM2信号通路下调COX-2表达,抑制胃癌细胞增殖并诱导其凋亡。     

阿帕替尼对胃癌细胞增殖、凋亡及VEGFR通路的影响研究

目的 探讨阿帕替尼对胃癌细胞增殖、凋亡及VEGFR通路的影响.方法 选取胃癌细胞系HGC-27和NCI-N87细胞,通过CCK-8细胞增殖试验和克隆形成实验探讨不同浓度阿帕替尼对HGC-27和NCI-N87细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测不同浓度阿帕替尼对HGC-27和NCI-N87细胞凋亡的影响;采用Western...     

新型蛋白酶体抑制剂MLN2238对胃癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的探讨新型蛋白酶体抑制剂MLN2238对胃癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法取对数生长期胃癌细胞系BGC-823和SGC-7901,按照MLN2238终浓度0、25、50、75、100 nmol/L分为5组,处理24、48、72 h后采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测各孔吸光值并计算存活率以评价MLN2238对胃癌细胞的增殖抑制作用;处理48 h后经膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)和碘化丙啶(PI)双标或PI标记后,采用流式细胞术检测胃癌细胞凋亡率及细胞周期的变化。结果相同作用时间(24、48或72 h)下,随着MLN2238浓度的增加,MLN2238处理后BGC-823、SGC-7901细胞的存活率降低(P0.05);相同MLN2238浓度(25、50、75或100 nmol/L)情况下,除100 nmol/L MLN2238作用24 h和48 h的BGC-823细胞存活率间无统计学差异外(P0.05),随MLN2238作用时间的延长,MLN2238对BGC-823、SGC-7901细胞的增殖抑制作用也基本呈递增趋势(P0.05);MLN2238处理BGC-823、SGC-7901细胞48 h后,除75、100 nmol/L MLN2238作用BGC-823细胞各周期细胞比例的差异无统计学意义外(P0.05),随MLN2238浓度的增加,BGC-823、SGC-7901细胞的凋亡率、G0/G1期细胞比例均升高,S、G2/M期细胞比例降低,且MLN2238的促凋亡效应和促细胞周期G0/G1期阻滞作用呈浓度依赖性(P0.05)。结论 MLN2238可抑制胃癌细胞的增殖并诱导细胞凋亡及G0/G1期阻滞,MLN2238的以上作用与作用时间和作用浓度有关。     

阿司匹林对胃癌细胞株7901增殖和凋亡的影响

目的 体外观察阿司匹林（ASA）对胃癌细胞株SGC-7901细胞平殖的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 采用噻唑蓝（MTT）法、流式细胞仪（FCM）、电镜和^3h-TdR核素标记等技术,研究ASA和SGC-7901细胞增殖的抑制和可能的机制。结果 MTT显示体外ASA对SGC-7901有细胞毒作用,与浓度和作用时间有相关性,^3H-TdR实验表明,ASA对细胞DNA合成有抑制制作。FCM显示,DNA直方图上出现典型的亚二倍体“凋亡峰”,凋亡率在7.8%-34.4%。使S期、G2/M期细胞比例升高,G1期比例下降,呈一定剂量效应关系。电镜下见典型的细胞凋亡形态学特征：细胞核染色质致密浓缩,凋亡小体形成等。结论 体外ASA对SGC-7901细胞增殖有抑制作用,可能与诱导细胞凋亡和阻止细胞周期的进展有关。     

白藜芦醇对胃癌细胞SGC7901增殖与凋亡的影响

目的:探讨白藜芦醇(Res)对胃癌细胞SGC7901增殖与凋亡的影响.方法:MTT法检测不同浓度(0,10,20,50,100,200 μmol/L)Res处理24,48,72 h对SGC7901细胞的抑制率.流式细胞仪采用AnnexinV和PI双染检测细胞的早期凋亡率.电镜扫描观察SGC7901细胞形态学改变,分光光度法检测caspase-3活性.结果:Res在20-300 μmol/L浓度范围内,以浓度和剂量依赖的方式抑制胃癌细胞的增殖(P＜0.01).经0,10,20,50,100,200 μmol/L Res处理24 h后,细胞凋亡率分别为1.17%,3.73%,8.75%,23.35%,63.97%和70.10%,晚期凋亡和坏死的细胞比例分别为5.66%,7.22%,9.86%,6.91%,12.51%及11.98%,各组之间差异不大.电镜下见到典型的细胞凋亡的形态学改变.100 μmol/L Res处理后6 h caspase-3活性增加,18 h达高峰,24 h后下降,48 h仍高于正常(0.135±0.036 vs 0.069±0.008,P＜0.05).经20,50,100 μmol/L Res处理18 h后的细胞的caspase-3活性分别为0.169±0.017,0.247±0.028,0.353±0.044(P＜0.01),较对照组(0.063±0.006)分别增加2.68倍、3.92倍和5.61倍.结论:Res通过诱导caspase-3活性增加以时间依赖和浓度依赖的方式抑制SGC7901细胞增殖,诱导细胞凋亡.     

迷迭香酸对胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响及机制

目的 探讨迷迭香酸(RA)对胃癌细胞SGC-7901生长、增殖、凋亡的影响及机制。方法 CCK8检测不同浓度RA对胃癌细胞SGC-7901生长的影响,筛选合适剂量;BrdU检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测氧化应激标志物;荧光探针检测活性氧(ROS);流式检测线粒体膜电位的变化;Western印迹检测线粒体损伤标志物(Bax/Bcl-2、Cleaved cas3/cas3)及Nrf2/HO-1通路(p-Nrf2/Nrf2、NQO1、HO-1)相关蛋白表达。结果 与对照组相比,RA浓度为10μmol/L时,RA对细胞生长的抑制作用较小,不具有显著差异。浓度为20μmol/L RA对细胞生长的抑制作用增加,差异显著(P<0.05)。CCK8实验结果将RA浓度分为4个组(RA 0、10、20、40μmol/L);与对照组(RA 0μmol/L)相比,除RA 10μmol/L剂量组差异无统计学意义外,20、40μmol/L剂量组Brdu阳性细胞百分数、线粒体膜电位均显著降低,细胞凋亡率、氧化应激标志物含量[低密度脂蛋白(LDL)、丙二醛(MDA)]、...     

p130Cas对胃癌细胞AGS增殖和凋亡的影响

目的探讨p130Cas对胃癌恶性生物学表型的影响及可能的分子机制。方法构建p130Cas siRNA慢病毒载体、p130Cas过表达慢病毒载体和相应的对照载体,转染AGS细胞株,筛选获得稳定转染株;RT-PCR及Western印迹证实载体的有效性;采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)比较慢病毒载体转染后各组细胞增殖情况;运用Annexin V-PI流式细胞实验检测各组细胞凋亡情况。结果成功构建了p130Cas siRNA慢病毒载体及p130Cas过表达慢病毒载体,构建的慢病毒载体均能高效率的感染AGS细胞,感染慢病毒过表达载体后细胞p130Cas mRNA及蛋白表达水平明显升高,感染慢病毒干扰载体后p130Cas mRNA及蛋白表达水平显著降低。p130Cas高表达细胞株无外界刺激时p130Cas磷酸化水平未发现有明显增加(P0.05);p130Cas低表达细胞株p130Cas磷酸化水平明显下降(P0.05)。高表达p130Cas细胞的增殖和凋亡无明显影响(P0.05);低表达p130Cas组细胞增殖受到抑制,凋亡率明显升高(P0.05)。结论 p130Cas总蛋白及磷酸化表达水平降低可抑制胃癌细胞株AGS细胞增殖,并促进AGS细胞凋亡,但其总蛋白表达增高对AGS细胞的增殖和凋亡无明显影响。     

胰岛素对肝癌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响及机制

目的:探讨胰岛素对肝癌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响。方法:不同浓度的胰岛素(5μIU/m L、10μIU/m L、20μIU/m L、40μIU/m L、80μIU/m L)处理人肝癌Hep G2细胞24h,同时设置对照组,CCK8检测细胞增殖情况; 80μIU/m L胰岛素处理细胞24h,Transwell法检测细胞侵袭能力;流式细胞仪检测细胞凋亡; Western blot检测凋亡蛋白Cleaved caspase 3、侵袭相关蛋白(MMP-2)和MMP-9、PI3K/AKT信号通路PI3K和p AKT的蛋白表达。结果:随着胰岛素浓度的升高,肝癌细胞增殖能力增强,与对照组比较,差异具有统计学意义(P 0. 05),选择80μIU/m L胰岛素进行后续侵袭、凋亡及蛋白表达实验研究;与对照组比较,胰岛素组细胞侵袭数显著升高,细胞凋亡率显著降低; Cleaved caspase 3蛋白表达显著下调,MMP-2、MMP-9、PI3K、p AKT蛋白表达显著上调(P 0. 05)。结论:胰岛素可促进肝癌细胞增殖和侵袭能力,抑制细胞的凋亡,其功能与Cleaved caspase 3、MMP-2、MMP-9蛋白表达及PI3K/AKT信号通路密切相关。     

LINC00176下调miR-761对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响

目的探讨LINC00176对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及潜在的作用机制。方法 miR-NC组(转染miR-NC)、miR-761组(转染miR-761 mimics)、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1)、pcDNA3.1-LINC00176组(转染pcDNA3.1-LINC00176)、si-NC组(转染si-NC)、si-LINC00176组(转染si-LINC00176)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-761组(转染anti-miR-761)、miR-NC+WT-LINC00176组(共转染miR-NC和WT-LINC00176)、miR-NC+MUT-LINC00176组(共转染miR-NC和MUT-LINC00176)、miR-761+WT-LINC00176组(共转染miR-761和WT-LINC00176)、miR-761+MUT-LINC00176组(共转染miR-761和MUT-LINC00176)、pcDNA3.1-LINC00176+miR-NC组(共转染pcDNA3.1-LINC00176和miR-NC)、pcDNA3.1-LINC00176+miR-761组(共转染pcDNA3.1-LINC00176和miR-761)均用脂质体法转染至SGC-7901细胞;采用qRT-PCR检测LINC00176和miR-761的表达水平;CCK-8法检测各组细胞增殖;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测各组细胞凋亡;Western印迹检测蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果相较于正常胃黏膜细胞GES-1,胃癌细胞MGC-803、SGC-7901中LINC00176的表达水平显著降低(P0.05);过表达LINC00176、抑制表达miR-761均可抑制SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡;抑制Bcl-2、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MPP)-2蛋白表达,促进Bax蛋、E-钙黏蛋白(cadherin)、P21蛋白表达。LINC00176靶向调控miR-761表达。过表达miR-761能逆转LINC00176对胃癌细胞SGC-7901增殖、迁移、侵袭的抑制和凋亡的促进作用。结论长链非编码RNA LINC00176可抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,其机制可能与靶向miR-761基因有关,将可为胃癌的预防和治疗提供新靶点。     

中药抑制结肠癌细胞增殖、促进凋亡的分子机制

结肠癌(colon cancer)已为常见的恶性肿瘤之一,有转移者5年生存率仅有8%。我国传统的中医在治疗结肠癌中,彰显了增效减毒的优势,具有抗肿瘤作用。近年来,中药对结肠癌细胞系体外培养生长的抑制作用、增强机体免疫功能以及对细胞周期、细胞凋亡的影响等进行了有益的探索。本文就中药抑制结肠癌细胞增殖、促进凋亡的分子机制与研究进展作一综述。     

WWOX基因转染对胆管癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

目的:探讨WWOX基因转染胆管癌细胞株QBC939后对其增殖、凋亡与侵袭性的影响.方法:用脂质体转染法将WWOX重组真核表达质粒转染QBC939细胞,建立稳定表达WWOX基因的细胞株.将其分为以下3组:QBC939组,QBC939/con组和QBC939/WWOX组.荧光定量RT-PCR和Western blot法检测...