补肾养经汤对多囊卵巢模型大鼠子宫AQP9表达的影响

目的 观察补肾养经汤对多囊卵巢(PCO)模型大鼠子宫水通道蛋白9(AQP9)表达的影响,探讨补肾养经汤治疗PCOS的机制.方法 筛选未成年23日龄SD雌性大鼠64只,随机抽取16只作为对照组,其余48只用硫酸普拉睾酮钠建立PCO动物模型,造模成功后将模型动物随机分为模型对照组、克罗米芬组、补肾养经汤高剂量组、补肾养经汤中剂量组、补肾养经汤低剂量组.给药后处死动物,采用免疫组化SP法检测各组大鼠子宫中AQP9表达水平的变化.结果 模型组与正常对照组比较,AQP9的表达明显降低(P＜0.01);补肾养经汤高、中、低剂量组及克罗米芬组与模型组比较,AQP9的表达明显增高(P＜0.05);与补肾养经汤低剂量组比较,补肾养经汤高剂量组AQP9的表达明显增加(P＜0.01),补肾养经汤中剂量组AQP9的表达虽有增加,但两者之间差异无统计学意义(P＞0.05);与补肾养经汤中剂量组比较,补肾养经汤高剂量组AQP9的表达明显增加(P＜0.01);与克罗米芬组比较,补肾养经汤高剂量组AQP9的表达明显增加(P＜0.01),而补肾养经汤中、低剂量组AQP9的表达虽有增加,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 补肾养经汤可明显上调模型大鼠子宫内膜腔上皮及腺上皮细胞中AQP9的表达,可能通过调节子宫内膜容受性来治疗PCOS.     

补阳还五汤对Cav1/Notch1/Hes1通路在小鼠脑缺血后海马NSCs增殖中的作用

目的探讨Cav1/Notch1/Hes1通路在小鼠脑缺血后海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖中的作用及补阳还五汤促神经再生的机制。方法采用大脑中动脉阻塞法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)复制小鼠脑缺血模型,将野生型(wild type,WT)和小凹蛋白-1基因敲除小鼠(caveolin1 gene knockout,Cav1 KO)分别随机分为假手术组、模型组、补阳组,每组12只,腹腔注射Brd U标记增殖细胞,干预7 d后,采用免疫荧光Brd U/Nestin双标法检测小鼠缺血侧海马NSCs增殖情况,Western blot法检测Notch1、NICD、Hes1蛋白表达,Real time PCR法检测Notch1、Hes1m RNA表达。结果 MCAO法成功复制了小鼠脑缺血模型;WT模型组、补阳组和KO模型组、补阳组缺血侧海马Brd U/Nestin双标阳性细胞,Notch1、NICD、Hes1蛋白表达及Notch1、Hes1m RNA表达均增加,与相应假手术组比较,差异有统计学意义(P0.01,P0.05),同时,WT模型组要高于KO模型组(P0.05),WT补阳组要高于WT模型组和KO补阳组(P0.01,P0.05)。结论Cav1/Notch1/Hes1通路在小鼠脑缺血后海马NSCs增殖中发挥重要调控作用;通过上调Cav1/Notch1/Hes1通路活性是补阳还五汤促进缺血海马神经再生作用机理之一。     

归芪聪志汤对血管性痴呆模型大鼠行为学和海马组织基因表达谱的影响

目的研究归芪聪志汤对血管性痴呆(Vasculardementia,VD)大鼠模型海马基因表达谱的影响及部分筛选基因表达的影响。方法从120只SPF级Wistar雌性大鼠中随机选取10只作为假手术组,其余均采用改良后的两血管阻断法改良法制备血管性痴呆大鼠模型,经水迷宫筛选出合格造模大鼠35只,随机区组分为假手术组,模型组,阳性对照组,归芪聪志汤高、中、低剂量组。归芪聪志汤连续灌胃4周后处死大鼠取材海马组织。Morris水迷宫检测造模后及治疗后行为学变化。全基因组表达谱芯片检测归芪聪志汤中剂量组与模型组海马组织之间差异表达的基因;RT-qPCR检测紧密连接蛋白-1,2,3,14,22(claudin-1,claudin-2,claudin-3,claudin-14,claudin-22),细胞黏附分子(ICAM),血管紧张素转化酶(ACE)的mRNA表达量。结果Morris水迷宫检测显示:模型鼠逃避潜伏期明显延长,跨原平台次数明显减少(P0.01)。治疗28d后模型组逃避潜伏期明显延长,跨原平台次数明显减少(P0.05);与模型组相比,各治疗组大鼠逃逸潜伏期均缩短,跨原平台次数均增多(P0.01),其中归芪聪志汤中剂量组、阳性药物对照组大鼠学习记忆能力改善情况优于归芪聪志汤高、低剂量组(P0.05)。基因芯片和RT-qPCR检测结果显示:与假手术组比较,模型组claudin-1,claudin-2,claudin-3,claudin-22,ICAM,ACE基因表达量均升高(P0.05,P0.01),claudin-14、CDH3基因表达量均下降(P0.05,P0.01);与模型组比较,各治疗组claudin-1,claudin-2,claudin-3,claudin-22,ICAM,ACE基因表达量均下降,claudin-14,CDH3基因表达量均升高,其中,归芪聪志汤中剂量组、阳性药物对照组优于归芪聪志汤高、低剂量组(P0.05)。结论归芪聪志汤能下调VD模型大鼠海马组织claudin-1,claudin-2,claudin-3,claudin-22,ICAM,ACE的表达,并升高claudin-14,CDH3的表达,从而发挥抗VD作用。     

文静汤对抽动障碍模型小鼠脑内多巴胺系统的影响

目的观察文静汤对抽动障碍模型小鼠脑内多巴胺(DA)系统的影响,探讨其作用机制。方法将72只ICR雄性小鼠随机分为空白组、模型组、西药组、文静汤低剂量组、文静汤中剂量组及文静汤高剂量组,每组12只。模型组、西药组、文静汤低剂量组、文静汤中剂量组及文静汤高剂量组以腹腔注射亚氨基二丙腈(IPDN)的方式建立抽动障碍模型,空白组腹腔注射等容积0.9%氯化钠注射液。造模成功后,西药组予盐酸硫必利片25 mg/(kg·d)灌胃,文静汤低、中、高剂量组分别予1、2、4 g/m L文静汤混悬液14 m L/(kg·d)灌胃,空白组及模型组予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃。均连续灌胃给药4周后比较各组小鼠行为学评分(包括刻板行为及运动行为)及脑内DA水平、巴胺转运蛋白(DAT)表达情况。结果 (1)与空白组比较,模型组、西药组、文静汤低剂量组、文静汤中剂量组及文静汤高剂量组刻板行为评分及运动行为评分均明显升高(P0.05);与模型组比较,西药组、文静汤中剂量组及文静汤高剂量组刻板行为评分及运动行为评分均明显降低(P0.05),文静汤低剂量组与模型组相当(P0.05);与西药组比较,文静汤高剂量组刻板行为评分及运动行为评分明显低于西药组(P0.05),文静汤中剂量组与西药组相当(P0.05)。(2)与空白组比较,模型组DA含量与之相当(P0.05);与模型组比较,西药组、文静汤中剂量组及文静汤高剂量组DA含量均明显降低(P0.05),文静汤低剂量组与模型组相当(P0.05);与西药组比较,文静汤高剂量组DA含量明显降低(P0.05),文静汤中剂量组与西药组相当(P0.05)。(3)与空白组比较,模型组、西药组、文静汤低剂量组、文静汤中剂量组及文静汤高剂量组DAT表达均明显降低(P0.05);与模型组比较,西药组、文静汤中剂量组及文静汤高剂量组DAT表达均明显升高(P0.05),文静汤低剂量组与模型组相当(P0.05);与西药组比较,文静汤高剂量组DAT表达明显升高(P0.05),文静汤中剂量组与西药组相当(P0.05)。结论文静汤对抽动障碍模型小鼠具有确切治疗作用,可改善小鼠行为学表现,且其作用效果与剂量浓度成正相关,其作用机制可能与调节DA系统功能失衡有关,降低脑内DA含量,增加DAT表达,使DA能神经元功能亢进受到抑制,从而改善患者抽动等临床症状。     

当归补血汤协同肌源性干细胞移植对小鼠胸腺Notch4、Delta4和Hes5的影响

目的:研究当归补血汤(Danggui Buxue Decoction,DBD)协同肌源性干细胞(Muscle-derived stem cells,MDSCs)移植对小鼠胸腺Notch4、Delta4和Hes5基因mRNA的影响。方法:将150只雌性昆明小鼠按照随机数字表随机分成照射模型组、骨髓移植组、MDSCs移植组、不同剂量(1、3和5倍)DBD预处理+MDSCs移植组。各组分别于照射前给予生理盐水或不同剂量DBD灌胃1周。经射线8Gy~(137)Cs-γ照射后,在小鼠尾静脉移植骨髓细胞或MDSCs。运用real-time PCR检测3周和8周末时小鼠胸腺中Notch4、Delta4和Hes5mRNA表达。结果:移植3周末,与模型组相比,各给药组Notch4、Delta4mRNA及给药2组Hes5mRNA表达上调,给药1组和给药3组的Hes5mRNA表达下调,骨髓移植组和MDSCs移植组Delta4mRNA表达下调,Hes5mRNA表达上调,骨髓移植组Notch4mRNA表达下调,MDSCs移植组Notch4mRNA表达上调,且组间具有统计学差异(Notch4,F=18.556,P=0.000;Delta4,F=5.635,P=0.007;Hes5,F=4.771,P=0.012)。移植八周末,与模型组相比,各给药组Delta4、Hes5mRNA及给药3组Notch4mRNA表达上调,给药1组和给药2组的Notch4mRNA表达下调,骨髓移植组和MDSCs移植组Notch4mRNA表达下调,Hes5mRNA表达上调,骨髓移植组Delta4mRNA表达下调,MDSCs移植组Delta4mRNA表达上调,且组间具有统计学差异(Notch4,F=19.057,P=0.000;Delta4,F=8.116,P=0.010;Hes5,F=4.545,P=0.015)。结论:Notch4、Delta4和Hes5在骨髓移植、MDSCs移植和DBD协同MDSCs移植中对T淋巴细胞分化和发育的作用相同,3倍剂量当归补血汤可通过Notch4和Delta4,并作用于下游靶基因Hes5来促进MDSCs向T细胞分化发育。     

酸枣仁汤对抑郁模型大鼠皮质、海马中NMDAR1、NMDAR2A、NMDAR2B基因表达的影响

目的观察酸枣仁汤对抑郁模型大鼠大脑皮质、海马中NMDAR1、NMDAR2A、NMDAR2B基因表达的影响,并探讨其作用机制。方法将大鼠随机分为空白组、模型组、西药组和酸枣仁汤高、中、低剂量组,除空白组外,其余各组大鼠均以慢性应激法复制抑郁症模型,各给药组给予相应药物灌胃。采用RT-PCR检测大鼠皮质、海马中NMDAR1、NMDAR2A和NMDAR2B基因的表达。结果与模型组比较,酸枣仁汤高、中剂量组大鼠皮质和海马中NMDAR1阳性表达均降低(P0.01);酸枣仁汤高、中剂量组和西药组皮质和海马中NMDAR2A阳性表达均降低(P0.05,P0.01),酸枣仁汤低剂量组海马中NMDAR2A表达增高(P0.05);酸枣仁汤高、中、低剂量组和西药组皮质中NMDAR2B阳性表达均降低(P0.01),酸枣仁汤中、低剂量组海马中NMDAR2B表达增高(P0.01)。结论酸枣仁汤可能通过降低大鼠皮质、海马中NMDAR1、NMDAR2A、NMDAR2B基因表达达到治疗抑郁症的作用。     

Cav1/Notch1/Hes1通路在小鼠脑缺血后海马NSCs增殖中的作用及补阳还五汤的影响

目的 探讨Cav1/Notch1/Hes1通路在小鼠脑缺血后海马神经干细胞（neural stem cells, NSCs）增殖中的作用及补阳还五汤促神经再生机制。方法 采用大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion , MCAO)法复制小鼠脑缺血模型，将野生型（wild type, WT）和小凹蛋白-1基因敲除（caveolin1 gene knockout,Cav1 KO）小鼠分别随机分为假手术组、模型组、补阳组，每组12只，腹腔注射BrdU标记增殖细胞，干预7d后，采用免疫荧光BrdU/ Nestin双标法检测小鼠缺血侧海马NSCs增殖情况，Western blot法检测Notch1、NICD、Hes1蛋白表达，Real time PCR法检测Notch1、Hes1mRNA表达。结果 MCAO法成功复制了小鼠脑缺血模型；WT模型组、补阳组和KO模型组、补阳组缺血侧海马BrdU/Nestin双标阳性细胞，Notch1、NICD、Hes1蛋白表达及Notch1、Hes1mRNA表达均增加，与相应假手术组比较有显著性差异(P< 0.01或P <0.05），同时，WT模型组要高于KO模型组(P <0.05)，WT补阳组要高于WT模型组和KO补阳组（P< 0.01或P <0.05）。 结论Cav1/Notch1/Hes1通路在小鼠脑缺血后海马NSCs增殖中发挥重要调控作用；通过上调Cav1/Notch1/Hes1通路活性是补阳还五汤促进缺血海马神经再生作用机理之一。     

六味地黄汤对发育迟缓仔鼠认知功能及脑组织NGF、EGF、bFGF表达的影响

目的:观察六味地黄汤对发育迟缓仔鼠认知功能及脑组织NGF、EGF、b FGF表达影响,阐述六味地黄汤补肾健脑的机制。方法:采用孕鼠被动吸烟复制仔鼠发育迟缓模型,于自然分娩后喂养仔鼠1个月,进行学习记忆能力的检测,采用免疫组化法及RT-q PCR检测仔鼠脑内NGF、EGF、b FGF的表达水平。结果:1造模后,与正常组相比,动物逃逸潜伏期延长,垮台次数减少(P0.05),药物治疗后,与模型组相比,逃逸潜伏期缩短,垮台次数增多,差异具有统计学意义(P0.05)。2正常仔鼠脑内NGF、EGF、b FGF基因和蛋白表达大致相同,造模后,NGF、EGF、b FGF表达减少,与正常组相比,差异具有统计学意义(P0.01或P0.05),药物治疗后,NGF、EGF、b FGF表达明显增多,与模型组相比,差异具有统计学意义(P0.01或P0.05)。结论:孕期被动吸烟可以导致仔鼠学习记忆能力降低以及脑组织NGF、EGF、b FGF表达下降,六味地黄汤能显著提高脑组织内NGF、EGF、b FGF表达水平,从而提高仔鼠的学习记忆能力可能是其补肾健脑的机制。     

活血通络汤基于Notch信号通路对家兔激素性股骨头缺血性坏死治疗作用机制研究

目的研究活血通络汤治疗家兔激素性股骨头缺血性坏死的作用机制。方法将40只日本大耳兔随机分为空白组、模型组、治疗给药组、预防加治疗给药组,每组10只,采用贺西京法制做家兔激素性股骨头坏死模型。预防给药组第2周开始喂服中药饲料,治疗给药组第3周开始喂服中药饲料,模型组和空白组均喂服等量普通饲料。第8周末各实验组耳缘静脉取血,RT-PCR检测白细胞Notch1,Notch2,Notch3,Notch4、DLL1,DLL3,DLL4,Jagged1,Jagged2,Hes1,Hes5,HERP1,HERP2基因表达。同时对股骨头进行病理镜检,计算空骨陷窝率。结果第8周时,活血通络汤预防给药组和治疗给药组家兔股骨空骨陷窝率显著低于模型组(P0.05);相比模型组,预防给药组家兔白细胞Notch1和Notch3 mRNA表达有显著升高(P0.05),而Notch2和Notch4 mRNA表达有显著下调(P0.05);相比模型组,预防给药组和治疗给药组家兔白细胞Hes1和Hes5 mRNA表达有显著下调(P0.05),Jagged1 mRNA表达有显著升高(P0.05);预防给药组和治疗给药组家兔白细胞DLL1和DLL4mRNA表达有显著升高(P0.05)。结论活血通络汤通过早期作用于Notch1或其它成员导致其表达发生变化,从而激活Notch如Notch1-DLL1信号传导通路,而增加Notch1胞内NICD的表达,促进下游靶基因的转录表达,促进血管生成,从而参与对骨细胞增殖的调控,进而促进新骨生成。     

蒙古族药阿给炭对胃溃疡大鼠溃疡组织VEGF, bFGF及其受体mRNA表达的影响

目的:研究蒙古族药阿给炭对应激型胃溃疡模型大鼠溃疡组织血管内皮生长因子(VEGF),碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)及其受体mRNA表达的变化,探讨阿给炭促进胃溃疡愈合的分子机制。方法:84只SD大鼠分为7组,即正常组,模型组,阳性药云南白药组(0.18 g·kg-1),阿给生药组(1.35 g·kg-1),阿给炭药低、中、高剂量组(0.9,1.35,1.8 g·kg-1),除正常组外,其余各组采用水浸束缚应激方法复制急性胃溃疡大鼠模型。连续给药1周后,常规处死动物,剪取胃部溃疡组织,采用Western blot及RT-PCR技术检测VEGF及VEGF受体(VEGFR),b FGF及b FGF受体(b FGFR)mRNA及蛋白表达水平。结果:与正常组比较,急性应激性溃疡导致大鼠溃疡组织b FGF(P0.01)和b FGFR(P0.05)蛋白表达水平显著降低。与模型组比较阿给炭低剂量组明显升高了大鼠溃疡组织VEGF mRNA(P0.05)以及VEGF和VEGFR蛋白表达(P0.05),但无剂量相关性;其他各组与模型组无差异;中剂量、高剂量阿给炭和云南白药显著升高b FGF的蛋白表达(P0.01),高剂量阿给炭同时也升高了b FGF和b FGFR mRNA(P0.01)和b FGFR蛋白表达(P0.05)。结论:阿给炭促进胃溃疡愈合的分子机制可能与上调VEGF及其受体蛋白,b FGF及其受体蛋白有关,对VEGF,b FGF和b FGFR的调控是在转录水平,对VEGFR的调控是在后转录水平。     

养阴生肌散对糖尿病大鼠皮肤溃疡组织TGF-β1、bFGF、VEGF表达的影响

目的:观察养阴生肌散对糖尿病大鼠皮肤溃疡组织转化生长因子β1(TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:以STZ腹腔注射诱导糖尿病模型,成模27只糖尿病大鼠切除皮肤制备皮肤溃疡模型。随机分为模型组、阳性药组和养阴生肌散组,每组9只,另取10只大鼠作空白对照。分别于给药3、7、14 d记录皮肤愈合面积,计算愈合率;于第14 d采用免疫组织化学法检测皮肤创面组织TGF-β1、b FGF和VEGF的表达。结果:与模型组比较,其他各组大鼠创面愈合率明显提高,在给药第7、14d与模型组比较差异具有统计学意义(P0.05,P0.01),养阴生肌散组在第14 d愈合率明显高于美肤宝对照组(P0.05)。模型组大鼠皮肤溃疡组织TGF-β1、b FGF和VEGF表达明显低于空白对照组(P0.01),给药组表达量明显高于模型组,养阴生肌散组表达高于阳性对照组(P0.05)。结论:养阴生肌散通过增强皮肤组织TGF-β1、b FGF和VEGF蛋白的表达促进糖尿病大鼠皮肤溃疡的愈合。     

归脾汤对血小板减少性紫癜模型小鼠脾中CD80及CD86表达的影响

目的:观察归脾汤对ITP模型小鼠脾中协同刺激分子CD80及CD86的影响。方法:用腹腔注射豚鼠抗小鼠血小板血清(APS)方法,建立ITP小鼠模型。造模第5天给药治疗,正常组、模型组灌服生理盐水,归脾汤高剂量组、归脾汤中剂量组、归脾汤低剂量组、醋酸沷尼松组小鼠分别灌服相应药物。连续给药10 d。提取脾细胞,流式细胞仪检测脾中CD80及CD86。结果:各造模组小鼠CD80均显著增高,CD86表达升高,与正常组比较P0.001,;经治疗后只有归脾汤高剂量组小鼠CD80表达明显降低,与模型组比较差异著性(P0.01),但未达到正常水平。归脾汤高剂量组降低CD86效果最好,与正常组比较P=0.647,归脾汤低剂量组效果最差,CD86值与模型组接近,其他治疗组表达均下降,与模型组比较差异显著(P0.01),但未达到正常水平,与正常组比较差异显著(P0.001)。结论:归脾汤治疗ITP的作用机制可能包括通过降低脾脏中CD80与CD86的表达,抑制B淋巴细胞的活化,减少血小板自身抗体的产生,进而保护血小板。     

艾灸对血管性痴呆大鼠海马神经营养因子及Notch信号通路表达的影响

目的:观察艾灸对血管性痴呆(VD)大鼠海马神经营养因子及Notch通路表达的影响,探讨艾灸治疗VD的作用机制。方法:SD大鼠随机分成假手术组、模型组、西药组、艾灸组,每组15只。采用双侧颈总动脉缺血再灌注法复制大鼠VD模型。艾灸组给予悬灸"命门""大椎""关元",每次15min,每日1次,每周治疗6d,治疗4周。西药组给予尼莫地平灌胃,每日1次,治疗4周。Morris水迷宫实验测定大鼠学习与记忆能力,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测大鼠大脑的梗死面积,HE染色法检测大鼠脑组织病理形态,实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组大鼠海马胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、Notch 1、碱性螺旋-环-螺旋转录因子3(Hes 3)mRNA和蛋白表达情况。结果:模型组水迷宫实验逃避潜伏期较假手术组延长(P0.05);治疗后,艾灸组和西药组逃避潜伏期较模型组明显缩短(P0.05)。TTC染色结果显示,模型组颜色较假手术组变浅,白色区域多;西药组、艾灸组白色区域较模型组减少。HE染色结果显示,模型组大鼠海马区神经元数量较假手术组明显减少,深染细胞排列紊乱,可见坏死的神经元;西药组、艾灸组细胞水肿较轻,细胞形态接近正常,细胞数量增加。模型组海马组织中BDNF、NGF、GFAP、Hes 3、Notch 1mRNA及蛋白表达均较假手术组明显升高(P0.05,P0.01);与模型组相比,艾灸组BDNF、NGF、GFAP、Hes 3、Notch 1 mRNA及蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01),西药组NGF、GFAP mRNA及蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01)。与西药组比较,艾灸组海马组织中GFAP、Hes 3、Notch 1mRNA表达明显升高(P0.05,P0.01)。结论:艾灸可以改善痴呆大鼠记忆和认知能力,调节神经营养因子表达,可能与调节Notch信号通路有关。     

陷胸汤对内毒素致小鼠急性肺损伤的影响

目的:探究陷胸汤对内毒素致小鼠急性肺损伤的影响.方法:将80只雌性ICR小鼠平均随机分为空白组、模型组、阳性药组、陷胸汤组、大陷胸汤组、陷胸汤去甘遂组、陷胸汤去甘草组、甘遂甘草组.除空白组外,各组动物于第1,2,3天经乙醚吸入麻醉后予滴鼻和腹腔注射脂多糖建立急性肺损伤模型.造模30 min后分别予0.2 mL相应药物灌胃,阳性药组和空白组分别予等量地塞米松和生理盐水.末次造模给药24 h后取材.测定血中白细胞数、血和肺泡灌洗液上清液中中性粒细胞百分比、肺组织干湿比值(W/D),观察肺组织病理学改变.综合分析各指标,选择优效组陷胸汤组进行剂量梯度实验.将60只雌性ICR小鼠平均随机分为空白组、模型组、阳性药组、陷胸汤高剂量组、陷胸汤中剂量组、陷胸汤低剂量组,以同样的方法造模并检测指标,并用ELISA法检测陷胸汤中剂量组小鼠肺泡灌洗液中细胞因子NF-κB,TNF-α,IL-6表达水平;RT-PCR方法检测肺组织中NF-κB,TNF-α mRNA的表达,Western blot方法检测肺组织中NF-κB,TNF-α蛋白的表达.为明确陷胸汤毒性,将20只小鼠随机分为2组,每组10只,禁食8h后灌胃给药.给药组小鼠以最大给药剂量(120 g·kg-1)、小鼠可承受的给药最大体积(40 mL·kg-1)一次性灌胃给药陷胸汤水煎提取液.空白组给予等量生理盐水.给药后24 h内密切观察小鼠的状态.结果:陷胸汤组小鼠血中白细胞数较模型组降低(P＜0.01),与陷胸汤组比较,陷胸汤去甘遂组、陷胸汤去甘草组、甘草甘遂组小鼠血中白细胞数较高(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01);与模型组相比,陷胸汤组小鼠血中和BALF中中性粒细胞百分比降低(P＜0.01,P＜0.05);且陷胸汤可显著降低LPS引起的小鼠肺组织W/D比值的增高(P＜0.01).与模型组相比,陷胸汤组肺泡壁、气道壁病变程度均较模型组减轻,管壁及其周围浸润的炎细胞数量减少,支气管上皮细胞变性不明显,支气管腔内渗出物减少.其他给药组见不同程度肺泡壁、气道壁增厚,大量炎细胞浸润,支气管黏膜上皮细胞变性脱落;肺泡壁轻度增厚支气管黏膜上皮细胞变性脱落.陷胸汤可使肺泡灌洗液中NF-κB,TNF-α和IL-6水平降低(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05),陷胸汤高、低剂量组只在TNF-α因子水平上表现出一定程度的下降(P＜0.01,P＜0.05).陷胸汤还使得NF-κB,TNF-α mRNA在小鼠肺组织中表达显著降低,NF-κB,TNF-α蛋白在小鼠肺组织中表达显著降低.给药后24 h内,给药组小鼠死亡5只,排除灌胃等其他因素影响,确定为药物毒性.结论:陷胸汤可以显著保护由内毒素导致的小鼠急性肺损伤,但在3g·mL-1剂量时存在毒性.     

淫羊藿苷对D-半乳糖诱导的脑衰老模型小鼠p53/p21信号通路的影响

目的:观察淫羊藿苷对脑衰老模型小鼠p53/p21信号通路的影响,并探讨淫羊藿苷抗衰老的可能机制。方法:将实验小鼠随机分为空白组、模型组、淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组,除空白组外,其他各组通过D-半乳糖诱导建立脑衰老模型。淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组灌胃淫羊藿苷药液,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水。用Morris水迷宫评价各组小鼠的学习记忆能力;用ELISA检测各组小鼠血清中T-AOC、GSH-PX、GSH-ST、MDA的表达。用Real time-PCR和免疫组化检测各组小鼠海马中p53和p21的表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠上平台潜伏期、游泳总路程和第1次抵原平台时间都明显增加(P0.01),而小鼠穿越平台次数和目标象限时间则明显较少(P0.01)。与模型组相比,淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组小鼠上平台潜伏期、游泳总路程和第1次抵原平台时间均有所较少(P0.01,P0.05),而小鼠越平台次数和目标象限时间有所增加(P0.01,P0.05)。与空白组比较,模型组小鼠血清中T-AOC、GSH-PX、GSH-ST明显降低(P0.01),而MDA明显升高(P0.01);与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组小鼠血清中T-AOC、GSH-PX、GSH-ST均有不同程度升高(P0.01,P0.05),而MDA则有所降低(P0.01)。与空白组比较,模型组小鼠海马中p53、p21 mRNA和蛋白表达水平升高(P0.01)。与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组小鼠海马中p53、p21 mRNA和蛋白表达水平降低(P0.01,P0.05)。结论:淫羊藿苷具有延缓衰老作用,其机制可能与其抑制衰老信号通路p53/p21有关。     

当归补血汤协同肌源性干细胞移植促造血重建的研究:Notch2、Jagged2和Hes5在鼠脾脏中的表达及作用

目的了解Notch2、Jagged2和Hes5在当归补血汤(Danggui Buxue Decoction,DBD)协同肌源性干细胞(Muscle-derived stem cells,MDSCs)移植鼠脾脏中的表达及其临床意义。方法根据随机数字表将150只雌性昆明小鼠分成6组,于照射前1周分别给予6组不同剂量当归补血汤或生理盐水灌胃。在经8Gy 137Cs-γ射线照射后的小鼠尾静脉中移植骨髓细胞或肌源性干细胞。并于3周和8周末时采用实时定量PCR方法检测小鼠脾脏中Notch2、Jagged2和Hes5mRNA表达。结果移植3周末,与照射组相比,各给药组Notch2、Jagged2mRNA及给药3组Hes5mRNA表达上调,给药1组和给药2组的Hes5mRNA表达下调,且组间具有统计学差异(Notch2,F=4.777,P=0.012;Jagged2,F=11.650,P=0.000;Hes5,F=23.229,P=0.000)。移植8周末,与照射组相比,各给药组Notch2、Jagged2mRNA表达上调,Hes5mRNA表达下调,且仅Jagged2mRNA组间存在统计学差异(Notch2,F=2.979,P=0.056;Jagged2,F=18.796,P=0.000;Hes5,F=2.202,P=0.122)。结论在骨髓移植早期和晚期,以及MDSCs移植早期,Notch2和Jagged2均未参与B淋巴细胞的分化发育。Hes5在骨髓移植早期参与了脾脏中B淋巴细胞的发育调控。3倍剂量当归补血汤可在MDSCs移植早期通过调控Notch2及Jagged2来促进B淋巴细胞发育。     

氧化苦参碱对D-半乳糖致小鼠衰老的影响

目的:探讨氧化苦参碱(OMT)对D-半乳糖致小鼠衰老的影响。方法:健康昆明种小鼠,随机分为正常对照组、模型组以及氧化苦参碱低(5 mg/kg)、中(10 mg/kg)、高(20 mg/kg)剂量组,除正常对照组外,各组动物给予D-半乳糖0.1 g/kg造模,造模1 h后给药。各组连续腹腔给药30 d后进行跳台实验及Morris水迷宫实验以测定小鼠的学习记忆能力。待行为学指标测完后,将各组小鼠眼静脉丛取血1～2 mL,离心取血清,测定SOD活性以及MDA含量。结果:在水迷宫实验中,模型组较正常对照组小鼠到达终点平台的潜伏期显著延长(P0.01),穿越平台次数显著减少(P0.01),而各给药组较模型组小鼠到达终点平台的潜伏期显著缩短(P0.05或P0.01),穿越平台的次数显著增加(P0.05或P0.01);在小鼠跳台实验中,OMT各剂量均显示出延长平台潜伏期、减少错误次数的趋势,但差异无统计学意义(P0.05);在血清生化指标检测中,模型组SOD活性显著低于正常对照组(P0.01),而氧化苦参碱各剂量组血清SOD活性均较模型组显著增高(P0.05或P0.01);模型组血清MDA含量显著高于正常对照组(P0.01),而氧化苦参碱各剂量组血清MDA含量均显著低于模型组(P0.05或P0.01)。结论:氧化苦参碱能够增加D-半乳糖致小鼠衰老的学习记忆能力,该作用与其抗氧自由基,减少脂质过氧化有关。     

小半夏加茯苓汤对H22荷瘤小鼠瘤体中颗粒酶B和穿孔素表达的影响

目的观察小半夏加茯苓汤对H22荷瘤小鼠瘤体中的颗粒酶B及穿孔素表达的影响。方法建立体内H22荷瘤小鼠模型,随机分为荷瘤模型组、小半夏加茯苓汤高剂量组、小半夏加茯苓汤中剂量组、小半夏加茯苓汤低剂量组、顺铂组,每组24只。接种次日开始给药,荷瘤模型组给予生理盐水10g·kg-1,1次/d;小半夏加茯苓汤高、中、低剂量组,分别给予含4g、2g、1g生药·ml-1小半夏加茯苓汤水煎剂40,20,10g·kg-1,1次/d;顺铂组腹腔注射0.9%氯化钠溶液稀释顺铂5mg·kg-1,分别于第1,4,7,10天各给药1次,实验第11日称重断髓处死小鼠,取瘤体。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化(IHC)检测瘤组织中的颗粒酶B和穿孔素的表达量情况。结果与荷瘤模型组比较,小半夏加茯苓汤高剂量组体重明显升高(P0.05),小半夏加茯苓汤高、中剂量组瘤重明显降低(P0.05),顺铂组瘤重更低(P0.01);小半夏加茯苓汤高、中剂量组,顺铂组颗粒酶B、穿孔素基因表达量升高;各给药组颗粒酶B与穿孔素蛋白表达均显著升高(P0.01)。与顺铂组比较,各组小半夏加茯苓汤体重、瘤重显著升高(P0.01)。结论小半夏加茯苓汤升高H22荷瘤小鼠瘤体中的颗粒酶B及穿孔素表达量,这可能是诱导细胞凋亡的机制之一。     

肝郁脾虚证大鼠海马Notch 信号通路改变及逍遥散的调节作用

目的：观察肝郁脾虚证模型大鼠海马Notch信号通路各相关分子表达的变化并探讨逍遥散的调节作用。方法：雄性SD大鼠随机分成4组,分别是正常组、模型组、模型+逍遥散组、模型+氟西汀组,每组12只。采用慢性束缚应激的方法制备大鼠肝郁脾虚证模型,造模持续21天。通过尼氏染色、蛋白免疫印迹及实时荧光定量PCR方法检测各组大鼠海马尼氏小体数量、Notch信号通路中NICD、Hes1、Hes5及Jad1的表达情况。结果：与正常组相比,模型组尼氏小体数明显减少（P ＜ 0.01）,逍遥散和氟西汀有逆转作用（P ＜ 0.01）;与正常组相比,模型组Notch信号通路相关蛋白表达均显著降低（P ＜ 0.01）,逍遥散和氟西汀能逆转NICD、Hes5、Jag1蛋白表达量（P ＜ 0.05或P ＜ 0.01）;与正常组相比,模型组各基因mRNA表达量均降低（P ＜ 0.01）,逍遥散和氟西汀能逆转NICD、Hes1、Hes5 mRNA表达（P ＜ 0.05,P ＜ 0.01）。结论：肝郁脾虚证模型大鼠海马神经元损伤尼氏小体减少,Notch信号通路各分子蛋白及基因表达均降低,逍遥散可能通过调节海马相关分子的表达水平进而保护神经元,起到治疗作用。     

升阳益胃汤对功能性消化不良模型大鼠的作用机制研究

目的:探讨升阳益胃汤对功能性消化不良模型大鼠的作用机制。方法:SD大鼠60只,根据体质量随机分为6组,正常对照组,模型对照组,升阳益胃汤高、中、低剂量组,阳性对照组,每组10只。采用夹尾刺激联合不规则饮食方法制备模型,正常对照组及模型对照组给予蒸馏水,升阳益胃汤高、中、低剂量组的给药剂量分别为29.34、14.67、7.34 g/kg;阳性对照组给予多潘立酮2.7 mg/kg;每天给药1次,连续给药2周。通过测定大鼠血清中胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、血管活性肠肽(VIP)水平,观察升阳益胃汤对功能性消化不良大鼠的胃肠动力作用机制。结果:与模型对照组比较,升阳益胃汤高剂量组大鼠的小肠推进率明显提高(P<0.01),升阳益胃汤中剂量组大鼠的小肠推进率略有提高(P<0.05)。升阳益胃汤高剂量组大鼠的MIL、GAS、VIP水平水平明显升高(P<0.01)。结论:升阳益胃汤对功能性消化不良模型大鼠具有提高小肠推进率的作用,其作用机制与提高MTL、GAS、VIP水平有关。