艾灸对急性胃黏膜损伤大鼠热休克蛋白与相关炎性细胞因子的影响

目的探讨艾灸对急性胃黏膜损伤的保护作用及其炎症反应的抑制机制。方法健康SPF级SD大鼠,随机分对照组、模型组、艾灸组和艾灸非穴位组。采用无水乙醇灌胃制备急性胃黏膜损伤模型。艾灸足三里、中脘穴,按GUTH法计算胃黏膜损伤指数（UI）,HE染色观察胃黏膜组织形态学变化,免疫组织化学法检测胃黏膜细胞中HSP70的表达,放免法测定血清中炎性细胞因子的含量。结果与对照组比较模型组胃黏膜损伤指数、血清中炎性细胞因子含量明显升高（P〈0.01）,胃黏膜组织炎性浸润明显。与模型组相比,艾灸组胃黏膜损伤指数、血清中炎性细胞因子含量明显降低（P〈0.01或P〈0.05）,胃黏膜组织形态较为完好,HSP70大量表达（P〈0.01）。结论艾灸足三里、中脘穴对大鼠急性胃黏膜损伤具有一定的保护作用,其机制可能与诱导机体产生大量HSP70抑制炎性细胞因子的释放有关。     

艾灸对亚急性衰老大鼠松果体细胞数及热休克蛋白70表达的影响

目的:探讨艾灸延缓衰老的可能作用机制。方法:将30只实验大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组,每组10只。皮下注射25%D-半乳糖溶液(125 mg/kg)造成大鼠衰老模型。艾灸组选取双侧"脾俞"肾俞"进行艾灸治疗,每日治疗1次,每次每穴灸5 min,连续治疗6周。采用组织化学染色及多克隆抗体免疫组化技术,结合细胞医学图像分析及病理图文图像分析方法,测定各组大鼠松果体细胞数及HSP 70表达。结果:与空白组相比,模型组大鼠松果体细胞数显著减少(P<0.001)、HSP 70表达显著降低(P<0.01)。与模型组相比,艾灸组大鼠松果体细胞数显著增多(P<0.01)、HSP 70表达显著增加(P<0.05)。结论:艾灸可能通过上调脑区松果体中HSP 70表达、减缓机体衰老过程中松果体细胞减少的速度,在一定程度上维持松果体的正常形态及功能,延缓松果体衰退,从而起到抗衰老的作用。这可能是艾灸延缓机体衰老机制之一。     

槲皮素阻断热休克蛋白70表达对艾灸预处理抑制胃黏膜损伤细胞凋亡的影响

目的通过槲皮素灌胃阻断热休克蛋白（HSP）70表达,观察艾灸预处理对大鼠急性胃黏膜损伤指数及细胞凋亡的影响,以进一步探明艾灸的细胞保护作用及其与HSP70的关系。方法40只大鼠随机分为捆绑对照组（A组）、模型组（B组）、艾灸＋模型组（C组）、槲皮素＋艾灸＋模型组（D组）、槲皮素＋模型组（E组）。D、E组每日采用槲皮素灌胃。C、D组每日艾灸足三里、梁门,以上处理共8 d。第9日,B、C、D、E组均采用无水乙醇灌胃制作大鼠急性胃黏膜损伤模型。采用western-blot方法检测胃黏膜HSP70蛋白表达;TUNEL法检测胃黏膜细胞凋亡指数（AI）。结果与A组比较,模型组大鼠胃黏膜AI明显增高（P〈0.05）,胃黏膜HSP70表达升高（P〈0.01）。与B组相比,C组大鼠AI明显降低（P〈0.05）,HSP70表达显著升高（P〈0.01）;D组大鼠胃黏膜AI值明显增加（P〈0.01）,HSP70表达未见上调。与C组相比,D组大鼠胃黏膜AI值升高明显（P〈0.01）,HSP70表达明显下调。结论艾灸预处理上调胃黏膜HSP70表达,急性病胃黏膜损伤所致的细胞凋亡被抑制。槲皮素阻断HSP70合成后,艾灸预处理抑制急性胃黏膜...     

艾灸对实验性RA大鼠热休克蛋白(HSP70)表达的影响

目的 :探讨艾灸治疗实验性RA的作用机理。方法 :用福氏完全佐剂塑造大鼠实验性RA病理模型 ,观察艾灸“肾俞”、“足三里”对实验性RA大鼠炎症局部组织热休克蛋白 (HSP70 )表达的影响。结果 :艾灸能明显增加实验性RA大鼠局部组织HSP70面积总和、积分光密度总和及平均黑度 (P <0 .0 1)。结论 :艾灸可诱导实验性RA大鼠局部组织热休克蛋白 (HSP70 )的大量合成。     

针刺对脑缺血大鼠热休克蛋白70表达影响的研究进展

针刺治疗脑缺血性疾病具有良好的疗效,越来越受到国内外医学界的广泛关注,其治疗机制成为现代医学研究的热点.热休克蛋白70（heat shock protein70,HSP70）作为脑缺血诱导的神经元保护性物质,具有抗脑缺血后细胞凋亡、清除细胞内异常蛋白和减少氧自由基产生等作用.现将HSP70与缺血性脑损伤的关系及针刺对缺血性脑损伤过程中HSP70的影响综述如下.     

脊髓横断后艾灸足三里对胃黏膜损伤大鼠Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的： 观察艾灸足三里通过调节Nrf2/HO-1信号通路对应激性胃黏膜损伤大鼠的治疗作用,并探讨其胃黏膜保护作用与脊髓的关系。方法：SPF级SD大鼠50只,按体质量随机分为空白组、模型组、药物组、艾灸组和手术+艾灸组,每组各10只。采用无水乙醇结合阿司匹林混悬液灌胃建立大鼠胃黏膜损伤模型,艾灸组艾灸大鼠双侧“足三里”穴,药物组给予奥美拉唑肠溶片溶液(0.2 mg/kg)灌胃,连续治疗8 d;手术+艾灸组予以脊髓横断手术,术后进行胃黏膜损伤造模及艾灸治疗。治疗结束后,应用Guth法计算大鼠胃黏膜损伤指数(UI),HE染色观察大鼠胃黏膜形态学变化,ELISA实验检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)的水平变化。Western-blot和RT-PCR检测胃黏膜组织中一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)、核转录因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶-1(HO-1)的蛋白及mRNA表达。结果：与模型组相比,艾灸组大鼠UI值显著降低(P＜0.01),胃黏膜组织损伤明显改善,明显降低了血清中MDA、NO水平,升高了SOD、GSH-Px的水平(P＜0.01)。显著下调了胃黏膜组织中iNOS和COX-2的蛋白及mRNA表达水平,上调了Nrf2和HO-1的表达水平(P＜0.01)。手术+艾灸组大鼠UI值、血清中MDA、NO水平及胃黏膜组织中iNOS和COX-2的表达较艾灸组升高,血清SOD、GSH-Px的水平及黏膜组织Nrf2和HO-1的表达水平明显降低,差异均具有显著性意义(P＜0.05)。结论：艾灸足三里可通过Nrf2/HO-1信号通路有效改善大鼠应激性胃黏膜损伤,脊髓参与了其修复作用及信号传导的过程。     

艾灸、电针足三里对腓总神经横断术后大鼠胃黏膜损伤修复的影响

目的探讨艾灸、电针启动相关内源性保护信息对胃黏膜的保护效应以及与腓总神经通路的关系。方法将72只SD大鼠随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、模型艾灸组(C组)、手术模型艾灸组(D组)、模型电针组(E组)和手术模型电针组(F组),每组12只。除正常组外,其余各组均用无水乙醇、阿司匹林灌胃制备胃黏膜损伤模型,其中D组和F组在行腓总神经切断术后进行造模。C组和D组采用艾灸双侧足三里穴治疗,E组和F组采用电针双侧足三里穴治疗。治疗3 d后,采用苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠胃黏膜形态学变化,计算胃黏膜溃疡指数(UI),并采用ELISA法检测各组大鼠血清与胃黏膜组织中一氧化氮(NO)、白细胞介素-1?(IL-1?)的含量。结果 B组、C组、D组、E组和F组UI、血清NO含量及胃黏膜组织中NO、IL-1?含量与A组比较,差异均具有统计学意义(P0.01,P0.05)。B组、D组、E组和F组血清IL-1?含量与A组比较,差异均具有统计学意义(P0.01,P0.05)。B组和D组UI、血清NO含量及胃黏膜组织中NO、IL-1?含量与C组比较,差异均具有统计学意义(P0.01)。B组和F组UI、血清NO含量及胃黏膜组织中NO、IL-1?含量与E组比较,差异均具有统计学意义(P0.01)。结论艾灸和电针足三里穴均可通过腓总神经途径传递信息,促使NO、IL-1?释放,从而有效促进胃黏膜修复,且两种方法治疗效果相近。     

丹参对癫痫大鼠脑组织形态结构及热休克蛋白70表达的影响

目的：探讨丹参对癫痫发作所造成神经元损伤的作用及其作用机制。方法：采用戊四氮致痫模型,运用常规病理及电镜检查方法,比较丹参组与对照组元受损的情况;运用免疫组织化学方法,对比观察丹参组与对照组热休克蛋白（ＨＳＰ）７０表达的变化。结果：丹参组与对照组物相比,大脑皮质及海马区异常神经元的数目明显减少（Ｐ〈０．０１）,超微结构的异常发迹也明显减轻。同时丹参组动物脑内ＨＳＰ７０免疫反应阳性神经元的数目明显增     

艾灸及烟条灸预处理对急性胃黏膜损伤大鼠热休克蛋白和炎性细胞因子的影响

目的探讨艾灸对急性胃黏膜损伤炎症反应的抑制机制及比较不同灸材对大鼠胃黏膜损伤的保护作用。方法健康SPF级SD大鼠32只,随机分为对照组、模型组、艾灸组、烟条灸组,每组8只。采用无水乙醇灌胃制备急性胃黏膜损伤模型。艾灸及烟条灸穴位为足三里、中脘。按GUTH法计算胃黏膜损伤指数（UI）,HE染色光镜下观察胃黏膜组织形态学变化,免疫组织化学法检测胃黏膜细胞中热休克蛋白（HSP）70的表达,放免法测定血清中炎性细胞因子的含量。结果与对照组比较,模型组UI、血清中炎性细胞因子含量明显升高（P〈0．01）,胃黏膜组织炎性浸润明显,HSP70阳性表达稍升高。与模型组和烟条灸组相比,艾灸组UI、血清中炎性细胞因子含量明显降低（P〈0．01或P〈0．05）,胃黏膜组织形态较为完好,HSP70表达上调（P〈0．01）。结论艾灸及烟条灸对大鼠急性胃黏膜损伤均具有一定的保护作用,其机制可能与诱导机体产生大量HSP70抑制炎性细胞因子的释放有关。     

电针对脊髓损伤模型大鼠热休克蛋白70及其mRNA的影响

目的探讨电针对大鼠急性脊髓损伤（ASCI）后热休克蛋白70（Hsp70）及其mRNA（Hsp70mRNA）表达的影响。方法成年雄性SD大鼠,随机分为电针组、模型组和假手术组。采用改良的Allen法建立大鼠急性脊髓损伤模型,电针组动物手术后2h即给予电针处理。分别在1d、2d和3d处死动物,应用实时荧光定量PCR方法检测脊髓损伤部Hsp70mRNA,应用免疫组织化学结合图像定量分析方法检测Hsp70表达。结果手术后1d时模型组和电针组Hsp70mRNA表达量与假手术组比较均明显增高（P〈0．05）,随后逐渐下降,至3d时已降至假手术组水平。电针组Hsp70mRNA表达下降速率明显较模型组缓慢,Hsp70mRNA表达量在2d时仍明显高于模型组（P〈0．05）。模型组和电针组Hsp70蛋白表达也是1d时最高,以后逐渐下降;电针组Hsp70表达在各时间段均明显高于模型组（P〈0．05）。结论电针治疗可以增加脊髓损伤大鼠脊髓损伤部Hsp70及其mRNA的表达,减少细胞毒性,从而抑制神经元的凋亡和死亡。     

艾灸血浆对GES-1热休克蛋白70及细胞凋亡细胞周期的影响

目的：探讨艾灸血浆对乙醇损伤的人胃粘膜上皮细胞（GES-1）热休克蛋白70（HSP70）及细胞凋亡、细胞周期的影响。方法：24名健康人（男女各半）随机分为艾灸穴位组12名、艾灸非穴位组12名。两组分别于艾灸前和艾灸后采取静脉血提取灸前血浆和灸后血浆。将GES-1细胞分为A空白组、B模型组、C艾灸穴位血浆组、D艾灸非穴位血浆组,采用含8%乙醇的培养液造成GES-1细胞损伤模型,观察艾灸血浆对GES-1 HSP 70及细胞凋亡、细胞周期的影响。结果：与模型组和艾灸非穴位血浆组比较,艾灸穴位血浆组GES-1中HSP70含量明显上调（1.1084±0.0771 vs 0.6387±0.0322,0.7220±0.0708,P〈0.01）、细胞凋亡率下降（1.238±0.084 vs7.418±0.156,1.565±0.186,P〈0.01）;细胞周期中G1期下降：49.18±1.72 vs 57.9±1.42,52.5±2.83,P〈0.01）;S期上升（25.93±1.18 vs 21.5±0.35,23.55±1.54,P〈0.01）;G2/M期升高（24.88±1.17 vs 20.53±1.24,23.95±1.58,P〈0.01）。结论：艾灸血浆可诱导GES-1中HSP70含量升高,以达到对抗细胞凋亡,促进细胞增殖的作用。     

川芎嗪对大鼠脊髓损伤后脊髓组织c-fos基因蛋白表达的影响

目的:探讨川芎嗪对脊髓损伤后脊髓组织c-fos基因表达的影响.方法:60只SD大鼠随机分成两组:生理盐水(SAL)组、川芎嗪(TMP)组;用Allen WD法以10 g×2.5 cm致伤力损伤T8脊髓,TMP组术后即刻给予川芎嗪(200 mg/kg)腹腔注射,SAL组腹腔注射等量生理盐水.用免疫组化法检测c-fos蛋白在脊髓组织中的表达.结果:SAL组c-fos基因在不同时间点(伤后30 min、1 h、2 h、4 h、6 h)均有表达,伤后2 h达到高峰,后逐渐下降.TMP组c-fos蛋白含量各时间点均高于SAL组,但伤后30 min与SAL组相比无显著性意义(P>0.05),伤后6 h有显著性意义(P＜0.05)而其余各时相点均两者差异有显著性意义(P<0.01).结论:TMP通过抑制损伤后c-fos基因表达,从而保护了神经元并抑制继发性损害的发生,这可能是TMP保护脊髓损伤作用机理之一.     

胃黏膜保护剂替普瑞酮对慢性萎缩性胃炎大鼠热休克蛋白表达的影响

 目的研究胃黏膜保护剂对大鼠慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)修复过程中胃腺体细胞热休克蛋白(heat shock protein 70,HSP70)表达的影响,探索胃黏膜保护剂作用机制,并有可能为临床药物疗效提供新的评价指标。方法通过建立大鼠慢性萎缩性胃炎模型,进行胃黏膜保护剂(替普瑞酮)的逆转治疗实验,以免疫组织化学方法和Western blot方法,研究胃黏膜组织HSP 70的表达、组织含量和分布特点。结果①24周CAG组成功造模后,与正常大鼠比较,腺体变薄、肌层增厚,并伴大量炎症细胞浸润;经自然修复4周,发现胃黏膜腺体层增厚,肌层变薄,但仍伴有明显炎症细胞浸润;替普瑞酮逆转治疗4周,可见黏膜炎症减轻,腺体层明显增厚,肌层变薄,与自然修复组及生理盐水组对比,除肌层厚度,差异非常明显(P<0.001),接近正常组大鼠形态;②免疫组化结果发现,24周CAG组、28周CAG组及正常对照组中HSP 70以胞浆表达为主,而替普瑞酮组及生理盐水组HSP 70胞浆和胞核均有表达。通过阳性腺体数及灰度值的综合分析,替普瑞酮逆转治疗后,阳性腺体全层可见,HSP 70表达较各对照组明显增强(P<0.01);③Western blot定量研究证明,替普瑞酮逆转治疗后HSP 70含量增加极明显。结论胃黏膜保护剂替普瑞酮能明显促进HSP 70表达,其可能通过HSP 70参与的胃黏膜修复的病理生理过程发挥黏膜保护作用。     

湿热壅滞型肛瘘术后苦参汤熏洗对热休克蛋白hsp70表达的影响

目的：观察湿热壁滞型肛瘘患者手术后行苦参汤熏洗对热休克蛋白hsp70表达的影响。方法：将80例湿热壅滞型肛瘘患者随机分为治疗组（40例）和对照组（40例）。治疗组术后给予苦参汤坐浴,对照组则给予生理盐水坐浴,分别于治疗前及治疗后3天、7天和14天,以免疫组织化学方法检测、分析两组患者创面组织热休克蛋白hsp70的表达。结果：治疗组治疗后3天、7天和14天热休克蛋白hsp70表达均高于对照组（P＜O．01）。结论：肛瘘术后苦参汤熏洗可能是热休克蛋白hsp70表达的诱导因素之一,能明显增加热休克蛋白hsp70的表达。     

电针对局灶性脑缺血大鼠热休克蛋白70表达的影响

目的观察电针对局灶性脑缺血大鼠热休克蛋白70(Hsp70)表达的影响。方法采用免疫组化法检测大鼠脑局灶性缺血24h后Hsp70表达,以及电针干预后Hsp70表达的变化。结果大鼠局灶性脑缺血后Hsp70大量表达,电针可上调Hsp70的表达。结论电针能促进缺血后细胞凋亡相关基因Hsp70的表达,可能是其抗缺血性脑损伤的机制之一。     

乌司他丁对大鼠肾脏烫伤后肾脏热休克蛋白70表达的早期影响

目的研究烫伤后早期给予乌司他丁对大鼠肾脏组织细胞热休克蛋白70(HSP70)表达的影响,探讨乌司他丁对大鼠肾脏的保护作用和可能的作用机制。方法选用健康Wistar大鼠45只,随机分为对照组(非烫伤,n=5)、烧伤组(单纯烫伤,n=20)、治疗组(烫伤后给予乌司他丁,n=20)。建立30%TBSAⅢ度烫伤大鼠模型。用HE染色方法、免疫组织化学方法检测各组创伤后1 h、6 h、12 h、24 h肾脏组织中HSP70蛋白的表达。结果①对照组肾脏组织中HSP70蛋白呈弱阳性表达。与对照组比较,烧伤组在烫伤后6 h HSP70表达增强(P<0.05)。治疗组肾组织中HSP70表达在1 h、6 h、12 h明显高于烧伤组(以12 h点最为显著,P<0.05)。②正常大鼠肾脏外观呈现马蹄形或蚕豆形,圆润,颜色红。烧伤组外观较对照组肿胀变大,颜色暗红,充血明显。烫伤后12 h改变最为明显。治疗组外观较对照组略肿胀,颜色暗红,充血不明显。③烫伤后各个时间段肾组织出现不同程度损伤性改变,6 h最为明显。肾小球毛细血管丛缩小,肾小球囊腔扩大。肾小管细胞肿胀、变性坏死、管腔扩张。近曲小管上皮细胞扁平,刷状缘脱落,个别上皮细胞脱落,基底膜尚完整。治疗组上述改变明显减轻,仅见部分肾小管细胞肿胀、管腔扩张、无明显变性坏死。结论严重烧伤早期大鼠肾脏组织损伤明显,早期应用乌司他丁具有保护肾脏组织的作用。HSP70在烧伤大鼠早期肾脏组织的表达可能具有细胞保护作用和作为应激反应强度标志的作用。乌司他丁能够明显增强烧伤早期大鼠组织细胞内HSP70的表达,这可能是其抗肾脏组织细胞凋亡,保护肾脏组织的机制之一。     

芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注后热休克蛋白70的影响

目的观察芪棱汤对脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白70(Hsp 70)的影响,为益气养阴活血法治疗脑梗死提供实验依据。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组及芪棱汤组,并予相应药物腹腔注射。采用颈内动脉线栓加环扎法复制大鼠脑缺血再灌注模型。于再灌注后不同时间点观察大鼠缺血脑组织Hsp 70的表达。结果假手术组无Hsp70蛋白表达,其他各组Hsp70蛋白表达较假手术组高,芪棱汤组在再灌注24h、48h段Hsp70表达较模型组高,且芪棱汤组在再灌注24h段增加Hsp70蛋白表达方面优于补阳还五汤组。结论芪棱汤可以促进Hsp70的蛋白表达,对脑缺血再灌注所导致的脑损伤起保护作用。     

健脾和胃化瘀中药对慢性萎缩性胃炎患者胃黏膜热休克蛋白70表达的影响

目的观察健脾和胃化瘀中药对慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)患者胃黏膜热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法将100例CAG患者按随机数字表法分为治疗组(50例)和对照组(50例)。治疗组给予口服健脾和胃化瘀中药治疗,每日1次;对照组给予口服叶酸片治疗,10 mg/次,每日3次,两组疗程均为6个月。观察两组治疗前后主要中医症状体征、胃镜和病理组织学的变化。采用SP免疫组化法测定治疗前后胃黏膜HSP70的表达,利用HPIAS-1 000病理图文分析系统采集图像,半定量分析表达情况。结果治疗组中医症状体征有效率为88.0%(44/50),对照组有效率为56.0%(28/50),两组差异有统计学意义(P0.01)。胃镜检查治疗组对胃黏膜充血水肿、糜烂、胆汁反流、黏膜白相、血管显露和颗粒增生的改善率明显优于对照组(均P0.05)。病理检查治疗组治疗萎缩总有效率为80.0%(40/50),对照组总有效率54.0%(27/50),两组差异有统计学意义(P0.01)。治疗组治疗肠化有效率75.0%(12/16),对照组有效率33.3%(5/15),治疗组优于对照组(P0.05)。与本组治疗前比较,两组治疗后胃黏膜HSP70积分光密度值均明显升高,差异有统计学意义(均P0.01);与对照组比较,治疗组治疗后胃黏膜HSP70积分光密度值亦明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。结论健脾和胃化瘀中药治疗CAG有明显的效果,对胃癌前病变有改善作用,并可能通过影响CAG患者胃黏膜HSP70的表达而起到治疗作用。     

牛珀至宝微丸对内毒素休克肺组织热休克蛋白70表达的调控

目的：观察：牛珀至宝微丸对内毒素休克肺损伤时热休克蛋白70(heat shock protein，HSP70)表达的影响及其与一氧化氮(nitric oxide，NO)的关系。方法：静脉注射内毒素(LPS)1．5mg/kg，腹腔注射D-氨基半乳糖(D—GalN)100mg／kg造成内毒素休克模型，用牛珀至宝微丸和AG作对照干预处理，检测血浆一氧化氮(NO)浓度，免疫组化方法检测HSP70在肺组织内的表达。结果：牛珀至宝微丸增强内毒素休克时肺组织HSP70表达，降低血浆：NO浓度，肺损伤减轻。结论：证实牛珀至宝微丸能增强内毒素休克时肺组织HSP70表达，提示牛珀至宝微丸对内毒素休克造成的肺损伤的保护作用可能是通过刺激肺组织HSP70表达增强来调节血浆NO浓度而产生的。