改良双缩脲试剂检测血清总蛋白的观察

<正> NaOH-BR(氢氧化钠双缩脲试剂)在测定高脂血标本时常出现混浊,况且通常所用的乙醚抽提法手续烦琐。我们用 KOH-BR(氢氧比钾双缩脲试剂)代替NaOH-BR可有效消除干扰,效果满意。     

自配双缩脲试剂与总蛋白的试剂盒比较

为降低实验成本,在不影响实验结果前提下,作者用自己配制双缩脲试剂与外购总蛋白的试剂盒测血清总蛋白进行比较,取得满意结果,其血清总蛋白测定结果X=3.32P〉0.05其精密度X^2=1.57PC〈0.001稳定性X^2=4.35P〉0.05。     

双缩脲法测定血浆总蛋白和血清总蛋白的结果比较

AU-640型自动生化分析仪。中生北控公司生产的双缩脲试剂盒。标准品与质控品均采用罗氏公司产品。肝素锂真空抗凝管，分离胶采血管。血清或血浆用量100μl，在10～120g／L浓度范围内呈良好的线性关系，批内CV〈2％。     

双试剂双缩脲法对脂浊标本血清总蛋白的测定

目的探讨双试剂双缩脲法在全自动生化仪中直接测定脂肪乳浊标本血清总蛋白。方法将单试剂双缩脲法改成双试剂,在全自动生化仪上采用二点终点法直接测定。结果双试剂双缩脲法测定脂浊血清标本的总蛋白为(74.27±5.65)mmol/L与手工标化法测定的(74.46±5.77)mmol/L差异无显著性(P>0.05)。结论双试剂双缩脲法能有效地消除脂肪的干扰,无需另进行手工除脂测定,大大地提高工作效率。     

用双缩脲法在自动生化分析仪上测定脑脊液蛋白含量

脑脊液中的蛋白质主要是由毛细血管壁超滤作用而生成的,部分是中枢神经系统合成的。测定脑脊液蛋白含量常用于观察血脑屏障的通透性或鞘内蛋白的分泌是否增加。脑脊液蛋白含量测定的常用方法有氨基水杨酸三氯醋酸、双缩脲法、苄索氯氨浊度法等,每种方法有各自的特点。我们在美国Dade Behring公司的Dimension RxL全自动生化分析仪上用双缩脲法测定脑脊液蛋白,报道如下。     

高速离心去脂对双缩脲法测定总蛋白的影响分析

目的探讨高速离心去除血清标本中大部分甘油三酯成份，消除脂血对双缩脲方法测定总蛋白结果的影响。方法脂血标本在RPM4000条件下离心5min，分离血清，然后将血清分成三组，一组不加处理，为常规测定组，一纽在RPM15000离心10min，为离心测定组，另一组用乙醚提取，为乙醚提取测定纽，在日立7170A上，分别测定这三组标本，观察测定结果。结果脂血标本在RPM15000离心能有效减少其对总蛋白测定的影响，与乙醚提取法相比，测定结果无显著性差异。结论采用标本离心法可以有效地减少脂血对双缩脲法总蛋白测定的干扰。     

丙三醇、乙二醇对双缩脲法测定总蛋白的干扰

目的:观察丙三醇、乙二醇对双缩脲法测定总蛋白的干扰。方法:用双缩脲试剂、镍一双缩脲试剂分别与丙三醇、乙二醇及其配制的液体质控血清进行呈色反应。结果:丙三醇、乙二醇都与双缩脲试剂有呈色反应,丙三醇使液体质控血清中总蛋白值升高,有统计学意义;乙二醇也有使总蛋白升高倾向。丙三醇、乙二醇的呈色反应与总蛋白的呈色速率、吸收曲线均基本相同。结论:丙三醇、乙二醇制备的液体质控血清不宜用作双缩脲法测定总蛋白。     

双缩脲比色法测定血清总蛋白回收实验的考核探索

目的考核学生生物化学实验结果的准确度。方法通过双缩脲比色法测定血清总蛋白（TP）回收实验来考核学生实验结果的准确度。结果根据回收率、待测血清TP浓度这2个参数对学生实验结果进行评分。结论该方法试剂价廉,操作简便,重复性好,结果准确可靠,能客观地评价学生实验结果的准确度,并易于评价,是一个比较理想的考核方法。     

双缩脲法测定血浆总蛋白含量的不确定度评定

目的:对用双缩脲法测定血浆蛋白含量的不确定度进行评定,确保检测结果的准确可靠。方法:根据《全国临床检验操作规程》(第二版)双缩脲法测定血浆蛋白含量,通过对以往检测64份样本的(OD值)光密度,建立数学模型,分析双缩脲法测定血浆蛋白含量的不确定度来源,对分量不确定度进行评估评定双缩脲法测定血浆蛋白含量的不确定度。结果:样品中血浆蛋白含量的扩展不确定度U=12.88g/L,K=2。结论:在对蛋白含量检测中带入测量不确定度结果,可使检测结果表达更完整。     

双缩脲双波长自动分析法测定脑脊液总蛋白含量的临床应用

目的：在全自动分析仪上建立一种快速简便的脑脊液蛋白双缩脲测定法。方法：在日产7170A全自动分析仪上，用双缩脲法测定脑脊液蛋白含量。结果：双缩脲法测定脑脊液蛋白准确度高，精密度好，与磺基水杨酸比浊法有很好的相关性，而且重视性优于比浊法，两法相比，P＜0．01，有较显著的差异。结论：在全自动分析仪上用双缩脲法测定脑脊液蛋白是一种简便、快速、可靠的方法。     

改良双缩脲法测定血清总蛋白的方法与应用

目的探讨能消除脂质与葡聚糖双重干扰的血清总蛋白测定方法。方法用氢氧化钾代替Doumas法试剂中的氢氧化钠,使脂质的溶解度增大,以消除或减低脂质所致反应液混浊。优选调整酒石钾钠的浓度,以消除葡聚糖对测定的干扰。用正交法设计实验。优选氢氧化钾和酒石酸钾的最佳浓度。结果含氢氧化钾143mmol/L、酒石酸钾钠56.7mmol/L的改良试剂与含TG5.6mmol/L、葡聚糖60g/L的血清反应均不显混浊,可不做标本空白。TG>5.6mmol/L时,反应液混浊程度较Doumas法轻,可用标本空白纠正。对蛋白标准液和新鲜混合血清反应的吸收曲线相同。吸收峰530～560nm,最大峰值546nm,与Doumas法一致。改良试剂和Doumas试剂与蛋白反应的比吸光度分别为0.2992,0.3036L.g-1.cm-1。测定线性范围28～140g/L。回归方程y=0.8925 0.2727x,r=0.9995。与Doumas法平行测定外观正常的血清72例,结果无显著差异(t=0.99,P>0.2)。结论改良试剂性能稳定,成本低廉,既能消除脂质与葡聚糖的双重干扰,又保留了Doumas法的优点。适合手工、半自动和全自动生化分析仪测定血清总蛋白,应用效果满意。     

血清、分离胶分离血清和血浆三者之间总蛋白双缩脲法测定结果比较

目的:比较血清、分离胶分离血清和血浆三者之间总蛋白双缩脲法测定结果的差异。方法:调查对象为阜新市2005年各单位健康体验人员及本单位部分门诊和住院病人共3562人。仪器为OLYMPUS AU400全自动生化分析仪。标准品、质控品均采用美国罗氏公司产品。试剂采用北京中生北控公司总蛋白双缩脲法试剂。结果:血清、分离胶分离血清、血浆测定结果之间无显著性差异(P>0．05)。血清与血浆之间、分离胶分离血清与血浆之间有显著性差异(P均<0.01)。结论:血浆测定结果比血清和分离胶分离血清测定结果分别偏高约3．3g／L和3．1g／L。     

钴—双缩脲法测定血浆总蛋白质

本文建立了一种用钴—双缩脲法测定血浆总蛋白质方法,并对其实验条件作了研究。应用本法测定在37℃、10分钟就能反应完全,且色泽稳定。在波长405nm处测定样品总蛋白浓度。本法样品用量少、时间短、操作简便。批内、批间CV分别为1.21％、1.81％。平均回收率98.04％。线性可达120g/L。与铜—双缩脲反应法比较相关系数r=0.9985、回归方程Y(本法)=1.006x+0.1774。     

BECKMAN CX3 DELTA检测脑脊液和尿液总蛋白的应用与评价

目的:评价BECKMAN CX3 DELTA测定脑脊液和尿液总蛋白的优缺点.方法:BECKMAN CX3 DELTA(以下简称CX3)改良双缩脲法测定脑脊液和尿液总蛋白,与磺基水杨酸法相比较.结果:CX3改良双缩脲法和磺基水杨酸法测定脑脊液总蛋白结果(-x±s)分别为303.85±80.44mg/L和297.3±79.43mg/L,两法测定结果无显著性差异(P>0.05);尿液标本无论是正常对照组或病人组,两法的测定结果均有显著性差异(P＜0.01).其中维生素C、尿酸对尿蛋白测定有正干扰;加入30%H2O2可消除一部分尿酸等还原物质的干扰,但不甚理想.结论:BECKMAN CX3 DELTA能快速准确地测定脑脊液蛋白,但由于尿液成份复杂,在测定尿蛋白时存在较大偏差,不适合临床采用.     

干、湿化学法测定血清总蛋白结果及其纠正的探讨

目的 干、湿化学法测定血清总蛋白方法的探讨。方法 用干化学法、双缩脲法测定低值血清总蛋白，并用纠正公式纠正。结果 在低值血清总蛋白测定中，干化学法结果明显低于实际数值，而双缩脲法与利用纠正公式之后所得数值无显著性差异，并均高于干化学法所测结果。结论 在低值血清总蛋白的测定中，干化学法与双缩脲法相比较还存在着一定误差，纠正公式的使用可以使结果得到纠正。     

两种校准品和3种双缩脲试剂测定血清总蛋白结果偏倚评估及方法学评价

目的评估两种校准品及3种双缩脲试剂盒测定血清总蛋白结果的偏倚,评价3种双缩脲试剂盒血清总蛋白的精密度、线性和灵敏度。方法用3种双缩脲试剂盒及两种校准品组合成6个检测系统,按NCCLS EP9-A文件,评估3种双缩脲试剂盒及两种校准品测定结果偏倚和统计学分析;按NCCLS EP5-A文件,评价3种双缩脲试剂盒批内、批间、日间和总CV%。按NCCLS EP6-P文件评价3种双缩脲试剂盒的线性;比较3种双缩脲试剂盒测定同一份血清在540nm处的吸光度。结果用Roche校准血清(c.f.a.s)校准仪器,双缩脲试剂盒B、C与试剂盒A比较,差异无统计学意义(P>0.05);用总蛋白标准液校准仪器,试剂盒B与试剂盒A比较,差异无统计学意义(P>0.05),试剂盒C与试剂盒A比较,差异具有统计学意义(P<0.01);3种双缩脲试剂盒测定血清总蛋白总CV为0.86%～1.16%;波长为540nm,试剂盒A的吸光度明显高于试剂盒B、C;试剂盒A和B线性良好(FF0.05)。结论测定血清总蛋白,建议用Doumas配方的双缩脲试剂和基质状态与病人血清相似的校准血清。     

血清总蛋白测定的基质效应评价

目的 评价14种室间质量评价(EQA)材料和3种市售材料在4个检测系统上测定血清总蛋白的基质效应.方法 参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP14-A2指南,以美国临床化学协会(AACC)推荐血清总蛋白双缩脲为参考方法,以4个检测系统为待评方法,评价制备物的基质效应.结果 9种制备物对各系统均无基质效应,1种制备物对所有系统均存在基质效应,其余样本对不同检测系统存在不同程度的基质效应.结论 制备物样本的基质效应可影响血清总蛋白测定的准确性和可比性,在临床检测中应重视其对检验结果 量值溯源的影响.     

双缩脲法与折射法检测胸腹水总蛋白的相关性探讨及联合检测乳酸脱氢酶的临床意义

胸腹水的鉴别诊断一直是临床、检验科共同探讨的问题。近年来，随着检验技术的发展，临床实验室可以相应的理学检查和化学以及免疫学检查对渗出液与漏出液进行鉴别，从而寻找不同的致病因素。如何提高检验结果的准确性，更好的依据试验结果进行综合分析来鉴别积液的性质，为临床提供准确并具有诊断性的检验结果，这是检验工作人员一直努力的目标。作者予2008年4月-2009年4月期间，对本院72例住院病人进行胸腹水总蛋白双缩脲法与折射计法测定，同时进行总蛋白与LDH联合检测的分析。现将结果报告如下：