乳腺癌雌激素受体阳性细胞对雌激素受体阴性细胞增殖的影响

目的探讨雌激素受体(ER)表达不同的乳腺癌细胞间相互作用。方法 PCR法检测MDA-MB-231及MCF-7细胞中ER的基因表达。CCK-8法检测17β-雌二醇对MCF-7和MDA-MB-231细胞生长增殖的影响。将MDA-MB-231(雌激素受体阴性细胞)用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)法标记荧光信号,将其分别与MCF-7细胞(雌激素受体阳性细胞)和未标记荧光的MDA-MB-231细胞(雌激素受体阴性细胞)用Transwell侵袭小室分层共培养,加入或不加入雌二醇,检测MDA-MB-231细胞的增殖差异。结果 MCF-7细胞表达雌激素受体α(ESR1,ERα)和雌激素受体β(ESR2,ERβ),而MDA-MB-231细胞均不表达。17β-雌二醇浓度为10-11 mol/L时促MCF-7增殖作用最大,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05),对MDA-MB-231细胞则无明显作用(P>0.05)。在加入雌二醇培养的MCF-7细胞与MDA-MB-231细胞小室分层共培养组,经流式细胞仪检测发现MDA-MB-231平均荧光强度较对照组显著降低。结论雌激素受体阳性细胞在雌激素作用下,可促进雌激素受体阴性细胞的增殖。     

全反式维甲酸对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响.方法采用MTT法观察和比较MCF-7细胞在ATRA不同浓度和作用时间下的增殖能力.结果ATRA作用浓度为1 μmol/L时,第3、6、9 d的光吸收值均与对照组有显著差异(P<0.01),其中又以第6 d时ATRA对MCF-7细胞增殖的抑制作用最明显.结论ATRA对乳腺癌MCF-7细胞具有增殖抑制作用,且这种作用具有剂量和时间依赖性.     

全反式维甲酸对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响。方法采用MTT法观察和比较MCF-7细胞在ATRA不同浓度和作用时间下的增殖能力。结果ATRA作用浓度为1μmol/L时,第3、6、9d的光吸收值均与对照组有显著差异(P<0.01),其中又以第6d时ATRA对MCF-7细胞增殖的抑制作用最明显。结论ATRA对乳腺癌MCF-7细胞具有增殖抑制作用,且这种作用具有剂量和时间依赖性。     

用人乳腺癌细胞增殖法检测化学物的雌激素样作用

目的 :引入一种外源性雌激素的快速筛检方法 ,检测外源性化学物的雌激素样活性。方法 :用人乳腺癌细胞体外增殖法 ( E- SCREEN) ,检测硫丹等化学物的雌激素样活性。结果 :成功地建立了 E- SCREEN法 ,该法可检测到 1× 10 - 13 m ol/ L的雌二醇。发现在该试验条件下 ,己烯雌酚为雌激素受体的全激动剂 ,硫丹为雌激素受体的部分激动剂 ,而 4 -羟化他莫昔酚无雌激素样作用。结论 :E- SCREEN法敏感性高 ,并有快速、简便等优点 ,适用于大量化合物的初筛。     

全反式维甲酸对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对人胃癌细胞增殖和细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法用不同浓度的全反式维甲酸处理人胃癌细胞AGS,采用MTT法观察处理前后细胞增殖的变化,应用流式细胞仪和Western印迹杂交法检测细胞凋亡。结果 ATRA显著抑制胃癌细胞增殖,具有时间和浓度依赖性。在0.5、1.0和5.0μmol/L浓度ATRA作用下,胃癌细胞增殖明显受到抑制,且随着作用时间的延长和浓度的增加,抑制作用越明显。ATRA 5.0μmol/L处理细胞72 h后,胃癌细胞凋亡率为15.32%,而对照组为3.31%,差异有统计学意义(P<0.01);并且ATRA处理后可观察到聚二磷酸腺苷核糖多聚酶(PARP)的剪切降解,以及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3,-8和-9的激活。结论全反式维甲酸可抑制胃癌细胞的增殖,并诱导胃癌细胞凋亡,其机制与Caspases的活化有关。全反式维甲酸在胃癌的治疗中可能具有潜在的应用前景。     

全反式维甲酸对神经母细胞瘤SY5Y细胞增殖的影响

[目的]研究全反式维甲酸(ATRA)对神经母细胞瘤细胞增殖的影响.[方法]神经母细胞瘤细胞SY5Y经全反式维甲酸(ATRA)处理不同时间后(2、4、6d)分别于显微镜下观察细胞形态学改变及使用MTS方法观察细胞增殖情况.对经ATRA处理4d的细胞进行溴脱氧尿苷(Brdu)染色观察DNA合成及利用流式细胞仪进行细胞周期分析.[结果]与对照组比较,SY5Y细胞经ATRA处理4d或6d后于显微镜下可见明显的轴突延伸,MTS方法显示细胞增殖明显降低.ATRA处理4d时Brdu染色显示DNA合成减少,利用流式细胞仪对细胞周期的分析表明细胞被阻滞在G1期.[结论]ATRA可抑制神经母细胞瘤细胞增殖.     

SCP对人乳腺癌细胞增殖抑制作用的研究

目的：研究SCP对人乳腺癌细胞生长,抑制效应,探讨其抗癌作用机制。方法：用不同浓度的SCP加入体外培养的人乳腺癌细胞（MCF－7）中,观察加药后细胞生长和有丝分裂指数（MI）的变化,用MTT法检测其细胞毒作用;Hoechst33342/PI荧光双染色方法检测细胞凋亡。结果：SCP明显抑制MCF－7细胞生长,IC50值为1mg/ml;MI于加药后48h较对照组明显降低;凋亡细胞比例在用药后48h达63．3％,结论：SCP可有效抑制人乳腺癌细胞的增殖。     

槲皮素对人乳腺癌裸鼠移植瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的　观察槲皮素 ( Quercetin)对人乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法　以 MCF- 7细胞复制裸鼠异种移植瘤模型 ,2 4只荷瘤鼠随机分组用药 :对照组、槲皮素组、5 - Fu组、槲皮素 + 5 - Fu组。用药 15 d收集肿瘤标本 ,采用光镜、电镜观察 ,Tunel法行原位凋亡检测 ,免疫组化分析 Ki67、Bcl- 2的表达。结果　 1槲皮素组、5 - Fu组、槲皮素 + 5 - Fu组瘤重明显低于对照组 ( P<0 .0 5 ) ;2 Ki67免疫组化显示 :槲皮素组、5 - Fu组、槲皮素 + 5 - Fu组 Ki67指数 ( Ki67- L I)明显低于对照组 ,差异有显著性 ( P<0 .0 1) ;Bcl- 2免疫组化显示 :槲皮素组、5 - Fu组、槲皮素 + 5 - Fu组与对照组差异有显著性 ( P<0 .0 5 ) ;3原位凋亡检测显示 :槲皮素组、5 -Fu组、槲皮素 + 5 - Fu组凋亡指数 ( AI)高于对照组 ( P<0 .0 1) ,槲皮素 + 5 - Fu组高于槲皮素组、5 - Fu组 ,差异有显著性意义 ( P<0 .0 5 )。结论　槲皮素可抑制人乳腺癌细胞 MCF- 7移植瘤生长     

不同浓度丙泊酚对人乳腺癌雌激素受体阳性MCF-7细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的 研究不同浓度丙泊酚对人乳腺癌雌激素受体阳性MCF-7细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法 以人乳腺癌雌激素受体阳性MCF-7细胞为研究对象,随机将其分为3组,即P₀组(为空白对照)、P₂₅组(给予25μg/mL丙泊酚)和P₅₀组(给予50μg/mL丙泊酚)。对3组细胞分别进行克隆形成实验、Transwell细胞迁移实验、侵袭实验、划痕愈合实验,观察各组细胞的增殖、迁移、侵袭变化情况。采用Western blot法检测不同浓度丙泊酚对人乳腺癌胞Ki-67、PD-L1的蛋白表达水平的影响;RT-qPCR法检测不同浓度丙泊酚对Ki-67、PD-L1的RNA表达水平的影响。结果 与P₀组比较,P₅₀组人乳腺癌雌激素受体阳性MCF-7细胞增殖、迁移及侵袭能力均升高,差异有统计学意义(P<0.05);与P₂₅组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与P₀组相比,P₅₀组PD-L1、Ki-67蛋白表达水平升高,...     

他莫昔芬在雌激素受体阳性人乳腺癌细胞中的抗氧化活性的实验研究

目的 利用体外培养的人乳腺癌细胞检测他莫昔芬的抗氧化活性。方法 体外培养雌激素受体阳性的人乳腺癌细胞,通过real-timePCR方法观测他莫昔芬处理后细胞抗氧化物酶：SODI、SODFI和CAT的变化,同时应用XTT测量细胞存活率。结果 他莫昔芬提高SODI、SODFI和CAT在雌激素受体阳性的人乳腺癌细胞中的表达。XTT测定结果显示在他莫昔芬处理后,细胞存活率明显下降（P〈0．05）。结论 他莫昔芬在雌激素受体阳性的人乳腺癌细胞中具有抗氧化活性。     

新藤黄酸联合阿霉素诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的研究

目的研究新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)与阿霉素(adriamycin,ADM)联合作用对人乳腺癌细胞MCF-7的影响。方法体外培养人乳腺癌细胞MCF-7细胞株,采用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞存活率,倒置显微镜观察细胞形态变化;4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)细胞核染色实验观察GNA与ADM单独与联合作用对乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响;膜联蛋白Ⅴ(annexinⅤ,AV)-异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染流式细胞仪检测给药后乳腺癌细胞MCF-7凋亡率。结果 MTT检测结果显示,在GNA浓度为0.125~4μmol/L和ADM浓度在0.5~16μmol/L范围内,人乳腺癌细胞MCF-7的细胞存活率随GNA和ADM剂量增加而降低,且联合用药组细胞存活率低于单独用药组。倒置显微镜和荧光显微镜下,与对照组比较,细胞明显缩圆变小,染色细胞核破碎,呈现凋亡状态,而联合用药组凋亡细胞数量明显高于单独用药组。AV-FITC/PI双染经流式细胞仪检测发现,GNA与ADM单独和联合作用均诱导MCF-7细胞凋亡,与单独用药组比较,联合用药组细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。结论 GNA与ADM单独和联合作用均能诱导人乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡,且两者联合作用可产生协同效应,其作用机制可能与诱导细胞凋亡相关。     

葛根素糖苷生物合成及对乳腺癌细胞增殖抑制的影响

目的 研究约氏不动杆菌G2菌株对葛根素糖苷生物合成的最佳转化条件,以及葛根素糖苷对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231的增殖抑制作用。方法 考察生物合成体系中转化温度、pH和蔗糖浓度对转化率的影响;并以四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）观察不同浓度的葛根素及葛根素糖苷对MDA-MB-231细胞生长的影响。结果 葛根素糖苷的最佳转化条件为温度30 ℃,pH 7.38,蔗糖浓度60 g/L,在此条件反应24 h,转化率为85%。MTT法显示,不同浓度的葛根素及其糖苷对MDA-MB-231细胞均有抑制作用,并随浓度升高而抑制作用增强;其中200 μmol/L浓度葛根素及葛根素糖苷作用MDA-MB-231细胞48h后,其抑制率分别为61.91%和59.42%。结论 约氏不动杆菌G2菌株可有效催化葛根素合成葛根素糖苷;葛根素及其糖苷均能明显抑制人乳腺癌细胞株MDA-MB-231的增殖。     

三羟异黄酮对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S细胞周期的影响

目的：观察三羟异黄酮(genistein，Gen)对体外培养的人乳腺癌细胞株MDA—MB—435S细胞存活率、细胞周期和凋亡的影响。方法：用噻唑蓝(MIT)法观察Gen对MDA—MB-435S细胞生长的影响；流式细胞仪观察Gen处理人乳腺癌细胞后细胞周期改变的剂量效应和时间效应关系；吖啶橙／溴乙锭染色法(acridine orange/ethidium bromide staining)在荧光显微镜下观察Gen对MDA—MB—435S细胞的凋亡作用。结果：随剂量增大和作用时间延长，Gen对MDA—MB—435S细胞增殖的抑制作用逐渐增强。同时可以阻滞细胞周期于G2—M期，而且随剂量的增大，作用时间的延长，阻滞作用也增强。吖啶橙染色法于荧光显微镜下可见，随Gen剂量增大，细胞凋亡也逐渐明显。结论：Gen可抑制人乳腺癌细胞的增殖，其作用机制可能包括诱导细胞凋亡和G2—M期阻滞。     

钾通道阻断剂抑制乳腺癌细胞增殖作用的实验研究

目的探讨选择性钾离子通道阻断剂4-氨基吡啶(4-AP)对多西紫杉醇(DOC)抗人乳腺癌细胞MDA-MB-435S增殖、凋亡、周期的影响。方法通过MTT比色法分析DOC、4-AP以及两药联合应用对人乳腺癌细胞MDA-MB-435S增殖的影响;流式细胞术AnnexinV-FITC/PI双染法和PI单染法检测2种药物对MDA-MB-435S凋亡和周期的影响。结果0.04～50μmol/LDOC可剂量依赖性抑制人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S的增殖;4-AP(5mmol/L)本身具有抑制MDA-MB-435S细胞的增殖作用,并可使DOC(25μmol/L)对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S达最大抑制率的时间明显提前,DOC和4-AP对MDA-MB-435S细胞的增殖抑制有相加或协同作用,并呈剂量和时间依赖性。DOC(2μmol/L)单用24h时促进MDA-MB-435S细胞凋亡的作用并不明显,当与4-AP(5mmol/L)联合应用后能明显增加细胞早期凋亡的发生率;单用DOC可使MDA-MB-435S细胞阻断在G2/M期,单用4-AP可使MDA-MB-435S细胞阻断在G0/G1期,两药联合应用可使细胞阻断在G2/M期。结论DOC和4-AP分别在G2/M期和G0/G1期抑制MDA-MB-435S细胞增殖,4-AP通过促进DOC诱导MDA-MB-435S细胞凋亡从而抑制其增殖作用。     

山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖、迁移的影响。方法:利用细胞培养技术对人乳腺癌T-47D细胞进行培养;利用MTT法比较不同浓度山慈菇水煎剂组和对照组对T-47D细胞生长增殖情况的影响;利用细胞划痕实验,检测不同浓度的山慈菇水煎剂对T-47D细胞迁移的影响。结果:不同浓度的山慈菇水煎剂(50 g·L~(-1)、100 g·L~(-1)、200 g·L~(-1),400 g·L~(-1)、600 g·L~(-1)、800 g·L~(-1))对T-47D细胞的生长抑制率分别为-0.60%、-17.10%、-0.60%、65.08%、81.15%、82.80%,400~800 g·L~(-1)质量浓度山慈菇水煎剂对乳腺癌T-47D细胞的增殖有明显抑制作用;划痕实验结果显示200 g·L~(-1)、300g·L~(-1)山慈菇水煎剂作用24h和48h后,与对照组比较,乳腺癌T-47D细胞的划痕距离较大,划痕未见明显愈合,差异有统计学意义(P0.05)。结论:一定浓度的山慈菇水煎剂对T-47D细胞生长增殖具有抑制作用,低浓度(200 g·L~(-1))的山慈菇水煎剂对T-47D细胞的生长增殖无影响,即无细胞毒性;高浓度(200 g·L~(-1))的山慈菇水煎剂对乳腺癌T-47D的增殖有明显的抑制作用;一定浓度的山慈菇水煎剂可以抑制T-47D细胞的迁移运动。     

Survivin反义核酸对乳腺癌细胞增殖的影响

目的：探讨Survivin反义核酸对乳腺癌细胞增殖的影响。方法：本实验分6组，分别以脂质体介导反义寡核苷酸、无义寡核苷酸及RPMI 1640培养液作为空白的对照组，转染人乳腺癌MCF-7细胞系，采用Realtime RT-PCR，Western blot方法检测各组MCF-7细胞Survivin蛋白及mRNA的表达情况，测定转染后细胞贴壁率变化，研究Survivin反义寡核苷酸对MCF-7细胞的生长抑制作用。结果：脂质体介导Survivin反义寡核苷酸转染人乳腺癌MCF-7细胞后，细胞内Survivin蛋白及mRNA表达显著降低，通过Realtime RT-PCR检测MCF-7细胞经作用后其Survivin mRNA起始拷贝数明显下降；同时细胞贴壁率降低达32．96％，细胞生长抑制率最高达73．62％，ASOND／LiP组与NODN／LiP组和LiP组差异有显著性（P＜0．05）。结论：脂质体介导转染的反义寡核苷酸可在Survivin蛋白及mRNA水平有效地降低乳腺癌MCF-7细胞内Survivin的表达，并能够有效抑制乳腺癌细胞的增殖活性，提示Survivin靶向治疗可能成为乳腺癌综合治疗的一种重要方法。