谷氨酸对急性脑缺血再灌注大鼠皮层乙酰胆碱活性影响的在体动态电化学研究

为了研究脑缺血时兴奋性氨基酸与胆碱能神经的关系，采用双侧颈总动脉夹闭（ＣＣＡＯ）的脑缺血动物模型，用乙酰胆碱离子选择性微电极（ＡＣｈ－ＩＳＭｓ）检测皮层ＡＣｈ释放量，观察脑缺血再灌注时谷氨酸对大鼠皮层ＡＣｈ释放量的影响。结果表明：１０－１ｍｏｌ／ＬＧｌｕ对ＡＣｈ－ＩＳＭｓ无干扰作用，在生理状态下不能显著地促进皮层ＡＣｈ的释放，但可使脑缺血３ｍｉｎ时皮层ＡＣｈ释放量较未加Ｇｌｕ组增加５８．１％（Ｐ＜０．０１），再灌注后皮层ＡＣｈ活性恢复减慢。结果提示：Ｇｌｕ协同ＡＣｈ释放的效应在脑缺血时明显放大，推测Ｇｌｕ和ＡＣｈ可能在缺血性脑损伤中有放大的协同作用。     

谷氨酸对急性脑缺血再灌注大鼠皮层乙酰胆碱活性影响的在体 …

为了研究脑缺血时兴奋性氨基酸与胆碱能神经的关系，采用双侧颈总动脉夹闭（ＣＣＡＯ）的脑缺血动物模型，用乙酰胆碱离子选择性微电极（ＡＣｈ－ＩＳＭｓ）检测皮层ＡＣｈ释放量，观察脑缺血再灌注时谷氨酸对六鼠皮层ＡＣｈ释放量的影响。结果表明：１０＾－１ｍｏｌｏ／Ｌ Ｇｌｕ对ＡＣｈ－ＩＳＭｓ无干扰作用，在生理状态下不能显著地促进皮层ＡＣｈ的释放，但可使脑缺血３ｍｉｎ时皮层ＡＣｈ释放量较示加Ｇｌｕ组增加５８．１％     

线粒体钙,钙调素,兴奋性氨基酸丙二醛在脑缺血再灌注中变？…

目的：观察脑缺血再灌注中线粒体钙,钙调素,兴奋性氨基酸,丙二醛的动态变化。研究探索其变化时相,为阻抑其自稳平衡紊乱的发生提供科学的时间效应点。方法;采用大鼠全脑缺血再灌注模型（４ＶＯ）,测定假手术组,缺血３０ｍｉｎ再灌注１ｈ,６ｈ,１２ｈ组大 皮层,海马组织ＭＣａ,ＣａＭ,ＥＡＡ,ＭＤＡ的含量。结果：缺血３０ｍｉｈ再灌注１ｈ鼠大脑皮层,海马组织ＭＣａ,ＣａＭ,ＭＤＡ含量显著升高,ＥＡＡ含量显著降低     

神经节苷脂GM1对大鼠MCAO／IR模型细胞外液氨基酸含量的影响——活…

目的 探讨ＧＭ１对脑缺血／再灌流的保护作用，动态观察神经节苷脂ＧＭ１对大鼠ＭＣＡＯ／ＩＲ模型细胞外液氨基酸类神经递质的影响。方法 采用缺血１ｈ再灌流２ｈ模型，用活体微透析法，检测缺血皮层脑组织外液内氨基酸类神经递质。结果（１）脑缺血后６０ｍｉｎ Ｇｌｕ上升到峰值浓度，随后很快下降，再灌流２ｈ内未见回升；（２）ＧＭ１组各类氨基酸都明显下降。结论 ＧＭ１能使包括Ｇｌｕ在内的多种氨基酸明显下降，它的保护     

苯海索对大鼠急性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的本实验研究苯海索对脑缺血损伤的作用。方法大鼠脑缺血模型采用四血管结扎法（４－ＶＯ），即在第一颈椎处电的凝固双侧椎动脉，动脉夹夹闭双侧颈总动脉，造成前脑缺血３０ｍｉｎ，然后开夹重灌１ｈ。缺血前后和重灌期间记录大鼠ＥＥＧ。重灌结束时，测大鼠皮层、海马、脑干、间脑单胺（ＮＥ、ＤＡ、５－ＨＴ）递质含量。单胺递质测定采用荧光分光光度法。结果大鼠腹腔注射苯海索１．５ｍｇ／ｋｇ和３．０ｍｇ／ｋｇ能显著改善缺血再灌注损伤的脑电活动，脑电恢复时间可恢复到（２４±４）和（１９±６）ｍｉｎ（Ｐ＜０．０１），苯海索还能明显减轻缺血３０ｍｉｎ后再灌注１ｈ的单胺递质的降低。结论苯海索对缺血引起的损伤神经有保护作用。     

神经节苷脂GM_1对大鼠MCAO/IR模型细胞外液氨基酸含量的影响—活体微透析研究

目的探讨ＧＭ１对脑缺血／再灌流的保护作用。动态观察神经节苷脂ＧＭ１对大鼠ＭＣＡＯ／ＩＲ模型细胞外液氨基酸类神经递质的影响。方法采用缺血１ｈ再灌流２ｈ模型，用活体微透析法，检测缺血皮层脑组织细胞外液内氨基酸类神经递质。结果（１）脑缺血后６０ｍｉｎＧｌｕ上升到峰值浓度，随后很快下降，再灌流２ｈ内未见回升；（２）ＧＭ１组各类氨基酸都明显下降。结论ＧＭ１能使包括Ｇｌｕ在内的多种氨基酸明显下降，它的保护机制与其可能维护神经元膜稳定性有关     

红景天保护缺血再灌注损伤鼠脑细胞的作用及机理研究

目的研究红景天对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用。方法４ＶＯ法复制缺血再灌注动物模型;放免法及化学发光法测定乙酰胆碱（Ａｃｈ）、一氧化氮（ＮＯ）及内皮素（ＥＴ）含量;细胞培养观察红景天对神经细胞的作用。结果（１）缺血再灌注组（ＩＲ）Ａｃｈ含量显著低于假手术组（ＳＡＭ）,药物预防后缺血再灌注组（Ｒ＋ＩＲ）及缺血再灌注后药物治疗组（ＩＲ＋Ｒ）较ＩＲ组显著升高。（２）ＩＲ组ＮＯ含量显著高于ＳＡＭ组,Ｒ＋ＩＲ组及ＩＲ＋Ｒ组ＮＯ含量显著降低。（３）ＩＲ组ＥＴ含量显著高于ＳＡＭ组而Ｒ＋ＩＲ组显著降低。（４）红景天甙培养组细胞存活率及ＬＤＨ含量明显高于对照组,ＮＭＤＡ损伤＋红景天甙组细胞存活率明显高于ＮＭＤＡ损伤组,ＬＤＨ含量却明显降低。结论红景天对大鼠脑缺血再灌注损伤时脑神经细胞具有保护作用。     

内皮素和自由基在脑缺血中的相互作用

本文在建立兔ＭＣＡＯ模型的基础上，用放免法测脑组织和血浆中内皮素（ＥＴ）的含量，同时用ＴＢＡ法测定脑组织中过氧化脂质（ＬＰＯ）含量。兔３６只，随机分三组，对照组（假手术），脑缺血后４ｈ，２４ｈ组，每组１２只。结果发现脑缺血后ＥＴ和ＬＰＯ之间呈明显的正相关（Ｐ＜０．００１），且随缺血后时间的延长而递增（Ｐ＜０．０１），用相关回归分析发现，脑组织ＥＴ和ＬＰＯ均显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），结果说明脑     

重症肌无力患者胸腺手术后血清AchRab和CAEab的变化

目的：研究重症肌无力（ＭＧ）患者手术后血清乙酰胆碱受体抗体（ＡｃｈＲａｂ）与抗骨骼肌柠檬酸提取物抗体（ＣＡＥａｂ）的变化。方法：用固相酶联免疫吸附法测定血清ＡｃｈＲａｂ和ＣＡＥａｂ。结果：ＭＧ患者血清ＡｃｈＲａｂ和ＣＡＥａｂ的水平明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。ＡｃｈＲａｂ水平在手术后１个月开始下降（Ｐ＜０．０５）,在手术后１年下降更明显（Ｐ＜０．０１）;ＣＡＥａｂ水平在手术后１个月和６个月下降不明显（Ｐ＞０．０５）,在手术后１年下降有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。手术后１年患者血清中ＡｃｈＲａｂ和ＣＡＥａｂ水平仍高于对照组（Ｐ＜０．０１）。结论：手术后血清ＡｃｈＲａｂ和ＣＡＥａｂ的检测有助于了解患者的病情。     

神经节苷脂对缺血性大鼠脑保护作用的研究

目的探讨神经节苷脂（ＧＭ１）的脑保护作用及其可能机制。方法用四血管闭塞（４ＶＯ）全脑缺血再灌注模型,用高效液相色谱仪柱前衍生色谱法测定假手术组、缺血３０ｍｉｎ再灌注６０ｍｉｎ生理盐水（ＮＳ）处理组、缺血３０ｍｉｎ再灌注６０ｍｉｎＧＭ１处理组的海马组织兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）含量,并观察缺血３０ｍｉｎ再灌注４ｄ海马ＣＡ１区病理变化。结果缺血再灌注ＮＳ处理组海马组织ＥＡＡ含量显著性降低（Ｐ＜０．０１）,海马ＣＡ１区多数神经元坏死,残存神经元呈较严重缺血性改变,ＧＭ１处理组上述生化病理改变明显为轻。结论推测ＧＭ１可调控缺血再灌注早期ＥＡＡ的过度释放和（或）重摄取受阻,减轻其在细胞外堆聚引起的兴奋毒性损伤,具有脑保护作用。     

急性脑缺血再灌注大鼠不同脑区乙酰胆碱酯酶活性的变化

本文旨在探讨胆碱能神经在脑缺血再灌注时的变化和意义。采用双侧颈总动脉夹闭（CCAO）的大鼠脑缺血动物模型,用改良的Ellman法测定大脑皮层、海马、间脑、纹状体和脑子五个脑区乙酰胆碱酯酶（AChE）活性,观察脑缺血30分钟和再灌注30分钟不同脑区AChE活性的变化。结果发现：在生理状态下不同胞区AChE活性不同,纹状体最高（181．8±1．7μ／g）,皮层最低（24．1±0．4μ／g）,CCAO30分钟皮层、海马、间脑、纹状体的AChE活性均明显下降,较正常大鼠分别降低278％、26．3％、16．9％、23．6％（P＜0．01）,再灌注30分钟后分别回升18.4％、17.6％、10．2％、23．7％（P＜0．01）。而脑干在缺血和再灌注中无显著变化。结果提示不同胞区胆碱能活性程度不同;脑AChE活性对缺血和再灌注是敏感的,推测胆碱能神经可能在缺血性脑损伤中起重要作用。     

Reduced susceptibility of magnocellular neuroendocrine nuclei of the rat hypothalamus to transient focal ischemia produced by middle cerebral artery occlusion

Intraparenchymal injections of glutamate analogues into the diencephalon near the supraoptic (SON) and paraventricular nucleus (PVN) of the hypothalamus selectively spare magnocellular neuroendocrine cells. In this study we investigated for the first time the susceptibility of this neuronal population to ischemia. Temporary focal ischemia was produced using a three-vessel occlusion method involving unilateral middle cerebral artery and bilateral common carotid artery occlusion (MCAO/CCAO). Most of the 3-h ischemic period was maintained without anesthesia and reversed by microclip removal of the contralateral common carotid artery occlusion. In one subset of rats transcardial perfusion with India ink was used to estimate the degree of ischemia produced during MCAO/CCAO in the SON, lateral magnocellular nucleus of the PVN (PVL), caudoputamen (CP), and frontoparietal cortex (COR). Computer-assisted densitometry measurements of ink density indicated significant reductions in ink penetration in the territory of the occluded MCA within the SON (46%), PVL (45%), CP (53%), and COR (76%). In contrast, neither sham-operated rats nor rats subjected to occlusion of the MCA alone showed differences in ink optical densities between the sides ipsilateral and contralateral to MCAO. The other subset of rats were perfused 48-72 h after recovery and brain sections were examined for neurodegenerative changes. While the incidences of cerebral and caudoputamen infarction after MCAO/CCAO were 98.4 and 52%, respectively, the histological features of the SON or PVL in ischemic rats were similar to those of control rats. Reduced susceptibility of magnocellular neuroendocrine cells to ischemia may be due to a number of mechanisms including neuronal resilience, neuroprotection by glia and vascular/perivascular cells, and access to perivascular cerebrospinal fluid.     

Autonomic and myocardial changes in middle cerebral artery occlusion: stroke models in the rat

Stroke models in larger animals such as the cat, dog and monkey are becoming increasingly more expensive and less readily available. However, the rat is an excellent model for focal cerebral ischemia. Rats are readily available, inexpensive and their neuroanatomy and brain function have been studied extensively. Increases in plasma catecholamines and myocardial damage have been observed in clinical stroke. We examined autonomic and myocardial changes in two rat stroke models. In one model only the middle cerebral artery was occluded (MCAO) while the other model involved occlusion of both the MCA and the common carotid artery (MCAO/CCAO). Arterial blood pressure and heart rate were monitored continuously in 25 male rats (326-430 g) that underwent one of the following procedures: (1) MCAO only; (2) MCAO/CCAO; (3) CCAO only; and (4) sham occlusions (SHAM). Arterial blood samples (0.5 ml) for radioenzymatic assay of norepinephrine (NE) and epinephrine (E) were taken twice before the occlusions and at 90 and 180 min after the occlusions. The animals were perfused at the end of the experiment and the heart removed and examined histologically. Tetrazolium salts were reacted with oxidative enzymes to delineate the region of inadequate perfusion. The mean blood pressure and pulse pressure of the SHAM, MCAO/CCAO and CCAO groups significantly declined from initial values (from an average of 78 to 53 mm Hg) during the course of the experiment. However, the mean blood pressure and pulse pressure of the MCAO rats did not change during the experiment, so that the final mean blood pressure and pulse pressure were significantly higher than in the other 3 groups. The levels of both NE and E increased significantly (NE, 1443 +/- 285.9 to 4095 +/- 929 pg/ml; E, 2402 +/- 623 to 3741 +/- 1166 pg/ml) following occlusion in the MCAO group only while the other 3 groups did not change. Four of 6 hearts in the MCAO group were abnormal, showing evidence of subendocardial hemorrhage, ischemic damage or subendocardial congestion. MCAO also resulted in a consistent region of the brain with inadequate perfusion including the insular cortex. These autonomic and myocardial changes appear to mimic some of the changes seen clinically in stroke patients and provide the first acute stroke model for studying autonomic dysfunction in the rat.     

脑缺血早期大脑皮质区神经元内一氧化氮合酶活性的变化

建立大鼠ＭＣＡＯ局灶脑缺血模型,利用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法检测脑缺血早期大脑皮质缺血区神经元内一氧化氮合酶活性的变化。结果显示脑缺血早期３０ｍｉｎ神经元内一氧化氮合酶活性开始至高峰,随后下降,脑缺血后６０ｍｉｎ,降至正常。     

大鼠局灶脑缺血后钙调神经磷酸酶活性和含量变化

目的 研究大脑中动脉闭塞后钙调神经磷酸酶（Calcineurin,CaN)的活性和含量变化规律。探讨CaN在脑缺血中的作用。方法 制备大鼠大脑中动脉永久性闭塞模型。分别测定缺血后不同时间点病灶侧大脑皮质和海马CA1区CaN的活性和含量。结果 皮质组织在缺血6h及其后各时间点CaN 的含量下降，其活性于缺血后4h,6h和12h短暂性增强。海马CA1区CaN的含量于缺血后24h开始降低且不恢复；CaN的活性在缺血后2h,4h和6h减弱。12h始恢复至正常水平。可见，CaN的活性与含量分离。结论 局灶脑缺血后CaN独特的时间变化规律显示其参与介导缺血性神经元损伤。可能具有毒性作用。     

TMB—8对脑缺血大鼠脑血流量的作用

目的 研究8－（N，N－二乙胺）－n－辛基－3，4，5－三甲氧基苯甲酸酯（TMB－8）对局灶性脑缺血大鼠脑血流量（CBF）的作用。方法 用激光多谱勒血流仪测量大脑中动脉阻断（MCAO）大鼠脑血流量。分别于阻断前30分钟和阻断后20分钟给予TMB－8进行干预。结果 MCAO后，CBF迅速下降，维持恒定。阻断前30分钟给予TMB－8 0．5、1和2mg/kg，可剂量依赖性抑制CBF下降，阻断后20分钟给予TMB－8 1mg/kg，也能明显增加CBF。结论 TMB－8能预防和治疗MCAO局灶性脑缺血大鼠CBF减少，改善缺血区血供。     

电针对脑缺血大鼠神经黏蛋白mRNA表达与细胞超微结构的影响

目的观察电针对易卒中型肾血管性高血压大鼠(stroke prone renovascular hypertensive rats,RHRSP)脑缺血-再灌注后不同时间点神经黏蛋白mRNA(neurocan-mRNA)表达、细胞超微结构的影响。方法用环形银夹使SD大鼠的双侧肾动脉狭窄,制成RHRSP,再用线栓法制成一侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlu-sion,MCAO)模型。运用原位杂交和电镜等技术观察电针对脑缺血2h后再灌注1、7、14、30d大鼠脑内神经黏蛋白-mRNA表达与细胞超微结构的干预作用,并与对照组比较。结果电针组脑缺血-再灌注7、14、30d大鼠脑缺血区周围及海马区neurocan-mRNA表达均低于同期对照组,差异有统计学意义(P<0.05);电针组神经元、血管壁等细胞超微结构的损伤较对照各组减轻。结论电针对RHRSP脑缺血-再灌注损伤的保护作用,可能与其下调神经抑制因子neurocan-mRNA表达、减轻细胞超微结构损害等机制有关。     

大鼠局灶性脑缺血后神经营养因子表达的自然变化

目的 观察大鼠局灶性脑缺血后大鼠神经行为、梗死体积、组织形态及缺血半暗带神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)的表达水平变化。方法 将健康雄性SD大鼠24只随机分为2组,Ⅰ组(假手术组); Ⅱ组(脑缺血组)。用线栓法建立动物模型,不给予再灌注,各组在术后48h断头取脑,处死前行神经功能评分,用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色计算脑梗死体积,用HE染色观察组织学形态,用免疫组织化学染色观察NGF、BDNF的表达水平。结果 Ⅰ组在神经功能评分、梗死体积、组织形态及大脑皮层相应部位NGF、BDNF阳性细胞数均正常。与Ⅰ组比较,Ⅱ组的神经功能评分和梗死体积均严重受损; 光镜下Ⅱ组缺血性病理改变较重,与Ⅰ组比较,Ⅱ组缺血半暗带NGF、BDNF阳性神经元数增加(P<0.05)。结论 脑缺血本身可上调缺血半暗带NGF、BDNF的表达水平。     

局灶性脑缺血后脑内髓过氧化物酶活性观察

目的　探讨局灶性脑缺血后脑组织髓过氧化物酶（ＭＰＯ） 活性的测定方法,以及与缺血性损害的关系。方法　采用新型小鼠大脑中动脉线栓模型,检测不同缺血时间组梗塞体积及ＭＰＯ活性。结果　缺血１ ｈ 后再灌注２３ ｈ 组（ｔＭＣＡＯ）缺血灶体积明显小于缺血２４ ｈ 组（ｐＭＣＡＯ）;ＭＰＯ活性在各缺血组缺血侧明显高于对照侧和对照组（ Ｐ＜ ０－０５）,ｐＭＣＡＯ 组缺血侧基底节区ＭＰＯ 活性显著高于ｔＭＣＡＯ 组（ Ｐ＜ ０－０５） ,而两组缺血皮质区ＭＰＯ 活性则无显著差异。结论　本研究建立了局灶性脑缺血的ＭＰＯ活性测定方法,证明ＭＰＯ活性与缺血损伤间具有一定关系。