谷氨酸对急性脑缺血再灌注大鼠皮层乙酰胆碱活性影响的在体动态电化学研究

为了研究脑缺血时兴奋性氨基酸与胆碱能神经的关系,采用双侧颈总动脉夹闭（ＣＣＡＯ）的脑缺血动物模型,用乙酰胆碱离子选择性微电极（ＡＣｈ－ＩＳＭｓ）检测皮层ＡＣｈ释放量,观察脑缺血再灌注时谷氨酸对大鼠皮层ＡＣｈ释放量的影响。结果表明：１０－１ｍｏｌ／ＬＧｌｕ对ＡＣｈ－ＩＳＭｓ无干扰作用,在生理状态下不能显著地促进皮层ＡＣｈ的释放,但可使脑缺血３ｍｉｎ时皮层ＡＣｈ释放量较未加Ｇｌｕ组增加５８．１％（Ｐ＜０．０１）,再灌注后皮层ＡＣｈ活性恢复减慢。结果提示：Ｇｌｕ协同ＡＣｈ释放的效应在脑缺血时明显放大,推测Ｇｌｕ和ＡＣｈ可能在缺血性脑损伤中有放大的协同作用。     

急性脑缺血再灌注大鼠不同脑区乙酰胆碱酯酶活性的变化

本文旨在探讨胆碱能神经在脑缺血再灌注时的变化和意义。采用双侧颈总动脉夹闭（CCAO）的大鼠脑缺血动物模型,用改良的Ellman法测定大脑皮层、海马、间脑、纹状体和脑子五个脑区乙酰胆碱酯酶（AChE）活性,观察脑缺血30分钟和再灌注30分钟不同脑区AChE活性的变化。结果发现：在生理状态下不同胞区AChE活性不同,纹状体最高（181．8±1．7μ／g）,皮层最低（24．1±0．4μ／g）,CCAO30分钟皮层、海马、间脑、纹状体的AChE活性均明显下降,较正常大鼠分别降低278％、26．3％、16．9％、23．6％（P＜0．01）,再灌注30分钟后分别回升18.4％、17.6％、10．2％、23．7％（P＜0．01）。而脑干在缺血和再灌注中无显著变化。结果提示不同胞区胆碱能活性程度不同;脑AChE活性对缺血和再灌注是敏感的,推测胆碱能神经可能在缺血性脑损伤中起重要作用。     

帕金森病大鼠纹状体区乙酰胆碱含量及胆碱酯酶表达的研究

目的观察帕金森病(PD)大鼠纹状体区乙酰胆碱(Acetylcholine,Ach)含量及胆碱酯酶(Ace-tylcholinesterase,AchE)表达的变化。方法采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)行脑立体定向术制作大鼠PD模型,用高效液相色谱法(HPLC)测定不同时间点(1、2、3周)及左旋多巴干预后纹状体乙酰胆碱及多巴胺(Dopamine,DA)含量的变化;通过免疫组织化学法观察胆碱酯酶表达的变化。结果患侧纹状体内乙酰胆碱的含量随着时间的延长呈现不同程度的上升(P<0.05)。而多巴胺的含量随着时间的延长有明显的下降(P<0.05),胆碱酯酶的表达在1周有一定的上调,但在2周和3周时呈梯度下降(P<0.05),用药1周后乙酰胆碱的含量稍下降,DA含量和AchE的着色深度有所回升。结论PD大鼠乙酰胆碱的含量明显升高,多巴胺的含量有显著下降;胆碱酯酶的表达以降低为主;使用左旋多巴后乙酰胆碱和多巴胺含量有一定恢复,且胆碱酯酶阳性细胞数有一定回升。     

免疫应答期间大鼠部分脑区内乙酰胆碱酯酶活性的变化

用绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）免疫大鼠，在免疫后第３天至第６天，分别检测大鼠下丘脑、丘脑、中脑和脑桥内乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）活性的变化。其中丘脑、中脑和脑桥在免疫后第３至６天，ＡＣｈＥ活性与对照组比较均无显著差异。而下丘脑内ＣＡｈＥ活性从第３天开始下降，至第６天均明显降低．本实验说明，在免疫应答期间，下丘脑中ＡＣｈＥ活性降低，由此提示体液免疫应答可影响下丘脑中乙酰胆碱（ＡＣｈ）的含量。我们以往的实验表明，中枢ＡＣｈ可调控体液免疫功能。综合两者结果，可以推断中枢ＡＣｈ与免疫之间存在相互作用。     

大鼠脑缺血时脑细胞膜磷脂含量变化

采用SD大鼠一侧大脑中动脉阻断致局限性脑缺血模型。脑缺血后迅速断头置于液氮中,HPLC外标定量法测定各磷脂组分。观察脑缺血1、5、15、60、360min时脑细胞膜磷脂含量变化。结果显示,PI在缺血早期显著低于对照组(P<0.01～0.05);PE、PC早期仅呈下降趋势,PE在缺血60min组、PC缺血360min组显著低于对照组(P<0.01～0.05)。PS在缺血全过程中变化轻微(P>0.05)。提示磷脂降解与脑缺血存在一定关系,缺血早期首先出现脑细胞膜功能磷脂降解,膜结构磷脂则在缺血后期出现显著变化,且PE较PC优先降解。     

八肽胆囊收缩素对正常及脑缺血大鼠大脑皮层NO水平的调节作用

目的 探讨中枢八肽胆囊收缩素(CCK—8)对正常及脑缺血大鼠脑组织一氧化氮(NO)水平的影响及其可能的机制。方法 给正常或局部脑缺血1h再灌注24h大鼠脑室内(icv)分别注射体积均为5μl的溶剂(人工脑脊液)、CCK—8、丙谷胺或丙谷胺十CCK—8。给药后25h分别取正常大鼠的大脑皮层及脑缺血大鼠缺血中心区、半暗区、非缺血半球皮层，检测脑组织NO水平及一氧化氮合酶(NOS)活性。结果 (1)与假手术组相比，缺血溶剂组大鼠脑缺血中心区及半暗区NO水平显著增加(P＜0．05)，缺血CCK—8组NO水平无明显变化；与缺血溶剂组相比，缺血CCK—8组脑缺血中心区及半暗区NO水平显著降低(P＜0．05或0．01)；缺血CCK—8组非缺血半球皮层NO水平显著高于假手术组(P＜0．05)，而缺血溶剂组非缺血半球NO水平的升高不明显。(2)正常大鼠给CCK—8后，脑皮层NO水平、NOS活性明显升高(P＜0．05或0．005)，丙谷胺可部分拮抗这一作用；单独给丙谷胺对NO水平、NOS活性无影响。结论 中枢给予CCK—8对局部脑缺血再灌注引起的脑皮层缺血中心区及半暗区NO水平的升高具有抑制作用；对正常脑皮层组织NO水平、NOS活性有上调作用，丙谷胺可部分拮抗这一作用。     

血管性痴呆大鼠模型海马乙酰胆碱和血小板激活因子含量变化的动态观察

目的 探讨乙酰胆碱（acetylcholine,ACh）和血小板激活因子（Platelet activatingfactor,PAF）在血管性痴呆中的含量变化及意义。方法 用比色法和高效薄层层析法,分别测定血管性痴呆（vascular dementia,VaD）大鼠手术后,第2、3、5天海马ACh和PAF含量。结果 手术后第2、3、5天大鼠海马ACh含量,在模型组与对照组间均有显著性差异（P<0.05）;而PAF含量两组间则均无显著性差异（P>0.05）。结论 血管性痴呆大鼠海马ACh含量的持续降低,可能是VaD发生、发展的重要原因之一;而PAF则可能主要参与急性脑缺血早期的病理生理过程,对脑缺血后期的病理生理变化意义不大。     

谷氨酸对急性脑缺血再灌注大鼠皮层乙酰胆碱活性影响的在体 …

为了研究脑缺血时兴奋性氨基酸与胆碱能神经的关系,采用双侧颈总动脉夹闭（ＣＣＡＯ）的脑缺血动物模型,用乙酰胆碱离子选择性微电极（ＡＣｈ－ＩＳＭｓ）检测皮层ＡＣｈ释放量,观察脑缺血再灌注时谷氨酸对六鼠皮层ＡＣｈ释放量的影响。结果表明：１０＾－１ｍｏｌｏ／Ｌ Ｇｌｕ对ＡＣｈ－ＩＳＭｓ无干扰作用,在生理状态下不能显著地促进皮层ＡＣｈ的释放,但可使脑缺血３ｍｉｎ时皮层ＡＣｈ释放量较示加Ｇｌｕ组增加５８．１％     

锂盐治疗精神病人导致红细胞内乙酰胆碱的积累研究

本文应用对乙酰胆碱(Ach)敏感的离子选择微电极,在研究服用碳酸锂的8位躁狂症病人红细胞内(Ach)值中发现,其值为:98.2±41.3μmol/L,对照17例正常健康人红细胞内Ach活度值(22.8±1.6μmol/L),经统计学处理有显著性差异,是正常人的5倍(P<0.001)。而服用舒必利和氯氮平精神分裂症患者的(Ach)(31.1±18.9μmol/L),和正常人比较没有差异。     

人参皂苷Rg2对脑缺血再灌注大鼠神经保护作用的研究

目的研究人参皂苷Rg2对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用线栓法制成大鼠大脑中动脉栓塞再灌注模型,术后连续腹腔注射5 d给予不同剂量的人参皂苷Rg2,采用Longa 5级评分标准对脑缺血再灌注大鼠进行神经功能评定,采用TTC染色测定梗死面积,酶组织化学染色显示乙酰胆碱酯酶神经元,比色法测定乙酰胆碱酯酶活性。结果神经功能评分显示人参皂苷Rg2低、中、高剂量组与模型组比较有统计学意义(P<0.05)。TTC染色结果显示人参皂苷Rg2低、中、高剂量能显著减少梗死面积,与模型组相比,差别有显著性(P<0.01)。Ach E组织化学染色可见人参皂苷Rg2高、中剂量组大鼠基底前脑Ach E阳性神经元数目与模型组比较差别有显著性(P<0.01),人参皂苷Rg2各组和尼莫地平组Ach E活性明显高于模型组,差别有统计学意义(P<0.01)。结论人参皂苷Rg2可通过减少缺血再灌注大鼠神经功能评分,减少脑梗死面积,提高胆碱能神经活性,对脑缺血再灌注损伤具有防护作用。     

脑缺血再灌流大鼠脑胶质源性神经营养因子基因表达的变化

探讨脑缺血再灌流不同时程及不同程度缺血对海马及皮层胶质源性神经营养因子（ｇｌｉａｌｃｅｌｌｌｉｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ, ＧＤＮＦ）基因表达的影响,以及Ｎ甲基Ｄ天冬氨酸（Ｎｍ ｅｔｈｙｌＤｓａｐａｒｔａｔｅ, ＮＭＤＡ）受体拮抗剂,钙离子通道阻断剂是否能调节缺血病态下ＧＤＮＦｍ ＲＮＡ的表达。参照Ｓｍ ｉｔｈ 等方法建立大鼠前脑缺血再灌流动物模型。用ＤＩＧＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ３′ｅｎｄ ｌａｂｅｌｉｎｇ Ｋｉｔ,标记５１ ｍ ｅｒ的ＧＤＮＦ寡核苷酸探针在含有海马结构的冰冻组织切片上进行原位杂交检测ＧＤＮＦｍ ＲＮＡ的表达。１０ ｍ ｉｎ 缺血再灌流２ ｈ,齿状回ＧＤＮＦｍ ＲＮＡ表达上调。再灌流６ ｈ,ＣＡ１,ＣＡ３ 和皮层ＰＡＲ区ＧＤＮＦｍ ＲＮＡ表达亦见增多,２４ ｈ 达高峰。Ｋｅｔａｍ ｉｎｅ 可使ＧＤＮＦ的基因表达在海马结构及皮层ＰＡＲ区明显低于相应的缺血再灌流组,统计学差异显著（Ｐ＜ ００５）。脑缺血再灌流时ＧＤＮＦ基因表达增加,对缺血神经元可能起保护作用。Ｋｅｔａｍ ｉｎｅ可阻断缺血后ＧＤＮＦｍ ＲＮＡ 的表达增加,提示ＮＭＤＡ谷氨酸受体很可能参与介导了缺     

汉防己碱对缺血—再灌流大鼠脑NOS活性及超微结构的影响

用ＮＡＤＰＨｄ 组织化学和电镜技术研究了汉防己碱（Ｔｅｔ）对大鼠缺血再灌流脑一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性及超微结构变化的作用。结果发现,缺血１５ ｍ ｉｎ,再灌流２ ｈ 后,海马超微结构出现明显的病理学损害,主要包括核周出现髓鞘样变,核周间隙增大,胞核均质化,大量片状软化灶,毛细血管周围水肿。Ｔｅｔ １０ 和２０ｍ ｇ／ｋｇ 缺血前３０ ｍ ｉｎ 腹腔注射可明显改善或避免出现上述缺血组织学改变。缺血１５ ｍ ｉｎ,再灌流２４ ｈ 后,皮层和海马ＮＯＳ阳性细胞数目显著增多,Ｔｅｔ５,１０ 和１５ ｍ ｇ／ｋｇ 缺血前３０ ｍ ｉｎ 腹腔注射,浓度依赖地抑制缺血再灌流所致的ＮＯＳ阳性细胞数目增加。这些结果提示,Ｔｅｔ可抑制缺血再灌流脑ＮＯＳ活性,减少ＮＯ产生,这可能与Ｔｅｔ减轻脑缺血再灌流的损害有关。     

MATERNAL BILATERAL ADRENALECTOMY ALTERS NUCLEAR COMPOSITION IN CEREBRAL CORTEX OF FETAL RAT

The present study examined the effects of maternal bilateral adrenalectomy on cell nucleus composition of developing fetal rat cerebral cortex. Pregnant adult rats underwent adrenalectomy (ADX) on day 4 of gestation. Fetal brain tissues from sham and ADX groups were examined at each of 10 em bryonal stages, E11 E20. From each fetus three slides of dorsal-central region of developing brain were taken and the diameter and long axis of nucleus of cells in these samples were measured. Maternal adrenalectomy generally produces increased nuclear diameter and number of ovoid nucleus in fetal cerebral cortex especially late prenatal stages. It is shown that ADX may change nuclear composition of developing cerebral cortex.     

糖皮质激素对大鼠大脑皮层突触体高亲和摄取L—谷氨酸的快速,非基因组效应

本研究采用大鼠大脑皮层突触体，观察糖皮质激素（ＧＣ）对于Ｎａ＋依赖高亲和摄取３Ｈ－Ｌ谷氨酸（孵育４ｍｉｎ）的影响。发现ＧＣ包括皮质酮硫酸盐（Ｂ－ＳＯ４）、氢化可的松琥珀酸盐（Ｆ－ｓｕｃ）、地塞米松磷酸盐（ＤＥＸ－ＰＯ４）及皮质酮（Ｂ）均促进突触体摄取谷氨酸，且呈一定浓度依赖性。Ｂ－ＳＯ４１０－５ｍｏｌ／Ｌ时，谷氨酸摄取较对照组增加２５．６％，Ｂ－ＳＯ４、Ｆ－Ｓｕｃ及Ｂ最低有效剂量均为１０－７ｍｏｌ／Ｌ，ＤＥＸ－ＰＯ４最低有效剂量为１０－６ｍｏｌ／Ｌ。孵育２ｍｉｎ后即见Ｂ－ＳＯ４（１０－６ｍｏｌ／Ｌ）促进突触体摄取谷氨酸，孵育４ｍｉｎ后Ｂ－ＳＯ４的作用达高峰。１０－６ｍｏｌ／Ｌ睾酮及孕酮也有促进摄取谷氨酸的作用，而去氧皮质酮及１７β－雌二醇硫酸盐对突触体摄取谷氨酸没有显著影响，ＧＣ的作用有一定甾体特异性。ＧＣ胞内受体阻断剂ＲＵ４８６本身对谷氨酸摄取没有影响，但可部份阻断Ｂ的促进作用。由于已从神经元上离断下来的突触体不再受基因组机制影响，本实验中ＧＣ快速促进突触体摄取谷氨酸是非基因组机制介导的，其详细机制及潜在生理意义有待进一步探讨。     

A QUANTITATIVE STUDY OF AGE-RELATED CHANGES IN THE VASCULAR ARCHITECTURE OF THE RAT CEREBRAL CORTEX

Wilkinson J.H., Hopewell J.W. & Reinhold H.S. (1981) Neuropathology and Applied Neurobiology 7, 451–462
A quantitative study of age-related changes in the vascular architecture of the rat cerebral cortex
A quantitative study of age related changes in the vascular architecture of the rat cerebral cortex is described. A special vessel-filling technique, which allowed the simultaneous fixation of the vasculature, aided the identification of the vessels in histological sections. Vascular parameters, which included the total number of vessel fragments, a blood volume and a vessel wall-surface area index were obtained using a Quantimet 720 shape-analysing computer. In animals aged 13–83 weeks, there was an increase in the above vascular parameters which could mainly be attributed to an increase in the number of vessels with a diameter > 8 μm. In very old rats, aged 124 weeks, the vascularity of the cerebral cortex was severely reduced. These changes, which are very similar to those reported in the ageing human cerebral cortex, may be explained by either direct or indirect effects on the cerebral vasculature. Possible mechanisms are discussed in relation to similar changes observed in the cerebral vasculature after several different insults.     

1998年上海市神经科学学会年会论文摘要

ＭＰＴＰ诱导褐鼠黑质的胰岛素原样α肽同源ＥＳＴ的差异表达徐磊１吕立夏１杨秀丽２刘振国２李学礼１陈生弟２王尧１（１上海铁道大学生化教研室;２上海第二医科大学附属瑞金医院神经内科）帕金森病（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎｄｉｓｅａｓｅ,ＰＤ）是一种以震颤、强直、运动...     

乙酰胆碱及阿托品对大鼠旁巨细胞外侧核神经元自发放电的影响

实验在１７只麻醉、自主呼吸的ＳＤ大鼠上进行，用多管微电极在旁巨细胞外侧核尾侧半（ｃＰＧＣＬ）观察了微电泳乙酰胆碱（ＡＣｈ）及其桔抗剂Ａｔｒｏｐｉｎｅ（阿托品）对神经元自发放电的效应及Ａｔｒｏｐｉｎｅ对ＡＣｈ效应的影响。ＡＣｈ可引起大多数被测神经元（７９．６％）兴奋，少数（２０．４％）无反应；Ａｔｒｏｐｉｎｅ可引起神经元兴奋（占被测神经元数的８％）、抑制（占４８％）或无反应（占４４％）。ＡＣｈ的兴奋效应和Ａｔｒｏｐｉｎｅ的抑制效应呈量效依赖关系。Ａｔｒｏｐｉｎｅ可部分或完全阻断大多数被测试神经元（８０．３％）对ＡＣｈ的兴奋反应。本结果提示ＰＧＣＬ区可能存在着起递质作用的内源性ＡＣｈ，某些神经元存在着Ｍ受体     

THE PROTEOGLYCAN DSD-1-PG OCCURS IN PERINEURONAL NETS AROUND PARVALBUMIN-IMMUNOREACTIVE INTERNEURONS OF THE RAT CEREBRAL CORTEX

Proteoglycans involved in the shaping of the developing brain are often preserved in the adult brain in more restricted locations. We have studied the fate of DSD-1-PG, a chondroitin sulfate proteoglycan containing the hybrid epitope DSD-1. DSD-1-PG exerts neurite outgrowth promoting activity and has been shown to occur in the developing brain during late brain development and into adulthood. In the adult rat brain, monoclonal and polyclonal antibodies against DSD-1-PG labelled only the circumference of a selected subpopulation of neurons. These nerve cells invariably expressed the calcium-binding protein parvalbumin. The label occupied the extracellular space in close vicinity to the cell body, surrounding axon terminals and glial end feet, but was absent from synaptic clefts. DSD-1-PG is thus shown to be an additional representative of the growing list of substances found in perineuronal locations in the adult mammalian brain. Copyright © 1996 ISDN. Published by Elsevier Science Ltd.     

THE EFFECT OF NORMOVOLEMIC HEMODILUTION ON C-FOS PROTEIN IMMUNOREACTIVITY IN THE POSTISCHEMIC RAT BRAIN CORTEX

The hemodilution effect was evaluated in the parietal, temporal, and basal regions of postischemic rat brain neocortex by the immunohistochemical detection of the c-Fos protein. Rats were subjected to the four-vessel-occlusion and the hemodilution was used in one group of animals. Coronal sections of rat brains were used for immunohistochemical processing of c-Fos protein after different postischemic reperfusion intervals. The number of c-Fos positive neuronal nuclei was significantly decreased in the hemodilution group after 4 h of reperfusion in the parietal and basal neocortex compared to the reperfusion without hemodilution.