反义转化生长因子βⅡ型受体表达质粒对实验性肝纤维化的影响

目的 观察反义转化生长因子βⅡ型受作(TGF βRⅡ)表达质粒对实验性肝纤维化的影响。方法 运用重组DNA技术中构建反义TGF βRⅡ真核细胞表达质粒,采用猪血清腹腔注射制备免疫性大鼠肝纤维化模型,实验动物分为肝纤维化模型组、反义TGF βRⅡ治疗组、pCDNA3对照组及正常对照组。反义TGF βRⅡ质粒和pCDNA3空质粒与糖化多聚赖氨酸偶联后经尾静脉分别导入大鼠体内,通过northern blot、RT-PCR、Western blot检测外源导入质粒在肝组织中的表达,检测血清转化生长因子β1(TGFβ1)、肝组织羟脯氨酸测定,Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组织化学与Van Gieson染色观察反义TGF βRⅡ质粒对大鼠肝纤维化的影响。 结果 反义TGF βRⅡ表达质粒可在肝组织中获得确切表达,其表达可使反义治疗组血清TGF β1含量下降,反义TGF βRⅡ治疗组为(23.16 ± 3.13)ng/ml,模型组为(32.96±3.79)ng/ml,F=36.73,P<0.01。肝组织羟脯氦酸含量下降,治疗组为(0.17±0.01)mg/g,模型组为(0.30±0.03)mg/g,F=15.48,P<0.01。减少了肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的沉积,治疗组Ⅰ型胶原为650.26±51.51,Ⅲ型胶原为661.5 8±55.28,模型组Ⅰ型胶原为1209.44±16.60,Ⅲ型胶原为1175.14±121.44,F值分圳为69.87、70.46,P<0.01。并促进反义治疗组肝脏病理形态一定程度的改善。     

氯沙坦抗大鼠肝纤维化的研究

目的 :研究血管紧张素Ⅱ 1型受体拮抗剂氯沙坦对二甲基亚硝胺 (DMN)诱导的肝纤维化大鼠模型的疗效及可能的机制。方法 :制备DMN诱导的大鼠肝纤维化模型 ,同时应用氯沙坦灌胃 ,共 8周。肝组织进行常规HE及Masson三色染色。测定血清肝功能及透明质酸 (HA)。大鼠肝组织Ⅰ型胶原 (ColⅠ )、Ⅲ型胶原 (ColⅢ )及转化生长因子 βl(TGF β1)mRNA的水平用RT PCR方法检测。结果 :氯沙坦可明显改善肝纤维化的程度 ,降低血清ALT及HA的水平 (P <0 .0 1)。同时模型组ColⅠ、ColⅢ及TGF β1mRNA的水平明显高于正常对照组 ,氯沙坦治疗组明显低于模型组 (P <0 .0 0 1)。结论 :氯沙坦具有良好的抗肝纤维化作用 ,且能够抑制肝组织ColⅠ、ColⅢ及TGF β1mRNA的水平 ,从而发挥其抗肝纤维化的作用。     

银杏叶提取物对肝纤维化大鼠转化生长因子β1及Ⅰ型胶原蛋白的影响

[目的]研究银杏叶提取物(EGb)对肝纤维化大鼠的保护作用及其可能机制.[方法]36只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、EGb预防4、8周组.用CCl4腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,采用免疫组化半定量法观察EGb干预4、8周后肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)蛋白的表达,苏木精-伊红及苦味酸酸性品红胶原染色法观察肝组织病理形态学的改变,并检测肝功能、脂质过氧化指标等.[结果]与模型组相比,EGb干预治疗4、8周后,大鼠肝组织TGFβ1、Col Ⅰ蛋白的表达显著降低(P＜0.05),并显著改善肝纤维化分级(P＜0.05),使血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸转氨酶降低,清蛋白升高(P＜0.01),并使肝组织丙二醛明显降低(P＜0.01),8周较4周更明显.[结论]EGb具有抗脂质过氧化,降低TGF-β1的表达、抑制Col Ⅰ合成的作用.     

银杏叶提取物对肝纤维化大鼠转化生长因子β1及Ⅰ型胶原蛋白的影响

[目的]研究银杏叶提取物(EGb)对肝纤维化大鼠的保护作用及其可能机制.[方法]36只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、EGb预防4、8周组.用CCl4腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,采用免疫组化半定量法观察EGb干预4、8周后肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)蛋白的表达,苏木精-伊红及苦味酸酸性品红胶原染色法观察肝组织病理形态学的改变,并检测肝功能、脂质过氧化指标等.[结果]与模型组相比,EGb干预治疗4、8周后,大鼠肝组织TGFβ1、Col Ⅰ蛋白的表达显著降低(P＜0.05),并显著改善肝纤维化分级(P＜0.05),使血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸转氨酶降低,清蛋白升高(P＜0.01),并使肝组织丙二醛明显降低(P＜0.01),8周较4周更明显.[结论]EGb具有抗脂质过氧化,降低TGF-β1的表达、抑制Col Ⅰ合成的作用.     

胡黄连苦苷Ⅱ抗大鼠肝纤维化的作用研究

背景：胡黄连苦苷Ⅱ可治疗急性肝损伤,但对肝纤维化的作用尚不明。目的：探讨胡黄连苦苷Ⅱ对CCl4致大鼠肝纤维化的治疗作用及其机制。方法：采用CCl4腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,56只大鼠分为正常对照组、模型组、胡黄连苦苷Ⅱ治疗组和胡黄连苦苷Ⅱ对照组。造模第8周,处死大鼠：以HE染色和Masson染色观察肝组织改变和肝纤维化程度,以电子显微镜观察超微结构变化,检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、白蛋白（ALB）以及组织丙二醛（MDA）水平,以逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫组化法分别检测肝组织转化生长因子（TGF）-β1、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达。结果：与正常对照组相比,模型组肝组织炎症和纤维化程度、血清ALT、AST以及肝组织MDA水平、TGF—β1和Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达显著增高,血清ALB水平显著降低,超微结构发生显著改变。经胡黄连苦苷Ⅱ治疗后,上述指标均显著改善,但与正常对照组相比差异仍有统计学意义。胡黄连苦苷Ⅱ对照组上述各项指标与正常对照组无明显差异：结论：胡黄连苦苷Ⅱ可通过改善肝功能、抑制脂质过氧化反应、下调TGF-β1和Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达而抑制肝纤维化的形成。     

银杏叶提取物对肝纤维化大鼠转化生长因子β_1及I型胶原蛋白的影响

[目的]研究银杏叶提取物(EGb)对肝纤维化大鼠的保护作用及其可能机制。[方法]36只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、EGb预防4、8周组。用CCl4腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,采用免疫组化半定量法观察EGb干预4、8周后肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)I、型胶原(Col I)蛋白的表达,苏木精-伊红及苦味酸-酸性品红胶原染色法观察肝组织病理形态学的改变,并检测肝功能、脂质过氧化指标等。[结果]与模型组相比,EGb干预治疗4、8周后,大鼠肝组织TGF-β1、Col I蛋白的表达显著降低(P<0.05),并显著改善肝纤维化分级(P<0.05),使血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸转氨酶降低,清蛋白升高(P<0.01),并使肝组织丙二醛明显降低(P<0.01),8周较4周更明显。[结论]EGb具有抗脂质过氧化,降低TGF-β1的表达、抑制Col I合成的作用。     

川芎嗪对大鼠肝细胞凋亡的影响

目的 :采用四氯化碳 (CCl4)损伤性肝纤维化模型 ,观察川芎嗪对大鼠肝细胞凋亡的影响。方法 :雄性Wistar大鼠 40只随机分为 4组 :A组 (模型对照组 )、B组 (秋水仙碱组 )、C组 (川芎嗪组 ) ,采用 5 0 ?l4和 5 %乙醇造模 ;D组为正常对照组 ,代之以等量生理盐水。 6周末处死动物 ,用TUNEL法检测各组肝细胞凋亡情况 ,生化分析仪测定血清肝功能指标 ,比色法检测肝组织匀浆MDA、GSH Px、Hyp ,免疫组化检测肝组织TGF β1的表达。结果 :川芎嗪能改善肝纤维化大鼠的肝功能 ,降低肝组织MDA、Hyp含量 ,增加GSH Px活性 ,使肝组织TGF β1的显色指数降低 ;凋亡细胞TUNEL标记显示 :模型对照组出现典型凋亡改变 ,川芎嗪治疗组未见明显凋亡改变 ,两组比较差异有显著性意义 (P <0 0 1)。结论 :川芎嗪可抑制纤维化大鼠肝细胞的凋亡 ,这可能是其抗肝纤维化的机制之一。     

TGF-β1Ⅱ型受体部分基因表达质粒对实验性大鼠肝纤维化的影响

目的　观察缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体表达质粒在大白鼠体内阻断TGF β1 的作用后对免疫性大鼠肝纤维化的影响。方法　运用基因重组技术 ,构建人的含有细胞外结合区、跨膜区和少量细胞质区的缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体真核细胞表达质粒 ,经脂质体包埋后 ,通过腹腔注射将其导入免疫性大鼠肝纤维化模型体内 ,观察其对大鼠肝纤维化的影响。结果　早期接受缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体表达质粒治疗的大鼠 ,其血清透明质酸 (HA)、层黏连蛋白 (LN)、Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )、Ⅳ型胶原 (Ⅳ C)的水平均比模型组低 (P <0 .0 1) ,晚期组与模型组之间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;在病理形态学的观察方面 ,早期、晚期运用缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体表达质粒进行治疗 ,均可使大鼠肝纤维化程度较模型组减轻 (P <0 .0 1)。结论　在肝纤维化形成的早期应用缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体表达质粒进行治疗可以预防肝纤维化的形成 ,而晚期应用只能阻止肝纤维化的进一步发展 ,尚不能有效逆转肝纤维化     

肝组织与血清转化生长因子β1表达水平与病毒性肝炎患者肝纤维化的关系

目的 观察肝纤维化不同阶段转化生长因子β_1(TGF β_1)在肝组织内表达情况及血清水平,探讨TGF β_1与肝纤维化发生发展的关系,评价肝脏、血清TGF β_1及血清Ⅲ型胶原(PC Ⅲ)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(C Ⅳ)反映肝纤维化情况。 方法 随机选取92例慢性病毒性肝炎患者,酶联免疫法检测TGF β_1血清水平,其中31例行肝组织活检,做TGF β_1的免疫组织化学染色和胶原纤维染色,并用多媒体彩色图文分析系统对肝脏TGF β_1和胶原进行图像分析定量。 结果 (1)按肝组织纤维化程度(S)分组,除S_2组与S_1组比较外,TGF β_1随纤维化分期加重而表达增加,F=13.46,P<0.05。按炎症活动度级别(G)分组,G_1组、G_2组、G_3组、G_4组之间两两比较差异无显著性。(2)肝组织TGF β_1水平与血清TGF β_1浓度呈正相关(r=0.896)。肝组织TGF β_1水平与肝组织胶原含量呈正相关(r=0.863),肝组织TGF β_1水平与血清PC Ⅲ、HA、LN、C Ⅳ之间均呈正相关,r分别为0.824、0.720、0.747、0.839。 结论 肝脏和血清TGFβ_1表达水平与肝组织纤维化程度密切相关,且较HA、LN、C Ⅳ三项常规指标在反映早期纤维化方面更敏感。     

肝力克对肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子β1 mRNA表达的影响

[目的 ]探讨中药复方肝力克对肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子 β1(TGF β1)mRNA表达的影响。 [方法 ]用 4 0 ?l4皮下注射建立SD大鼠肝纤维化模型。造模结束后 ,给予不同剂量的肝力克和秋水仙碱灌胃治疗 9周。采用原位杂交法观察大鼠肝组织中TGF β1mRNA的表达情况。 [结果 ]肝纤维化模型组大鼠肝组织TGF β1mRNA阳性表达较正常对照组明显升高 (P <0 .0 1) ;应用肝力克大、中、小剂量和秋水仙碱治疗后 ,大鼠肝组织TGF β1mRNA阳性表达均较肝纤维化模型组明显降低 (P <0 .0 1,<0 .0 5 )。肝纤维化模型组大鼠肝组织纤维化计分与TGF β1表达程度呈明显正相关 (r =0 .80 1,P <0 .0 1)。 [结论 ]肝纤维化大鼠肝组织TGF β1mRNA表达程度与肝纤维化的发生发展有密切关系 ;中药肝力克降低肝纤维化大鼠肝组织TGF β1mRNA的表达可能是其抗肝纤维化的作用途径之一。