应用ELISA法检测HIV抗体失控原因分析

应用酶联免疫吸附试验 ( ELISA)作为初筛试验检测 HIV抗体是目前国内外各实验室普遍采用的方法 ,该法尽管敏感度高 ,但也存在一定的局限性 ,可造成一定的假阳性或假阴性 ,影响结果的准确性。因此 ,要想保证结果的可信 ,则必须在整个实验过程中加入外部质控血清进行严格的质量控制。而本试验的影响因素很多 ,为了弄清该实验失控的常见原因 ,积累该法检测 HIV抗体的经验 ,以便指导今后的工作 ,保证 HIV检测工作质量 ,现就广西检验检疫局艾滋病检测确认实验室 2 0 0 1年 HIV抗体检测的失控情况进行分析如下。1　材料与方法1 .1　材料来…     

RA相关自身抗体对HIV病毒检测结果的影响

目的探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)相关自身抗体对HIV病毒不同筛查方法的影响,为临床中出现的HIV检测结果假阳性提供解释依据。方法选择2015年7月~2016年7月我院接诊的90例RA患者进行检测,按RA抗体类风湿因子(rheumatoid factor,RF)值高低分为RF18 U/m L组(n=33)和RF300 U/m L(n=57);按抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)值高低分为抗CCP抗体浓度25 RU/m L组(n=39)和抗CCP抗体浓度500 RU/m L组(n=51),采用快速胶体金法、酶联免疫吸附法(ELISA)及电化学发光法(ECLIA)对所有患者进行血清HIV病毒检测,阳性标本采用免疫印记确认实验,并采用ELISA法对所有患者RF及抗CCP抗体进行检测。结果快速胶体金法和ELISA法所检测的所有患者结果均为阴性,ECLIA法检测出12例患者HIV抗体呈阳性,阳性标本采用免疫印记确认,结果均为阴性,差异有统计学意义(P0.05);ECLIA法检测RF-Ig M18 U/m L组的HIV抗体呈阳性患者1例,RF-Ig M300 U/m L及RF-Ig G300 U/m L的HIV抗体呈阳性患者分别为11例、3例,差异有统计学意义(P0.05);抗CCP抗体浓度25 RU/m L组中HIV抗体呈阳性患者2例,抗CCP抗体浓度500RU/m L组HIV抗体呈阳性患者12例,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论类风湿关节炎高滴度的自身抗体对ECLIA法检测患者HIV抗体具有一定的影响,会导致假阳性的产生,因此多种检测方式进行筛查是有必要的。     

酶联免疫吸附试验检测HIV抗体的质量控制方法探讨

目的寻找一种适用于HIV抗体酶联免疫吸附实验室内质量控制(IQC)的方法。方法采用Levey-Jennings质控图法、即刻法和控制变异系数(CV)的方法(改良即刻法)同时统计规范操作前和规范后的两批各30个质控数据,制作质控图。结果规范前检测采用即刻法和Levey-Jennings质控图法考核显示在控,改良即刻法显示失控;规范后检测3种方法考核均为在控。结论采用即刻法考核,前3次结果对后续质控结果影响较大,前3个质控数据的CV值较大时,随后的结果会出现假在控。Levey-Jennings质控图法如果不对CV值进行考核,前3个质控数据的CV值较大时,随后的结果也会出现假在控。采用改良即刻法统计,只要设定好一个实验室或一个地区的允许CV值,就没有假失控和假在控的结果,因此改良即刻法较为适用于HIV抗体ELISA检测的室内质量控制。ELISA检测手工操作步骤较多,操作细节都对实验结果有很大影响,因此需要规范实验操作,并严格按照要求执行。     

自制人类免疫缺陷病毒抗体质控参考品的探讨

目的 探讨自制HIV抗体弱阳性质控血清作为室内质控参考品,对抗-HIV检测的结果进行质量控制、评价和分析并考核其稳定性,提高人类免疫缺陷综合征(AIDS)筛查的实验室检测质量.方法 采用阳性对照品自制临界的弱阳性血清,作为室内质控参考品.结果 依据HIV抗体弱阳性的标准,经20次试验检测确定按照1 ∶6稀释度(含HIV-1抗体)和1 ∶8稀释度(含HIV-2抗体)制备室内质控参考品,其质控参考品吸光度值/临界值(s/co)分别为2.58和2.62,变异系数分别为4.65%和4.32%.结论 自制HIV抗体室内质控参考品对HIV筛查实验室进行质量控制是经济、有效并值得推广的.     

快速胶体硒法检测抗-HIV(1+2)抗体

人类免疫缺陷病毒 (HIV)抗体测定是鉴别HIV病毒感染血液的最合适指标 ,检测HIV抗体最常用的方法有三种 :酶联免疫吸附试验 (ELISA)、颗粒凝集试验、特异性快速试验。特异性快速试验方法简单、快速、不需特殊仪器。本文对HIV抗体胶体硒法试剂检测抗 -HIV( 1 +2 )抗体的灵敏度、特异性、反应时间做了初步探讨 ,现报告如下 :1　材料与方法1 .1　检测参考品HIV抗体国家参考品 (中国药品生物制品检定所 ,批号 :2 0 0 1 0 7)。该参考品有 45支样品组成 ,其中N1～N2 0 为HIV抗体阴性参考品 ,P1～P18为HIV-1型阳性样品 ,P19～P2 0 为…     

2570例住院患者输血前血清五项指标检测结果分析

目的:探讨住院患者输血前乙肝病毒、丙肝病毒、HIV、梅毒携带情况,以增强临床医护人员自我保护意识,有效控制院内感染,减少输血医疗纠纷。方法:对2 5 70例住院患者在输血前采集的血标本分别进行血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乙肝表面抗原、丙肝抗体、HIV抗体、梅毒抗体检测,并分别进行统计计算。结果:检出乙肝阳性75例(2 .92 %) ,其中71例(94 .6 7%)伴随ALT升高(5 0U/L80U/L) ;检出丙肝阳性1 8例(0 .70 %) ,有2例(1 1 .1 1 %)伴随ALT升高(5 0U/L70U/L) ;检出梅毒抗体阳性5例(0 .1 9%)、HIV抗体阳性1例(具有很大偶然性)。结论:本组输血前病例5项指标检出阳性率较国内东部地区输血前检出率偏低,但足以引起临床医护人员对医源性感染的重视,并加强自身防护。     

艾滋病病毒抗体检测外部质控参考品制备和应用

目的 制备艾滋病抗体检测的外部质控参考品,以保证艾滋病筛查实验室的检测质量.方法 用人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体阴性血清稀释阳性对照的方法 ,经过国产试剂检测,制备出弱阳性标本的质控参考品,并绘制质控图.结果 根据HIV抗体弱阳性的标准,确定按照1:8稀释度制备外部质控血清,其质控物吸光度值/临界值(S/CO)为2.54,变异系数为15.2%.结论 自行制备的HIV抗体弱阳性标本质控参考品用于HIV筛查实验室的质量控制和评价是经济可行的.     

儿童卡波希肉瘤与HIV等相关病毒感染

为提高对小儿卡波希肉瘤 (Kaposisarcoma,KS)的认识 ,对 1 4例非洲小儿KS的临床资料、HIV抗体检测结果和组织病理学结果进行分析。结果 :1 4例患儿活组织病理学观察均符合KS诊断 ,其中 1 2例 ( 85 .71 % )HIV抗体阳性。HIV抗体阳性的患儿中 ,婴幼儿组 ( 6月～ 3岁 ) 5例 ( 4 1 .7% ) ,4～ 6岁 1例 ( 8.3% ) ,7～ 9岁 3例 ( 2 5 .0 % ) ,1 0～ 1 4岁 3例 ( 2 5 .0 % ) ;淋巴结型KS占 75 % ,皮肤型占 2 5 %。提示 :小儿HIV感染相关型KS并不少见 ,以婴幼儿组发病率最高 ,以淋巴结型KS为主要临床表现类型 ;应提高对本病的认识 ,及时诊断患儿。     

羧基肽酶-H自身抗体对LADA的诊断价值(英文)

目的 :探讨羧基肽酶H(carboxypeptidaseH ,CPH)自身抗体检测对成人隐匿性自身免疫性糖尿病 (LA DA)的诊断价值。方法 :选择 1型糖尿病患者 15 4例 ,2型糖尿病患者 10 4例 ,健康对照 14 4例。重组人CPH在体外翻译时用3 5S 甲硫氨酸标记 ,采用免疫沉淀法检测血清CPH抗体滴度。谷氨酸脱羧酶抗体 (GAD Ab)、酪氨酸磷酸酶细胞内段抗体 (IA2ic Ab)和胰岛素自身抗体 (IAA)均采用放射免疫分析法检测。结果 :CPH抗体频率在 1型糖尿病患者 (5 / 15 4 ,3.2 % ) ,2型糖尿病患者 (6 / 10 4 ,5 .7% )和健康对照 (3/ 14 4 ,2 .1% )间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。 2型糖尿病患者GAD Ab ,IA2ic Ab和IAA频率分别为 15 .4 % (16 / 10 4 ) ,2 .9% (3/ 10 4 )和 2 .3% (1/ 4 3) ,且IA2ic Ab或IAA阳性者均为GAD Ab阳性 ,但CPH抗体阳性者无一例GAD Ab ,IA2ic Ab和IAA阳性。结论 :CPH抗体对LADA有辅助诊断价值 ,与GAD Ab联合检测可提高LADA诊断的敏感性。     

溶血对抗-HIV测定结果的影响

随着我国 HIV感染人数的逐年增高 ,人们对艾滋病病毒的检测日益重视。目前我国的 HIV初筛试验大多是采用间接EL ISA法 [1 ] ,而标本溶血是影响该方法结果准确性的关键因素之一 [2 ]。但是我们在采样、分离血浆等过程中因操作不当 ,均易造成标本不同程度的溶血 ,为了确定不同程度的溶血标本对抗 - HIV检测结果的影响 ,我们进行了实验观察 ,现将结果报告如下。1　材料与试剂1.1　仪器和试剂　 Wellscan MK2型酶标仪 (奥地利产 ) ;a WI型洗板机 (奥地利产 ) ;北京金豪公司抗 - HIV试剂盒 ,批号2 0 0 31118。1.2　溶血标本的配制　多份…     

质控图在HIV抗体检测室内质控的应用

目的 质量控制图的应用是HIV检测实验室常规的室内控制方法.HIV抗体检测实验室常规采用"即刻法"质控图和(或)Levey-Jennings质控图.二种质控图有许多优点,但也存在一些缺点.有作者提出动态质控图法作为HIV抗体检测室内质量控制的补充.方法 本HIV抗体检测实验室通过应用"即刻法"质控图、Levey-Jennings质控图、动态质控图法三种方法来进行室内质控的评价.结果 证明这三种质控图在HIV抗体检测室内质控中有相互补充的作用.不同级别的HIV抗体检测实验室可根据实际情况选用.     

溶血对ELISA法检测HIV抗体影响的临床分析

目的探讨溶血对ELISA法检测HIV抗体影响。方法采用回顾性分析的方法,分析200例血液标本,不同溶血程度对检测HIV抗体的影响。结果血浆游离血红蛋白≥10g/L出现HIV抗体假阳性,同时随着血浆游离血红蛋白的增高HIV抗体假阳性率逐渐增高。结论ELISA法检测HIV抗体应尽量避免假阳性标本的出现,从而保证检测结果的真实可靠性。     

急诊术前HIV抗体金标法快速检测的临床意义

目的论证急诊术前HIV抗体金标法快速检测的必要性及其临床意义。方法采用免疫胶体金技术(DIG-FA)即金标法和酶免疫(EIA)检测方法平行检测急诊术前患者血清艾滋病病毒抗体(抗HIV1/2),并对DIGFA技术参数进行评估。结果急诊手术患者群中HIV抗体阳性率为1.05%;抗HIV1/2 DIGFA试卡检测特异性为100.00%、灵敏度为80%,检测总效率为99.79%。结论HIV抗体金标法特异性、灵敏度、检测总效率等符合初筛要求,急诊术前采用金标法快速检测HIV抗体,可节省检测时间以赢得宝贵的手术时间,又可使医生在术中对可疑患者进行针对性预防,降低医源性HIV感染概率。     

HIV感染和AIDS患者T淋巴细胞免疫病理改变的研究

目的　探讨我国HIV感染和AIDS患者T淋巴细胞的免疫病理改变情况及其临床意义。方法　收集 13例HIV感染患者 (HIV组 )、2 7例AIDS患者 (AIDS组 )和 5 1名健康献血员 (正常对照组 )的抗凝血 ,用人T淋巴细胞亚群的特异性荧光抗体标记 ,通过流式细胞仪检测外周血CD4 + T淋巴细胞 (T4细胞 )、CD8+ T淋巴细胞 (T8细胞 )及其亚群 ,并检测患者血浆HIV载量。结果　正常对照组、HIV组和AIDS组外周血T4细胞计数 (× 10 6个 /L)分别为 84 9± 2 88,4 37± 184 ,5 0± 5 1,组间比较P <0 0 1;T8细胞计数 (× 10 6个 /L)分别为 5 79± 175 ,10 31± 345 ,5 35± 338,HIV组明显高于正常对照组(P <0 0 5 ) ;T4纯真细胞 (CD4 + CD4 5RA+ CD6 2L+ )亚群比例分别为 4 3 0 %± 11 4 % ,4 4 2 %± 12 8% ,2 4 8%± 15 5 % ,AIDS组明显为低 (P <0 0 5 ) ;T4纯真细胞计数 (× 10 6个 /L)分别为 36 8± 16 2 ,185±134,18± 2 0 ,组间比较P <0 0 1;T4功能细胞 (CD4 + CD2 8+ )亚群比例分别为 93 1%± 8 1% ,6 2 6 %±2 8 2 % ,5 6 9%± 2 6 4 % ,组间比较P <0 0 1;T4和T8激活细胞 (CD4 + HLA DR+ ,CD8+ HLA DR+ ,CD8+CD38+ )亚群比例均表现为AIDS组 >HIV组 >正常对照组 (P <0 0 5 ) ;T4和T8凋亡细胞 (CD4 +CD95 + ,C     

2型糖尿病患者血清β-AP测定结果的初步分析

目的:探讨2型糖尿病患者与β- AP之间的关系。方法:2型糖尿病患者4 0例;正常对照4 0例,分别采用氧化酶法测空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TTC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL - C) ,采用放射免疫法测β-AP、瘦素(L EP)、胰岛素(INS)、胰岛素抗体。结果:2型糖尿病组与正常对照组β- AP检测结果分别为:(2 3.11±5 .0 4 )pg/ ml;(30 .0 9±7.5 6 ) pg/ ml(P<0 .0 1)。2型糖尿病患者血清β- AP浓度与TG、TTC、HDL- C、FBG、INS、胰岛素抗体、L EP的相关系数分别为- 0 .2 (P>0 .0 5 ) ;0 .10 3(P>0 .0 5 ) ;- 0 .10 5 (P>0 .0 5 ) ;0 .174 (P>0 .0 5 ) ;0 .2 5 3(P>0 .0 5 ) ;0 .0 96 (P>0 .0 5 ) ;- 0 .0 4 (P>0 .0 5 )。扣除TG、HDL - C,β- AP与INS的偏相关系数为0 .30 6 (P>0 .0 5 )。结论:2型糖尿病组与正常对照组血清β- AP水平差异具有显著性,但未发现2型糖尿病患者血清β- AP水平与TG、TTC、HDL - C、FBG、INS、胰岛素抗体、L EP有明显相关性。     

温度与时间对HBsAg、抗HCV、抗HIV、抗梅毒抗体的影响

严格的血液检测是保证输血安全的重要手段，日常的检测工作中常会遇到阳性或可疑标本、质控品放置不同温度和时间时出现测定值明显差异现象，严重影响血液标本检测结果的正确性，导致室内质控图曲线的失控。为此，笔者对12份阳性标本、4份质控品分别在室温、2～6℃冰箱及-20℃冰箱中贮存，在不同时间用ELISA法分别进行HBsAg、抗HCV、抗HIV、抗梅毒抗体检测，结果如下。     

国产KET-2002全自动血液细胞分析仪性能评价

目的　对国产KET -2 0 0 2自动血液细胞分析仪进行注册前临床研究。方法　采用新鲜抗凝静脉全血及质控品评价仪器的主要性能。结果　全血样本白细胞 (WBC)、红细胞 (RBC)、血红蛋白 (Hb)、红细胞比积 (HCT)和血小板 (Plt)的平均批内精密度为 0 5 3 %～ 3 84% ,总变异系数为 1 2 9%～ 3 5 7% ,携带污染率为 0～ 2 5 3 % ,在WBC( 2 40～66 5 0 )× 10 9/L ,RBC( 0 89～ 7 12 )× 10 12 /L ,Hb( 2 5 0～ 2 43 0 )g/L ,HCT 7 8%～ 61 9%和Plt( 2 5～ 72 9)× 10 9/L的评估范围内线性良好 ,与SysmexKX -2 1血液分析仪比较 ,相关系数在 0 95 6～ 0 996之间 ,预稀释模式与全血模式结果一致 (r≥0 975 ) ,Hb检测与手工HiCN法结果相关系数为 0 991,白细胞分类中淋巴细胞与中性粒细胞与镜检法符合率高 ,日间变异均小于 2 % ,经时变化稳定。结论　仪器主要指标试验结果能满足临床检测需要 ,KET -2 0 0 2是一台性能优良的自动血液细胞分析仪。     

妇产科概论 免疫学

061465妊娠水平孕酮体外对HIV-1感染和复制的影响/李海仙…∥中国免疫学杂志·—2006,22(5)·—445~448研究相当于妊娠后外周血和胎盘局部浓度的孕酮(P4)体外对HIV-1感染及复制的影响。方法:检测终浓度为10-6mol/L(相当于妊娠妇女外周血水平)和10-5mol/L(相当于母胎界面局部浓度)的P4对HIV-1介导细胞融合的影响;ELISA法检测感染HIV的MT-2细胞培养上清p24抗原含量来探讨对HIV-1复制的影响;流式细胞术检测对淋巴细胞活化后CD69表达的影响和3H-TdR掺入法检测对淋巴细胞增殖的影响。结果:10-5mol/L的P4可以明显抑制HIV-1介导的细…     

尿液中检测HIV-1抗体进行男同性恋HIV病毒感染筛查的研究

目的：用酶联免疫吸附试验(ELASA)进行男同性恋者尿液中艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)抗体检测,并与血清学检测结果进行比较,探讨采用尿液检测HIV抗体进行特殊人群HIV感染筛查的可行性。方法：平行采集受检男同性恋者的外周静脉血及尿液标本,分别用血液和尿液EUSA法检测HIV抗体,阳性血清标本采用WB法确认。结果：检测109人,血清学检测结果3人阳性,并经WB实验确认为HIV病毒感染,尿液检测3人为阳性,与血清学实验对照,准确性为100％。结论：尿液检测HIV-1抗体结果可靠,可作HIV病毒感染的筛查。     

三种血清HDL-C直接测定法干扰因素的比较

评价了基于选择性抑制、化学修饰和抗体抑制原理的三种高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)直接测定法的精密度及相关性 ,常见干扰因素对三种方法的影响。结果显示 :总CV值选择性抑制法为 2 6 1～ 3 6 9% ,化学修饰法为 2 78～ 4 0 0 % ,抗体抑制法为 2 6 4～ 3 82 % ,总CV都能满足临床实验室的要求。抗体抑制法 (x)与选择性抑制法 (Y1)的回归方程为Y1=0 .912x+0 .0 78,相关系数r=0 .981;抗体抑制法 (x)与化学修饰法 (Y2 )的回归方程为Y2 =0 .897x +0 .0 6 1,r=0 .977。提示三种方法测定结果相关良好。干扰实验表明 :TC <6 .0mmol/L ,Hb5g/L以下 ,胆红素 <2 5 0umol/L ,抗坏血酸 0 4g/L以下 ,对三种方法均不产生干扰 ,说明三种方法均具较强抗干扰能力。血清存放 4℃两周 ,- 2 0℃三周 ,保持稳定。以上实验说明 ,三种直接测定法均可作为临床实验室测定HDL C的常规方法。