9-顺-维甲酸对非小细胞肺癌CyclinD1、Cdk4表达的影响

目的:研究9-顺-维甲酸对非小细胞肺癌A549、PG、SPC-A1的细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶4(Cdk4)表达的影响,探讨其抑制非小细胞肺癌生长与影响CyclinD1、Cdk4表达的相关性。方法:采用半定量逆转录PCR方法,分析细胞周期因子CyclinD1、Cdk4表达的变化。结果:9-顺-维甲酸既可以降低PG、SPC-A1的CyclinD1表达(P<0.01),又可以降低PG、A549的Cdk4表达(P<0.01)。结论:9-顺-维甲酸对非小细胞肺癌生长的抑制作用,与其调控细胞周期因子CyclinD1、Cdk4的表达密切相关。     

9-顺维甲酸对人肺癌组织CyclinD1、Cdk4、P16转录的影响

目的：检测9－顺维甲酸（9-cis-RA)处理前后体外培养的人肺癌组织及其对照组织细胞周期蛋白因子CyclinD1、细胞周期蛋白依赖性激酶Ddk4、细胞周期蛋白酶抑制因子P16转录水平的变化，探讨其抑制肺癌组织细胞生长的作用机制。方法：采用半定量逆转录聚合酶链式反应（RT－PCR）分析CyclinD1,Cdk4,P16转录的变化，结果：9-cis-RA既可降低体培养的人肺癌组织Cdk4的转录，又可升高其P16的转录，对肺癌组织和正常肺组织CyclinD1的转录的影响无统计学意义。对正常肺组织Cdk4,P16的转录的影响也无统计学意义。结论：9-cis-RA抑制肺癌组织细胞增殖的作用机理与其调节Cdk4,P16的转录有关。     

9-顺-维甲酸对人肺鳞癌细胞周期调控因子CyclinD1、Cdk4转录的影响

目的:检测9-顺-维甲酸(9-cis-RA)处理前后人肺鳞癌细胞株L78、A2的细胞周期调控因子Cy-clinD1、Cdk4转录水平的变化。探讨其抑制肺鳞癌细胞生长的作用机制。方法:采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析细胞周期调控因子CyclinD1、Cdk4转录水平的变化。结果:9-cis-RA对两细胞株的细胞周期调控因子CyclinD1、Cdk4转录水平均有所降低,且具有统计学意义(P<0.05)。结论:9-cis-RA抑制肺鳞癌细胞株L78、A2增殖的作用机理与其调节细胞周期调控因子CyclinD1、Cdk4的转录有关。     

Cyclin D1及p16在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的:研究细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)及p16基因在人非小细胞肺癌组织中的表达和临床意义。方法:以免疫组化SP法检测62例非小细胞肺癌组织中及20例肺良性病变组织中Cyclin D1及p16的表达。结果:Cyclin D1及p16在肺癌组织中均有较高的表达,其阳性率分别为62.9%和56.5%;在肺良性病变中未发现Cyclin D1的表达,p16阳性率为85.0%。Cyclin D1的表达与肿瘤的大小、淋巴结转移及临床分期无关(P>0.05);p16的表达与肿瘤的大小无关(P>0.05),与淋巴结转移及临床分期有关(P<0.005)。结论:Cyclin D1的过表达与肺癌的发生有关,可作为肺癌早期诊断指标之一,而与肺癌发展和预后无关;p16异常与肺癌发生、发展及预后有关。     

CyclinD1,p16,Rb蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达

目的 :研究cyclinD1,p16 ,Rb在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达与其发生、发展的关系 .方法 :用免疫组织化学法对 4 0例NSCLC及其癌旁正常肺组织中cyclinD1,p16 ,Rb蛋白表达进行检测研究 .结果 :4 0例NSCLC中cyclinD1,p16 ,Rb蛋白表达阳性率分别为 92 .5 % (37/ 4 0 ) ,4 7.5 % (19/4 0 ) ,75 .0 % (30 / 4 0 ) .p16 ,Rb阳性率表达随组织学分级降低而降低 ,有显著差异 (P <0 .0 5 ) .cyclinD1阳性率表达与组织学分级无关 .30例Rb阳性标本中 ,p16呈阴性表达或低水平表达 ;10例Rb阴性标本中 ,p16呈阳性或阴性表达者各占一半 .结论 :NSCLC的分子发病机制涉及cyclinD1过表达与P16 ,Rb的表达缺失或失活 ;p16和Rb表达阳性率与NSCLC分级呈正比 ;p16的表达可能受pRb的负调控 ;cyclinD1,p16 ,Rb的蛋白表达与NSCLC的具体病理分型无明确关系     

实时荧光定量PCR检测非小细胞肺癌中cdk4基因表达

肺癌的病死率在我国位于恶性肿瘤的前列.细胞增殖周期调控异常是恶性肿瘤的一个重要特征[1],调控细胞周期进程分子机制的核心是细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependenet kinases,CDK)的活性表达与调控,CDK与细胞周期蛋白 1(cyclin D 1)等相结合而激活蛋白激酶活性推动细胞从G1期向S期过渡[2],启动DNA合成,使细胞从G1期进入S期,使细胞分裂加速.     

非小细胞肺癌组织中CyclinD1、VEGF表达的相互关系

[目的]CyclinD1为肿瘤发生的早期分子事件,而VEGF促进肿瘤的浸润转移而影响预后.本实验通过检测非小细胞肺癌中CyclinDl与VEGF的表达,了解两者的相互关系及CyclinD1能否影响非小细胞肺癌的生物学行为及其可能机制.[方法]用免疫组化方法测定55例非小细胞肺癌病理组织切片中CyclinD1与VEGF的表达阳性率;转移组与非转移组中两者的表达阳性率;CyclinD1表达阳性组中VEGF的阳性率;VEGF表达阳性组中CyclinD1的阳性率.[结果]55例非小细胞肺癌病理组织切片中,CyclinD1与VEGF的表达阳性率分别是62%和75%;在转移组中两者的阳性率分别是77%和88%;在CyclinD1阳性组中VEGF的表达阳性率是94%;在VEGF阳性组中CyclirD1的表达阳性率是79%.[结论]在非小细胞肺癌中,CyclinD1与VEGF的表达率高且均与肿瘤的浸润转移有关,两者有正相关,呈同向趋势.表明CyclinD1可能通过VEGF的机制来影响肿瘤的生物学行为从而影响预后.     

Wnt信号通路在非小细胞肺癌中的研究进展

Wnt信号通路是一条非常保守的信号转导途径,在许多生理过程中发挥了重要作用。Wnt信号通路与细胞的生长、分化、迁移及凋亡等诸多过程相关。由于该通路的异常活化与非小细胞肺癌(NSCLC)的发生、发展密切相关,因此揭示该通路的分子生物学机制与基因表达调节规律有重要意义。该文就Wnt信号通路与NSCLC研究近况予以综述。     

CyclinD1、p27在非小细胞肺癌中的表达及与临床病理特征、术后复发的关系

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p27蛋白的表达,探讨其与临床病理特征、术后复发的关系。方法回顾性分析125例NSCLC患者的临床资料。125例患者均手术切除,术后以免疫组织化学SP法检测癌组织与癌旁组织CyclinD1、p27蛋白的表达;比较不同临床病理特征患者癌组织CyclinD1、p27蛋白的阳性表达率;随访并统计复发率,对比复发者和未复发者癌组织CyclinD1、p27蛋白表达;采用Cox逐步回归分析探讨癌组织CyclinD1、p27蛋白表达与术后复发的关系。结果癌组织CyclinD1蛋白阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05),p27蛋白阳性表达率低于癌旁组织(P<0.05);Ⅲa期、低分化患者癌组织CyclinD1蛋白阳性表达率高于Ⅰ、Ⅱ期,中高分化患者,p27蛋白阳性表达率低于Ⅰ、Ⅱ期、中高分化患者(P<0.05);术后复发率为63.20%,复发患者癌组织CyclinD1蛋白阳性表达率高于未复发患者(P<0.05),p27蛋白阳性表达率低于未复发患者(P<0.05);复发NSCLC患者临床Ⅲa期...     

CyclinD1 MDR1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的　探讨非小细胞肺癌 (NSCLC)中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)及多药耐药基因 (MDR1)的表达及临床意义。方法　用鼠抗人CyclinD1及鼠抗人MDR1单克隆抗体对 40例石蜡包埋的原发性NSCLC组织进行免疫组化染色 ,并与 10例肺良性病变比较。结果　CyclinD1及MDR1在NSCLC中均有较高的表达 ,其阳性率分别为 67 5 %和 47 5 % ;而在肺良性病变中 ,CyclinD1无 1例表达 ,而MDR1有 1例表达 ,阳性率为 10 % ;在NSCLC中 ,CyclinD1表达与肿块大小、有无淋巴结转移、分化程度及临床分期无关 (P >0 0 5 ) ;而MDR1表达则在肿块≥ 3cm高于肿块 <3cm(P <0 0 5 ) ;有淋巴结转移高于无淋巴结转移 (P <0 0 5 )。结论　CyclinD1的过表达与肺癌的发生有关 ,是NSCLC的早期分子事件之一 ,而与NSCLC的发展和预后无关 ,可作为NSCLC早期诊断的指标之一。MDR1的过表达与NSCLC的发展与预后有关 ,可作为NSCLC预后的指标之一 ,同时 ,有利于进行NSCLC耐药的监测与评价。     

非小细胞肺癌中Bax和Cyclin D1的表达及意义

目的探讨促凋亡基因Bax和促增殖基因Cyclin D1在非小细胞肺癌中的表达及意义.方法用鼠抗人Bax及鼠抗人Cyclin D1单克隆抗体对40例石蜡包埋的原发性非小细胞肺癌(NSCLC)组织进行免疫组化染色,并与10例肺良性病变作对照,对它们的表达情况进行检测分析.结果 Bax蛋白在良性病变和恶性病变中表达无明显差异性,而在恶性肿块≥3cm者高于肿块＜3cm者,有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者,Ⅲ～Ⅳ期者高于Ⅰ～Ⅱ期者,中～高分化高于低～中分化(P＜0.05).而Cyclin D1表达则是恶性病变高于良性病变(P＜0.05),与P-TNM分期及分化程度无关.结论 Bax在非小细胞肺癌发生的早期低表达,而在后期高表达,说明Bax在早期的抑制诱癌形成,晚期则加速癌细胞凋亡,参与机体的抗癌机制.Cyclin D1的过表达与肺癌的发生有关,是NSCLC的早期分子事件之一,而与NSCLC的发展和预后可能无关.     

下调PD-L1 表达对吉非替尼耐药性非小细胞肺癌细胞的影响

目的：研究下调程序性细胞死亡配体1(programmed cell death ligand 1,PD-L1)表达对吉非替尼耐药性（gefitinibresistant,GR）非小细胞肺癌细胞的作用及机制。方法：通过RT-qPCR和Western blot检测各非小细胞肺癌细胞程序性细胞死亡1(programmed cell death 1,PD1)和PD-L1 mRNA和其蛋白表达水平;获得GR细胞H1703/GR,CCK-8检测细胞活性,Western blot检测PD1和PD-L1蛋白表达;转染sh-PD-L1进入H1703/GR细胞,CCK-8检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达;加入PI3K/Akt/mTOR通路激活剂IGF-1,CCK-8检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡。结果：与人永生化肺上皮细胞株16HBE相比,非小细胞肺癌细胞株GLC82、A549、PC9、SK-MES-1、H1703、L78、H460、H661中PD1和PD-L1 mRNA及蛋白表达均上调（P<0.05、P<0....     

MMP-9及TIMP-1在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 检测非小细胞肺癌(NSCLC)中基质金属蛋白酶9(MMP-9)及金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)的表达情况,探讨MMP9及TIMP-1的表达水平与非小细胞肺癌的组织学分型,细胞分级,淋巴结转移,临床病理分期的关系及临床意义.方法 采用免疫组织化学SP法对非小细胞肺癌患者,随机选取肿瘤原发灶蜡块保存良好及随访资料完整的病例43例及15例正常肺组织切片进行免疫组织化学染色,监测MMP-9及TIMP-1的表达水平,并分析非小细胞肺癌中MMMP-9及TIMP-1的表达水平与非小细胞肺癌的组织学分型,细胞分级,淋巴结转移,临床病理分期及患者预后的关系.结果 MMP-9和TIMP-1在正常肺组织中均有表达,表达部位主要在肺间质,表达强度较弱;MMP-9及TIMP-1在非小细胞肺癌中的表达主要位于癌细胞和癌旁间质细胞,均在胞浆内表达,癌细胞表达较强,问质细胞表达较弱;非小细胞肺癌组织中MMP-9和TIMP-1的阳性表达率均显著高于癌旁正常肺组织(P<0.05).MMP-9和TIMP-1的表达与肿块大小及部位无关(P>0.05);MMP-9在腺癌中的阳性表达率高于鳞癌(P<0.05),TIMP-1在腺癌和鳞癌中的阳性表达率差异无显著性(P>0.05),MMP-9的阳性表达率随组织分化程度的增加而有降低趋势,TIMP-1的阳性表达率随组织分化程度的增加而有增强趋势.MMP-9的阳性表达率随P-TNM分期增高而增加,TIMP-1阳性表达率随P-TNM分期增高而降低;有淋巴结转移者MMP-9和TIMP-1的阳性表达率高于无淋巴结转移者(P<0.05), MMP-9的阳性表达率与患者3年生存期呈负相关(P<0.05),TIMP-9的阳性表达率与患者3年生存期呈正相关(P>0.05).     

9-顺维甲酸对人肺腺癌细胞维甲酸受体转录的影响

目的：观察９－顺维甲酸（９－ｃｉｓ－ＲＡ）处理前后人肺腺癌细胞株ＰＧ和Ａ５４９维甲酸受体（ＲＡＲｓ）及维甲类Ｘ受体　（ＲＸＲｓ）不同时相ｍＲＮＡ转录水平的表达。方法：用ＲＴ－ＰＣＲ相对定量检测人肺腺癌细胞株ＰＧ和Ａ５４９加９－ｃｉｓ－ＲＡ前后ＲＡＲｓ和ＲＸＲｓ　ｍＲＮＡ转录水平。结果：应用９－ｃｉｓ－ＲＡ后，两细胞株的ＲＡＲα和ＲＡＲβ－ｍＲＮＡ转录水平较对照组明显增高，其余受体转录无明显变化。结论：受体ＲＡＲα和ＲＡＲβ可能与９－ｃｉｓ－ＲＡ对两细胞株的生长抑制和诱导凋亡作用有密切关系。     

低氧对非小细胞肺癌细胞PDHA1表达及生物学行为的影响

目的:观察低氧对非小细胞肺癌细胞丙酮酸脱氢酶E1α亚单位(PDHA1)表达及生物学行为的影响。方法:肺鳞状细胞癌细胞株LC-42和肺腺癌细胞株SELS分别在常氧及低氧条件下培养6 d,每天计数细胞,绘制生长曲线,计算细胞倍增时间。两种细胞分别在低氧和常氧条件下培养72 h,采用Transwell侵袭实验测定细胞侵袭能力,采用克隆形成实验观察克隆形成能力,采用Western blot法检测细胞中PDHA1蛋白的表达水平。采用Pearson相关分析低氧条件下两种细胞PDHA1蛋白表达与穿膜细胞数及克隆形成率的相关性。结果:与常氧组相比,低氧组的两种细胞株均出现生长缓慢、细胞倍增时间延长,体外侵袭能力及克隆形成能力增强,PDHA1蛋白表达降低(P<0.05)。LC-42、SELS缺氧组细胞中PDHA1蛋白的表达与穿膜细胞数及克隆形成率均呈负相关(LC-42:r=-0.951、-0.758,SELS:r=-0.803、-0.791,P均<0.05)。结论:低氧导致肺鳞状细胞癌及腺癌细胞PDHA1蛋白表达下降,恶性生物学行为增强。     

CASP1在非小细胞肺癌组织中的表达与生物学意义

目的  探讨含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶caspase-1（CASP1）表达在非小细胞肺癌（NSCLC）发生、发展中的作用。方法  收集华北理工大学附属医院2010～2014年确诊为NSCLC患者的肺癌及癌旁组织25对。采用免疫组织化学染色方法,比较CASP1基因在肺癌和癌旁组织以及不同病理类型及分化程度肺癌组织中的表达差异。使用正常和肿瘤组织表达数据库（GENT）提供的数据,分析CASP1在肺癌组织及正常组织中的表达差异。结果  免疫组织化学结果显示,CASP1在肺癌组织中的表达量（0.021±0.004）低于相应的癌旁组织（0.083±0.008）,差异有统计学意义（t =-8.554,P =0.000）。进一步对GENT数据库进行分析,发现在U133plus2提供的数据中,CASP1在肺正常组织中的表达量为（1137±42.17）,高于其在肺肿瘤组织中的表达量（844±19.35）,差异有统计学意义（Z =-7.037,P =0.000）。同样的结果出现在U113A提供的数据中,CASP1在肺正常组织的表达（467±11.19）高于其在肺肿瘤组织（423±8.44）中的表达,差异有统计学意义（Z =-2.898,P =0.004）。不同分化程度肺癌组织的免疫组织化学结果显示,CASP1的表达水平在高分化（0.027±0.006）、中分化（0.017±0.003）、低分化（0.007±0.002）肺癌组织中的差异有统计学意义（F =6.653,P =0.006）。组间比较显示,CASP1在高分化组织中的表达高于其在低分化肺癌组织中的表达,差异有统计学意义（P =0.001）,但与中分化组织中的表达比较无统计学意义（P =0.056）。笔者未发现CASP1在肺腺癌（0.019±0.003）和鳞癌（0.012±0.004）中表达差异有统计学意义（t =1.382,P =0.180）。结论  CASP1在非小细胞肺癌组织中表达下调,表明其在NSCLC的发生、发展过程中可能发挥重要作用。