带血管蒂肌腱移植修复跟腱缺损的实验研究

目的为带血供肌腱移植修复跟腱缺损提供生物力学和组织学依据.方法选用新西兰大白兔15只,其中12只分两组一侧行带血管蒂趾长屈肌腱转位修复跟腱缺损,对侧为游离肌腱移植对照组,术后12周取材,分别行组织学检查和生物力学测试.结果带血管蒂肌腱组移植跟腱组织学形态近似正常跟腱,肌腱最大拉伸力为正常跟腱的67.7%,而游离肌腱组移植跟腱的腱纤维为瘢痕包裹,最大拉伸力为跟腱的35.3%,两者的差异性非常显著(P＜0.01).结论带血管蒂肌腱移植修复跟腱缺损优于游离肌腱移植.     

rhBMP-2增强腱骨界面愈合的生物力学研究

目的:探讨rhBMP-2增强移植腱骨隧道界面愈合能力。方法:取成年新西兰兔同侧半腱肌肌腱作为自体移植材料,建立70只新西兰兔双侧前交叉韧带重建动物模型。实验组在移植腱-骨隧道界面注射填充以纤维蛋白胶作为载体的rhBMP-2,对照组仅填充纤维蛋白胶,完全空白对照组则不作任何填充。分别于术后第2、4和8周取材,进行生物力学检测。结果:实验组最大载荷在2、4、8周较对照组分别增强13.53%、82.13%、93.23%。实验组刚度在4、8周较对照组分别增强71.91%、121.99%,差异在统计学上显著(P<0.05)。结论:rhBMP-2可以在术后早期提高腱骨界面的最大载荷和刚度,增强了腱骨界面的结合力,促进腱骨界面愈合。     

带血管蒂肌腿移植修复跟腱缺损的实验研究

目的：为带血供肌腱移植修复跟腿,缺损提供生物力学和组织学依据。方法：选用新西兰大白兔15只,其中12只分两组：一侧行带因管蒂趾长屈肌腱转位修复跟腿缺损,对侧为游离肌腿移植对照组,术后12周取材,分别行组织学检查和生物力学测试。结果：带血管蒂肌腿组移植跟腿组织学形态近似正常跟腿,肌腿最大拉伸力为正常跟腿的67．7％,而游离肌腿组移植跟腿的腱纤维为瘢痕包裹,最大拉伸力为跟腿的35．3％,两者的差异性非常显著（P＜0．01）,结论：带血管蒂肌腿移植修复跟腿缺损优于游离肌腿移植。     

玻璃化法保存同种异体肌腱移植材料的可行性

背景：处理同种异体肌腱最主要目的是减少免疫原性和保持肌腱结构与活性。现在临床上常用的低温冷冻法操作复杂、费时,所保存的肌腱活性较低。 目的：以玻璃化法保存鸡屈趾深肌腱,探索其作为肌腱移植材料的可行性。 方法：将成年来亨鸡跖趾关节远侧屈趾深肌腱切断,以数字表法随机分为2组,分别移植同种异体玻璃化肌腱与自体肌腱。术后2,4,8,12,16周观察移植肌腱在形态结构、羟脯氨酸含量和力学性能等方面的变化。 结果与结论：玻璃化肌腱移植组早期存在轻度的免疫排斥反应,但不影响肌腱愈合与重建。两组肌腱周围产生中度粘连,移植后肌腱中段的羟脯氨酸含量先减少,8周后逐渐增高,而吻合口部羟脯氨酸含量随时间逐渐增高,两组间羟脯氨酸含量差异无显著性意义。在8周内玻璃化肌腱移植组吻合口部的破裂强度与弹性模量低于自体肌腱移植组(P < 0.05),12周后差别无显著性意义。两组肌腱中段部生物力学性能差异无显著性意义。说明玻璃化保存的同种异体肌腱生物活性好、免疫原性低,是良好的肌腱移植材料。     

构建趾深屈肌腱横断模型:移植腱周膜预防肌腱粘连

背景:肌腱修复术后肌腱与周围组织的粘连问题一直是临床工作中难以解决的问题之一。目的:构建雌性来亨鸡制备双爪第3趾趾深屈肌腱横断模型,研究腱周膜移植对预防肌腱术后粘连的作用。方法:造模成功后,左爪第3趾为实验组1,肌腱切断后缝合,取鸡同侧第4趾趾深屈肌腱腱周膜包绕实验组1肌腱吻合端,左爪第4趾为实验组2直接缝合皮肤。右爪第3趾为对照组1,肌腱切断后缝合,不修复腱周膜;右爪第4趾手术不损伤腱周膜为对照组2,肌腱进行大体观察和组织学观察。结果与结论:术后28 d,来亨鸡肌腱大体观察及组织学观察采用Kruskal-WallisH和Nemenyi检验两两比较,实验组1术后效果优于对照组1(P0.05),但较对照组2及实验组2略差(P0.05);实验组2术后效果优于对照组1组(P0.05),与对照组2比较,差异不显著(P0.05)。屈趾功能采用LSD-t检验两两比较,实验组1术后效果优于对照组1(P0.05),但较对照组2及实验组2略差(P0.05),实验组2术后效果优于对照组1(P0.05),与对照组2比较,差异不显著(P0.05)。结果提示,腱周膜移植可以有效预防术后肌腱粘连,切取腱周膜对正常肌腱滑动影响不大。     

自体浓缩骨髓移植促进腱骨愈合

背景：前交叉韧带断裂后应用自体腘绳肌腱移植进行重建应用较多,腱-骨愈合的时间较长,限制了患者交叉韧带重建后早期的功能活动。 目的：用浓缩自体骨髓植于前交叉韧带重建腱-骨界面,观察其界面愈合情况。 方法：32只新西兰大白兔行双侧膝关节半腱肌肌腱前交叉韧带重建,随机选取一侧膝关节作为实验组,胫骨侧腱骨界面植入自体浓缩骨髓,对侧不植入作为对照组。 结果与结论：组织学显示,前交叉韧带重建后2周对照组移植肌腱与骨隧道的界面由肉芽组织填充,连接组织松散,有成骨活动;实验组移植肌腱与骨隧道界面肉芽组织连接亦不紧密,骨隧道侧成骨活动较活跃。前交叉韧带重建后12周对照组腱骨结合部组织界面变模糊,可见胶原纤维-纤维软骨-钙化的软骨组织-骨组织的移行带改变;实验组显示明显的胶原纤维-纤维软骨-钙化的软骨组织-骨组织的移行带改变,潮线清晰。前交叉韧带重建后4,8,12周,实验组最大抗拉脱强度数值显著大于对照组(P < 0.05)。提示自体浓缩骨髓可以增强腱骨界面的抗拉伸强度,有利于腱-骨界的组织愈合。     

SOX9、结缔组织生长因子促进腱骨结合处愈合的生物力学研究

目的:观察SRY相关高迁移组box基因9(SOX9)及结缔组织生长因子(CTGF)在促进腱骨结合处愈合的生物力学作用。方法:36只成年新西兰大白兔随机分为A、B、C共3组,每组12只。其中A组为SOX9组:使用SOX9注射腱骨结点处;B组为CTGF组:使用CTGF注射腱骨结点处;C组为单纯对照组。三组动物均行动物试验并分别于术后4周、8周及12周行生物力学测定,统计学分析结果。结果:术后4周、12周,A、B组的横截面积均低于C组,组间对比有统计学差异(P<0.05)。术后4周、8周、12周,A、B组的拉断负荷及极限拉应力均高于C组,组间对比有统计学差异(P<0.05)。结论:SOX9以及CTGF组能够促进腱骨结合处的早期愈合,并能够增加其生物力学强度。     

带血管蒂髌腱移植物的力学性能

背景：临床上研究膝关节交叉韧带生物材料的力学性能具有重要意义,可为临床研制组织结构、生物力学及相容性好的材料提供理论依据。目的：分析带血管蒂髌腱移植物的力学性能。方法：切断42只新西兰大白兔左前腿前交叉韧带,随机分为2组,实验组植入自体带血管蒂髌腱移植物进行前交叉韧带修复,对照组植入自体不带血管蒂髌腱移植物进行前交叉韧带修复。移植后8,12,16周,检测两组移植标本的生物力学性能。结果与结论：两组不同时间点的断裂位置比较差异无显著性意义;实验组移植后12,16周的膝关节前后松弛度高于对照组(P < 0.05),两组移植后8周的膝关节前后松弛度比较差异无显著性意义;实验组移植后8,12,16周的最大载荷均高于对照组(P < 0.05),移植后8,12,16周的刚度均高于对照组(P < 0.05);两组移植后不同时间点的最大拉伸长度比较差异无显著性意义。表明带血管蒂髌腱移植物具有良好的力学性能。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

关节滑液对兔前交叉韧带重建后腱骨愈合生物力学和组织学的影响*

背景：目前前交叉韧带重建后关节滑液对移植物强度以及腱骨愈合的影响尚无定论。 目的：观察兔前交叉韧带重建后腱骨愈合过程中,关节滑液对移植肌腱生物力学及组织学的影响。 方法：取新西兰大白兔下肢半腱肌腱,以同侧肢体半腱肌腱重建前交叉韧带模拟关节滑液影响模型,并同时取对侧肢体半腱肌行股骨髁上“U”形肌腱埋植避免关节滑液的影响。重建4周,取股骨-韧带-胫骨复合体,行生物力学测定和组织学观察。 结果与结论：重建后4周,生物力学测定时发现“U”字形埋植肌腱断裂时平均载荷明显大于前交叉韧带重建后处于关节内的肌腱(P < 0.01)。组织学观察发现,骨隧道内坏死的腱组织已被纤维组织、新生骨组织替代,腱骨交界面形成Sharpey纤维连接和纤维软骨,优于关节内肌腱;“U”字形埋植肌腱腱骨交界面成骨细胞数目明显多于前交叉韧带重建肌腱(P < 0.01)。结果证实“U”字形埋植肌腱的生物力学及腱骨愈合均优于处于关节内肌腱,提示关节滑液对前交叉韧带重建后韧带的强度以及腱骨愈合有不利影响。     

不同方法制备移植修复材料对异体肌腱生物学性能的影响

背景:移植的肌腱必须具有良好的生物力学性能,才能有效避免缝合时肌腱吻合端的撕裂,减轻肌腱愈合过程中粘连程度。目的:探讨移植修复材料不同制备方法对异体肌腱生物学性能的影响。方法:将48只健康雄性来亨鸡依据随机数字表法分为均分为3组,切取3组鸡一侧第三趾屈趾浅深肌腱,玻璃化组、化学萃取组分别采用玻璃化法与化学萃取法处理肌腱,空白对照组肌腱不做任何处理。取3组一部分肌腱进行生物力学检测;另一部分进行异体移植,移植1,2,3,6周检测外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞数。结果与结论:玻璃化法可保留部分原有肌腱细胞,化学萃取法不能。3组肌腱拉伸断裂强度、拉伸断裂功耗及拉伸断裂延伸率比较差异无显著性意义(P0.05)。移植后1,2周末,3组间CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比较差异有显著性意义(P0.05);移植后3,6周末,玻璃化组、化学萃取组CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均明显少于空白对照组(P0.05),玻璃化组和化学萃取组间CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比较差异无显著性意义(P0.05)。表明采用玻璃化法和化学萃取法在有效保留肌腱生物力学性能的基础上,可显著降低肌腱的免疫原性。     

冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植后止点转归研究

目的：比较自体骨-前交叉韧带(ACL)-骨移植和冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植重建ACL后，韧带止点的组织学和生物力学转归。方法：将日本大耳兔和新斯兰兔各60只随机分成自体骨-ACL-骨移植组和二步令冻保存同种异体骨-ACL-骨移植组。术中及术后均不使用免疫抑制剂。术后4、8、12周分别切取ACL作大体、俎织学观察和生物力学测试。结果：自体骨-ACL-骨移植组和冷冻保存骨-ACL-骨移植组在4周时止点处组织学上已有纤维组织与骨相连，但未见“潮线”形成，而在12周时两组均有潮线形成；4周拉伸时，止点处断裂分别为60％、66．7％，而8周分别为13．3％、13．3％，12周时则分别为6．7％、6．7％。结论：两组在止点处有相似的生物力学性能和组织学愈合过程。     

间α胰蛋白酶抑制剂水平反映肾移植慢性排斥反应

背景：目前,肾移植病理学检查仍为移植肾慢性排斥反应的“金标准”,但肾移植程序性活检在中国尚难以普及,且存在一定的风险;由于诸多原因,使患者慢性排斥反应早期因未及时发现而错失治疗时机。 目的：观察肾移植慢性排斥反应大鼠血浆中间α胰蛋白酶抑制剂的水平。 方法：实验以正常雄性Wistar大鼠为供体,正常雄性SD大鼠为受体进行肾移植。移植后分为慢性排斥反应组和正常肾移植组。慢性排斥反应组受体于移植前3 d起,每日给予腹腔注射环孢素A微乳化剂2 mg/kg,正常肾移植组则每日给予环孢素A微乳化剂腹腔注射5 mg/kg。 结果与结论：移植后4,6,8,10,12周,Western blot检测结果显示,与移植前1周相比,正常肾移植组和慢性排斥反应组间α胰蛋白酶抑制剂蛋白表达量明显降低(P < 0.01)。移植后第4,6周,慢性排斥反应组间α胰蛋白酶抑制剂蛋白表达高于正常肾移植组(P < 0.01),而在8,10,12周低于正常肾移植组(P < 0.01)。慢性排斥反应组血浆间α胰蛋白酶抑制剂呈时间依赖性下降(P < 0.01)。结果证实,大鼠肾移植后出现慢性排斥反应时,血浆α胰蛋白酶抑制剂水平显著下调。间α胰蛋白酶抑制剂水平变化与肾移植慢性排斥反应关系密切,可为肾移植后慢性排异反应的预测提供参考依据。     

小腿有关肌腱转位修复跟腱的生物力学评价

目的：为临床选用自体肌腱转位修复跟腱提供生物力学依据。方法：选用防腐固定成年和新鲜青年下肢各７例。制备拉伸试件，在ＳＷＤ－１０型材料试验机上，进行单向拉伸破坏实验。结果：跟腱、腓骨长肌腱、腓骨短肌腱、胫骨后肌腱及展肌腱固定组分别为２２９２．６Ｎ、１０２０．５Ｎ、７５２．０Ｎ、９３８．９Ｎ和７２１．３Ｎ，新鲜组分别为１９２７．１Ｎ、８１９．５Ｎ、３４６．７Ｎ、６９９．７Ｎ、３０３．８Ｎ。结论：腓骨长肌腱是跟腱缺损修复术较理想的自体材料。     

雷公藤多甙对大鼠肾移植慢性排斥移植肾组织病理学的影响

背景：雷公藤多甙所具有的多种免疫调节作用,是否可于肾移植慢性排斥,缺乏严密的动物实验研究和多中心、大样本临床试验研究证据的支持。 目的：观察雷公藤多甙对大鼠肾移植慢性排斥的作用。 方法：选用SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体,制作SD-Wistar大鼠肾移植慢性排斥模型,完整保留受体右肾作为每个移植肾的内对照。所有受体均于移植后10 d内接受小剂量环孢素抑制急性排斥反应。移植成功受体随机分成治疗组与对照组,治疗组自移植后10 d 起每日经胃灌服雷公藤多甙,对照组给予相同容量的生理盐水,连续灌服至移植后12周。移植后12周收获动物,取受体移植肾组织送检组织病理学,并用免疫组织化学染色法检测移植肾转化生长因子β1的表达。 结果与结论：移植后12 周,两组受体移植肾均存活,体积较正常右肾略小,色泽较苍白,出现不同程度的单个核细胞浸润、肾小球硬化、肾小管萎缩、间质纤维化和小动脉内膜纤维性增厚等慢性排斥组织病理学改变。治疗组大鼠移植肾组织的病理改变明显轻于对照组(P < 0.01)。两组所有受体自身右肾均未出现任何组织病理学改变。转化生长因子β1主要在治疗组和对照组的肾小管、间质表达,治疗组肾组织的转化生长因子β1表达明显低于对照组(P < 0.01)。提示,雷公藤多甙能够减轻大鼠移植肾慢性排斥模型移植肾组织病理学损害,下调移植肾组织转化生长因子β1的表达可能是其作用机制之一。     

碳化二亚胺交联改性脱细胞异种猪肌腱修复跟腱缺损

背景：异体肌腱移植是目前修复肌腱缺损的理想方法,但移植后的排斥反应使其使用受到限制。 目的：观察碳化二亚胺交联改性脱细胞处理的版纳近交系微型猪肌腱移植修复兔跟腱缺损的效果。 方法：横向切除40只日本大白兔双侧跟腱,随机分组：实验组以碳化二亚胺交联改性脱细胞版纳近交系微型猪肌腱移植修复,对照组以自体肌腱移植修复。 结果与结论：①组织学观察：两组新生组织内细胞主要都是单核的成纤维细胞和纤维细胞,术后1-4周主要是呈椭圆形或圆形的成纤维细胞,细胞聚集区的细胞周围有新生胶原形成,这些胶原的走向较紊乱;局灶性条索状成熟胶原呈岛状分布,形成所谓“胶原岛”;术后12周时细胞越来越拉长,成为梭形和长条形的纤维细胞。②实验室检测：两组白细胞、C-反应蛋白水平、羟脯氨酸含量及抗拉强度差异均无显著性意义。说明碳化二亚胺交联改性的脱细胞版纳近交系微型猪肌腱能成功修复兔跟腱缺损,且具有组织相容性好、移植排斥反应轻、生物力学性能强的优点。     

硫酸钙促进ACL重建后腱-骨愈合的实验研究*

目的研究外科级硫酸钙促进腱-骨愈合的效应。方法实验采用比格犬33只建立动物模型,分别在实验侧采用注射型硫酸钙。在双侧后肢切取趾长屈肌腱进行前交叉韧带（ACL）重建。重建模拟临床方式：肌腱两端采用悬吊式固定,肌腱只充填骨隧道靠近关节腔的一部分。在实验侧,重建术后隧道内间隙充填硫酸钙;对侧不作类似处理,作为对照。术后2、4、6、8、10、12周,各取3只犬行组织学检查,了解腱-骨界面的组织学变化;术后2、4、6周各取5只作生物力学检查,测试腱-骨愈合强度;通过对比了解实验侧硫酸钙对腱-骨愈合的效应。结果实验侧组织学观察术后4周在腱-骨界面形成许多骨岛,出现不规排列的sharpey’s纤维;8周时腱-骨间sharpey’s纤维集结成束;12周时腱-骨间肌腱与骨出现密集的纤维连接。对照组4周腱骨间隙存在间隙;8周时腱-骨间隙才出现稀疏的sharpey’s纤维;12周时腱-骨界面出现的密集分布sharpey’s纤维。生物力学测试对比,实验侧和对照侧在术后6周内,有明显差异（0.05）。结论硫酸钙可以早期促进腱-骨界面的愈合。     

外源性碱性成纤维细胞生长因子促膜引导性骨再生的实验研究

本实验旨在评估碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对于膜引导性骨再生 (MGBR)的作用。取 4 0只成年新西兰大白兔 ,以聚 DL 乳酸膜建立经典的兔桡骨缺损膜引导性骨再生模型 ,实验侧膜管内加入游离bFGF4 0 μg/10 0 μl,对照侧膜管内加入 10 0 μl的生理盐水。术后 2、4、8、12周分别处死动物 ,行大体观察、X线摄片、组织学观察和图像分析以及骨生物力学检测。术后 2周 ,可见隔膜两端的软组织已覆盖隔膜管 ,使其形成完全密闭的腔室 ,术后 12周PDLLA膜管仍保持完整的外形。组织学显示 :术后 2周 ,bFGF组两骨断端均有较多的新生骨小梁形成 ,术后 12周 ,bFGF组缺损完全愈合 ,开始重塑改建。术后 2周、4周 ,bFGF组膜管内新生骨小梁平均面积、直径均与空白对照组比较明显增加 (P <0 .0 5 ) ,术后 8周和 12周 ,两组膜管内骨小梁平均面积、直径差异无显著性 (P >0 0 5 )。 12周时除了破坏挠度值 ,bFGF组新生骨生物力学指标优于对照组 (P <0 .0 5 )。因此 ,作者认为外源性bFGF能够促进MGBR及其生物力学性能的恢复。     

骨髓间充质干细胞移植急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠星形胶质细胞及髓鞘的变化

背景：国内有关一氧化碳中毒迟发性脑病治疗的报道,多采用药物治疗和高压氧治疗,但存在治疗疗程长,见效慢,花费较高等问题。 目的：首次观察骨髓间充质干细胞移植治疗一氧化碳中毒迟发性脑病前后星形胶质细胞及神经髓鞘的变化。 方法：以随机抽签方法将SD大鼠分为3组：对照组、假手术组及干细胞移植组。采用腹腔注入一氧化碳方法制作一氧化碳中毒迟发性脑病模型,干细胞移植组在注射后第0,3,6,12,24,72小时及1周时将同种异体骨髓间充质干细胞经左侧颈动脉植入到大鼠脑内;假手术组扎闭颈外动脉,用PBS代替细胞悬液;对照组不进行细胞移植。移植后1,2,3,4周采用免疫组织化学的方法检测胶质纤维酸性蛋白和固绿-FCF染色法观察髓鞘着色情况。 结果与结论：造模后6,12,24 h干细胞移植组大鼠脑内胶质纤维酸性蛋白表达明显高于对照组及假手术组(P < 0.05),干细胞移植组移植后1~4周大鼠脑内胶质纤维酸性蛋白表达差异无显著性意义(P > 0.05)。造模后6,12,24 h干细胞移植组大鼠脑内髓鞘平均吸光度明显高于对照组及假手术组(P< 0.05),且细胞移植后第2周明显高于第1,3,4周(P < 0.05)。 提示经左侧颈动脉在一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠体内移植骨髓间充质干细胞可以增加星形胶质细胞反应性,促进髓鞘再生,移植的最佳时机为发病后6~24 h,细胞移植后的积极作用在一两周最明显。