1型多聚二磷酸腺苷核糖合成酶对去甲肾上腺素诱导心脏成纤维细胞表达基质金属蛋白酶的影响

目的:探讨1型多聚二磷酸腺苷核糖合成酶(PARP-1)对去甲肾上腺素(NE)诱导培养的大鼠心脏成纤维细胞基质金属蛋白酶(MMP)-1,MMP-9及金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1表达的调节作用及其机制。方法:①培养乳鼠心脏成纤维细胞,10μmol/LNE刺激细胞24h,使用实时定量PCR法检测MMP-1、MMP-9及TIMP-1的基因表达水平;使用PARP抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-aminobenzamide,3AB)后,观察PARP-1对上述基因表达的影响。②检测心脏成纤维细胞内活性氧(ROS)水平、PARP酶活性的变化。③采用凝胶阻滞实验检测心脏成纤维细胞内转录因子AP-1的DNA结合能力,研究PARP-1对AP-1DNA结合能力的影响。结果:NE诱导心脏成纤维细胞内MMP-1,MMP-9及TIMP-1的基因表达水平明显增加。细胞内ROS产生增加,PARP酶被激活。核内转录因子AP-1的DNA结合能力明显增强。PARP抑制剂3AB可明显减少NE诱导的MMP-1、MMP-9及TIMP-1的基因表达水平,同时显著抑制AP-1的DNA结合能力。使用抗氧化剂vitC减少ROS产生,抑制了NE诱导的PARP-1活性增加及AP-1的DNA结合,进而显著降低了NE诱导的MMP-1、MMP-9及TIMP-1的基因表达水平。结论:NE刺激心脏成纤维细胞内ROS产生明显增多,大量的ROS激活了PARP使其酶活性显著增高,PARP通过调节转录因子AP-1的DNA结合调控了MMP-1,MMP-9及TIMP-1的基因表达。PARP可能是心脏纤维化过程中的重要调节机制之一。     

db/db小鼠胰腺中基质金属蛋白酶-2、-9及其抑制因子-1的表达及意义

目的 观测基质金属蛋白酶(MMP)中的MMP-2、MMP-9及其抑制因子(TIMP-1)在db/db自发性2型糖尿病(T2DM)小鼠胰腺中的表达情况及意义.方法 用免疫组织化学方法观察db/db小鼠胰腺中MMP-2、MMP-9、TIMP-1在小鼠胰腺的表达水平.结果 MMP-2、MMP-9阳性反应产物主要位于胰岛细胞胞浆内,随着月龄的增加糖尿病和正常组的表达均增强. 糖尿病组间比较,有显著性差异(P<0.05). 正常组间比较,无显著性差异(P>0.05).同月龄糖尿病组的表达明显高于正常组,有显著性差异(P<0.05).TIMP-1阳性反应产物位于胰岛细胞胞浆内,糖尿病组与正常组随着月龄的增加,表达均减弱,糖尿组间无显著性差异(P>0.05).正常组间比较,无显著性差异(P>0.05).同月龄糖尿病组与正常组间比较,糖尿病组的表达明显低于正常组,有显著性差异(P<0.05).结论 2型糖尿病的发生可能与MMPs/TIMP-1s系统的调控失衡密切相关.     

EMMPRIN/CD147对类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞合成基质金属蛋白酶的刺激作用

目的 观察细胞外基质金属蛋白酶诱导剂（EMMPRIN／CD147）对类风湿关节炎（RA）患者滑膜成纤维细胞（FLS）合成基质金属蛋白酶（MMPs）的作用。方法 手术切除的RA患者的滑膜组织，分离成FLS，传代培养。明胶酶谱法测FLS的MMPs含量将FLS与高表达EMMPRIN／CD147的单核细胞株（THP）-1共培养，观察THP-1细胞对FLS MMPs表达量的影响，同时观察EMMPRIN／CD147拮抗肽激活蛋白（AP）-9对FLS MMPs表达的影响。结果 THP-1细胞表达高水平的CD147，而MMP-2、MMP-9的表达水平很低；分离的FLS表达低水平的CD147和一定水平的MMP-2、MMP-9。二者混合培养后，FLS表达MMP-2、MMP-9水平显著升高，随着THP-1细胞数的增加，MMP-2、MMP-9的合成量也增加THP-1对FLS合成MMP-2、MMP-9的刺激作用可被CD147拮抗肽AP-9所抑制。结论 CD147对RA患者FLS合成MMP-2、MMP-9有刺激作用，而这种刺激作用呵被CD147拮抗肽AP-9所抑制。     

2型糖尿病大鼠心肌组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1的表达与胶原代谢的关系

目的 了解2型糖尿病（T2DM）大鼠模型心肌组织基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）及其组织抑制物1（TIMP-1）的mRNA表达变化、蛋白水平及组织定位，探讨MMPs／TIMPs在T2DM心肌病变发生发展中的作用。方法 Masson染色观察心肌胶原含量变化；RT-PCR方法观察心肌MMP-、MMP-9和TIMP-1mRNA表达；免疫组化方法测定MMP-2、MMP-9、TIMP-1的蛋白表达和组织定位。结果 T2DM大鼠心肌胶原纤维明显增多；MMP-2mRNA表达明显下调，蛋白水平下降；MMP-9、TIMP-1的mRNA表达均增加，MMP-9、TIMP-1的蛋白水平也升高，但MMP-9／TIMP-1的比值下降。结论 T2DM大鼠心肌组织胶原聚集，心肌纤维化。MMPs／TIMP-1比例失衡可能与T2DM心肌病变的发生有关。     

益心方对血管再狭窄小鼠基质金属蛋白酶与组织型基质金属蛋白酶抑制因子表达的影响

目的 探讨再狭窄血管中基质金属蛋白酶(MMPs)与组织型基质金属蛋白酶抑制因子(TIMPs)的表达及益心方对其的影响.方法 制备大鼠血管再狭窄模型,采用不同浓度的益心方药物浓度干预,观察颈总动脉形态学改变,免疫组化法检测颈总动脉MMPs与TIMPs的表达.结果 假手术组血管内膜和中膜处均可见少量散在分布的MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的阳性染色表达颗粒,以MMP-2表达最为明显;与假手术组比较,球囊导管内皮剥脱术后,模型组血管中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表达均显著增加(P<0.05或P<0.01),主要在新生内膜中表达,胞浆和基质内出现大量特异性的阳性颗粒;与模型组比较,益心方治疗低、高剂量组能明显抑制血管壁MMP-2、MMP-9的表达(P<0.05或P<0.01),其特异性的阳性颗粒与模型组相比显著减少,对TIMP-1和TIMP-2的表达也有减少的趋势.结论 益心方抑制血管再狭窄,其机制与抑制血管平滑肌细胞MMPs与TIMPs表达有关.     

MMP-2、MMP-9在子宫肌瘤组织中的表达及意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9在子宫肌瘤组织中的表达及意义.方法 收集30例子宫肌瘤患者的术后子宫肌瘤组织及其周围的正常子宫组织标本,分别应用明胶酶谱法、Western blot技术和PTPCR法检测标本中的MMP-2、MMP-9蛋白及其mRNA表达,并比较各检测指标在两种组织中的变化.结果 在子宫肌瘤组织中MMP-2蛋白及其mRNA表达量均明显高于正常子宫组织(P均＜0.05),而在两种组织中MMP-9蛋白及其mRNA表达量比较均无统计学差异(P均＞0.05).结论 MMP-2蛋白在子宫肌瘤组织中呈高表达,参与了子宫肌瘤的发生和发展.     

组织金属蛋白酶抑制物在老年大鼠肾小管间质病理损害中的动态变化

目的研究组织金属蛋白酶抑制物(TIMPs)及基质金属蛋白酶(MMPs)在不同鼠龄单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管间质中的表达变化,探讨其在老年大鼠肾小管间质损害中的作用. 方法选用3月龄(青年)、26月龄(老年)大鼠制备UUO模型,采用病理及免疫组化等方法动态观察不同年龄大鼠UUO术后3、7、14d梗阻侧肾脏的组织学变化和TIMP-1、TIMP-2 、MMP-2、MMP-9等在梗阻肾小管间质中的表达情况. 结果 TIMP-1、TIMP-2及MMP-2、MMP-9主要表达于肾小管上皮细胞和间质细胞.在对照组中,TIMP-1、TIMP-2仅微弱表达于青年鼠肾脏中,而在老年大鼠肾脏中其表达显著增加(TIMP-1 0.84±0.23 vs 2.17±0.85,P<0.01; TIMP-2 0.93±0.12 vs 2.31±0.87,P<0.01),MMP-2、MMP-9在正常青年鼠与老年鼠肾脏中均有表达,二者之间差异无显著性(P＞0.05).与对照组相比,3、26月龄大鼠梗阻侧肾脏的TIMP-1、TIMP-2及MMP-2、MMP-9在术后各时间点的表达均显著增高(P<0.01),肾小管间质纤维化面积随UUO术后时间的延长而增加,且TIMP-1、TIMP-2的表达与肾小管间质纤维化面积呈正相关(TIMP-1,r=0.816,P<0.01; TIMP-2, r=0.851, P<0.01).与3月龄UUO大鼠比较,26月龄UUO大鼠TIMP-1、TIMP-2在肾小管间质中各时间点的表达均显著增高(P<0.01),肾小管间质纤维化面积在各时间点也明显增加(P<0.01). 结论 TIMPs的高表达所致的MMPs/TIMPs比例失调可能促进老年大鼠肾小管间质损害的进程.     

多聚二磷酸腺苷核糖合成酶抑制剂对血管紧张素Ⅱ诱导心脏成纤维细胞基质金属蛋白酶表达的影响

目的:观察多聚二磷酸腺苷核糖合成酶(PARP)抑制剂对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激的乳鼠心脏成纤维细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)基因转录的影响.方法:新生SD大鼠心脏成纤维细胞原代培养,传代.用PARP抑制剂--3-氨基苯甲酰胺(3-AB)预处理细胞,观察3-AB对AngⅡ诱导心脏成纤维细胞MMP-2、MMP-9及TIMP-1基因表达的影响.结果:AngⅡ刺激心脏成纤维细胞MMP-2、MMP-9及TIMP-1基因表达明显增加,成纤维细胞内PARP活性及PARP1的表达显著增强.使用3-AB抑制PARP1的活性及表达,可以明显降低AngⅡ诱导的心脏成纤维细胞MMP-2、MMP-9及TIMP-1基因表达的增加.结论:PARP在AngⅡ诱导的心脏重构过程中发挥了重要的调控作用.     

基质金属蛋白酶、血管内皮生长因子在翼状胬肉中的表达及相关性

目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP)和血管内皮生长因子(VEGF)在翼状胬肉组织发生和进展过程中的表达及相关性.方法 采用免疫组化染色法检测正常结膜、翼状胬肉及翼状胬肉静止期、进展期MMP-1、MMP-9、VEGF的表达.结果 MMP-1、MMP-9、VEGF在翼状胬肉组织中各层均有表达,而在正常结膜组织中几乎不表达.翼状胬肉组织中MMP-1、MMP-9、VEGF的阳性表达均强于正常结膜组织(P均＜0.05);MMP-9、VEGF阳性表达进展期强于静止期(P均＜0.05);翼状胬肉组织中MMP-1与MMP-9 、MMP-1与VEGF、MMP-9与VEGF之间的表达均呈正相关(r分别为0.325、0.389、0.505,P均＜0.05).结论 MMP和VEGF与翼状胬肉的发生和发展有密切关系.     

MMP-2及CD147在宫颈上皮内瘤样病变组织中的表达及意义

采用免疫组化法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)及CD147在37例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)患者手术切除标本(观察组)中的表达水平,并与其在17例正常宫颈组织标本(对照组)中的表达水平进行比较.结果CIN组MMP-2、CD147均呈阳性表达,随级别增加其表达水平增高,均明显高于对照组,P均＜0.05.证实MMP-2、CD147耵在CIN组织中呈高表达,且与级别呈正相关;二者水平可作为判断CIN病情、指导治疗的指标.     

N-terminal pro-B-type natriuretic peptide and matrix metalloproteinases in early and late left ventricular remodeling after acute myocardial infarction

N-terminal pro-B-type natriuretic peptide (NT-pro-BNP) is a predictor of left ventricular remodeling. Matrix metalloproteinases (MMPs) contribute to collagen breakdown that is associated with ventricular remodeling after acute myocardial infarction (AMI). We assessed the association between circulating levels of NT-pro-BNP, MMP-2, and MMP-9 and their inhibitor (tissue inhibitor of metalloproteinase-1) early (24 and 72 hours) and late (7 and 30 days) after AMI in 108 patients who had ST-elevation AMI (90 men; mean age 60 years). Serum MMP-2 levels measured 24 and 72 hours after AMI were inversely associated with NT-pro-BNP levels, whereas MMP-9 serum levels were positively related. During late-stage remodeling after AMI, circulating concentrations of tissue inhibitor of metalloproteinase-1 were independently associated with NT-pro-BNP levels 7 and 30 days after AMI. This study shows that, in patients who have ST-elevation AMI, circulating levels of NT-pro-BNP are associated with MMPs in a species-specific and time-dependent manner.     

急性冠状动脉综合征患者MMP-9、MMP-2的临床意义

目的观察不同冠心病患者的血清的基质金属蛋白酶(MMPs)及其演变,探讨MMPs与急性冠状动脉综合征的关系。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)检测了32例急性心肌梗死(AMI),30例不稳定型心绞痛,20例稳定型心绞痛和16例健康对照者血清MMP-9,MMP-2和组织型基质金属蛋白酶抑制物-2(TIMP-2)水平,并比较上述指标与不同类型冠心病的关系及其演变。结果AMI患者血清MMP-9水平高于不稳定型心绞痛组、稳定型心绞痛组和对照组,分别为(191.91±150.10)ng/ml,(110.84±96.29)ng/ml,(69.30±55.85)ng/ml和(80.13±34.94)ng/ml。MMP-2、TIMP-2四组间比较差异无显著性。MMP-9在AMI患者中发病早期升高后持续到3~5d。MMPs与心肌损伤标志物无相关关系。结论血清MMP-9是预示斑块破裂中的主要MMPs之一,但它不能预测心肌坏死的程度。     

普伐他汀、福辛普利及合用对大鼠心肌梗死后肿瘤坏死因子-α表达及心室重构的影响

目的探讨普伐他汀、福辛普利及合用对大鼠心肌梗死后心室重构、心功能、肿瘤坏死因子α(TNFα)表达、基质金属蛋白酶(MMPs)活性等的影响。方法通过结扎冠状动脉前降支诱导大鼠急性心肌梗死(AMI),AMI后24h存活的48只大鼠随机分为AMI组,福辛普利组(10mg·kg1·d1),普伐他汀组(20mg·kg1·d1),普伐他汀(20mg·kg1·d1)加福辛普利组(10mg·kg1·d1),每组12只。另设假手术组(n=8)。术后24h开始直接灌胃给药,AMI及假手术组大鼠灌等量生理盐水。用药42天后,测定心功能和血流动力学参数,以反转录聚合酶链反应检测心肌TNFαmRNA的表达,酶谱法测定左室心肌MMPs活性,并测定心室重量/体重。结果梗死面积在AMI及各治疗组间差异均无统计学意义。与AMI组比较,福辛普利、普伐他汀、联合用药均使AMI组增加的左室舒张末压、左室舒张末直径、左室相对重量下降(P<0.05～0.01),使下降的左室压最大上升速率和下降速率、左室短轴缩短率、射血分数不同程度增加(P<0.05～0.01)。福辛普利、普伐他汀、联合用药分别使AMI组表达增加的TNFα降低29%、26%、33%(P<0.01);使MMP2活性水平降低25%、30%、35%(P<0.01);使MMP9活性水平降低20%、18%、24%(P<0.01)。联合用药较单用福辛普利或普伐他汀,对射血分数、左室短轴缩短率、左室压最大上     

Role of fibroblast growth factor-2 in the expression of matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases in human intestinal myofibroblasts

BACKGROUND AND AIMS: The coordinated expression of matrix metalloproteinases (MMPs) and tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMPs) plays a crucial role in tissue remodeling. We investigated the effects of fibroblast growth factor (FGF)-2 on the secretion of MMPs and TIMPs in human intestinal subepithelial myofibroblasts (SEMFs). METHODS: The secretion of MMP-s and TIMPs was determined by ELISA or Western blotting. The mRNA expression of MMPs and TIMPs was assessed by Northern blotting. The activating protein (AP)-1-DNA binding activity was evaluated by electrophoretic gel mobility shift assays (EMSA). RESULTS: Unstimulated intestinal SEMFs constitutively secreted MMP-2 and TIMP-2. FGF-2 stimulated MMP-1, MMP-3 and TIMP-1 secretion, but did not affect MMP-2 or TIMP-2 secretion. FGF-2 induced AP-1-DNA binding activity, and the c-Jun/AP-1 inhibitor curcumin attenuated the FGF-2-induced MMP-1, -3 and TIMP-1 mRNA expression. Mitogen-activated protein (MAP) kinase inhibitors (U0126 and PD098059) also blocked the MMP-1, -3 and TIMP-1 secretion. Furthermore, FGF-2 dose-dependently induced FGF-2 mRNA expression in these cells. CONCLUSIONS: FGF-2 may be one of important regulatory factors for extracellular matrix turnover via a modulation of MMP and TIMP secretion from SEMFs.     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对梗死心脏纤连蛋白的调节

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体(AT1,AT2)拮抗剂对梗死心脏心肌基质金属蛋白酶(MMP)及细胞外基质纤连蛋白(fibronectin,FN)的影响。方法结扎大鼠左冠状动脉建立心肌梗死模型,术前7天起分别用安慰剂、AT1受体拮抗剂缬沙坦(10mg.kg-1.d-1)、AT2受体拮抗剂PD123319(30mg.kg-1.d-1)。术后1、3、7天免疫沉淀法分别检测左心室游离壁(LVFW)、室间隔、右室壁心肌组织基质金属蛋白酶MMP-2、3、9及基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)及细胞外基质FN的表达,免疫荧光检测LVFW、室间隔、右心室心肌FN的分布。结果术后7天右心室心肌排列基本正常,室间隔心肌肥厚,LVFW心肌有不同程度的坏死、肥厚及纤维化。术后1、3、7天室间隔MMP-2、3、9蛋白表达呈逐渐增加的趋势,TIMP-1及FN表达逐渐减少,各时相点与基础值相比差异有统计学意义(P<0.01);术后1、3、7天LVFWMMP-2、3、9蛋白表达一直处于高水平,TIMP-1和FN蛋白表达处于低水平,各时相点与基础值比较差异有统计学意义(P<0.01)。FN在右心室心肌组织中表达较多,其次为室间隔和LVFW,MMP-2、3、9表达与FN表达结果相反。室间隔和LVFWMMP表达,手术+缬沙坦组低于手术组和手术+PD123319组(均P<0.01),手术组与手术+PD123319组比较差异无统计学意义。手术+缬沙坦组室间隔及LVFWFN表达高于手术组和手术+PD123319组(P<0.01),手术组与手术+PD123319组比较差异无统计学意义。手术组心肌梗死面积(51.0%±2.8%)高于手术+缬沙坦组(40.4%±2.1%,P<0.05),手术组与手术+PD123319组(49.5%±2.1%)比较,差异无统计学意义。结论血管紧张素Ⅱ受体AT1拮抗剂通过增加MMP-2、3、9的表达而降解心肌细胞外基质FN参与心肌重构的病理过程,进一步恶化心功能。     

L和L/T型钙通道对急性梗死心肌肌腱蛋白的调节

目的:研究L和L/T型钙通道对梗死心肌基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-3、MMP-9)及细胞外间基质肌腱蛋白(tenascin-c,TN-C)的影响。方法:结扎大鼠左冠状动脉建立心肌梗死模型,术前7d分别用安慰剂、L型钙通道阻滞剂阿莫地平(4mg·kg-1.d-1)、L/T型钙通道阻滞剂米贝拉地尔(10mg·kg-1.d-1)。术后1d、3d、7d分别检测左心室游离壁(left ventricular free wall,LVFW)MMP-2、MMP-3及MMP-9蛋白表达;免疫荧光检测LVFW心肌TN-C的分布。结果:术前LVFW心肌排列基本正常,术后7dLVFW心肌有不同程度的坏死、肥厚及纤维化。术后1d、3d、7dLVFWMMP-2、MMP-3、MMP-9及TN-C蛋白表达一直处于高水平,各时相点与基础值相比差异有显著性(P<0.01)。米贝拉地尔更明显地抑制LVFWMMP-2、MMP-3、MMP-9及TN-C上调,缩小心肌梗死病灶,阿莫地平能抑制MMP-2、MMP-3、MMP-9及TN-C上调,但较米贝拉地尔弱。结论:心肌梗死病理过程中,梗死病灶内MMP-2、MMP-3、MMP-9及TN-C上调,L和L/T型钙通道阻滞剂能减轻心肌重构与选择性的抑制心肌组织中的MMP-2、MMP-3、MMP-9及TN-C表达有关。     

Anti-inflammatory cytokine profile in acute coronary syndromes: behavior of interleukin-10 in association with serum metalloproteinases and proinflammatory cytokines

BACKGROUND: The anti-inflammatory cytokine interleukin-10 (IL-10) downregulates the production of metalloproteinases (MMPs) and upregulates the production of their tissue inhibitors (TIMPs). The aim of this study was to assess the levels of IL-10 in patients with acute myocardial infarction (AMI) and unstable angina (UA), as well as to investigate the relationship of circulating IL-10 with the levels of MMPs (MMP-1, -2, -9), their tissue inhibitor (TIMP-1), pro-inflammatory cytokines (IL-6, tumor necrosis factor (TNF)-alpha) and serum lipids in the same patient population. METHODS: Serum MMP-1, -2, -9, TIMP-1, IL-6, TNF-alpha and IL-10 were measured by ELISA assays in 23 patients with AMI and 20 patients with UA after their hospital admission, as well as in 16 healthy controls subjects. The lipid profile was assessed by measuring the serum levels of total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol and triglycerides. RESULTS: AMI patients exhibited significantly higher serum levels of IL-10 as compared with those of UA patients and healthy controls (both P=0.005). In contrast, there was no significant difference in IL-10 levels between UA patients and healthy controls. In AMI patients there was a statistically significant positive correlation of serum IL-10 with the levels of MMP-9 (rho=0.588, P=0.003), IL-6 (rho=0.502, P=0.015) and HDL-cholesterol (rho=0.697, P<0.001), as well as a significant negative correlation with the levels of triglycerides (rho=-0.417, P=0.048). CONCLUSIONS: Our results suggest that UA is associated with low serum activity of IL-10, while a significant elevation of this anti-inflammatory cytokine accompanies the peripheral immune responses of AMI. This observation indicates that different patterns of inflammatory reactions are implicated in the pathophysiology of two clinical conditions.     

二氧化硫通过调控MMP-3/TIMP-1表达改善急性心肌梗死大鼠心肌纤维化

目的探讨气体信号分子二氧化硫(SO2)对急性心肌梗死大鼠心肌纤维化的作用及其对基质金属蛋白酶(MMP)-3/MMPs抑制剂(TIMP)-1蛋白表达的影响。方法将40只健康雄性成年SD大鼠随机分为正常对照(Control)组、模型[异丙肾上腺素(Iso)]组、SO2干预(Iso+SO2)组、SO2对照(SO2)组。首先构建急性心肌梗死大鼠模型组,Iso组和Iso+SO2组予以持续2 d腹腔注射Iso 50 mg/(kg·d),Control组及SO2组大鼠则腹腔注射等量生理盐水,行心电图及肌钙蛋白检测,确定造模成功后,Iso+SO2组和SO2组大鼠腹腔注射亚硫酸钠(Na 2SO 3)/亚硫酸氢钠(NaHSO 3)溶液(0.54±0.18)mmol/(kg·d),Control组及Iso组则腹腔注射等量生理盐水;持续4 w后,将大鼠处死,通过Masson染色检测心肌胶原沉积情况,用Western印迹对大鼠心肌组织MMP-3和TIMP-1蛋白表达水平变化进行检测。结果与Control组相比,Iso组心肌组织间可见明显胶原纤维沉积,MMP-3蛋白表达显著上升(P<0.05),TIMP-1蛋白表达显著下降(P<0.05)。Iso+SO2组与Iso组相比,大鼠心肌组织可见胶原纤维沉积减少,MMP-3蛋白表达水平下降(P<0.05),TIMP-1表达水平明显上升(P<0.05)。结论SO2可能通过调控MMP-3/TIMP-1改善Iso诱导的急性心肌梗死大鼠的心肌纤维化。     

白细胞介素-10对急性心肌梗死后细胞外基质重构影响的实验研究

目的 观察白细胞介素-10(IL-10)对大鼠急性心肌梗死后心肌基质金属蛋白酶(MMP)-2、9,金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1表达及胶原代谢的作用,探讨其对急性心肌梗死后心肌基质重构的影响.方法 18只大鼠随机分为假手术组、MI/AAV2转染组作为对照和MI/AAV2-IL-10转染组,每组6只.结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌梗死动物模型,同时应用基因重组2型腺相关病毒(AAV-2)携带IL-10基因转染心肌组织.RT-PCR和ELISA观察心肌IL-10 mRNA和蛋白的表达.逆转录聚合酶链反应、免疫印迹法、明胶酶谱、免疫组化检测转染后心肌组织表达MMP-2、9,TIMP-1,Ⅰ、Ⅲ型胶原水平的变化.结果 心肌梗死5 d后,MI/AAV2-IL-10组检测到IL-10 mRNA和蛋白的表达;MI/AAV2组较假手术组心肌MMP-2、9,Ⅰ、Ⅲ型胶原表达明显升高;而MI/AAV2-IL-10组较MI/AAV2组梗死心肌各部位MMP-2、9表达减少,TIMP-1表达升高,其中,梗死边缘区的MMP-2表达降低14.6%(P＜0.01),MMP-9降低24.7%(P＜0.01),TIMP-1升高73.1%(P＜0.01),Ⅰ、Ⅲ型胶原表达分别下降了47.6%(P＜0.01)、23.6%(P＜0.05),Ⅰ/Ⅲ型胶原比值下降.结论 IL-10通过对MMP/TIMP的作用,改善大鼠急性心肌梗死后心肌胶原沉积和组织重构.